LC3000液相色譜儀操作規(guī)程

1、LC3000液相色譜儀操作規(guī)程1、首先將色譜儀電源打開，讓儀器進行預熱。2、進行樣品前處理，以及流動相進行過濾和脫氣，過濾流動相時使用溶劑過濾器，有機試劑使用有機膜，水使用水系膜。過濾完后對其進行脫氣處理。注意脫氣處理大概需要15-20分鐘左右。3、甲醇處理完后將其接入液路，然后將P3000泵的放空閥打開，并啟動泵讓甲醇充滿液路，并保證沒有汽泡，然后關閉放空閥。也可借助外力（使用洗耳球或注射器）在放空閥處將液體吸過來再啟動泵，這樣可以省時間。走30分鐘，停止泵，等待泵沒有壓力。換10%甲醇水沖洗30分鐘以上。停泵，等待壓力降至0左右。換流動相沖洗，查看管路中有無氣泡，保證沒有汽泡的情況下，啟動

2、泵。4、雙擊CXTH-3000色譜工作站點擊CXTH-3000（中文版）出現(xiàn)提示，關閉即可；出現(xiàn)色譜數(shù)據(jù)處理及儀器控制面板界面。5、在色譜數(shù)據(jù)處理及儀器控制面板界面中設置所分析樣品的色譜條件，如果使用單泵操作時，先確定所用泵是A泵還是B泵。點開時間程序中查看有無打,如果有；去掉為。6、設置參數(shù)：6.1在基本控制欄中設置波長（nm) ,然后點擊！確認。時間常數(shù)、量程切換都為2.切記開燈不要點。6.2設定流速（ml/min): 后點擊！確認。6.3設定最小壓力為0，最大壓力為35，如果數(shù)據(jù)已經(jīng)符合，就不要改動。6.4確定管路有無氣泡，如果沒有氣泡，點擊電腦上的第一個綠色圖標（啟動圖標） 7、做樣品

3、之前，保證儀器先用色譜甲醇走30分鐘，采集基線。把滿屏量程改至100，其他參數(shù)不變。查看基線走直后，停止采集，進樣。 8、如果分析的樣品流動相中含有酸、鹽，必須用甲醇：水（10:90）及（20:80）的甲醇水過渡40分鐘左右。即先用色譜純甲醇走基線30min，停止泵，換上甲醇水走基線40min,再停止泵，更換為流動相。 注意：沒走一步都要先確認管路中有無氣泡后，才能啟動泵。等待流動相基線走直后方可進樣，所進樣品必須用0.45m有機系濾頭過濾。進樣之前，需手動停止泵（點擊停止采集紅色圖標），待變成綠色的圖標后，把進樣閥扳到LOAD狀態(tài)，樣品勻速推進后，迅速扳下進樣閥（INJECT).自動采集數(shù)據(jù)

4、。等待圖譜出完后，基線走直。停止，保存圖譜。以此類推進樣。樣品分析結束后，先停止泵，換甲醇水貨甲醇沖洗儀器，沖至所做樣品前的壓力，即可停止泵，關機。梯度程序操作：12.1打開梯度混合器；12.2在打開的工作站中的儀器控制面板中，點擊時間程序，打開后，在運行時不使用基本控制中的參數(shù)，而使用本頁的程序前打，總運行時間不變。12.3設定參數(shù); 時間 流速（ml/min) A B C D 波長(nm) 歸零 量程 0 1.00 50 50 0 0 按標準 是 212.4設置好后，點擊第一綠色圖標采集基線，泵即可啟動，走30min后，按停所有泵。換上甲醇水或流動相。12.5如果分析的樣品流動相中含有酸、

5、鹽，必須用甲醇：水（10:90）及（20:80）的甲醇水過渡40分鐘左右。即先用色譜純甲醇走基線30min，停止泵，換上甲醇水走基線40min,再停止泵，更換為流動相。12.6設置所分析樣品的梯度條件（按照GB標準），設置好后點儀器控制面板中文件，另存設置。即可保存梯度條件。如果已存的梯度條件，可打開儀器控制面板中文件，引進設置，即可。12.7條件設置好后，點擊采集基線即可，啟動泵。把滿屏量程改至100。查看基線，基線走直后，進樣。12.8進樣前，先按停止采集（紅色圖標），變?yōu)榫G色后，把過濾好的樣品進入液相色譜（由LOAD狀態(tài)，進樣后，迅速扳下，到INJECT狀態(tài)）自動采集圖譜。12.9等待圖

6、譜出完后，基線走直，停止采集（點擊紅色圖譜），保存圖譜，進入第二針，以此類推。12.10樣品分析完后，沖洗儀器同上（先用甲醇水沖洗40min后，最后用甲醇沖洗至做樣前的壓力即可。停所有泵，關機。譜圖處理：13.1做標準曲線：13.1.1先打開已經(jīng)做好的譜圖，從低濃度到高濃度依次處理。比如先將8mg/l的圖譜調(diào)查點文件項點打開找所存位置的8mg/l的圖譜打開輸入最小峰面積點擊黃色圖標再處理（如有處理不掉的峰，點擊對已檢測出的峰進行手工取消成恢復）點擊定量計算后點擊定量組分（自動填全部套峰時間），填寫組分名稱、濃度后點擊定量方法，選擇計算校正因子（標準樣品）后點擊定量計算后點擊定量結果中當前表存檔

7、，提示入檔成功，檔中現(xiàn)有1檔數(shù)據(jù)，點擊確定。13.1.2以此類推其它濃度，都存檔成功后點擊定量方法點工作曲線，點擊計算后，點擊顯示。查看標準曲線是否合格。如合格，點擊文件存為模板，即可。13.2樣品處理：13.2.1調(diào)出樣品色譜圖，輸入最小峰面積點黃色圖標再處理如有處理不掉的峰，點擊對已檢測的峰進行手工取消或恢復點擊定量計算后點擊定量組分（自動填全部套峰時間），填寫組分名稱調(diào)出曲線點定量方法，選擇多點校正（基于工作曲線）后點擊定量計算后點擊定量結果，查看樣品濃度即可。代入公式計算。13.2.2如果不需要標準曲線的，直接打開色譜圖，鼠標應在峰中間，右擊后點擊峰尺寸，點看峰面積，代入公式計算。注意

8、事項：將色譜工作站CXTH-3000打開，將各項參數(shù)設置好（因為本工作是可以反控儀器的，因此儀器的常規(guī)操作是可以在工作站上完成的），然后點擊采集基線按扭，這時可以看如果基線比較平直了，就可以停止采集基線，這時可以將待測的樣品打到進樣閥里，（樣品必須用0.45um濾頭過濾，過濾后方可進樣）。并將進樣閥的手柄扳至LOAD位置，把過濾好的標樣用進樣針勻速推進，扳到INJECT位置。因為有進樣閥有觸發(fā)線連接工作站，所以扳閥的同時色譜工作站已經(jīng)進行譜圖采集的操作了。等待圖譜出完后，按紅色的圖標進行手動停止，保存圖譜。在以此類推進樣。采樣結束后可以對譜圖及定量結果進行相關操作，并得出結果。如果需要打印可以將譜圖數(shù)據(jù)進行打印。實驗結束后，還需要用純甲醇對整個液中進行沖洗，也就是將流動更換成純甲醇，檢查管路中有無氣泡。如有氣泡，排氣。無氣泡直接啟動泵，運行30分鐘左右。如果實驗過程中流動相配制中含有