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1、D正確。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域(B )練案33選修一生物技術(shù)實(shí)踐第二講微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用、選擇題(2018北京石景山區(qū)高三期末)下列有關(guān)細(xì)菌純化培養(yǎng)的說(shuō)法,不正確的是(C )A.實(shí)驗(yàn)操作者接種前要用70%的酒精棉球擦手消毒B .每次劃線后接種環(huán)要在酒精燈火焰上灼燒滅菌C.培養(yǎng)基上的單個(gè)菌落都是一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的克隆D.菌液梯度稀釋后用涂布法接種,得到單菌落便于計(jì)數(shù)解析在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要獲得純凈的培養(yǎng)物,需要進(jìn)行嚴(yán)格的消毒或滅菌,實(shí)驗(yàn)操作者 接種前要用70%的酒精棉球擦手消毒, A正確。每次劃線后為了保證劃線時(shí)的菌種只來(lái)自上 次劃線區(qū)域的末端,所以每次劃線后都要灼燒滅菌,最后一次是為了殺死菌種,防止污染環(huán) 境,

2、B正確。培養(yǎng)基上的單個(gè)菌落是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞或幾個(gè)同種細(xì)菌細(xì)胞繁殖而來(lái)的多個(gè)細(xì) 菌,C錯(cuò)誤。菌液梯度稀釋后用涂布平板法接種,有利于得到單菌落方便計(jì)數(shù),(2018北京市朝陽(yáng)區(qū)高三期末)漆酶屬于木質(zhì)降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程,相關(guān)敘述正確的是A.生活污水中含有大量微生物,是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B.篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C.在涂布平板上通過(guò)劃線獲得單菌落D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物,可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株解析生活污水中含有大量微生物,但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株,A錯(cuò)誤;篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過(guò)菌落特征挑

3、出產(chǎn)漆酶的菌落,從而獲得漆酶菌株,B正確;在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落,需要再通過(guò)平板劃線法進(jìn)一步純化,C錯(cuò)誤;菌種的長(zhǎng)期保存應(yīng)該在低溫下進(jìn)行,D錯(cuò)誤。.做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列敘述正確的是(D )A.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí),打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后,開(kāi)啟鍋蓋B.倒平板時(shí),應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析在高壓滅菌的操作過(guò)程中,加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,待壓力表 的指針指到零時(shí),打開(kāi)放氣閥,旋松螺栓,打開(kāi)蓋子。倒平板時(shí),用左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條 稍大于瓶口的縫隙,

4、而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后,再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中,一般將培養(yǎng)皿倒置,在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。.下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目方法的敘述,錯(cuò)誤的是(C )A .采用平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的菌落數(shù)B.當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落C.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般采用密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D.在某一濃度下涂布三個(gè)平板,若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大,則應(yīng)以它們的平 均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果解析當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)活菌連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,因此統(tǒng)計(jì)的菌 落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。一般選擇菌落數(shù)在30300的平板計(jì)數(shù),密度過(guò)大會(huì)使計(jì)數(shù)結(jié)果偏

5、小,影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。至少涂布 3個(gè)平板,作為重復(fù)組,取其平均值計(jì)數(shù)能增強(qiáng)實(shí) 驗(yàn)的說(shuō)服力和準(zhǔn)確性。.平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法,下列敘述正確的是(D )A .都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B .平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過(guò)接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C.稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)D,都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落解析平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋,稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂 布到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。. (2018張家口檢測(cè))下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說(shuō)法,正確的是(

6、C )A.天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基B.接種前需對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理C.大腸桿菌的純化培養(yǎng)過(guò)程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段D.分離分解尿素的細(xì)菌時(shí),尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源二、非選擇題.(2018青海省西寧市高三二模)酵母菌等微生物在人類的日常生活中發(fā)揮著越來(lái)越大的 作用,如面包、饅頭等食品以及果汁、果酒等飲料的作用都離不開(kāi)酵母菌,請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí) 回答下列問(wèn)題:(1)在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中,菌種的來(lái)源豐要是附著在葡萄皮上的野牛型酵母菌。 為提高果酒的品質(zhì),可以直接在果汁中加入人工培養(yǎng)的純凈酵母菌。要篩選得到純凈的酵母

7、 菌種,通常使用的培養(yǎng)基按功能來(lái)分稱為選擇培養(yǎng)基,如在培養(yǎng)基中加入青霉素(抗生素)可從細(xì)菌和酵母菌的混合液中分離酵母菌。(2)自然界中的微生物往往是混雜生長(zhǎng)的。人們?cè)谘芯课⑸飼r(shí)一般要將它們分離提純,然后進(jìn)行數(shù)量的測(cè)定。下面是對(duì)酵母菌進(jìn)行數(shù)量測(cè)定的實(shí)驗(yàn),請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)步驟第一步 制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。第二步為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果,你選用稀釋涂布平板法接種樣品。第三步適宜溫度下培養(yǎng)。(3)結(jié)果分析測(cè)定的酵母菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果,正確可信的是D(在以下選項(xiàng)中選擇),其理由是在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí),一定要涂布至少 3 個(gè)

8、平板作為重 復(fù)組,才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性;為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。A . 一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B.兩個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是220和260,取平均值240C.三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、50和520,取平均值260D.四個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、300、240和250,取平均值250某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為234,那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2 mL)1.17X 108。某同學(xué)在測(cè)定酵母菌的密度時(shí)發(fā)現(xiàn),在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落,能否肯定該酵母菌的菌種被污染

9、了?為什么?不能。因不能確定雜菌來(lái)自培養(yǎng)基或來(lái)自培養(yǎng)過(guò)程中。. (2018江西省新余市高三期末)目前微博傳言手機(jī)細(xì)菌比馬桶多。如圖,央視和北京衛(wèi)視通過(guò)實(shí)驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果。回答下列相關(guān)問(wèn)題:手機(jī)屏群心福技相(1)該實(shí)驗(yàn)需制備固(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入瓊脂互配置 成固體培養(yǎng)基。(2)據(jù)圖,兩電視臺(tái)均采用稀釋涂布平板法接種,接種前需要采用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng) 基進(jìn)行滅菌。(3)通過(guò)觀察菌落形狀、大小、隆起程唐和顏色等初步鑒定手機(jī)屏幕和馬桶按鈕上的牛物類群。兩電臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致,但報(bào)道結(jié)果截然不同,你認(rèn)為原因是手機(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)按圖操作取樣面積,實(shí)

10、驗(yàn)員測(cè)定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量,將10 mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋,分別取0.1 mL稀釋倍數(shù)為100的樣品液接種到三個(gè)培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為98、100、102,則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為4X 104個(gè)/平方厘米。該實(shí)驗(yàn)對(duì)照組要取培養(yǎng)基涂布 0.1 mL無(wú)菌水進(jìn)行培養(yǎng)。. (2018山東、湖北部分重點(diǎn)中學(xué)高考模擬)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌,具有下列類似的操作過(guò)程:制備培養(yǎng)基獲取土梯度稀釋壤樣品一并接種鑒別尿素分解 菌,挑取單菌落制備培養(yǎng)基獲取土選擇梯度稀釋壤樣品一培養(yǎng)一并接種鑒別纖維素分解 菌,挑取單菌落(1)在過(guò)程的選擇培養(yǎng)基是固住培養(yǎng)基,過(guò)程的詵擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基

11、(填“固體”或“液體”)。的具體措施是以尿素為唯一氮源;的選擇措施是以纖維素為唯一碳源。(2)在過(guò)程樣品梯度稀釋后, 一般只將稀釋度為 104106倍的菌液分別接種到 3個(gè)平板 培養(yǎng)基上。接種的常用方法為稀釋涂布平板(或平板劃線)。(3)過(guò)程采用倒平板時(shí)加入剛果紅染液的鑒別方法較簡(jiǎn)單。周圍出現(xiàn)透明圈但不能100%確定為纖維素分解菌的菌落,原因是:不分解纖維素(或分解剛果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈。.大腸桿菌是與我們?nèi)粘I盥?lián)系非常密切的細(xì)菌,請(qǐng)回答有關(guān)檢測(cè)飲用水中大腸桿 菌的問(wèn)題:(1)檢測(cè)飲用水中大腸桿菌的含量時(shí),通常將樣品進(jìn)行一系列的梯度稀釋,將不同稀釋度 的水樣用涂布器分別涂

12、布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),然后記錄菌落數(shù)量,這種方法 稱為稀釋涂布平板法。判斷下圖所示的4個(gè)菌落分布圖中,不可能是用該方法得到的是DoA.B.C.D.(2)用上述方法統(tǒng)計(jì)樣本中菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組?需要, 其原因是需要判斷培養(yǎng) 基是否被雜菌污染(滅菌是否合格),對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基 在適宜的溫度下放置一段時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(3)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中, 為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行滅菌(填“消 毒”或“滅菌”)處理;操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒i 靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺 滅,其原因是紫外線能使其內(nèi)蛋白質(zhì)變性,還能損傷

13、它的DNA的結(jié)構(gòu)。(4)檢測(cè)大腸桿菌實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理才能丟棄, 以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。解析D中菌落分布情況為利用平板劃線法所得。為判斷培養(yǎng)基滅菌是否合格,本實(shí) 驗(yàn)需要設(shè)置對(duì)照。要判斷固體培養(yǎng)基是否被污染,可將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下培養(yǎng) 一段時(shí)間,若發(fā)現(xiàn)有菌落說(shuō)明培養(yǎng)基已被污染。消毒是指使用較溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孑和抱子)。滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體 內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和抱子。對(duì)人的手不能進(jìn)行滅菌處理。對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿要 進(jìn)行滅菌處理,對(duì)操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和用酒精消毒。.某化工廠的污水池中含有

14、一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:污水池中污泥樣品:初選IJr _候選葡振躺培養(yǎng)者T一天后,漓定打瓶中化心物A的含標(biāo)1r 選樣援種接種 53固體墻養(yǎng)基(1)培養(yǎng)基中加入化合物 A的目的是篩詵目的菌.這種培養(yǎng)基屬于詵擇培養(yǎng)基。(2) “目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培養(yǎng)基中的化合物A。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng),由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是異養(yǎng)需氧型。(3)在上述實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí),常采用

15、平板劃線的方法進(jìn)行接種,此過(guò)程中所用的接種工具是接_種環(huán),操作時(shí)采用灼燒滅菌的方法。解析(1)在選擇培養(yǎng)基中加入特定物質(zhì),可以篩選出特定的細(xì)菌。(2)根據(jù)題目所給的培養(yǎng)基配方,“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源只能來(lái)自培養(yǎng)基中的化合物Ao異養(yǎng)需氧型細(xì)菌在培養(yǎng)時(shí)需要振蕩。(3)獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵。(4)用平板劃線 的方法進(jìn)行接種,所使用的接種工具是接種環(huán),操作時(shí)一般采用灼燒滅菌。.某同學(xué)欲利用所學(xué)習(xí)的微生物培養(yǎng)知識(shí),通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明痰液中含有細(xì)菌,來(lái)倡導(dǎo) 同學(xué)們不要隨地吐痰,以下是他進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)制備供細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)室常用牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基,

16、制備該培養(yǎng)基的步 驟是:計(jì)算一稱量一溶化一滅菌一倒平板,其中滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法 之后、滅菌之前還需要調(diào) pH ;平板冷凝后,還需要將平板倒置,主要目的是防止皿蓋上的水 珠落入培養(yǎng)基,造成污染。(2)瓊脂是一種從紅藻中提取的多糖,在培養(yǎng)基中常常加入一定量的瓊脂,添加瓊脂的目 的是作為凝固劑,使液體培養(yǎng)基凝固為固體培養(yǎng)基。(3)為了使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更有說(shuō)服力,該同學(xué)設(shè)置了空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組,其中對(duì)照組的 作用是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響(合理即可)。(4)微生物接種的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法,其中平板劃線法并不適用于微生物的計(jì)數(shù),其主要原因是不能將菌液中的微生物充分分離開(kāi)來(lái)。某同學(xué)利用稀釋涂布平板法 來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中細(xì)菌的數(shù)目,他在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為163,則每毫升痰液樣品中的細(xì)菌數(shù)是(所用稀釋液的體積為 0.2 mL)8.15 X106個(gè)0解析(1)對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅

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