土鱉蟲提取液對人胃低分化腺癌細(xì)胞BGC

1、土鱉蟲提取液對人胃低分化腺癌細(xì)胞BGC鄒璽，劉寶瑞，錢曉萍，禹立霞【關(guān)鍵詞】土鱉蟲；,BG摘要：目的研究土鱉蟲體外對人胃低分化腺癌BG823細(xì)胞抗腫瘤活性。要領(lǐng)接納TT法測定了土鱉蟲水提物和醇提物對人胃低分化腺癌BG823細(xì)胞增殖的按捺作用，接納生長曲線測定法檢測土鱉蟲醇提物對體外造就腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。效果土鱉蟲水提物不克不及按捺體外造就的腫瘤細(xì)胞，而醇提物能明顯按捺人胃低分化腺癌BG823細(xì)胞增殖,藥物作用48h時按捺率最高，并有較好的劑量依靠干系。結(jié)論體外土鱉蟲水提物沒有抗腫瘤活性，醇提物有較強(qiáng)的抗腫瘤作用，值得進(jìn)一步研究其按捺機(jī)理。關(guān)鍵詞：土鱉蟲；BG823細(xì)胞株；抗腫瘤活性TheS

2、uppressinEffetfExtratfEuplyphaganHuanGastriL-differentiatinAdenarinaellLineBG-823invitrKeyrds：Euplyphaga；BG823；Antineplasiativity?中國藥典?收載土鱉蟲正品藥材為鱉蠊科昆蟲地鱉Euplyphagasinensisalker或冀地鱉Stelephageplanyi(Bleny)的雌蟲枯燥體，性寒，味咸，有小毒。如今治療消化道腫瘤的中醫(yī)處方中土鱉蟲的應(yīng)用非常普及，大多入中藥復(fù)方煎取，以為其有抗腫瘤活性。然而，土鱉蟲的抗腫瘤作用及其抗腫瘤身分未見有明白的實(shí)行室研究報(bào)道。筆者

3、對此舉行了研究。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1質(zhì)料泉源實(shí)行細(xì)胞株：人胃低分化腺癌BG823細(xì)胞株為本實(shí)行室通例造就，生長于含10%新生牛血清的RPI1640完全造就液中，37恒溫，5%2，飽和濕度造就箱中生長。取對數(shù)生恒久細(xì)胞用于實(shí)行。土鱉蟲：購自六安市國泰藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號：20221201試劑：RPI1640造就液(GIB公司產(chǎn)物)；TT(siga公司產(chǎn)物，以超純水配制成5g/l濃度)；二甲基亞砜DS，上海凌峰公司產(chǎn)物，闡發(fā)純。1.2藥物制備1.3要領(lǐng)與步調(diào)1.4腫瘤細(xì)胞抑瘤率盤算公式抑瘤率=1-(D實(shí)行組-D空缺組)/(D實(shí)行比較組-D空缺組)100%2效果2.1土鱉蟲醇提液和水提液的按捺細(xì)胞作

4、用比力水提液各組按捺率均為負(fù)數(shù)。而醇提液組10g/l組按捺率為91.87，5g/l組按捺率為72.56，2.5g/l組按捺率為24.57，1.25g/l組按捺率為3.23，而1濃度的乙醇的按捺率為-4.68。效果見圖1。圖1土鱉蟲醇提液和水提液的按捺細(xì)胞作用比力略2.2差異濃度土鱉蟲醇提液按捺細(xì)胞作用比力加藥后造就24h時按捺率自低濃度到高濃度漸漸上升，12g/l時，沒有顯著的抗腫瘤作用，5g/l開始，抑瘤率處于較高的程度，8g/l的藥物濃度抑瘤率最高。I50為34g/l。效果見表1，圖2。表1土鱉蟲醇提液對體外造就腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用略2.3差異時間土鱉蟲醇提液按捺細(xì)胞作用比力從圖中可以看出

5、：加藥后造就8h，即有顯著的抗腫瘤作用，而且隨著劑量的增長，按捺率漸漸上升，48h時按捺率處于最高的程度，72h與48h并無顯著差異。效果見圖2。圖2差異濃度差異時間土鱉蟲醇提物的作用曲線略3討論土鱉蟲入肝、心、脾三經(jīng)，專理血癥，具有散血淤、消堅(jiān)結(jié)、解凝活血、接骨續(xù)筋、消腫止痛、下乳通經(jīng)等成果。婦科常用于逐淤通結(jié)，內(nèi)科常用于散結(jié)消癥，傷科常用于續(xù)骨療傷。其性中和，破而不峻，能行能和，大哥體虛者均可用之，是中醫(yī)臨床中血淤證的常用藥。始載于?神農(nóng)本草經(jīng)?，主“心腹寒熱灑灑，血積瘕，破堅(jiān)，下血閉。?金要略?、?本草綱目?等歷代醫(yī)藥著作中均有記述。?金要略?中該藥入方四次，此中三次以丸散入藥，在治療腹

6、中瘕的大黃庶蟲丸和鱉甲煎丸中均研末為丸，而非水提液。僅鄙人淤血湯中入湯劑，治療經(jīng)水倒霉。近十余年有幾篇文獻(xiàn)都提到了土鱉蟲具有抗腫瘤作用，但研究并不深化。比力公認(rèn)的一點(diǎn)是土鱉蟲在體外對白血病細(xì)胞有按捺作用3，4。別的有人推測土鱉蟲中谷甾醇身分5和以油酸為主的不飽和脂肪酸6很有大概有抗癌作用。關(guān)于土鱉蟲抗腫瘤細(xì)胞的機(jī)制的研究就比力少，田代華3以為土鱉蟲具有抗突變及抗腫瘤作用，可按捺體外肝癌、胃癌細(xì)胞的呼吸，但其理論按照不詳。如今治療腫瘤的中藥湯劑中土鱉蟲的應(yīng)用非常普及。按照我們研究的效果，土鱉蟲水提液對付胃癌BG823和肝癌HePG2細(xì)胞并沒有按捺作用，相反，有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增長的作用。由此，我們是

7、否可以推想：臨床上應(yīng)用時，如取其抗腫瘤作用，應(yīng)當(dāng)改變劑型？本研究接納TT法對差異濃度土鱉蟲醇提物作用下細(xì)胞72h的生長環(huán)境舉行了不雅察，效果表白土鱉蟲醇提物對細(xì)胞生長的按捺成必然濃度的依靠性:當(dāng)藥物濃度較低時，細(xì)胞吸光度值無顯著變革。最正確藥物濃度在8g/l，對胃低分化腺癌有顯著的殺傷作用，其抑瘤率到達(dá)98.06%。本研究還表現(xiàn)土鱉蟲醇提物對細(xì)胞生長的按捺成一按時間的依靠性:土鱉蟲醇提物對細(xì)胞作用4872h按捺作用最強(qiáng)。我們正進(jìn)一步提取分散其有用部位并研究其按捺作用的機(jī)理。參考文獻(xiàn)：1sannT.Rapidlrietriassayfrellulargrthandsurvival:AppliatintprliferatinandyttxiityassaysJ.JIunlethds,1983,65(1-2):55.2ShiyaaY,KubtaT,atanabe,etal.PreditabilityfinvivhesensitivitybyinvitrTTassayithreferenetthelngeniassayJ.JSurgnl.1989ay;41(1):12.3田代華.有用中藥辭典.北京：人民衛(wèi)生出書社，2002：2209.4傅桂香，徐永珍，芮和愷，等.地