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1、血培養(yǎng)的相關知識12021/7/20 星期二大綱血培養(yǎng)簡血培養(yǎng)在血流感染中的臨床實踐導管相關性血液感染正確采集血培養(yǎng)標本22021/7/20 星期二一、血培養(yǎng)概念:采集患者的血液或無菌體液標本,送至微生物實驗室培養(yǎng)檢測.檢測原本無菌的血液及體液中是否有細菌存在.如有細菌,則極有可能為致病的細菌.進一步進行鑒定/藥敏試驗.32021/7/20 星期二血培養(yǎng)檢測的意義根據(jù)培養(yǎng)結果:選擇正確的抗感染治療方案 調(diào)整經(jīng)驗治療方案 判斷感染性疾病的類型評價療效及預后正確采取感染控制措施是否隔離減少院內(nèi)感染監(jiān)測敏感事件 (如:生物恐怖) 血液及無菌體液是最有意義的病原學檢測標本。42021/7/20 星期二

2、A = Appropriate Therapy(正確治療)I = Inappropriate Therapy(不正確治療)Clin Infec Dis 24:584-602, 1997EMPIRIC 經(jīng)驗治療 AFTER Cx + 培養(yǎng)陽性后 AFTER AST 藥敏檢測后 ASSOC. MORT (%)死亡率 RELATIVE RISK危險性 A A A 10.5 1.0 I A A 13.3 1.27 A I A 20.0 1.91 A A I 20.0 1.91 I I A 25.8 2.46 A I I 28.6 2.73 I A I 0.0 (2) 0.05 I I I 33.3 3

3、.18 根據(jù)培養(yǎng)結果調(diào)整治療方案的療效分析52021/7/20 星期二完整的血培養(yǎng)過程醫(yī)師開出醫(yī)囑護理人員收集送檢樣本實驗室檢測、分離并鑒定導致血流感染的微生物三級報告:為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗結果62021/7/20 星期二國內(nèi)血培養(yǎng)現(xiàn)狀陽性檢出率低10%(國外約為15)血流中含菌量低血液中抗菌物質(zhì)抗生素的應用培養(yǎng)條件限制血培養(yǎng)的臨床實踐欠規(guī)范!原因何在?72021/7/20 星期二目前血培養(yǎng)的問題:采血時機不合適采血套數(shù)不夠采血量不足只做需氧培養(yǎng),不同時做厭氧培養(yǎng)采血前或采血時正在使用抗生素治療貼標簽時不應覆蓋瓶身上的原有標簽 正 確 錯 誤 82021/7/20 星期二二、血培養(yǎng)

4、在血流感染中的臨床實踐92021/7/20 星期二問題一:血培養(yǎng)的指征是什么?102021/7/20 星期二問題一:血培養(yǎng)的指征是什么?答 案當懷疑血流感染或膿毒癥時,應常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有:不明原因的發(fā)燒(38)或體溫過低(36)白細胞增多( 10,000/ul),粒細胞減少( 1,000ul)休克,寒顫,僵直嚴重的局部感染(腦膜炎,心內(nèi)膜炎,肺炎,腎盂腎炎,腹部術后感染,)心率異常加快低血壓或高血壓呼吸頻率加快112021/7/20 星期二問題二:懷疑血流感染,何時采血最佳?122021/7/20 星期二03060時間 (分鐘)體溫血培養(yǎng)采血時機細菌濃度132021/7/

5、20 星期二采集血培養(yǎng)樣本的最佳時間?答 案盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)應用抗菌藥物進行治療,應在下一次用藥之前采血培養(yǎng) 142021/7/20 星期二問題三:應該采幾份血液標本?152021/7/20 星期二基本概念成人“一套” 血培養(yǎng)應該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個,也叫“一份”注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套應從另一個穿刺點獲得。兒童一般只做需氧培養(yǎng),特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng) 162021/7/20 星期二采血套數(shù)Cockerill, CID 2004血培養(yǎng)套數(shù)與陽性檢出率()65809699172021/7/20 星期二采血套數(shù)Weinste

6、in et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548182021/7/20 星期二應該采幾份血液標本?答 案 每位患者采血最少2套,3套更好初發(fā)患者,絕不能只采1套標本 192021/7/20 星期二問題四:標本須間隔多久采集?202021/7/20 星期二標本須間隔多久采集?同時或短時間內(nèi)采集23套血培養(yǎng),因為體內(nèi)巨噬細胞吞噬系統(tǒng)會在1530min內(nèi)清除掉進入人體內(nèi)的細菌可疑急性心內(nèi)膜炎患者要

7、立即取血作血培養(yǎng),30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集,采集后立即進行抗菌藥的經(jīng)驗治療。如果24小時內(nèi)報告陰性,則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1h采集1套,連續(xù)采集3套標本。如果24小時內(nèi)報告陰性,則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。 212021/7/20 星期二問題五:應該采集多少血液?222021/7/20 星期二采血量(ml)與檢出率的關系 Overall血培養(yǎng)物每增加一毫升,真性菌血癥成年人微生物的檢出率增加3232021/7/20 星期二要采集多少血液?答 案采血量是影響靈敏度最關鍵因素成人一份標本2個培養(yǎng)瓶(需氧厭氧),每瓶810ml,共20ml;要求至少采兩份標本,

8、即40ml。兒童一般只需采集需氧瓶,在保證采集血量1總血量下,一般為13ml采血量不足時應優(yōu)先保證需氧瓶,因臨床90以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染 242021/7/20 星期二關于兒童血培養(yǎng):類似于成人,應在24小時內(nèi)采23次血培養(yǎng)不同于成人血培養(yǎng),由于厭氧菌感染極少發(fā)生在兒 童患者,因此建議只需采用需氧瓶。厭氧培養(yǎng)只考 慮針對特殊的高危群體,包括分娩過程中延遲破膜 的新生兒、母嬰垂直傳播的絨膜炎、慢性口腔或鼻 竇感染、蜂窩組織炎(特別是肛周及骶骨)、腹部 感染體征、咬傷、破傷風、膿毒性靜脈炎、接受類 固醇治療的兒童。 采血后必須洗去皮膚上殘留的碘類復合物。大于2 個月的兒童皮膚消毒同成

9、人,建議用采用洗必泰。 2 月以下的嬰兒建議僅采用70%異丙醇。252021/7/20 星期二兒童的采血量不能超過其總血容量的1%, 可按年齡或體重分別采足夠的血量不同部位采血有助于污染的判斷與陽性率的提升 1月: 0.5ml 1月36月:1.0ml 36月: 4.0ml陽性率:足量采血 5.2% (34/655) VS.不足量采血2.1% (14/648)關于兒童血培養(yǎng):Behrman:Nelson textbook of Pediatrics,17th ed.,2004262021/7/20 星期二兒童專用培養(yǎng)瓶: 領取時注意:粉紅色標簽 專門為兒童設計,采血量僅為1-3 ml 添加特殊促

10、進細菌生長因子,采用樹脂專利技術 低SPS濃度可提高兒童特征性病原菌(如耐瑟氏菌) 的檢出率樹脂顆粒能中和抗生素272021/7/20 星期二三、導管相關性血流感染282021/7/20 星期二導管相關性血流感染:篩選指征在ICU病房內(nèi)攜帶中心靜脈導管超過48h,出現(xiàn)原因不明的發(fā)燒或低血壓的患者,兒童出現(xiàn)低體溫者 292021/7/20 星期二導管相關性血流感染:送檢方法臨床醫(yī)生首先判斷導管是否仍有保留的必要性按導管保留與否分別采用不同的送檢方法 302021/7/20 星期二送檢方法:保留情況采取至少2套血培養(yǎng),其中至少1套來自外周靜脈,并做好標志,另外的1套則從導管中心或硅酮隔膜無菌采獲,

11、兩個來源的采血時間必須接近(5min),各自做好標記。312021/7/20 星期二送檢方法:不保留情況從獨立的外周靜脈無菌采集2套血培養(yǎng)無菌狀態(tài)下取出導管并剪下5cm導管尖端或近心端交付實驗室進行Maki半定量平板滾動培養(yǎng)或者定量培養(yǎng)(Following Vortex或超聲降解)322021/7/20 星期二護士們,您知道您有多重要!1、對醫(yī)生而言,血培養(yǎng)檢測能否指導其診斷及治療。2、微生物實驗室能否成功地得到正確的標本。3、患者能否有機會調(diào)整用藥,正確治療。332021/7/20 星期二四、血培養(yǎng)的采集:無菌操作血培養(yǎng)對無菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它標本要高。所以要最先采集血培

12、養(yǎng)標本。污染率的指標是 3% (100份標本里只能有不到3個標本出現(xiàn)污染。)342021/7/20 星期二再談洗手每次采集血液標本前一定要洗手.使用3-5ml抗菌皂液保證所有手部皮膚接觸皂液的時間超過15秒雙手在流水下有力的搓洗至少10秒鐘注意指尖及指甲內(nèi)側不要遺忘拇指紙巾干手并勿用手直接關閉水籠頭。你的手真得洗干凈了嗎?352021/7/20 星期二362021/7/20 星期二消毒液:要保質(zhì)還要保量 消毒液的種類繁多,我院采用安而碘II型皮膚消毒劑及75乙醇進行血培養(yǎng)的消毒。372021/7/20 星期二細菌是干死的,不是淹死的皮膚消毒程序:取無菌棉簽或棉球沾取安爾碘型皮膚消毒劑原液由內(nèi)向

13、外劃圈,均勻涂擦消毒區(qū)域二遍,消毒面積不小于5cm5cm.自然干燥后再行穿刺采血。如沒有佩戴無菌手套,不允許按壓消毒后的靜脈。 (因含洗必泰,2月的嬰兒不建議采用該消毒劑) 382021/7/20 星期二培養(yǎng)瓶的消毒程序:去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒。自然待干。將標本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)。5. 顛倒混勻標本與肉湯,以避免血液凝集。細菌是干死的,不是淹死的392021/7/20 星期二使用蝶翼針采血1 皮膚消毒2 培養(yǎng)瓶消毒3 標注采血量4 準備采血針5 靜脈穿刺6 負壓采血采血錄像402021/7/20 星期二關于采血的一些問題:1、血培養(yǎng)采血建議從外周靜脈采,不建議采

14、動脈血,為什么? 對檢出結果無明顯差異,但動脈穿刺危險性較大2、常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導管或靜脈留置裝置取血,為什么? 污染菌或定植菌的可能性較大,除非懷疑CRBSI3、如果需要從導管處取血,初段血或?qū)Ч軆?nèi)的補液是否需要棄去?為什么? 不能棄去,以便于判斷污染菌、定植菌或病原菌4、如果用注射器采血,采好后注入血培養(yǎng)瓶之前是否需要更換針頭?為什么? 無需更換,對提升陽性率無統(tǒng)計差異,增加了針刺傷的幾率412021/7/20 星期二注意事項1、成人抽雙瓶的條碼為:血(骨髓)培養(yǎng)(住院)、血培養(yǎng)(導管內(nèi) 住院)、血培養(yǎng)(左側外周 住院)、血培養(yǎng)(右側外周 住院),收費均為200元。 (一瓶100)2、

15、同一條碼打印2份,分別貼于厭氧瓶和需氧瓶上。不要用紙膠布或其他東西黏貼血培養(yǎng)瓶。3、條碼千萬不要覆蓋瓶子自身的條碼。4、瓶口不需要用棉簽黏貼。5、當血量較少時先注入需氧瓶,后注入?yún)捬跗?。血量足夠則反之。422021/7/20 星期二常用的血培養(yǎng)瓶采集標本前:于室溫保存,切勿冷凍。如冷藏需恢復至室溫使用。采集標本后:盡快送微生物室,如無法及時送檢,應置于室溫,不能置 于冰箱或溫箱,以免影響檢出。432021/7/20 星期二提問與回答培養(yǎng)瓶未使用時,是否需要冷藏或冷凍?答案:不需冷藏,更不能冷凍。保存在1525的室溫即可,溫度過低會導致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。加入標本后的培養(yǎng)瓶未能及時送到檢

16、驗科,是否需要冷藏或放入35 的溫箱 ?答案:保存在室溫即可,不能冷藏也不能放入35 的溫箱 。 過夜不會對檢測造成影響,但仍需盡快送檢。冷藏可能導致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。溫箱會導致細菌進入生長對數(shù)期,從而錯過檢測的最佳時期。442021/7/20 星期二 提問與回答:兩套血培養(yǎng)可否從一個靜脈穿刺點一次采集?答案:不可以,第二套需從第二個穿刺點采集,這樣能幫助判斷污染?;颊哽o脈中插有導管,可否直接從導管采血 ?答案:不可以,常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導管或靜脈留置裝置中采集,檢出污染或定植菌的可能性較大。除非懷疑導管相關性血流感染,請參照導管相關性血流感染的采血方法。452021/7/20 星

17、期二提問與回答:標簽是否可用隨意張貼于培養(yǎng)瓶上?答案:標簽應豎貼于瓶身上,同時不得遮蓋瓶身原有標簽,以免影響掃描。如用注射器采血后,是否需要更換針頭再向培養(yǎng)瓶內(nèi)注入標本?答案:不需要,對檢出率無提升,會增加針刺傷的幾率。但采集第二套血培養(yǎng)需更換針頭進行穿刺。 正 確 錯 誤 462021/7/20 星期二 提問與回答:何時采集血培養(yǎng)標本最佳?答案:寒戰(zhàn)后或發(fā)熱初期時,采用抗生素治療前或下一次用藥前。懷疑血流感染,一般應采集幾套血培養(yǎng)?答案:成人應一次采集23套血培養(yǎng)。兒童只需采集需氧培養(yǎng)。472021/7/20 星期二 提問與回答:采集血培養(yǎng)的間隔時間是多少?答案:同時或短時間內(nèi)采集23份血培養(yǎng),因為體內(nèi)巨細胞吞噬系統(tǒng)會在1530min內(nèi)清除掉進入人體內(nèi)的細菌。每套血培養(yǎng)的采血量為多少?答案:成人一份標本使用2個培養(yǎng)瓶(需氧厭氧),每瓶810ml,共20ml;要求至少采兩份標本,即40ml。兒童一般只需采集需氧瓶,在保證采集血量1總血量下,一般為

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