干化學應用河南醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院(老區(qū))

1、干化學(huxu)應用實驗室專員(zhunyun)房圣亞共五十七頁主要(zhyo)內容干化學(huxu)原理V350分析儀的日常保養(yǎng)常見應用問題解析共五十七頁美國強生公司是世界上最大的、最具綜合性的醫(yī)療保健品制造商，為消費者、制藥業(yè)和醫(yī)療器材及診斷市場提供(tgng)全面的專業(yè)化服務。2010年銷售額達到675億美元，在全世界的醫(yī)療保健產品生產企業(yè)中名列第一。全球雇員超過12萬。公司總部位于美國新澤西州，擁有多于250家子公司，為57個國家的市場提供產品和專業(yè)化服務。產品覆蓋制藥、醫(yī)療器材和保健品。在外科縫線、OTC藥品、醫(yī)療器械及診斷領域居于國際領先地位。2010年在財富(cif)全球最受景

2、仰的公司評選中，名列第三。全球僅有的五家AAA信用級工業(yè)公司之一。強生公司3共五十七頁強生OCD主要(zhyo)產品 安全輸血 血型分析(fnx) 血液篩查 實驗室診斷 臨床生化 臨床免疫 實驗室自動化* ValuMetrix實驗室管理咨詢服務* Veridex腫瘤分子診斷* 注冊中共五十七頁MicroSlide 多涂層(t cn)薄膜干片技術擴散層擴散層試劑層試劑層指示劑層指示劑層支持層支持層標本(biobn)MicroSlide多涂層薄膜干片技術：將所需試劑預固相在多層薄膜和郵票大小的透明支持基墊之上。當血漿，血清，尿液或腦脊液與這些已含化學物質的干式薄膜接觸時發(fā)生反應并對反應信號進行測量

3、。共五十七頁干片分類(fn li)CM/RTPMIR干片鈉鉀氯地高辛苯巴比妥卡馬西平苯妥因C反應(fnyng)蛋白膽固醇 甘油三酯總蛋白 白蛋白高密度酯蛋白 脂肪酶尿蛋白 腦脊液蛋白谷丙轉氨酶 谷氨酸轉移酶堿性磷酸酶 r谷氨酰轉酞酶乳酸脫氫酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶 尿素氮肌酐 尿酸 乳酸 鐵、總鐵結合力磷 鋰淀粉酶膽堿脂酶總膽紅素結合/非結合膽紅素血氨乙醇水楊酸茶堿醋氨酚鎂二氧化碳比色/速率法干片免疫速率法干片電極法干片共五十七頁 指示劑層 支持(zhch)層擴散(kusn)層試劑層比色/速率法干片通過測定干片顏色變化來確定化合物濃度共五十七頁 指示劑層 支持(zhch)層 多孔結構，允許標

4、本通過 均勻分布標本 過濾大分子（蛋白質，脂肪等） 去除干擾物質（溶血(rn xu)，黃疸等） 提供反射測定的背景擴散層試劑層擴散層比色/速率法干片結構共五十七頁試劑(shj)層 擴散層 試劑層指示劑層 支持層 包含(bohn)檢測反應所需的酶，緩沖液，催化劑等 多層試劑，控制反應順序比色/速率法干片結構葡萄糖干片共五十七頁指示劑層 擴散層 試劑層 指示劑層 支持層試劑層產物與指示劑層中的染料結合時，形成有色復合物，其與分析(fnx)物濃度成正比。比色/速率(sl)法干片結構共五十七頁支持(zhch)層 擴散層 試劑層 指示劑層 支持層 提供反應(fnyng)支持基墊 允許光路自由通過比色/速

5、率法干片結構共五十七頁反射光的測定(cdng)干擾(gnro)物質反光背景成色層生成純凈的反射光光源濾光片接收器比色/速率法干片功能演示共五十七頁濕化學 ： 采用透射光度法 遵循朗勃比爾定律(dngl)干化學 ： 采用反射光度法 遵循Williams Clapper定律吸光度(gungd)濃度反射光濃度透射與反射共五十七頁接收器接收器透射(tu sh) 與 反射光線經過干擾物質(wzh) 光線不經過干擾物質(wzh) 受影響 不受影響共五十七頁尿酸其他(qt)的優(yōu)異抗干擾能力 MicroSlide多層涂膜技術可以針對不同(b tn)檢測項目使用加以不同(b tn)成份的薄膜以達到最佳的檢測結果

6、某些干片中有清道夫層如尿酸試劑去除維他命C 和鎂干片去除鈣的干擾 某些干片試劑層下有半透膜層（如尿素氮）：去除藥物干擾半透膜尿素氮共五十七頁 競爭性與非競爭性免疫速率反應模式(msh) 需要液體反應底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡馬西平免疫(miny)速率法干片共五十七頁電極(dinj)法干片 離子選擇電極技術(jsh) 直接法測定兩電極間電勢不同 鉀，鈉，氯共五十七頁18鹽橋S2S1S3S4aIar離子載體膜M+ ClAgCl Ag離子載體膜M+ ClAgClAgaIarVV干片常規(guī)(chnggu)已知濃度(nngd)液體(參比液)待測液體(標本)離子選擇電極(ISE)鹽橋ar共

7、五十七頁電極(dinj)法干片19干片在接觸點被穿透(chun tu)測量電壓讀數通過電壓讀數計算出分析物的濃度共五十七頁旗艦(qjin)測試項目 K，Na，Cl 直接離子選擇電極20Aqueous Solution (Serum)水相(血清(xuqng)Non-aqueous solution(Lipids, Proteins)非水相(血脂,蛋白質)以間接法檢測的容量以直接法檢測的容量間接法無法對血脂和蛋白質進行校正.共五十七頁21組成(z chn)成分 原始體積水相9.3 ul非水相 0.7 ul總樣本(yngbn)體積 10.0 ul按照血清中, 非水相占有的體積約為7 %計算標本電解質

8、排斥效應共五十七頁22組成成分 原始(yunsh)體積稀釋液 990.0 ul水相 9.3 ul非水相 0.7 ul總樣本(yngbn)體積 1000.0 ul稀釋后的正常人標本(100倍稀釋)稀釋比率 = 最終體積 / 原始體積總的血清稀釋比率 = 1000 / 10 = 100 倍水相稀釋比率 = (990 + 9.3) / 9.3 = 107.45 倍電解質排斥效應共五十七頁23正常人標本(biobn)Na=140K = 4.0稀釋(xsh) 1:100檢測計算Na= 140K = 4.0結果Na = 130.3K = 3.72單位：mmol/LNa = 140 /107.45100 =

9、 130.3 mmol/LK = 4/107.45100 = 3.72 mmol/L直接離子選擇電極法檢測間接離子選擇電極法結果電解質排斥效應共五十七頁蛋白質增高(znggo)脫水巨球蛋白血癥多發(fā)性骨髓瘤高球蛋白血癥肉芽腫病某些膠原病血脂增高甲狀腺機能減退腎病綜合癥糖原(tn yun)過多癥糖尿病急性胰腺炎直接法 vs. 間接法 ISE疾病狀態(tài)對標本的影響共五十七頁血漿蛋白(dnbi)影響血漿蛋白(dnbi)為部分水溶性，故高濃度的蛋白(dnbi)會造成與血脂類似地影響 4 8 12 160.800.901.00檢測結果總蛋白直接電極法間接電極法共五十七頁 干式生化(shn hu)系統(tǒng)的抗干擾

10、性（黃疸）20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入膽紅素 BILIRUBIN ( mg/dL)( 最終結果 /原始結果)= 結果離散度 %*CREAASTPHOS# LDH #ALKPCaPROTECO2#MgCHOLGLUALT*TRIG*NA*CL*UREA*CK*AMYL*ALB*URCA*FEDxxxxx Dxxxxxxx 某濕生化系統(tǒng)文件(wnjin)來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistr

11、y instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.共五十七頁18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000BILIRUBIN ADDED ( mg/dL)結果離散度%PROT*ALB*ALKP*AMYL*AST*ECO2*CA*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*NA*CL*URCA*UREA*TRIG*CK200VITROS 350 干式生化(shn hu)系統(tǒng)的抗

12、干擾性（黃疸）文件(wnjin)來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.共五十七頁20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 脂肪 ( INTRALIPID Added mg/dL)結果離散度%*BILIURCAPHO

13、SGLUPROTMgCHOLALBCaCREAALKPAST#ALT*UREA*CK*CL*K*GGT*NA*CO2# LDH 109% AT 750 MG/DLCxxxxx 某濕生化系統(tǒng) 干式生化(shn hu)系統(tǒng)的抗干擾性（脂血）文件(wnjin)來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.共五十七頁 干式生

14、化(shn hu)系統(tǒng)的抗干擾性（脂血）18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000LIPEMIA ( INTRALIPID Added mg/dL)結果離散度%*ALB*ALKP*ALT*AMYL*AST*BICARB*BIL*CAL*CK*CL*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*Na*PHOS*PROT*URCA*UREAVITROS 350200文件(wnjin)來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chem

15、istry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.共五十七頁200 18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 血紅素 (as hemoglobin mg/dL)結果離散度%Hxxxxx xxx 某濕生化系統(tǒng)T.BILICPKMgALBPHOSUATRIGALTTPALKPGGTAMYL*CL*GLU*CHOL*GLOB*CREAT*D.BILI*BUN*CO2*

16、NA*CA 干式(n sh)生化系統(tǒng)的抗干擾性 （溶血）文件(wnjin)來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.共五十七頁18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000HEMOLYSATE ADDED (as hemoglobin

17、 mg/dL)結果離散度%*ALKP*AMYL*ECO2*CAL*CK*CL*CREAT*NA*URCA*UREABILIPHOSPROTALBTRIG GLU CHOLMg200VITROS 750強生干式生化系統(tǒng)(xtng)的抗干擾性（溶血）文件(wnjin)來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.共五十七

18、頁主要(zhyo)內容干化學原理V350分析儀的日常(rchng)保養(yǎng)常見應用問題解析共五十七頁每日保養(yǎng)(boyng)需要做的保養(yǎng):清空:廢稀釋杯和廢吸頭箱空試劑盒箱廢干片箱檢查: 加樣架是否臟了有無損壞補充:稀釋杯,吸頭試劑參比液,稀釋液,免疫(miny)沖洗液質控: 做所有機上項目的質控共五十七頁每日保養(yǎng)(boyng)清潔(qngji)加樣架和通道共五十七頁每日保養(yǎng)(boyng)更換各種輔助試劑:選擇相應(xingyng)的子程序儀器自動準備放入新的輔助試劑參比液,洗液都是記數為300滴稀釋液是2-10ML共五十七頁每周保養(yǎng)(boyng)需要做的保養(yǎng):清潔:加樣架平臺(pngti),加樣架

19、運動軌道吸頭停止位加樣位的樣品杯限位器觸摸屏和鍵盤檢查:加樣臂的運動路徑主控計算機的空氣濾網共五十七頁每周保養(yǎng)(boyng)加樣架平臺加樣架運動(yndng)軌道吸頭停止位加樣位的樣品杯限位器共五十七頁每周保養(yǎng)(boyng)加樣臂的運動(yndng)路徑共五十七頁每周保養(yǎng)(boyng)空氣(kngq)濾網共五十七頁必要(byo)的保養(yǎng)應做的保養(yǎng):須更換的:保濕劑,干燥劑 反射光度計的燈泡清潔: 廢干片通道 推片尺和干片通道需做的: 用黑白(hibi)參考片做的光 路校正測試共五十七頁必要(byo)的保養(yǎng)共五十七頁必要(byo)的保養(yǎng)進入Diagnostic-setup/adjust-Refle

20、ctometer Iris調整燈電壓(diny)(至8V以下)共五十七頁必要(byo)的保養(yǎng)用黑白參考片做的光路校正測試Diagnostic-setup/adjust-Correction Factor輸入黑白參考片的反射系數按提示(tsh)將參考片放入孵育盤更新生成的校正系數共五十七頁主要(zhyo)內容干化學原理(yunl)V350分析儀的日常保養(yǎng)常見應用問題解析共五十七頁45肌酐為什么有時候肌酐不出結果，報DP,稀釋(xsh)后結果反而不高？常見應用問題(wnt)解析-肌酐反應原理兩點速率法：滴加樣本后，干片進行孵育。反應初期樣本重的內源性肌酸被氧化，所產生的反射信號值在兩個時間點測定，

21、測定的反射強度差值與樣本中的肌酐 (CREA) 濃度成正比。共五十七頁46常見應用問題(wnt)解析-肌酐已知干擾物質血清和血漿(xujing) 肌酸：肌酐 (CREA) 濃度為 133 mol/L 時，大于 707 mol/L的肌酸濃度將會顯示“DP”代碼（因為提高很多的肌酸濃度可能引起過度的背景密度）。 對于沒有顯示錯誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 13.3 mol/L。 肌酐 (CREA) 濃度為 1237 mol/L時，大于 88 mol/L 的肌酸濃度將會顯示“DP”代碼。 對于沒有顯示錯誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 2%。共五十七頁47肌酐 常見應用問題(wnt)

22、解析-肌酐處理方法稀釋樣本如果肌酐濃度超出系統(tǒng)可報告范圍，或者分析儀顯示“DP”代碼（指示高背景密度，通常是因為肌酸濃度升高所致），則按如下步驟操作：手工樣本稀釋1. 使用 VITROS 7% 牛血清(xuqng)白蛋白溶液稀釋樣本；2. 重新分析；3. 結果乘以稀釋因子，獲得原始樣本中肌酐濃度的估計值。共五十七頁48CK/CKMB為什么在檢測(jin c)同一標本時CKMB大于CK？說明書的應用(yngyng)（3）CKMB反應原理CK反應原理共五十七頁49CK/CKMB說明書的應用(yngyng)（3）實驗的局限性已知干擾物質 CK-BB（存在于新生兒 、腦局部缺血、小腦血腫、休克(xik) 和癌癥患者樣品中）和大分子 CK I 類及 II 類會使 CK-MB 結果假性升高 大于 1000 U/L 的總 CK 活性可能會引起 CK-MB 結果升高。總 CK 1000 U/L 的樣本在分析前應進行稀釋共五十七頁電解質應用(yngyng)注意事項參比液要24小時更換,否則測量結果會下降(xijing)參比液槍頭要8小時更換鉀、氯試劑彈夾從冰箱中取出必須室溫1個小時鈉試劑彈夾從冰箱中取出必須室溫2個小時共五十七頁電解質應用(yngyng)注意事