潔凈室空調(diào)滅菌方法

1、潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)&滅菌法和無菌保證1一、潔凈廠房概述藥片是特殊商品，除了必須嚴(yán)格控制藥片的成份以外，還必須控制微生物量。隨著科學(xué)技術(shù)的深化，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌等微生物在空氣中難以存活，它必須依附在塵埃上才能存活?？茖W(xué)家和工程師根據(jù)微生物生存特性，研制不同類型的過濾器，通過多道過濾，最終根據(jù)藥片生存要求，可以達(dá)到100,000級(jí)，10,000級(jí)和100級(jí)潔凈度要求。同時(shí)，通過冷凍除濕或氯化鈣轉(zhuǎn)輪除濕方法，達(dá)到生產(chǎn)車間舒適或低濕要求，溫度也可通過換熱器控制。2一、潔凈廠房藥品生產(chǎn)企業(yè)必須有整潔的生產(chǎn)環(huán)境。廠區(qū)的地面、路面及運(yùn)輸?shù)炔粦?yīng)對(duì)藥品的生產(chǎn)造成污染。生產(chǎn)、行政、生活和輔助區(qū)的總體布置應(yīng)合理，不得互相防礙

2、。 相鄰的廠房之間的生產(chǎn)操作不得相互防礙。 在遵守國家總體工業(yè)規(guī)劃的同時(shí)，選擇大氣含塵、含菌濃度低、無有害氣體，自然環(huán)境好的區(qū)域。平面布置合理，人流、物流分開，避免交叉污染。廠區(qū)綠化盡量多種草坪，少種花粉類的植物。31-1潔凈廠房設(shè)計(jì)藥廠總平面布置和工藝布局的總設(shè)計(jì)整潔的生產(chǎn)環(huán)境，人流物流分開，相互不受影響，不會(huì)造成交叉污染。潔凈廠房設(shè)計(jì)方法全封閉全空調(diào)，人流物流放開潔凈度通過緩沖逐級(jí)提高，達(dá)到無菌的要求。100級(jí)無菌室的設(shè)計(jì)，目前國際上一般采用比較經(jīng)濟(jì)的做法：通過緩沖達(dá)到10萬級(jí)，再通過緩沖達(dá)到1萬級(jí)，最后在1萬級(jí)房間局部加層流罩達(dá)到100級(jí)。41-2工藝布局按照生產(chǎn)工藝流程及所要求的空氣潔

3、凈等級(jí)進(jìn)行合的理布局，同一廠房內(nèi)的生產(chǎn)操作不能相互影響，不同潔凈度區(qū)域之間人員和物流出入，要設(shè)緩沖區(qū)，防止交叉污染。取樣室（可設(shè)在儲(chǔ)藏區(qū)）、稱量室、備料間空氣潔凈度與生產(chǎn)要求一 致。足夠大的中間儲(chǔ)藏室、設(shè)備清洗和儲(chǔ)存、衛(wèi)生設(shè)備清洗和儲(chǔ)存。生產(chǎn)區(qū)和包裝區(qū)分開，更衣室分開。不同潔凈度工作服分別清洗、整理。取樣室、中心稱量室，采用層流設(shè)計(jì)。51-3潔凈廠房建筑要求潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面應(yīng)平整光滑、無裂縫、接口嚴(yán)密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒。墻壁與地面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。潔凈室（區(qū)）內(nèi)各種管道、燈具、風(fēng)口以及其他公用設(shè)施，在設(shè)計(jì)和安裝時(shí)，應(yīng)考慮使用中避免出現(xiàn)

4、不易清潔的部位。與墻壁或天棚的連接部均應(yīng)密封。潔凈室（區(qū)）應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)要求提供足夠的照明。主要工作室的照度宜為300勒克斯，對(duì)照度有特殊要求的生產(chǎn)部位可設(shè)置局部照明。廠房應(yīng)有緊急照明設(shè)施。潔凈室（區(qū)）安裝的水池、地漏不得對(duì)藥品產(chǎn)生污染。100級(jí)潔凈 （區(qū)）不得設(shè)置地漏。61-4空調(diào)設(shè)計(jì)1-4-1空氣平衡和流向空氣從潔凈室流向次潔凈室。生產(chǎn)區(qū)對(duì)外保持正壓（10PA）活性物質(zhì)生產(chǎn)室保持負(fù)壓。 易產(chǎn)生粉塵的車間為負(fù)壓。開口工段為正壓。（或局部層流）潔凈設(shè)備間為負(fù)壓。潔凈房間對(duì)隔層和機(jī)房為正壓。生產(chǎn)車間內(nèi)辦公室保持正壓。71-4空調(diào)設(shè)計(jì)1-4-2氣體組織包裝車間、更衣室、走廊和浴室采用上送上回。生產(chǎn)車間

5、、灌裝車間、儲(chǔ)藏室采用上送下回。潔凈車間不得采用走廊回風(fēng)。 潔凈區(qū)無法采用上送下回時(shí)，可采用側(cè)送側(cè)回，但要注意氣流是否流過生產(chǎn)操作面。風(fēng)口設(shè)置時(shí)，注意氣體流能保護(hù)操作面。81-5環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-1環(huán)境控制確認(rèn)確認(rèn)100級(jí)無菌區(qū)，10,000級(jí)和100,000級(jí)潔凈區(qū)，輔助潔凈區(qū)室塵埃粒子的控制。安裝確認(rèn)環(huán)境控制區(qū)域相應(yīng)的被批準(zhǔn)的設(shè)計(jì)圖及有關(guān)流向圖（空氣流向、壓差、溫度、濕度、人流、物流）。系統(tǒng)描述和設(shè)計(jì)特征。有關(guān)文件有：DOP測試、完整性試驗(yàn)、環(huán)境參數(shù)文件 儀表校驗(yàn)文件、操作手冊(cè)和標(biāo)準(zhǔn)操作法。91-5環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證運(yùn)行確認(rèn)確認(rèn)整個(gè)環(huán)境調(diào)試、運(yùn)行時(shí)達(dá)到設(shè)計(jì)要求。搜集調(diào)試運(yùn)行時(shí)數(shù)據(jù)（溫度、相對(duì)濕

6、度、風(fēng)速、換氣次數(shù)、風(fēng)壓、風(fēng)量、空氣流向以及機(jī)電設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)參數(shù)）。測試總塵埃粒子和菌落數(shù)，證明系統(tǒng)運(yùn)行達(dá)到設(shè)計(jì)要求。主要性能測試：空氣平衡（空氣總風(fēng)量、新風(fēng)量、回風(fēng)量、空氣流向和空氣分配）；溫度、濕度和照度測試；空氣壓力和控制測試；懸浮粒子數(shù)測試；外界誘導(dǎo)空氣測試；粒子分散和過渡過程持續(xù)時(shí)間的測試微生物測試（懸浮菌和沉降菌）。101-5環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-2驗(yàn)證塵埃粒子測定浮游菌和沉降菌測定初次測試不合格處理驗(yàn)證時(shí)，總塵埃粒子或空氣菌落數(shù)測試結(jié)果超過范圍需在不合格后緊接在原取樣點(diǎn)重做二次，二次結(jié)果合格都放入表格內(nèi)，可認(rèn)為通過驗(yàn)證。重做菌落樣前房間需消毒11說明1塵埃粒子、浮游菌、沉淀菌在驗(yàn)證

7、區(qū)域滿足潔凈級(jí)別要求。2如果超出標(biāo)準(zhǔn)，每超出標(biāo)準(zhǔn)的取樣點(diǎn)必須重新取樣2次測試。每次重新測試的結(jié)果必須符合驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)。重新測試的樣品必須盡可能在不合格結(jié)果后立刻取樣。3重新測試取樣之前，必須清潔有菌落樣的區(qū)域。 124驗(yàn)證取樣條件4-1在取樣空氣系統(tǒng)驗(yàn)證區(qū)域必須連續(xù)運(yùn)行6小時(shí)以上，層流必須運(yùn)行30分鐘以上、在取空氣有菌量的區(qū)域，必須在取樣消毒。一旦驗(yàn)證開始，系統(tǒng)必須每天24小時(shí)，一周7天運(yùn)行。4-2 動(dòng)態(tài)是指灌裝機(jī)運(yùn)行（但無粉灌入），測試區(qū)內(nèi)有操作人員存在的情況下取樣。4-3 靜態(tài)是指在生產(chǎn)完成后，測試區(qū)無人的情況下，經(jīng)過15分鐘-20分鐘的凈化后，再對(duì)測試區(qū)進(jìn)行取樣。4-4記錄整個(gè)驗(yàn)證時(shí)期的溫度

8、、濕度和壓差的操作參數(shù)。4-5高效過濾器每年必須進(jìn)行完整性測試和記錄。 13E-5歐洲和美國的GMP對(duì)環(huán)境控制要求1概論歐洲共同體藥物控制局（MACThe Medicines Control Agency）環(huán)境控制要求，驗(yàn)證環(huán)境控制要達(dá)到A，B，C，D條件。美國標(biāo)準(zhǔn)209E中提出無菌100級(jí)，清潔10,000級(jí)和輔助100,000級(jí)的微粒和微生物控制要求。2A，B，C，D分級(jí)定義A級(jí)高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，即直接影響操作的區(qū)域。像隧道滅菌烘箱、無菌灌裝、瓶子開口處、高壓滅菌冷卻區(qū)等需用100級(jí)層流。直接影響產(chǎn)品質(zhì)量，稱A級(jí)。B級(jí) 間接影響無菌操作區(qū)，直接環(huán)繞A級(jí)區(qū)域的地方，像無菌灌裝房間、高壓滅菌冷卻房

9、間。C和D級(jí)進(jìn)入無菌生產(chǎn)區(qū)的過度性潔凈區(qū)。準(zhǔn)備間、更衣間和緩沖間。143歐洲潔凈級(jí)別要求 潔凈級(jí)別 總平均粒子數(shù) 浮游菌 沉淀菌歐洲（EU）209E美國 0.5M5MCFU/M3CFU/4 HoursA級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 25P/ft3或875P/M3011A級(jí)（動(dòng)態(tài)）100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3011B級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3022B級(jí)（動(dòng)態(tài)）10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或200P/M3555C級(jí)（靜態(tài)）10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或 200P/M3

10、2020C級(jí)（動(dòng)態(tài)）100,000級(jí) 100,000P/ft3或3,500,000P/M3580P/ft3或 20,00P/M3 5050D級(jí)（靜態(tài)）100,000級(jí) 100,000P/ft3或3,500,000P/M3580P/ft3或 20,00P/M3 10050 155驗(yàn)證取樣標(biāo)準(zhǔn)5-1空氣有菌量應(yīng)用生物空氣取樣器取樣，使用標(biāo)準(zhǔn)TSA培養(yǎng)基盤。5-2 所有工作水平面的空氣有菌量和顆粒取樣應(yīng)在工作活動(dòng)平面層流方向取樣（灌裝線瓶子開口處，及離地750-1000mm）。5-3 每個(gè)取樣點(diǎn)的工作水平取樣1ft3的空氣樣，測試大于等于0.5m的顆?？倲?shù)。計(jì)算每立方英尺的空氣顆粒平均數(shù)。5-4在A

11、，B，C和D級(jí)的每個(gè)房間的工作水平應(yīng)取樣5次，每次1立方英尺，測總顆粒數(shù)。16E-6日常生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控1無菌生產(chǎn)區(qū)環(huán)境監(jiān)控1-1生產(chǎn)潔凈級(jí)別劃分潔凈級(jí)別適應(yīng)室（區(qū)）EU209EA級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 無菌灌裝機(jī)、滅菌隧道、高壓無菌斧出料冷卻車A級(jí)（動(dòng)態(tài)）100級(jí) 同上B級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 無菌灌裝室（區(qū)）、高壓滅菌斧的冷卻室（區(qū)）B級(jí)（動(dòng)態(tài)）10,000級(jí) 同上C級(jí)（靜態(tài)）10,000級(jí) 進(jìn)高壓滅菌斧準(zhǔn)備間、清洗設(shè)備室、消毒、更衣、緩沖、走廊C級(jí)（動(dòng)態(tài)）100,000級(jí) 同上D級(jí)（靜態(tài)）100,000級(jí) 洗瓶、隧道、洗衣房、更衣室、第一緩沖室、進(jìn)洗室前緩沖室171-5環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-3歐美潔凈

12、級(jí)別比較潔凈級(jí)別 總平均粒子數(shù) 浮游菌 沉淀菌歐洲（EU）209E美國 0.5M5MCFU/M3CFU/4 HoursA級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 25P/ft3或875P/M3011A級(jí)（動(dòng)態(tài)）100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3011B級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3022B級(jí)（動(dòng)態(tài)）10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或200P/M355C級(jí)（靜態(tài)）10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或 200P/M3 2020C級(jí)（動(dòng)態(tài)）100,000級(jí) 100,000P/ft3或3,500,000P

13、/M3580P/ft3或 20,00P/M3 5050D級(jí)（靜態(tài)）100,000級(jí) 100,000P/ft3或3,500,000P/M3580P/ft3或 20,00P/M3 1005018滅菌法和無菌保證滅菌的定義：將物體上的所有微生物包括細(xì)菌芽孢全部殺死或除去的措施 。滅菌法是指殺死或除去所有微生物的方法，是滅菌藥劑生產(chǎn)的主要過程，對(duì)于注射劑尤為重要。微生物包括細(xì)菌、真菌、病毒等，凡有生命的地方都有微生物存在，微生物繁殖很快。細(xì)菌的芽胞具有較強(qiáng)的的抗熱力，不易殺死，因此滅菌效果，應(yīng)以殺死芽胞為標(biāo)準(zhǔn)。在藥劑中選擇滅菌方法，與微生物學(xué)上的要求不盡相同，不但要達(dá)到滅菌的目的，而且要保證藥物的穩(wěn)定

14、性。常見的滅菌法有熱壓滅菌、干熱滅菌、紫外線照射滅菌、過濾除菌和化學(xué)藥劑滅菌。 19F與Fo值在滅菌中的意義與作用微生物致死間曲線與D值 ：人們對(duì)微生物死亡的動(dòng)力學(xué)研究表明，其死亡速度屬一級(jí)過程，在一定溫度下符合下述方程式中N。為原始微生物數(shù)，Nt為殘存的微生物t時(shí)殘存的微生物。殘存數(shù)的對(duì)數(shù)時(shí)間作圖，得一條直線，直線的斜率K2.303，K為速度常數(shù)，單位為時(shí)間。20F與Fo值在滅菌中的意義與作用為了方便起見，引用D，并定義D為一定溫度下殺死被滅菌物品中微生物數(shù)的90(降低一個(gè)對(duì)數(shù)值 )所需時(shí)間，可描述為：21F與Fo值在滅菌中的意義與作用滅菌方法 微生物溫度 介質(zhì)或樣品 D值（min） 蒸汽滅

15、菌 嗜熱脂肪芽孢桿菌1055葡萄糖水溶液 87.8蒸汽滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1215葡萄糖水溶液2.4蒸汽滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌121注射用水3.0蒸汽滅菌梭狀芽孢桿菌1055葡萄糖水溶液1.3干熱滅菌枯草芽胞桿菌135紙16.6紅外線滅菌枯草芽胞桿菌160玻璃板18D值因微生物的種類、環(huán)境、滅菌溫度不同而各異,下表為不同滅菌法不同微生物的D值 ： 22F與Fo值在滅菌中的意義與作用Z值：一旦在不同溫度下對(duì)特定的微生物的在特定介質(zhì)或環(huán)境中求得D值后，就可用logD值對(duì)溫度作圖，在一定溫度范圍內(nèi)，logD與T呈直線關(guān)系，直線的斜率logD2logD1T2T1，由于此斜率為負(fù)值，為避免引入負(fù)數(shù)，而提出

16、Z值的概念，ZTT1logD2logD1，故定義Z值為降低一個(gè)logD值需的溫度數(shù)，也可以認(rèn)為Z值是降低微生物數(shù)90所需要的溫度數(shù)。23F與Fo值在滅菌中的意義與作用24F與Fo值在滅菌中的意義與作用不同溶液以嗜熱脂肪芽孢村菌測定Z值 溶液Z值5葡萄糖水溶液10.3注射用水8.45葡萄糖乳酸鹽林格氏溶液11.3PH7磷酸緩沖液7.625F與Fo值在滅菌中的意義與作用F值與Fo值數(shù)學(xué)表達(dá)或可表示如下： t是測量被滅菌物溫度的時(shí)間間隔， F為在一定溫度（T），給Z值所產(chǎn)生的滅菌效力與參比溫度（To）給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間（equivalent time）以分為單位。 26F與F

17、o值在滅菌中的意義與作用Fo值 ：為一定滅菌溫度（T）Z值為121，并假設(shè)特別耐濕熱的微生物指示劑（嗜熱脂肪芽胞桿菌）的Z值為10，則 顯然，F(xiàn)o值為一定滅菌溫度（T）Z值為10 所產(chǎn)生的滅菌效果力相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間（分）。也就是說Fo是將各種滅菌溫度使微生物的致死力轉(zhuǎn)換為滅菌物品完全暴露于121使微生物致死效力。 27滅菌法和無菌保證Fo值的計(jì)算對(duì)于驗(yàn)證滅菌效果極為有用，故用Fo來監(jiān)測滅菌效果肯有重要的意義。由于Fo是將不同滅菌溫度折算到相當(dāng)于121濕熱滅菌時(shí)的效力，故Fo值可作為滅菌過程的比較參數(shù)。當(dāng)產(chǎn)品以121濕熱滅菌時(shí)，滅菌器內(nèi)的溫度雖能迅速升到121，而被菌物品內(nèi)部則不然，通過由于包

18、裝材料性能及其他因素影響而使。升溫度各異，而Fo將隨著產(chǎn)品溫度（T）變化而呈指數(shù)的變化。故溫度即使很小的差別（如0.1-1）,將對(duì)Fo值產(chǎn)生顯著的影響。所以要求測定滅菌物品內(nèi)的實(shí)際溫度。 28滅菌法和無菌保證為了使Fo測定準(zhǔn)確，先應(yīng)選擇靈敏度高，重現(xiàn)性好，精密度為0.1的熱電偶，并對(duì)熱電偶進(jìn)行校驗(yàn)。滅菌時(shí)應(yīng)將熱電偶的探針置于被測物的內(nèi)部，經(jīng)滅菌器通向柜外的濕度記錄儀，有些滅菌記錄儀（digistrip recolder）附有Fo計(jì)算器，在滅菌過程中和滅菌后，自動(dòng)顯示Fo值。 另外，還應(yīng)考慮一些其他因素對(duì)Fo值的影響，有人對(duì)溶液粘度，容器充填量及容器在滅菌器內(nèi)的數(shù)量與排布進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)F

19、o均有影響，而以后者影響最大。故要注意滅菌器內(nèi)各層、四角、中間位置熱分布是否均勻，并進(jìn)行實(shí)際測定，作出合理排布，以便測得Fo值更可靠。 29滅菌方法無菌保證值（Sterility Assurance Level即SAL）：我國及歐美藥典都把無菌保證值（ SAL ）不得大于百萬分之一作為最終滅菌產(chǎn)品無菌保證的要求，即SAL106在Fo的計(jì)算時(shí)則使用以下定義： 無菌保證值（ SAL ）lg（微生物存活概率）6（F0 D污 lgN污）/ D污6F0D污（lgN污+6） 其中D污為污染菌的D121值，N污為滅菌前污染菌的數(shù)量。 在生產(chǎn)實(shí)踐中，耐熱性差的產(chǎn)品，在F0小于8時(shí)，只要強(qiáng)化工藝控制手段，仍能達(dá)

20、到無菌的標(biāo)準(zhǔn)，相反當(dāng)工藝失控時(shí)，即使F0大于8，也不一定能達(dá)到無菌要求。30滅菌法和無菌保證因產(chǎn)品熱穩(wěn)定性較差，所選滅菌程序?yàn)椋?0960min，所以在生產(chǎn)過程中應(yīng)嚴(yán)格對(duì)微生物進(jìn)行控制。首先在灌裝開始和結(jié)束各取樣10瓶，置于100下曝?zé)?0min，進(jìn)行需氧和厭氧條件培養(yǎng)，應(yīng)不長菌，證明產(chǎn)品中不存在耐熱孢子，可設(shè)定產(chǎn)品中污染菌的耐熱性（D121）不超過0.5。故使用D121為0.7的枯草芽孢桿菌做為生物指示劑，進(jìn)行生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)。以確認(rèn)產(chǎn)品的無菌保證值SAL達(dá)到6。 31滅菌方法根據(jù)公式 F0D污（lgN污+6）= DBi（lgNBi+1） 其中D污為污染菌的D121值，N污為滅菌前污染菌的數(shù)量，

21、 DBi為生物指示劑的D121值，NBi為生物指示劑的用量。F0值的計(jì)算：查得L為0.063，故F00.063603.78加上升溫及降溫階段，實(shí)際F0可達(dá)5以上。為保險(xiǎn)起見，取F04.9進(jìn)行計(jì)算污染菌數(shù)的控制計(jì)算：F0D污（lgN污+6） 將F04.9和D污0.3代入，得 lgN污（4.9-0.56）/0.53.75 N污5.6103生物指示劑用量計(jì)算：F0DBi（lgNBi+1） 將F04.9和DBi0.6代入，得lgNBi（4.9-0.7）/0.76 N污1.010632滅菌方法常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過濾除菌法?？筛鶕?jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種

22、方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，應(yīng)盡可能選用最終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采用最終滅菌法，可選用過濾除菌法或無菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無菌保證要求，只要可能，應(yīng)對(duì)非最終滅菌的產(chǎn)品作補(bǔ)充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。 33滅菌方法一、濕熱滅菌法 本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法 。該法滅菌能力強(qiáng)，為熱力滅菌中最有效、應(yīng)用最廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無菌衣、膠塞以及其它遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能完全殺滅細(xì)菌孢子，一般可作為不耐熱無菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。

23、34滅菌方法濕熱滅菌條件采用的程序多種，但必須保證物品滅菌后的SAL10-6。對(duì)熱穩(wěn)定的物品，可采用過度殺滅法，其SAL應(yīng)10-12。熱敏感產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0可低于8min，但應(yīng)在生產(chǎn)全過程中，對(duì)產(chǎn)品中污染的微生物嚴(yán)加監(jiān)控，并采取各種措施防止耐熱菌污染及降低微生物污染水平，確保被滅菌產(chǎn)品達(dá)到無菌保證要求。35滅菌方法濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)和生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn)；在空載條件下，確認(rèn)121時(shí)腔室各點(diǎn)的溫度差值應(yīng)1；使用插入實(shí)際物品或模擬物品內(nèi)的溫度探頭，確認(rèn)滅菌柜在不同裝載時(shí)，最冷點(diǎn)物品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（F0）達(dá)到設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)；用生物指示劑進(jìn)一步確認(rèn)在不同裝載時(shí)冷點(diǎn)處的滅菌物品達(dá)到無菌保證水平。本法常