動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體正式版課件

1、22.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課標(biāo)領(lǐng)航1掌握動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。2理解單克隆抗體技術(shù)。3了解動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用。【重點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；單克隆抗體技術(shù)。【難點(diǎn)】雜交瘤細(xì)胞的篩選過(guò)程。情景導(dǎo)航20世紀(jì)90年代初，英國(guó)科學(xué)家成功地利用“生物導(dǎo)彈”單克隆抗體瞄準(zhǔn)并殺死了癌細(xì)胞，使患血癌的一名67歲退休教授與一名女患者的癌細(xì)胞奇跡般消失了。被稱為“生物導(dǎo)彈”的單克隆抗體，能夠跟蹤和殺死細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞。核心要點(diǎn)突破基礎(chǔ)自主梳理知能過(guò)關(guān)演練2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體基礎(chǔ)自主梳理兩個(gè)或多個(gè)雜交DNA雜交4意義：克服了_雜交的不親合性，成為研究細(xì)胞_、_、腫瘤和生物_培育的重要手

2、段。二、單克隆抗體1傳統(tǒng)抗體的獲得(1)方法：向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種_，使動(dòng)物產(chǎn)生_；從動(dòng)物_中分離所需抗體。(2)特點(diǎn)：_、純度低、_差。遠(yuǎn)緣遺傳細(xì)胞免疫新品種抗原抗體血清產(chǎn)量低特異性2單克隆抗體的制備脾骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生抗體克隆化抗體體外培養(yǎng)小鼠腹腔細(xì)胞培養(yǎng)液腹水3單克隆抗體的應(yīng)用(1)優(yōu)點(diǎn)：_、_、產(chǎn)量大。(2)應(yīng)用作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、_、簡(jiǎn)易、_的優(yōu)點(diǎn)。用于_和_。特異性強(qiáng)靈敏度高高效快速治療疾病運(yùn)載藥物思考感悟什么是單克隆抗體？鼠的單克隆抗體能否用于人體疾病的治療？為什么？【提示】單克隆抗體是由單一雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的高度專一的抗體。不能。因?yàn)槭蟮腂淋巴細(xì)胞所

3、產(chǎn)生的抗體與人體B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是不同的。核心要點(diǎn)突破動(dòng)物細(xì)胞融合1原理：膜的流動(dòng)性。2誘導(dǎo)方法：物理法離心、振動(dòng)、電激；化學(xué)法聚乙二醇；生物方法滅活的病毒。3動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程4優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限性，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。特別提醒滅活是指用物理或化學(xué)的手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。5植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段離心、電激、振

4、動(dòng)、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo)與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果獲取雜種植株獲得雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,擴(kuò)展雜交親本組合范圍，培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 (2010年安慶高二檢測(cè))某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為有幾處是不正確的()例1植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)，植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合，單克隆抗體的制備特殊處理機(jī)械法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理，制作細(xì)胞懸液融合方法物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法典型應(yīng)用人工種子、雜種植株單克隆抗體的制備培養(yǎng)基區(qū)別生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂

5、素影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化動(dòng)物血清不可缺少A.1B2C3 D4【嘗試解答】B【解析】選B。植物細(xì)胞工程常采用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交。動(dòng)物細(xì)胞工程常采用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備，還有胚胎移植、核移植等。動(dòng)、植物細(xì)胞工程中都需要對(duì)所取材料進(jìn)行特殊處理，植物細(xì)胞工程要利用酶解法去除細(xì)胞壁，得到有生活力的原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞工程則需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織。動(dòng)、植物細(xì)胞工程所用的培養(yǎng)基是不同的，植物細(xì)胞工程中利用固體或半固體培養(yǎng)基,含有蔗糖、植物必需的礦質(zhì)元素、植物激素等，動(dòng)物細(xì)胞工程中利用液體培養(yǎng)基，含有動(dòng)物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等?！净?/p>

6、動(dòng)探究】 動(dòng)物細(xì)胞融合中兩種不同細(xì)胞融合,則：融合的方式有幾種？融合完成的標(biāo)志是什么？【提示】三種；細(xì)胞核融合成一個(gè)核?！疽渍`警示】(1)常用的病毒誘導(dǎo)劑有仙臺(tái)病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺(tái)病毒最常用。(2)用做誘導(dǎo)劑的病毒必須事先滅活，使病毒的感染活性、增殖能力喪失但不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu)。跟蹤訓(xùn)練(2011年灤縣高二檢測(cè))能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因素是()A離心B滅活的病毒C電激 D振動(dòng)答案：B單克隆抗體的制備1關(guān)鍵思路及操作依據(jù) (1)關(guān)鍵思路克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。(2)用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因每一個(gè)B淋巴細(xì)

7、胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無(wú)限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能夠無(wú)限增殖。 2單克隆抗體的制備過(guò)程3單克隆抗體制備過(guò)程中的篩選及原因(1)第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后，因?yàn)橛腥N融合情況：B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，而只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來(lái)的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的

8、單克隆抗體。特別提醒上述B淋巴細(xì)胞為經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞。 (2011年青島市高二檢測(cè))如圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。例2(1)人的紅細(xì)胞膜表面有被稱為凝集原的特異_;從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是_。(2)圖中細(xì)胞1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細(xì)胞后而獲得的_細(xì)胞，這種細(xì)胞具有產(chǎn)生_的特點(diǎn)，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能_，但不會(huì)產(chǎn)生抗體。(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促細(xì)胞融合因子的作用下，使兩種細(xì)胞發(fā)生融合，形成圖中的細(xì)胞3，這種細(xì)胞稱為_(kāi)。把它在乙培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，

9、則能產(chǎn)生大量的細(xì)胞群，這種方法稱為_(kāi)。(4)過(guò)程的主要目的是_。通過(guò)過(guò)程或的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量_抗體?！緡L試解答】(1)糖蛋白抗原(2)B淋巴單一的抗A抗體(或單一的特異性抗體)快速大量增殖(3)雜交瘤細(xì)胞單克隆(4)篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞抗A單克隆【解析】此題主要考查了單克隆抗體的制備過(guò)程及其相關(guān)知識(shí)。(1)紅細(xì)胞表面的凝集原與細(xì)胞識(shí)別有關(guān)，其化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白。從免疫學(xué)角度看是抗原。(2)小鼠受到抗原刺激后能產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞，這種細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能增殖，骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖但不能產(chǎn)生抗體。(3)通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合的方式可以獲得雜交瘤細(xì)胞，產(chǎn)生單克隆抗體。 (4)過(guò)程的目的是

10、篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞,通過(guò)或可大量產(chǎn)生抗A單克隆抗體?！疽渍`警示】解答單克隆抗體的有關(guān)題目時(shí)要特別注意以下幾點(diǎn)：(1)所用B淋巴細(xì)胞是否是經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞。(2)細(xì)胞融合之后需要經(jīng)過(guò)兩次篩選，方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)彈”，其選擇性是由抗體決定的，與藥物無(wú)關(guān)。跟蹤訓(xùn)練(2011年惠州高二檢測(cè))關(guān)于應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟如下，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述中不正確的是 ()將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合將雜交瘤細(xì)

11、胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞從腹水中提取抗體A實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是B過(guò)程中產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程也為克隆C過(guò)程獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖D到的過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選解析：選C。本題考查的是單克隆抗體的制備，屬于考綱識(shí)記層次。解答本題的關(guān)鍵是知道單克隆抗體制備的過(guò)程，理解其原理。只有骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞的融合體才可以無(wú)限增殖。知能過(guò)關(guān)演練本部分內(nèi)容講解結(jié)束點(diǎn)此進(jìn)入課件目錄按ESC鍵退出全屏播放謝謝使用隨著年歲的疊加，我們會(huì)漸漸發(fā)現(xiàn)：越是有智慧的人，越是謙虛，因?yàn)榘侯^的只是稗子，低頭的才是稻子；越是富有的人，越是高貴，因?yàn)檎嬲母辉Ｊ庆`魂上的高貴以及精神世界的富足；越是優(yōu)秀的人，

12、越是努力，因?yàn)閮?yōu)秀從來(lái)不是與生俱來(lái)，從來(lái)不是一蹴而就。隨著滄桑的累積，我們也會(huì)慢慢懂得：成功的路，其實(shí)并不擁擠，因?yàn)槟軌驁?jiān)持到底的人實(shí)在太少；所有優(yōu)秀的人，其實(shí)就是活得很努力的人，所謂的勝利，其實(shí)最后就是自身價(jià)值觀的勝利。人到中年，突然間醒悟許多，總算明白：人生，只有將世間的路一一走遍，才能到盡頭；生活，只有將塵世況味種種嘗遍，才能熬出頭。這世間，從來(lái)沒(méi)有最好，只有更好。每天，總想要努力醒得比太陽(yáng)還早，因?yàn)榭傆X(jué)得世間萬(wàn)物，太陽(yáng)是最能賜人力量和能量的。每當(dāng)面對(duì)噴薄的日出，心中的太陽(yáng)隨之冉冉騰起，生命之火熊熊燃燒，生活的熱情就會(huì)光芒四射。我真的難以想象，那些從來(lái)不早起的人，一生到底能夠看到幾回日升

13、？那些從來(lái)沒(méi)有良好習(xí)慣的人，活到最后到底該是多么的遺憾與愧疚？曾國(guó)藩說(shuō)：早晨不起，誤一天的事；幼時(shí)不學(xué)，誤一生的事。尼采也說(shuō)：每一個(gè)不曾起舞的日子，都是對(duì)生命的辜負(fù)。光陰易逝，豈容我待？越是努力的人，越是沒(méi)有時(shí)間抱怨，越是沒(méi)有工夫頹喪。每當(dāng)走在黎明的曙光里，看到那些兢兢業(yè)業(yè)清潔城市的“美容師”，我就會(huì)由衷地欣賞并在心底贊嘆他們，因?yàn)樗麄兓畹煤芘苷J(rèn)真。每當(dāng)看見(jiàn)那些奔跑在朝霞絢爛里的晨練者，我就會(huì)從心里為他們豎起大拇指，因?yàn)樗麄兘o自己力量的同時(shí)，也贈(zèng)予他人能量。我總覺(jué)得：你可以不優(yōu)秀，但你必須有認(rèn)真的態(tài)度；你可以不成功，但你必須努力。這個(gè)世界上，從來(lái)沒(méi)有誰(shuí)比誰(shuí)更優(yōu)秀，只有誰(shuí)比誰(shuí)更努力。我也始終

14、認(rèn)為：一個(gè)活得很努力的人，自帶光芒萬(wàn)丈；一個(gè)人認(rèn)真的樣子，比任何時(shí)候都要美好；一個(gè)能夠自律自控的人，他的人生也就成功了大半。世間每一種的好，從來(lái)都只為懂得努力的人盛裝而來(lái)。有時(shí)候，我真的感覺(jué)，人生的另一個(gè)名字應(yīng)該叫做努力，努力了就會(huì)無(wú)悔，努力了就會(huì)無(wú)愧；生活的另一種說(shuō)法應(yīng)該叫做煎熬，熬過(guò)了漫漫黑夜，天就亮了，熬過(guò)了蕭蕭冬日，春天就來(lái)了。人生不易，越努力越幸運(yùn)；余生不長(zhǎng)，越珍惜越精彩。人生，是一本太倉(cāng)促的書(shū)，越認(rèn)真越深刻；生命，是一條無(wú)名的河，越往前越深邃。愿你不要為已逝的年華嘆息，不要為前路的茫茫而裹足不前愿你相信所有的堅(jiān)持總能奏響黎明的號(hào)角，所有的努力總能孕育碩果的盛駕光臨。愿你堅(jiān)信越是成功

15、的人越是不允許自己頹廢散漫，越是優(yōu)秀的人越是努力生活中很多時(shí)候，我們遇到一些復(fù)雜的情況，會(huì)很容易被眼前的障礙所蒙蔽，找不到解決問(wèn)題的方法。這時(shí)候，如果能從當(dāng)前的環(huán)境脫離出來(lái)，從一個(gè)新角度去解決問(wèn)題，也許就會(huì)柳暗花明。一個(gè)土豪，每次出門(mén)都擔(dān)心家中被盜，想買(mǎi)只狼狗栓門(mén)前護(hù)院，但又不想雇人喂狗浪費(fèi)銀兩。苦思良久后終得一法：每次出門(mén)前把WiFi修改成無(wú)密碼，然后放心出門(mén)每次回來(lái)都能看到十幾個(gè)人捧著手機(jī)蹲在自家門(mén)口，從此無(wú)憂。護(hù)院，未必一定要養(yǎng)狗換個(gè)角度想問(wèn)題，結(jié)果大不同。一位大爺?shù)讲耸袌?chǎng)買(mǎi)菜，挑了3個(gè)西紅柿到到秤盤(pán)，攤主秤了下：“一斤半3塊7?！贝鬆敚骸白鰷挥媚敲炊??！比サ袅俗畲蟮奈骷t柿。攤主:“一

16、斤二兩，3塊?！闭?dāng)身邊人想提醒大爺注意秤時(shí)，大爺從容的掏出了七毛錢(qián)，拿起剛剛?cè)サ舻哪莻€(gè)大的西紅柿，瀟灑地?fù)Q種算法，獨(dú)辟蹊徑，你會(huì)發(fā)現(xiàn)解決問(wèn)題的另一個(gè)方法。生活中，我們特別容易陷入非A即B的思維死角，但其實(shí)，遭遇兩難困境時(shí)換個(gè)角度思考，也許就會(huì)明白：路的旁邊還有路。一個(gè)魚(yú)塘新開(kāi)張，釣費(fèi)100塊。釣了一整天沒(méi)釣到魚(yú)，老板說(shuō)凡是沒(méi)釣到的就送一只雞。很多人都去了，回來(lái)的時(shí)候每人拎著一只雞，大家都很高興！覺(jué)得老板很夠意思。后來(lái)，釣魚(yú)場(chǎng)看門(mén)大爺告訴大家，老板本來(lái)就是個(gè)養(yǎng)雞專業(yè)戶，這魚(yú)塘本來(lái)就沒(méi)魚(yú)。巧妙的去庫(kù)存，還讓顧客心甘情愿買(mǎi)單。新時(shí)代，做營(yíng)銷(xiāo)，必須打破傳統(tǒng)思維。孩子不愿意做爸爸留的課外作業(yè)，于是爸爸靈機(jī)一動(dòng)說(shuō)：兒子，我來(lái)做作業(yè)，你來(lái)檢查如何？孩子