天然產(chǎn)物提取分離

1、關(guān)于天然產(chǎn)物的提取分離第一張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月天然藥物活性成分的研究程序第二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月提取化學(xué)成分的兩種情況1 已 知 成 分2 對(duì)有效成分的性質(zhì)一無所知第三張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月溶劑法 水蒸氣蒸餾法升華法分餾法沉淀法 提取天然產(chǎn)物的常用方法第四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一、溶劑法 根據(jù)相似相溶原則，按極性化合物易溶于極性溶劑，非極性化合物易溶于非極性溶劑來選擇溶劑。 1.原理： 溶劑提取法是根據(jù)天然產(chǎn)物中各種成分在溶劑中的溶解性質(zhì)，選用對(duì)活性成分溶解度大，對(duì)不需要溶出成分溶解度小的溶劑，而將有效成分溶解

2、出來的方法。第五張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月石斛：有一定解熱鎮(zhèn)痛作用，能促進(jìn)胃液分泌,助消化，有增強(qiáng)新陳代謝、抗衰老等作用。 第六張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2、常用溶劑的極性環(huán)己烷,石油醚,苯,氯仿,乙醚,乙酸乙酯,正丁醇,丙酮,乙醇,甲醇小 大親脂性：大 小 親水性：小 大 極性：第七張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 化學(xué)成分的極性特點(diǎn) 分子越小,取代基極性越強(qiáng),極性基團(tuán)數(shù)目越多則極性越大，親水性越強(qiáng),為親水性成分（如:單糖） 反之,則親脂性越強(qiáng),為親脂性成分（如:揮發(fā)油） 取代基的極性順序：-COOH-OH-NH2-SH-CHOC=O-COOR-

3、OR-CH=CH-CH2-CH2-第八張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月例：下列三個(gè)化合物極性最小的是：C第九張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月4、溶劑提取法 浸漬法滲漉法煎煮法回流提取法第十張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月浸漬法：浸漬法是將天然產(chǎn)物粉末或碎塊裝人適當(dāng)?shù)娜萜髦?，加入適宜的溶劑（如乙醇、稀醇或水），浸漬藥材以溶出其中成分的方法。滲漉法：滲漉法是將天然產(chǎn)物粉末裝在滲漉器中，不斷添加新溶劑，使其滲透過藥材，自上而下從滲漉器下部流出浸出液的一種浸出方法。第十一張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月煎煮法：煎煮法是我國(guó)最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。所用容器一般為

4、陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜用鐵鍋，以免藥液變色。直火加熱時(shí)最好時(shí)常攪拌，以免局部藥材受熱太高，容易焦糊。回流提取法：應(yīng)用有機(jī)溶劑加熱提取，需采用回流加熱裝置，以免溶劑揮發(fā)損失。此法提取效率較冷浸法高，大量生產(chǎn)中多采用連續(xù)提取法。 第十二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月二、 水蒸氣蒸餾法 適于隨水蒸汽蒸餾而不被破壞的成分。將油層分出后，再以石油醚、乙醚萃取。 此類化合物沸點(diǎn)多在100oC以上；與水不互溶或僅微溶；在100oC有一定的蒸汽壓。液體就開始沸騰，水蒸氣將揮發(fā)性物質(zhì)一并帶出。 例如:揮發(fā)油、某些小分子生物堿的提取。第十三張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月三 、升華

5、法 優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便易行缺點(diǎn)：成分分解；焦油狀物不易除去第十四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月四、影響提取效果的因素 原料的粉碎程度：一般而言粒度以2060目為適。 浸出溫度：一般浸出溫度控制在60100。 濃度差:濃度差越大，擴(kuò)散推動(dòng)力越大，越有利提高浸出效率。 浸提時(shí)間:熱提13h，乙醇加熱回流提取12h。 第十五張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月天然產(chǎn)物有效成分的分離與精制 根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進(jìn)行分離 根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配系數(shù)不同進(jìn)行分離 根據(jù)分子的大小不同進(jìn)行分離 第十六張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一、根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進(jìn)行分離 1、結(jié)晶原理：利用混合物

6、中各成分在溶劑中的溶解度不 同來達(dá)到分離提純的目的。結(jié)晶溶劑的選擇：（1）不與有效成分發(fā)生反應(yīng)（2）對(duì)欲結(jié)晶成分的溶解度隨溫度的不同而有明顯差別。（3）對(duì)欲去除的雜質(zhì)冷熱時(shí)溶解度均大或均小第十七張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月制備結(jié)晶操作：略結(jié)晶純度的判定：化合物的結(jié)晶都有一定的結(jié)晶形狀、色澤、熔點(diǎn)和熔距，一可以作為鑒定的初步依據(jù)。 第十八張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2、溶劑沉淀： 在溶液中加入另一種溶劑以改變混合溶劑的極性，使一部分物質(zhì)沉淀析出，從而實(shí)現(xiàn)分離。 3、沉淀劑沉淀：（1）金屬離子沉淀；（2）酸堿沉淀；（3）非離子型聚合物沉淀；（4）均相沉淀。4、鹽析沉淀

7、第十九張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月二、根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行分離 一、液-液萃取法基本原理 分配定律利用不同化合物分配系數(shù)的不同，達(dá)到分離的目的K相差越大，越易分離第二十張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3、萃取方式分次萃取 實(shí)驗(yàn)室用分液漏斗，3-4次注意以下幾點(diǎn)：1）先用小試管猛烈振搖約1分鐘，觀察萃取后二液層分層現(xiàn)象。如果容易產(chǎn)生乳化，大量提取時(shí)要避免猛烈振搖，可延長(zhǎng)萃取時(shí)間。2）一般萃取34次即可。3） 溶劑與水溶液應(yīng)保持一定量的比例，第一次提取一般為水提取液的1/3，以后的用量可以少一些，一般1/4-1/6。 第二十一張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于20

8、22年6月4、超臨界流體萃取技術(shù) 超臨界流體萃取是以某一介質(zhì)作為萃取劑，在其臨界溫度和臨界壓力之上的條件下，從液體或固體物料中萃取出待分離的組分的一種方法。 第二十二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3液液分配色譜柱 將兩相溶劑中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上,作為固定相,填充在色譜管中,然后加入與固定相不相混溶的另一相溶劑 (流動(dòng)相)沖洗色譜柱。這樣,物質(zhì)同樣可在兩相溶劑中相對(duì)作逆流移動(dòng),在移動(dòng)過程中不斷進(jìn)行動(dòng)態(tài)分配而得以分離。這種方法稱之為液-液分配柱色譜法。 正相色譜與反相色譜第二十三張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月三、 根據(jù)物質(zhì)分子大小差別進(jìn)行分離 凝膠過濾法（Gel

9、filtration） 凝膠過濾法也叫凝膠滲透色譜排祖色譜，是利用分子篩分離物質(zhì)的一種方法。其中所用載體，如葡聚糖凝膠，是在水中不溶、但可膨脹的球形顆粒，具有三維空間的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。出柱順序： 按分子由大到小順序先后流出并得到分離。 第二十四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離方法薄層層析（Thin Layer Chromatography, TLC）1、原理 吸附、分配2、展開劑 低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑，選擇原則同吸附柱層析第二十五張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）化合物結(jié)構(gòu)與Rf值的關(guān)系在色譜中一個(gè)化合物所移動(dòng)的距離與溶劑前沿的距離之比.(0.01Rf 0.1），粗顆粒（1

10、50-200目） 難分離樣品（ Rf 0.1），細(xì)顆粒（200-300目）（三）展開劑 TLC選擇，各斑點(diǎn) Rf相差大，斑點(diǎn)圓，數(shù)量多第三十二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）實(shí)驗(yàn)操作 1、裝柱 堅(jiān)實(shí)、平整、無縫隙 尼龍筒或塑料薄膜袋2、加樣（1）拌樣加樣法（2）溶液加樣法 迅速、蓋滿柱頂，輕拍，趕走氣泡，保持柱頂整齊3、展開 展開至柱底第三十三張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（五）特點(diǎn)1、廣泛應(yīng)用于植化成分的制備性分離2、效果優(yōu)于濕法3、分離條件可用TLC探索4、熒光或有色物質(zhì)可在UV下分離切開，避免交叉5、設(shè)備簡(jiǎn)單、消耗溶劑少、省時(shí)缺點(diǎn)：裝柱不當(dāng)，效果不如濕法第三十四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月天然藥物活性成分的結(jié)構(gòu)研究方法一、程序1、初步推斷化合物類型1）根據(jù)樣品在提取、分離中的行為 2）測(cè)定有關(guān)理化性質(zhì)：定性反應(yīng)、PH、溶解度及熔沸點(diǎn)等 3）結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研2、測(cè)定分子式、計(jì)算不飽和度 1）元素定量分析 + 分子量測(cè)定 2）同位素峰法 3）HIMS 4）計(jì)算不飽和度3、確定分子中官能團(tuán)、或結(jié)構(gòu)片段或基本骨架 1）官能團(tuán)定性、定量分析 2）測(cè)定并解析圖譜：UV、IR、MS、H NMR、C NMR