免疫實(shí)驗課：間接凝集抑制反應(yīng)_第1頁
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文檔簡介

1、間接凝集抑制反應(yīng)間接凝集反應(yīng)的分類1 （正向）間接凝集反應(yīng) 抗原致敏載體檢測抗體2 反向間接凝集反應(yīng) 抗體致敏載體檢測抗原3 間接凝集抑制試驗 抗原(抗體)致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體（抗原），檢測標(biāo)本中是否存在與致敏抗原（抗體）相同的抗原（ 抗體）4 協(xié)同凝集反應(yīng) 載體為金葡菌 A蛋白（反向） 實(shí)驗原理將含有可溶性抗原的待檢樣品先與已知抗體混合，充分作用后再加入抗原致敏的膠乳顆粒，因抗體已與樣品中的可溶性抗原結(jié)合，膠乳顆粒不再出現(xiàn)可見的凝集現(xiàn)象，稱膠乳凝集抑制試驗。本實(shí)驗以檢測絨毛膜促性腺激素(HCG)的免疫妊娠試驗為例。試劑和器材1.樣品待檢尿液。2.膠乳抗原(HCG致敏的膠乳顆粒)、診斷血

2、清(用HCG免疫動物得到的抗血清)、正常尿(或生理鹽水)、孕婦尿。3.反應(yīng)板、滴管、牙簽等。2類風(fēng)濕因子陽性血清和陰性血清。3加樣槍，黑色方格反應(yīng)板，牙簽等。操作方法1.在反應(yīng)板上選擇三個凹孔，中間凹孔加待檢尿液1滴(約50l)，左側(cè)凹孔加孕婦尿1滴(約50l)，右側(cè)凹孔加正常尿(或生理鹽水)1滴(約50l)，然后向三個凹孔內(nèi)各滴加診斷血清1滴(約50l)，分別用牙簽混勻，在實(shí)驗臺上輕輕搖動1min。2.上述三個凹孔內(nèi)各滴加膠乳抗原1滴(約50l)，混勻，再輕輕搖動23min，觀察結(jié)果。結(jié)果判斷陰性對照(右側(cè)凹孔)應(yīng)出現(xiàn)明顯的均勻一致的凝集顆粒，液體澄清，否則實(shí)驗無效；陽性對照(左側(cè)凹孔)應(yīng)呈均勻一致的膠乳狀；待檢樣品(中間凹孔)如出現(xiàn)明顯凝集為HCG陰性，如不出現(xiàn)凝集，呈均勻膠乳狀為HCG陽性。注意事項1.待檢尿液以晨尿為好，若不及時檢測，應(yīng)將樣品置4 。C冰箱保存；若超過24h才測定應(yīng)置-20oC保存。用前先置37 oC水浴融化并充分混勻。樣品中若含血細(xì)胞或較多蛋白質(zhì)和細(xì)菌污染則不宜使用。2.試劑應(yīng)4 。C保存，切勿凍存。使用前使試劑接近室溫并搖勻。3.試驗同時設(shè)立陽性、陰性對照，以排除非特異性凝集。4.所加液滴應(yīng)大小一致。5.結(jié)果應(yīng)在強(qiáng)光下觀察，觀察時應(yīng)置黑色背景下或稍傾斜反應(yīng)板。 丁香園ht

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