消毒和滅菌教學(xué)課件

1、第三章 消毒與滅菌 1.滅菌（sterilization） 指殺滅物體中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。 2.消毒（disinfection） 指殺滅物體中的病原微生物的方法。消毒只要求達(dá)到消除傳染性的目的，而對非病原微生物及其芽胞、孢子并不嚴(yán)格要求全部殺死。 3.防腐（antisepsis） 指阻止或抑制微生物生長繁殖的方法。 4.無菌（asepsis）指沒有活的微生物的狀態(tài)。采取防止或杜絕任何微生物進(jìn)入動物機(jī)體或其它物體的方法，稱為無菌法。以無菌法進(jìn)行的操作稱為無菌操作。 物理因素對微生物的影響 物理因素溫 度輻射干 燥超聲波微 波濾過除菌(一)低溫 大多數(shù)微生物對低

2、溫具有很強(qiáng)的抵抗力 。低溫下，代謝活動降低到最低水平，生長繁殖停止，但仍可長時(shí)間保持活力。 意義：保存菌種、毒種、疫苗等 一、溫 度 熱力滅菌法：干熱滅菌 和濕熱滅菌兩種方法。 二者比較：在同一溫度下，后者效力比前者為大。 原因：（1）濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固； （2）濕熱的穿透力比干熱大； （3）濕熱的蒸汽有潛熱存在。 (二)高溫：高溫對微生物具有明顯的致死作用. (1)火焰滅菌法 :火焰直接燒灼，如接種環(huán) 。 1.干熱滅菌法 (2)熱空氣滅菌法 干熱滅菌器適用于高溫下不損壞、不變質(zhì)的物品,如玻璃器皿、瓷器等的滅菌。 滅菌溫度需160維持2 h 。 (1)煮沸滅菌 : 煮沸1020 min

3、可殺死所有細(xì)菌的繁殖 體，芽胞常需煮沸12 h才被殺死 。用于飲水、一般器械 如刀剪的消毒。 (2)巴氏消毒法 :以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物，而又不致嚴(yán)重?fù)p害其營養(yǎng)成分和風(fēng)味的消毒方法 . 1.低溫維持巴氏消毒法 636530min 2.高溫瞬時(shí)巴氏消毒法 717215s 3.超高溫巴氏消毒法 13212s 2.濕熱滅菌法 （3）流通蒸汽滅菌法 ：是一種常壓蒸汽消毒法，細(xì)菌繁殖體15-30分鐘可殺滅，但芽孢不全部被殺滅。 (4) 間歇滅菌法 （反復(fù)多次流通蒸汽） 100維持30min 溫箱過夜 100維持30min 溫箱過夜 100維持30min 溫箱過夜 100維持30mi

4、n。 此法常用于一些不耐高溫的培養(yǎng)基，如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、糖培養(yǎng)基的滅菌 。 高壓蒸汽滅菌器：15磅/平方英寸，121.3溫度下維持1520min 。 應(yīng)用此法滅菌，一定要充分排除滅菌器內(nèi)原有的冷空氣。用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、耐熱藥品、手術(shù)敷料等。 手提式高壓蒸汽滅菌器（5）高壓蒸汽滅菌法輻射：能量通過空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。 按輻射對微生物的滅活作用分：1.非電離輻射:可見光、日光、紫外線2.電離輻射 :、射線以及高能質(zhì)子、 中子等 二、輻 射 (一)非電離輻射 1.可見光:指在紅外線和紫外線之間的肉眼可見的光線，其波長400800nm。可見光線對微生物一般無多大影響，但長時(shí)間作用也

5、能妨礙微生物的新陳代謝與繁殖。 光感作用 :指可見光具有微弱的殺菌作用，若將某些染料如結(jié)晶紫、美藍(lán)、汞溴紅、伊紅、沙黃等加到培養(yǎng)基或涂在外傷表面，能增強(qiáng)可見光的殺菌作用 。2.陽光:直射日光有強(qiáng)烈的殺菌作用，是天然的殺菌因素。許多微生物在直射日光的照射下，半小時(shí)到數(shù)小時(shí)即可死亡。芽胞對日光照射的抵抗力比繁殖體大得多，往往需經(jīng)20h才死亡。日光的殺菌效力因地、因時(shí)及微生物所處環(huán)境不同而異 。 波長200-300nm部分有殺菌作用。實(shí)驗(yàn)室常使用的紫外線殺菌燈紫外線波長為253.7nm。常用于微生物實(shí)驗(yàn)室、無菌室、手術(shù)室等的空氣消毒，或用于不能用高溫或化學(xué)藥品消毒的物品的表面消毒。還可用于誘變育種。

6、 3.紫外線殺菌機(jī)理：（1）損害DNA構(gòu)型，影響DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄（2） O2 O3 O 殺菌 (1) 射線:電離輻射強(qiáng) ， 穿透力差（ 缺乏穿透力，不實(shí)用） (2) 射線:電離輻射強(qiáng) ， 穿透力強(qiáng) (3) 射線:電離輻射弱， 穿透力強(qiáng)（4）X射線：殺菌力不如紫外線，穿透力強(qiáng) 用途：忌熱物品的滅菌消毒、食品保藏和育種等方面 殺菌機(jī)制：射線使水電離為H和OH，這些游離基是強(qiáng)烈的還原劑和氧化劑，可直接作用于細(xì)菌本身 。(二）電離輻射 微生物在干燥的環(huán)境中失去大量水分，新陳代謝便會發(fā)生障礙，甚至引起菌體蛋白質(zhì)變性和由于鹽類濃度的增高而逐漸導(dǎo)致死亡。不同種類的微生物對干燥的抵抗力差異很大。主要用于菌種和食品的保藏。 三、干 燥頻率在20 000200 000 Hz的聲波稱為超聲波 。主要用于裂解細(xì)胞，提取細(xì)胞組分。四、超聲波 五、微 波 從幾百兆赫至幾十萬兆赫頻率的無線電波稱為微波。所需時(shí)間短、加熱均勻。主要用于陶瓷、耐熱玻璃容器和塑料器皿，金屬器皿忌用。 濾過除菌 :通過機(jī)械阻留作用將液體或空氣中的細(xì)菌等微生物除去的方法。但濾過除菌常不能除