血漿治療若干問題的探討課件

1、血漿治療若干問題的探討上海市血液中心 錢開誠7/29/20221錢開誠輸血醫(yī)學輸血是醫(yī)學發(fā)展史上的重要里程碑輸血是最早獲得成功的組織移植輸血是現代醫(yī)學的重要支持手段輸血是未來醫(yī)學的重要載體7/29/20222錢開誠臨床輸血相關法規(guī)中華人民共和國獻血法（1998）第十三條：醫(yī)療機構對臨床用血必須進行核查。；第十六條：醫(yī)療機構臨床用血應當制定用血計劃，遵循合理科學原則。國家鼓勵臨床用血新技術的研究和推廣醫(yī)療機構臨床用血管理辦法（1999）第五條：醫(yī)療機構應當設立臨床輸血管理委員會，負責臨床用血的規(guī)范管理和技術指導。；第六條：二級以上醫(yī)院設立輸血科（血庫），負責計劃、儲血、制度執(zhí)行情況檢查、參與臨床

2、診斷、治療與科研臨床輸血技術規(guī)范（2000）總則；輸血申請；受血者血樣采集與送檢；交叉配血；血液入庫、核對、儲存；發(fā)血；輸血；附件19 7/29/20223錢開誠合理科學輸血現代輸血理念各類血液成分的適應癥、指征和輸注量相關病例的輸血治療輸血不良反應的預防、診斷、處理7/29/20224錢開誠合理科學輸血-血漿輸注現代輸血理念血漿生理概要及其臨床治療適應癥血漿置換療法被動免疫血漿治療血漿輸注不良反應的預防、診斷、處理7/29/20225錢開誠現代輸血理念成分輸血科學、合理用血7/29/20226錢開誠 成份輸血定義 將全血分離，制備成各種高濃度、高純度的血液成份制品。根據病情需要有針對性地輸注

3、不同的血液成份，稱為成份輸血。7/29/20227錢開誠 成份輸血的優(yōu)越性高效安全易于保存節(jié)約血液資源7/29/20228錢開誠臨床合理用血原則“不可替代時選擇”原則滿足生理需要原則風險規(guī)避原則7/29/20229錢開誠合理科學輸血-血漿輸注現代輸血理念血漿生理概要及其臨床治療適應癥血漿置換療法被動免疫血漿治療血漿輸注不良反應的預防、診斷、處理7/29/202210錢開誠血漿生理概要7/29/202211錢開誠血液血 漿血細胞紅細胞白細胞血小板: 水：9092 血漿蛋白 溶質：810小分子物質營養(yǎng)物質激素代謝產物有機物無機鹽（電解質）白蛋白球蛋白纖維蛋白原7/29/202212錢開誠 血漿的構

4、成體重的 4% （ 40 45 ml / kg 體重）組成水 90 %溶質 10 %蛋白質 7 %無機鹽 0.9 %其它有機物7/29/202213錢開誠血漿蛋白的主要功能： 1.形成血漿的膠體滲透壓 2.運輸功能 3.參與凝血和抗凝血功能 4.防御功能 5.營養(yǎng)、緩沖功能 7/29/202214錢開誠 血漿蛋白 白蛋白白蛋白 MW 67000血漿中含量最多的蛋白 4048g/L血漿總白蛋白約 120 g占人體總白蛋白的 40 %功能維持血漿膠體滲透壓運輸 脂肪酸 膽紅質等肝臟合成 正常成人肝臟每日約合成12g白蛋白，相當300ml血漿所含的白蛋白半壽期 約 20 天7/29/202215錢開

5、誠 免疫球蛋白和補體免疫球蛋白免疫球蛋白是一組主要由脾、淋巴結和其他淋巴組織內的槳細胞所產生具有抗體活性的蛋白質 組成 IgG 、IgM、IgA、IgE、IgD生物學效應：與抗原特異性結合；激活補體；與細胞表面Fc受體結合；參與免疫調節(jié)補體存在于血液和組織液中的一組經活化后具有酶活性的蛋白質組成由30余種可溶性蛋白、膜結合性蛋白和補體受體組成的多分子系統(tǒng)(complement system)。根據補體系統(tǒng)各成分的生物學功能，可將其分為補體固有成分、補體調控成分和補體受體（CR）生物學效應有：增強吞噬細胞的趨化性；增加血管的通透性；參與細胞溶解；參與免疫調節(jié)等7/29/202216錢開誠 凝血、

6、抗凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)血液凝固：血液由流動的液體狀態(tài)變成不流動的凝膠狀血塊的過程抗凝血：阻礙血液凝固的機制纖維蛋白溶解：纖維蛋白或纖維蛋白原被水解的過程 7/29/202217錢開誠 凝血因子血液及其它組織中直接參與凝血的物質稱為凝血因子。根據發(fā)現的先后順序，以羅馬數字編號7/29/202218錢開誠 血液凝固的機理7/29/202219錢開誠 凝血過程 (瀑布學說) 凝血過程大體上分為三個基本步驟： 凝血酶原激活物形成 凝血酶原 凝血酶 纖維蛋白原 纖維蛋白 7/29/202220錢開誠抗凝血機制 體液抗凝系統(tǒng)中的主要抗凝物質： 抗凝血酶 (AT ) 肝素 蛋白質 C (PC) 體外的主要

7、抗凝物質： 降低血鈣濃度而妨礙血液凝固，如： 草酸鹽 檸檬酸鹽7/29/202221錢開誠纖維蛋白溶解機制概念: 纖維蛋白或纖維蛋白原被纖維蛋白溶解酶 （簡稱纖溶酶）水解的過程，簡稱纖溶。意義:使血液經常保持液態(tài),血流通暢,防血栓形成。 纖溶的基本過程包括： 纖溶酶原的激活 纖維蛋白的降解，7/29/202222錢開誠 血漿無機物陽離子Na+ 主要 140 mMK+ 4 mMCa+ 1 mMMg+ 2 mM陰離子Cl 主要 103 mMHCO3- 28 mM7/29/202223錢開誠 血漿碳水化合物種類葡萄糖 70 105 mg %其它單糖果糖半乳糖甘露糖多糖 量少糖蛋白7/29/20222

8、4錢開誠 血漿脂質含量 5 mg / ml主要形式 脂蛋白7/29/202225錢開誠血漿制品常規(guī)血漿制品新鮮冰凍血漿 (FFP)冰凍血漿(FP)冷沉淀7/29/202226錢開誠常規(guī)血漿輸注適應癥獲得性多凝血因子缺乏先天性凝血因子缺乏？血漿置換被動免疫治療注：1、血漿不是維持血液膠滲透壓、擴充血容量的最佳途徑 2、糾正低蛋白血癥的首選制劑是白蛋白7/29/202227錢開誠血漿不宜單純用于擴充血容量擴容效果不理想血漿增量效力僅76% ，血液動力學改善效果 并不理想(Ahnefeld 1965)具有輸血相關風險輸血相關傳染性風險：HCV,HBV,HIV免疫抑制 輸血相關急性肺損傷7/29/20

9、2228錢開誠臨床常用的膠體溶液 羥乙基淀粉 白蛋白 明膠制劑 右旋糖酐 7/29/202229錢開誠不同液體容量效力的比較7/29/202230錢開誠若干臨床輸血特例討論急性大量出血擇期手術惡性腫瘤播散性血管內凝血.7/29/202231錢開誠大量失血的輸血搶救（大量輸血）概念24小時內輸入血液全身血量 1 小時內輸入血液1/2全身血量適應癥大血管創(chuàng)傷性斷裂外科手術及手術意外產科意外7/29/202232錢開誠大量失血的治療的程序首要目標：維持循環(huán)容量第二目標：保持血氧攜帶能力第三目標：恢復凝血和內環(huán)境穩(wěn)定 美國麻醉學會（ASA）19977/29/202233錢開誠大量輸血緊急大量輸血的配血

10、5分鐘？15分鐘？3045分鐘？WHO臨床用血：緊急情況下輸注“O、Rh-”臨床輸血規(guī)范： Rh（D）陰性和其他稀有血型患者， 應采用自身輸血、同型輸血或配合型輸血 UMSTC:5649例創(chuàng)傷,8%輸RBC,其中11%(50例)未經交叉配型直接輸入“O”型RBC(Hess JR et al,Transfusion,2006,46(5) 7/29/202234錢開誠大 量 輸 血大量輸血的血液選擇全血？組織間液缺失檸檬酸中毒大量、多人份異體血漿溶血可能、急性肺損傷PT-GVHD紅細胞懸液必要時輸注血小板、FFP、冷沉淀 7/29/202235錢開誠維持凝血所需的凝血因子水平凝血因子最低水平（正常

11、）I30-50II20-40V15-25VII5-10VIII25-30IX15-25X10-20XI10XIII2-37/29/202236錢開誠急性失血對血小板的影響（可耐受230%失血）血小板計數15010050失血量/血容量50% 100 150 200 230%7/29/202237錢開誠各凝血因子可耐受的失血量血小板 230% 血容量纖維蛋白元 140%凝血酶原 201%V 因子 229%VIII因子 236%7/29/202238錢開誠失血后容量替代治療步驟Target controlled replacement Volume loss (%)Colloids + crysta

12、lloids100908070605040302010 + 紅細胞+新鮮冰凍血漿+ 血小板0晶+膠 7/29/202239錢開誠 血漿輸注劑量補充凝血因子1520ml/Kg.BW7/29/202240錢開誠 冷沉淀輸注冷沉淀的定義冷沉淀的組份及含量冷沉淀輸注適應癥冷沉淀輸注劑量7/29/202241錢開誠 冷沉淀的定義 把從400ml全血中獲得的FFP置于04條件下融化，收集得到的冷不融部分稱為冷沉淀。7/29/202242錢開誠 冷沉淀主要組份及含量因子VIII促凝活性(F VIII：C) 80IU瑞斯托霉素因子(VWF)60IU纖維蛋白原 (F1) 200300mg纖維蛋白穩(wěn)定因子 (FX

13、III)80IU纖維結合蛋白(Fn)60mg7/29/202243錢開誠 冷沉淀輸注的適應癥先天性凝血因子缺乏甲型血友病血管性假血友病(VW病)獲得性凝血因子缺乏DIC嚴重肝病尿毒癥等.?纖維結合蛋白水平降低惡性腫瘤重癥感染DIC嚴重創(chuàng)傷、燒傷大手術等7/29/202244錢開誠 冷沉淀輸注劑量血友病及其它凝血因子缺乏患者FVIII 20IU/Kg.BW（0.25袋/Kg.BW)纖維蛋白原 4080mg/Kg.BW（0.20.4袋/Kg.BW)Fn水平低下患者大劑量法：15mg/Kg . BW（0.25袋/Kg.BW)維持法：6-7mg/Kg . BW7/29/202245錢開誠合理科學輸血-

14、血漿輸注現代輸血理念血漿生理概要及其臨床治療適應癥血漿置換療法被動免疫血漿治療血漿輸注不良反應的預防、診斷、處理7/29/202246錢開誠血漿置換術適應癥自身免疫性疾病 (重癥肌無力、肺腎綜合征、SLE、 急進性腎炎等)藥物、毒物、毒素中毒 (洋地黃、有機磷等、內毒素)急性肝、腎功能衰竭7/29/202247錢開誠血漿置換術機理:移除血漿中的致病因子 (抗體、毒素、滯留代謝產物等)導入缺乏的血漿成分 凝血因子 體液免疫因子等7/29/202248錢開誠血漿置換術方法：人工單采術機械單采術7/29/202249錢開誠血漿置換術血漿置換量：置換全身血漿清除率60%置換全身血漿2倍清除率85%全身

15、血漿(ml)=體重(kg)70(1-Hct)常規(guī)：13L/次、間隔12日一次35次為一療程7/29/202250錢開誠血漿置換術置換液：新鮮冰凍血漿晶體溶液白蛋白溶液血漿蛋白混合液7/29/202251錢開誠血漿置換術不良反應及其對策：檸檬酸鹽反應 適當補充鈣離子凝血障礙FFP、凝血因子病毒感染病毒滅活血漿栓塞脈管炎等嚴謹操作7/29/202252錢開誠合理科學輸血-血漿輸注現代輸血理念血漿生理概要及其臨床治療適應癥血漿置換療法被動免疫血漿治療血漿輸注不良反應的預防、診斷、處理7/29/202253錢開誠被動免疫血清（漿）治療 1890年，德國病理學家Won Behring發(fā)現感染病菌的人恢復

16、后血清中會產生一種抗菌成份，給病人注射恢復期病人的血清可以治療同一種感染性疾病，由此開創(chuàng)了用“康復期血清（漿）”實施被動免疫治療的先河。 7/29/202254錢開誠被動免疫治療 是指給機體輸入含有特異性抗體的免疫 血清、血漿或免疫球蛋白，使機體被動獲得特異性免疫力，達到緊急預防或治療某些感染性疾病的目的治療方式7/29/202255錢開誠主動免疫與人工被動免疫區(qū)別要點人工主動免疫人工被動免疫免疫物質抗原抗體或細胞因子等免疫出現時間慢，2-4周快，立即免疫維持時間長，數月-數年短，2-3周主要用途預防治療或緊急預防7/29/202256錢開誠SARS康復期血漿治療 姜素椿，傳染病專家。 曾任中

17、國人民解放軍302醫(yī)院傳染科主任、副院長、專家組成員。在中樞神經系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及出血熱等傳染病的診治方面具有很高的造詣及豐富的經驗。 2003年，姜素椿在搶救一位SARS患者時不幸感染SARS，他在自己身上大膽試驗，注射了SARS康復者的血清，使病情發(fā)生奇跡般的變化，再配合其他藥物治療后，僅23天就康復出院，開創(chuàng)了全國首例用血清來治愈SARS的臨床實驗，為科學治療SARS留下了寶貴的臨床醫(yī)學資料和經驗。在抗擊SARS斗爭中，姜素椿被中國人民解放軍四總部評為“全軍非典型肺炎防治先進個人”，被中組部評為“全國防治非典工作優(yōu)秀共產黨員”,被中國科協(xié)授予“防治非典先進科技工作者”稱號。 商務

18、印書館大家專欄 7/29/202257錢開誠香港SARS康復期血漿治療 曾在工作中感染“非典”并已痊愈的中大內科及藥物治療學系副教授鄭彥銘，至今已捐出毫升血清救助患者。月初，鄭彥銘在威爾斯醫(yī)院工作時受到感染，他自愿成為中大血清治療法的試驗者。月底，鄭彥銘康復出院后很快返回工作崗位，積極參與研究血清療法。 新華網7/29/202258錢開誠香港中文大學SARS康復期血漿治療 康復期血漿組 類固醇激素組患者數 20 20痊愈 20 17死亡 0 3死亡率 0% 15% 人民網 陳少波7/29/202259錢開誠康復期血漿治愈H5N1型禽流感一例 患者概況：男性，31歲，既往史無特殊；于2006年6

19、月7日因高熱4天（體溫39.9），伴寒戰(zhàn)，咳嗽，咳痰收治入院。胸部X線攝片示左肺下部有大片模糊影。經RT-PCR檢測和氣管抽吸物病毒分析確定為A型（H5N1）禽流感病毒。入院第5天予奧司他韋150 mg bid治療2天，患者右肺實變影增重而左肺僅有輕度好轉。第一次病毒定量測定為患者開始奧司他韋治療后26小時，H5N1病毒呈高水平復制（1.31105拷貝/ml）狀態(tài)，次日，在奧司他韋治療中，病毒復制水平仍呈上升趨勢（ 1.68105拷貝/ml）。 鐘南山等N Engl J Med 2007, 357: 1450 7/29/202260康復期血漿治愈H5N1型禽流感一例入院第八天行H5N1型禽流感

20、康復期血漿治療：捐獻者為2006年2月罹患H5N1型禽流感經治療后康復的患者。共捐獻600 ml康復期血漿，血漿H5N1 病毒中和抗體滴度1:80。 600ml康復期血漿分3次輸注，200mi/次；第一次輸注與第二次輸注間隔8hr，第二次輸注與第三次輸注間隔24hr；第一次輸入康復期血漿后8hr，患者的病毒復制水平從1.68105拷貝/ml降至1.42104拷貝/ml，第一次輸注康復期血漿后32hr（距第二次輸注24hr）、病毒檢測陰性。患者最終得以康復。H5N1 病毒中和抗體測定：輸注康復期血漿前H5N1 病毒中和抗體陰性，輸注血漿后抗體水平逐步增高，至第一次康復期血漿輸注5天后，抗體滴度維

21、持在1:401:80之間。 鐘南山等N Engl J Med 2007, 357: 1450 7/29/202261康復期血漿治療甲型H1N1流感的預期甲型H1N1流感診療方案（2009年第三版） 2009.10.12頒布對于重癥和危重病例，也可以考慮使用甲型H1N1流感近期康復者恢復期血漿或疫苗接種者免疫血漿進行治療。對發(fā)病1周內的重癥和危重病例，在保證醫(yī)療安全的前提下，宜早期使用。推薦用法：一般成人100-200ml，兒童50ml（或者根據血漿特異性抗體滴度調整用量），靜脈輸入。必要時可重復使用。使用過程中，注意過敏反應。7/29/202262錢開誠合理科學輸血-血漿輸注現代輸血理念血漿生

22、理概要及其臨床治療適應癥血漿置換療法被動免疫血漿治療血漿輸注不良反應的預防、診斷、處理7/29/202263錢開誠近代輸血醫(yī)學的關注焦點不斷提高輸血的療效成分輸血科學合理用血血液成分的體外誘導、修飾不斷降低輸血風險技術層面發(fā)展經血傳播病原體及免疫血液學檢測技術發(fā)展血液病原體滅活、白細胞濾除、-射線照射等血液處理技術管理層面實施無償獻血，根除利益驅動性供血實施體系化質量管理，最大限度杜絕失誤事件的發(fā)生7/29/202264錢開誠輸血風險免疫反應輸血感染疾病紅細胞白細胞血小板血漿急性溶血遲發(fā)性溶血發(fā)免 G熱疫 V 抑 H 制 D血輸小血板后輸紫注癜無效急 過性 敏肺 反損 應傷乙 丙 愛 人 C

23、其型 型 滋 類 M 它肝 肝 病 T V 病 炎 炎 細 感 原 胞 染 體 白 血 病7/29/202265錢開誠輸血相關病毒感染風險病毒標記物檢測技術的局限性 窗口期 WP 試劑敏感性檢測病毒種類的局限性 檢測：HBV HCV HIV 未檢測 ：HTLV CMV EBV B19 新病毒不斷被發(fā)現 SARS? WNV僅2003 年，美國CDC 報告WNV感染97862例,導致264人死亡;其中61例可能與輸血有關, 21例被確認為輸血感染，(其中6人死亡)。 7/29/202266錢開誠受血者感染百分比%7/29/202267錢開誠病毒性輸血傳染病發(fā)生機率美國 HIV 1：676,000

24、HCV 1 : 103000 HTLV 1: 641,000 HBV 1: 63,000 輸血相關病毒感染機率 1 : 34,000 (其中1/1000死亡) Schreiber,GB,et al, NEJM,334:1685,1998 7/29/202268錢開誠美國生活風險(年死亡機率) 主動生活風險吸煙 1:200駕駛汽車 1:10,000摩托車比賽 1:50賽馬 1:740懷孕 1:4,350 被動生活風險交通意外 1:20,000地震 1:588,000流行感冒 1:5000PTCA 1:200 術后感染 1:1,200 輸血感染 1:34,0007/29/202269輸血傳播病毒性

25、疾病全球目前受感染人數: 約 5.8 億HBV 3.71 億1.2億(32%)HCV 1.77 億3800萬(21%)HIV 3300 萬100萬(3%)因不安全輸血引起:HBV 8001600 萬HCV 230470萬HIV 150300萬健康報2002.5.31 , CDC 2003WHO / GDBS 1998-99Safe blood starts with me WHO/BCT/01.03 7/29/202270錢開誠Four Protecting Wallsdonor criteriatestingInactivation removalModified from: N Dhing

26、ra, 17-18 June 2003Rational Use7/29/202271錢開誠 病毒性輸血風險的控制對策現行對策： 推行無償獻血 嚴格篩查血液 提倡科學用血 消除殘留風險的根本對策： 血液制品病毒滅活 開發(fā)血液代用品 7/29/202272錢開誠嚴格篩查血液-NAT 檢測的優(yōu)勢直接檢測病毒的核酸縮短病毒檢測的“窗口期”敏感性高HIV markers during early infectionHIV RNA (plasma)HIV Antibody110102030405060708090100HIV p24 Ag16225 Days6 DaysTheoretical Infect

27、ivity Day 0HIV RNADay 11HIV p24 AgDay 16HIV AntibodyDay 22COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 20027/29/202274錢開誠HBV markers during early infectionInfectionDay 0HBV DNADay 32 HBsAgDay 59; disappears Day 120HBV DNA (PCR)Anti-HBcInfection1200102030405060708090100110HBsAgALT59COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT

28、 20027/29/202275錢開誠HCV markers during early infectionHCV RNAAnti-HCV120102030405060708090100 InfectionDay 0 HCV RNADay 12 HCV AntibodyDay 70COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 20027/29/202276錢開誠NAT 縮短病毒檢測窗口期HIV: 22 to 11 daysHBV: 59 to 32 daysHCV: 70 to 12 daysResidual risk, all donors (US)InfectionResi

29、dual risk from:Repeat donorsAll donorsHBV1:205,0001:144,000HCV (without NAT)1:276,0001:199,000HCV (with NAT)1:1,935,0001:1,390,000HIV (without NAT)1:1,468,0001:1,048,000HIV (with NAT)1:2,135,0001;1,525,000HTLV1:2,993,0001:2,230,000 Dodd RY, Notari EP 4th, Stramer SL.Transfusion. 2002 Aug;42(8):9757/

30、29/2022如何杜絕已檢測病毒的殘留感染風險？如何杜絕CMV EBV B19 WNV等未檢測病毒經 輸血傳播的風險？如何防范未知病毒經輸血傳播的風險？血液成分病毒滅活7/29/202279錢開誠 病毒性輸血風險的控制對策現行對策： 推行無償獻血 嚴格篩選血液 提倡科學用血 消除殘留風險的根本對策： 血液制品病毒滅活 開發(fā)血液代用品 7/29/202280錢開誠血液成分病毒滅活方法血漿病毒滅活濕熱法（巴士德法）有機溶劑/洗滌劑(Solvents/Detergents）亞甲蘭光化學法（MB-P）S-59光化學法核黃素光化學法紅細胞病毒滅活血卟啉、酞菁化合物、部化菁 酚噻嗪類化合物（MB、DMMB

31、） + 可見光照射FRALE S303+PH調節(jié)PEN110血小板病毒滅活硫堇+可見光照射（Thionine-I）8-甲氧補骨脂+UVA（8-MOP-UVA）S-59+UVA核黃素 7/29/202281錢開誠血液病毒滅活方法評價原則能有效滅活病毒 指示病毒：HIV、DHBV、Sindbis、VSV、脊髓灰質炎病毒 方法：細胞病變法、動物感染、PCR對血液成分活性及功能無明顯不良影響 血漿：凝血因子、血漿蛋白回收率、蛋白質免疫原性. 紅細胞：溶血、K+逸出、ATP、2,3-DPG、形態(tài)積分、體內回收率 血小板：HSR、形態(tài)積分、聚集率、CCI.對人體安全 急性毒性、慢性毒性、基因毒性 適用于單

32、袋血液成分處理7/29/202282錢開誠近年關注的血液病毒滅活方法亞甲蘭光化學法（MB-P）S-59光化學法核黃素光化學法FRALE S303+PH調節(jié)PEN1107/29/202283錢開誠亞甲蘭光化學病毒滅活機理 破壞病毒核酸 破壞病毒包膜7/29/202284錢開誠MB-P病毒滅活機理LIGHTMBMB7/29/202285錢開誠亞甲蘭的安全性亞甲蘭是國家藥典收錄的靜脈輸注藥物1000ml血漿含380mg亞甲蘭，僅是臨床常用成人輸注量的1/600 適應癥 MB常用劑量 給藥途徑高鐵血紅蛋白癥 50250mg/50kg 靜脈 甲狀腺染色 50250mg/50kg 靜脈 血漿病毒滅活 0.

33、38mg/1000ml 靜脈 7/29/202286錢開誠MB-P血漿病毒滅活的效果照射時間051030600.001.002.003.004.005.006.007.008.009.00logTCID5051060MB+熒光照射不同時間含VSV，Sindbis病毒血漿logTCID50變化SINDBISVSV7/29/202287錢開誠MB-P對HCV-RNA NS-5的作用7/29/202288錢開誠MB滅活后病毒殘留量(%)100 80 60 40 20 0滅活時間(分鐘) 未處理 5 30標本病毒滅活前后血漿HCV-RNA濃度病毒滅活動力學曲線7/29/202289錢開誠2.RNA病毒

34、-HCV的FQ-PCRPCR Amp/Cycle Chart7/29/202290錢開誠 MB-P對DHBV-DNA病毒的滅活效果方法: 受試樣品接種雛鴨，觀察感染情況 對照樣品:含不同滴度DHBV的人血漿 實驗樣品:經亞甲藍光化學處理的含不同滴度DHBV的人血漿 結果: 未經MB-P處理的含不同滴度DHBV的人血漿均感染雛鴨 經MB-P處理，可使血漿中DHBV的TcID50下降106- 107.7/29/202291錢開誠MB-P對CMV的滅活效果 未滅活CMV感染人胚肺細胞 滅活CMV未感染人胚肺細胞 7/29/202292錢開誠 MB-P對血漿凝血因子的影響05101530Fir回收率:

35、C回收率:C回收率707580859095100(%)照射時間MB+熒光照射對部分凝血因子的影響7/29/202293錢開誠MB-P處理對血漿蛋白免疫原性的影響7/29/202294錢開誠MB-P 血漿臨床輸注（1000,000單位）無不良輸注反應治療效果良好7/29/202295錢開誠MB-P血漿病毒滅活技術提要亞甲藍添加精度 10.1mol/L光照劑量范圍30,00038,000lxMB濾除材料疏水性材質和碳纖維吸附材質（保證血漿有效成分回收率）MB濾除率 85%滅菌方法 高壓蒸汽滅菌（無毒）病毒滅活有效性驗證7/29/202296錢開誠DNA or RNAof pathogenAmoto

36、salen(S-59)DockingPermanent CrosslinkingUVA IlluminationS-59光化學病原體滅活機理7/29/202297錢開誠S-59光化學病原體滅活技術特點適用于血小板和血漿病毒滅活、不適用于紅細胞病毒滅活尚能同時滅活多種細菌及T淋巴細胞 7/29/202298錢開誠S-59光化學病原體滅活技術的進展建立了S-59+UVA血小板和血漿病毒滅活方法實驗室及動物模型驗證了病毒滅活的有效性證實對血小板和血漿的體外質量指標及動物體內回收率無明顯不良影響期臨床試驗結果表明經S-59光化學處理的血小板和血漿具有良好的療效和安全性7/29/202299錢開誠核黃素

37、光化學病毒滅活機理多環(huán)平面結構的芳香族化合物,易穿透細胞膜和病毒包膜，插入病毒的核酸在接受了UVA或可見光提供的能量后,發(fā)生電子轉移,使鳥嘌呤堿基氧化并形成共價加成化合物，阻止核酸的轉錄、復制進一步的反應可使核酸骨架鏈斷裂,使病毒、細菌、 T淋巴細胞等病原體失活 7/29/2022100錢開誠核黃素光化學病毒滅活機理示意圖Illumination reaction breaks DNARiboflavin intercalates into DNANormal pathogen DNA7/29/2022101錢開誠核黃素光化學病毒滅活特點能滅活脂質包膜病毒和非脂質包膜病毒及多種細菌無殘留生物毒

38、性期望適用于血小板、血漿及紅細胞病毒滅活7/29/2022102錢開誠核黃素光化學病毒滅活進展概要實驗提示該方法病毒滅活效果良好，對血小板和紅細胞的功能、活力、形態(tài)及血漿有效組分無明顯不良影響能有效滅活T淋巴細胞，預期可用于預防PT-GVHDDVHD核黃素光化學血漿及血小板病原體滅活已獲準在歐洲使用 （2008、10 CE Mark ）核黃素光化學紅細胞原體滅活的研究尚處于實驗室階段7/29/2022103錢開誠血液病原體滅活研究的發(fā)展取向病毒滅活 病原體滅活 以病毒滅活為焦點、兼顧細菌、寄生蟲、T細胞等病原體的 滅活血液成分病原體滅活 全血病原體滅活 能有效滅活病原體；對紅細胞、血小板、血漿均無 明顯損傷