漿膜腔積液脫落細胞學(xué)檢查課件(PPT 47頁)

1、漿膜腔積液細胞學(xué)檢查第1頁，共47頁。主要內(nèi)容漿膜腔積液概述漿膜腔積液的采集、申請單的填寫漿膜腔積液脫落細胞的分類及意義免疫組化染色第2頁，共47頁。漿膜腔積液概述第3頁，共47頁。漿膜襯在體腔壁和轉(zhuǎn)折包于內(nèi)臟器官表面的薄膜漿膜壁層貼于體腔壁表面的部分漿膜臟層壁層從腔壁移行折轉(zhuǎn)覆蓋于內(nèi)臟器官表面漿膜臟層和臟層之間的間隙漿膜腔胸膜腔、腹膜腔、心包腔漿膜腔概 述第4頁，共47頁。正常漿膜腔少量液體來自壁層漿膜毛細血管內(nèi)的血漿濾出，通過臟層漿膜的淋巴管和小靜脈回吸收潤滑作用漿膜腔積液：病理狀態(tài)下，漿膜腔內(nèi)液體增多概 述第5頁，共47頁。漿膜腔積液分類和發(fā)生機制當(dāng)液體的產(chǎn)生和回吸收不平衡時，引起積液根

2、據(jù)積液產(chǎn)生原因及性質(zhì)不同，分為漏出液（transudate)和滲出液(exudate) 漏出液(transudate)為非炎性積液血漿膠體滲透壓降低 毛細血管內(nèi)流體靜脈壓升高淋巴管阻塞 滲出液 (exudate)為炎性積液感染性： 如化膿性細菌、結(jié)核非感染性：外傷、化學(xué)性刺激、惡性腫瘤概 述第6頁，共47頁。漿膜腔積液的采集第7頁，共47頁。在胸腔積液采集中可將先抽入注射器的積液再快速推向胸腔底部，反復(fù)數(shù)次后抽取送檢，可使腫瘤細胞檢出率由50%左右提高為80.3%。標(biāo)本采集方式第8頁，共47頁。漿膜腔積液中常見的脫落細胞及其臨床意義第9頁，共47頁。間皮細胞形態(tài)：細胞圓形或橢圓形，核大，位于中

3、心或偏位，核仁較大，有1-3個，均為紫色，含有少數(shù)空泡，滲出液中形態(tài)可能不規(guī)則，有時與癌細胞難于區(qū)分，見于惡性腫瘤，淤血等。免疫組化：間皮細胞表達CR、CK5/6、WT-1、MC，腺癌細胞表達CEA、CK7、CK19等等第10頁，共47頁。形態(tài)：比白細胞大，細胞染色較淡，核呈腎形，偏位，染色質(zhì)致密，胞漿多呈泡沫狀。見于淤血或惡性腫瘤等。免疫組化：CD68（+）組織（單核）細胞第11頁，共47頁。淋巴細胞數(shù)量增多提示存在慢性炎癥、病毒、結(jié)核菌感染或結(jié)締組織病所致滲出液，少量淋巴細胞亦見于漏出液。淋巴細胞第12頁，共47頁。中性粒細胞增多常見于化膿性炎癥和結(jié)核性積液早期，以化膿性滲出液中性粒細胞增

4、多最明顯 。中性粒細胞第13頁，共47頁。漿細胞明顯增多可能為多發(fā)性骨髓瘤浸潤漿膜所引起。漿細胞第14頁，共47頁。免疫組織化學(xué)染色第15頁，共47頁。免疫組化原理 免疫組織化學(xué)是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，對某些化學(xué)成分進行定性、定位、定量測定的一項技術(shù)。第16頁，共47頁。組織或細胞內(nèi)的某種化學(xué)物質(zhì)（待檢測物） 抗原 免疫動物 抗體 檢測（免疫組織化學(xué)） 熒光素 酶 金、銀顆粒原理：抗原和抗體之間的高度特異性結(jié)合鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)（SP）法免疫組化原理流程介紹第17頁，共47頁。免疫組化在病理學(xué)中的作用1、確定細胞類型2、辨

5、認(rèn)細胞產(chǎn)物3、了解分化程度4、鑒定病變性質(zhì)5、發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶、脈管內(nèi)瘤栓6、探討腫瘤起源或分化表型7、指導(dǎo)治療和預(yù)后8、輔助疾病診斷和分類第18頁，共47頁。胸水中常見腫瘤及免疫組化第19頁，共47頁。鱗狀細胞癌常用免疫組化：CK 、CK5/6、P63、P40第20頁，共47頁。細胞角蛋白（cytokeratin，CK）低分子角蛋白，對腺癌、移行細胞部及低分化鱗癌標(biāo)記。一般用廣譜型角蛋白抗體為好，常用。有20個亞型CK1-CK20鱗狀上皮第21頁，共47頁。細胞角蛋白5/6（CK5/6）陽性部位：細胞漿在正常組織中，鱗狀上皮和導(dǎo)管上皮的基底細胞以及部分的鱗狀上皮生發(fā)層細胞、肌上皮細胞和間皮細胞

6、陽性，腺上皮細胞陰性。因此，可用于鱗癌和腺癌、間皮瘤和腺癌的鑒別診斷。支氣管上皮基底細胞、間皮、鱗癌、大細胞癌、移行細胞癌、間皮瘤陽性。大多數(shù)腺癌為陰性。第22頁，共47頁。常用免疫組化標(biāo)記CK7、CK20、Villin、CEA、CDX-2、PASTTF-1（肺的標(biāo)記）腺癌第23頁，共47頁。CK7： 肺、卵巢、乳腺、膽管陽性常常在(胃)腸道的癌為陰性 CK20 ：只有胃腸道癌和Merkel 細胞癌陽性 20第24頁，共47頁。 CK7是許多腺上皮及移行上皮中的一種堿性角蛋白。CK7通常在下列腺癌中表達：肺、乳腺、卵巢（漿液性和粘液性腫瘤）+子宮頸腫瘤、膽管上皮和膽管癌、膀胱移行細胞癌+在下列

7、腫瘤中缺乏：鱗狀細胞癌、結(jié)腸腺癌、卵巢粘液腺癌、肝細胞和肝-細胞癌、前列腺和前列腺腺癌、腎上皮腫瘤CK7第25頁，共47頁。CK20 免疫組化表達：用于胃腸道腺癌、卵巢黏液性腫瘤、皮膚Merkel細胞癌診斷。泌尿系統(tǒng)和移行細胞癌（通常CK7+/CK20+）鱗癌、乳腺癌、肺癌、子宮內(nèi)膜和卵巢非黏液性腫瘤常陰性。CK7和CK20的共同表達對于癌的原發(fā)部位的診斷尤其有用第26頁，共47頁。CK7和CK20的共同表達單獨CK7+或CK20+均不能可靠區(qū)分肺癌和結(jié)腸癌，CK7和CK20共表達如CK7+/CK20+或CK-/CK20-有助于診斷開始較模糊的腫瘤。聯(lián)合TTF-1檢測有助于診斷肺腺癌。第27頁

8、，共47頁。CDX2：是一種腸特異的轉(zhuǎn)錄因子。大約95%以上的浸潤性結(jié)、直腸癌可檢出CDX2陽性表達，胃癌和卵巢黏液性腺癌也可表達CDX2與CK7、CK20配合有助于尋找轉(zhuǎn)移癌的原發(fā)部位。CDX2第28頁，共47頁。CEA CEA 癌胚抗原：是從結(jié)腸癌中分離而得的一種球蛋白，定位于細胞膜上，對胃、腸、肺、胰、肝等幾乎所有的腺癌為陽性顯示涎腺或汗腺腫瘤中的腺體成分 用于鑒別腺癌和間皮瘤 第29頁，共47頁。神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤常用免疫組化標(biāo)記NSE Syn CgA CD56包括神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、胰島、垂體瘤、甲狀腺髓樣癌、皮膚Merkel細胞癌、原始神經(jīng)外胚層瘤（PNET）等，目前應(yīng)用NSE、嗜鉻蛋白顆

9、粒A（CgA）及觸突素（Syn）三種抗體同時或兩種一起用，因NSE不夠特異。 第30頁，共47頁。NSE（神經(jīng)元特異性烯醇化酶） 一種糖酵解酶 神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞及相應(yīng)腫瘤的標(biāo)記物。 敏強感性，特異性較差。第31頁，共47頁。嗜鉻素A CgA （chromogranin）腎上腺髓質(zhì)細胞（+）神經(jīng)細胞、神經(jīng)內(nèi)分泌細胞及其腫瘤均（+）主要用于神經(jīng)內(nèi)分泌細胞腫瘤的診斷（胰島細胞瘤、嗜鉻細胞瘤、皮膚Merkel細胞瘤 ）第32頁，共47頁。Syn突觸素 神經(jīng)組織標(biāo)志 第33頁，共47頁。 CD56 神經(jīng)細胞黏附分子，主要分布于大多數(shù)神經(jīng)外胚層來源細胞，常用于星型細胞瘤、神經(jīng)母細胞瘤、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤

10、診斷，也是NK細胞瘤的重要標(biāo)志，也標(biāo)記小細胞肺癌 第34頁，共47頁。1.B細胞標(biāo)記抗體：CD20、CD79、PAX-52.T細胞標(biāo)記抗體：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD45RO淋巴瘤第35頁，共47頁。B細胞及其腫瘤主要標(biāo)記物CD20 主要分布在B細胞、前B細胞后期和漿細胞之前的B細胞，在漿細胞和T細胞淋巴瘤中不表達。是非?？煽康腂細胞淋巴瘤的標(biāo)記抗體。CD79a是非常重要的B細胞淋巴瘤的標(biāo)記物，前B細胞開始到成熟的漿細胞都可以標(biāo)記，常作為CD20的補充，表達于大部分的B細胞淋巴瘤。PAX-5 PAX-5是B細胞特異性激活蛋白，是B細胞及B細胞淋巴瘤的標(biāo)記物。表達于非霍

11、奇金淋巴瘤的成熟及前體B細胞和經(jīng)典霍奇金淋巴瘤的R-S細胞。第36頁，共47頁。細胞及其腫瘤主要標(biāo)記物CD3是目前認(rèn)為最能代表T細胞的標(biāo)記抗體，CD3是T細胞和NK細胞的標(biāo)記物，常用于此類淋巴瘤的分類，在B淋巴細胞、巨噬細胞、髓細胞中不表達。 CD5 主要標(biāo)記T 細胞，少數(shù)B 細胞（套細胞）可表達。用于慢性淋巴細胞性白血病（B-CLL）和Mantle （套細胞）淋巴瘤 。CD45 (LCA)：白細胞共同抗原存在于前體細胞、成熟的T和B淋巴細胞、單核細胞、濾泡樹突狀細胞和粒細胞等白細胞中，是造血細胞的重要標(biāo)記物，不存在非造血組織。主要用于淋巴瘤、白血病和非造血組織腫瘤的鑒別診斷。陽性部位：細胞膜

12、 第37頁，共47頁。CD21CD21是補體C3d的受體免疫組化表達:濾泡樹突狀細胞（FDC）診斷應(yīng)用:證明濾泡樹突狀細胞的篩狀網(wǎng)結(jié)構(gòu)，用以協(xié)助淋 巴瘤的診斷Castlemans?。ㄑ転V泡性增生）FDC腫瘤第38頁，共47頁。肝細胞肝癌和膽管細胞癌第39頁，共47頁。肝細胞肝癌：AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、P53、HbsAg、Hepatocyte肝膽管細胞癌：CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、Hepatocyte、HbsAg第40頁，共47頁。Hepatocyte：肝細胞癌多為陽性表達AFP 甲胎蛋

13、白：由胎肝細胞提取的一種酸性糖蛋白，細胞漿和細胞膜上表達。它是肝細胞癌、卵黃囊癌的特異性標(biāo)記。肝細胞肝癌和膽管細胞癌第41頁，共47頁。CK19：分布于單層上皮和間皮,常用于腺癌診斷,肝細胞不表達,而膽管為陽性反應(yīng)。CK8/18：主要標(biāo)記非角化復(fù)層鱗狀上皮，用于鱗狀細胞癌和腺癌的鑒別，腫瘤細胞、肝細胞和膽管上皮細胞胞漿陽性。Villin 絨毛蛋白：正常組織中，villin通常只表達于有刷狀緣的細胞上，如胃腸道上皮細胞、胰腺和膽管上皮細胞以及腎實質(zhì)的上皮細胞中（特別是近曲小管）。Villin在胃腸道癌、胰腺癌、膽囊癌和膽管癌組織中有很高的表達率，具有明顯腺樣結(jié)構(gòu)的腫瘤上沒有Villin表達，則這

14、個腫瘤為胃腸道、胰腺、膽囊或膽管來源的可能性極低。肝細胞肝癌和膽管細胞癌第42頁，共47頁。CD34 ：表達于早期淋巴造血干細胞、祖細胞、內(nèi)皮細胞、胚胎纖維母細胞和某些神經(jīng)組織細胞,多用于標(biāo)記血管內(nèi)皮細胞，血管源性腫瘤的診斷，GIST 80-90%。肝細胞肝癌和膽管細胞癌第43頁，共47頁。免疫組化應(yīng)注意的問題1. 對某一種腫瘤的診斷，可同時選用幾種特異性較高的標(biāo)志，互相補充。2. 要正確區(qū)分假陽性、假陰性。3. 要運用“反證法”，既要有陽性標(biāo)記物的結(jié)果，也要有陰性標(biāo)記物的結(jié)果，才能確保診斷的可靠性。第44頁，共47頁。免疫組化常用套餐鑒別間皮細胞、腺癌細胞 CK7、CEA、TTF-1、CK5/6、CR、WT-1鑒別肺腺癌、鱗癌、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤 CK7、TTF-1、NapsinA、CK5/6、P63、P40、syn、CgA、CD56是否淋巴瘤