高中生物選修一粗提取和鑒定

1、關(guān)于高中生物選修一粗提取與鑒定第一張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、基礎(chǔ)知識(shí)：提取DNA的方法（1） DNA和蛋白質(zhì)等成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；（0.14mol/L的NaCl溶液,DNA溶解度最低，析出） 選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而雜質(zhì)沉淀，或者相反；1、DNA的溶解性（2） DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。第二張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、基礎(chǔ)知識(shí)：提取DNA的方法（1）蛋白酶：水解蛋白質(zhì)，不能水解DNA。（2）高溫：大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080的高溫，而DNA在80以上才

2、會(huì)變性。（3）洗滌劑：瓦解細(xì)胞膜（主要破壞膜中的蛋白質(zhì)分子）， 但對(duì)DNA沒(méi)影響。2、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性第三張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（1）二苯胺：沸水浴條件下，DNA遇二苯胺沸水浴5min會(huì)染成藍(lán)色（2）甲基綠：將DNA染成綠色3、DNA鑒定原理第四張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則上只要含DNA的生物材料都可以，但是選取DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功率更大。（一）實(shí)驗(yàn)材料的選取 本實(shí)驗(yàn)材料：新鮮雞血細(xì)胞液和雞全血相比，雞血細(xì)胞液中DNA相對(duì)含量高，保證實(shí)驗(yàn)?zāi)芴崛〉阶銐蛄康腄NA。第五張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）破

3、碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液 1.動(dòng)物細(xì)胞：加蒸餾水使細(xì)胞吸水脹破，玻璃棒攪拌可加速細(xì)胞膜和核膜破裂，過(guò)濾后收集濾液 2.植物細(xì)胞：切碎后加洗滌劑和食鹽，然后充分?jǐn)嚢?、研磨，過(guò)濾后收集濾液；（P55問(wèn)題）第六張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（三）去除濾液中的雜質(zhì) 方案3：控制溫度在6075 方案2：濾液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶） 方案1：控制NaCl溶液的濃度，反復(fù)地 溶解與析出DNA，去除雜質(zhì)第七張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 前面處理后的溶液過(guò)濾，加與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)95)，靜置23min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物 粗提取DNA 用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水1、DNA的析出（進(jìn)一步提純DNA）（四）DNA的析出與鑒定第八張，PPT共十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2. DNA的鑒定 向兩支試管中分別加入 2mol/L NaCl 溶液5ml 其中一支試管中加DNA絲狀物 各加入二苯胺試劑4ml 混勻后，沸水浴中加熱5min 待冷卻后，比較兩只試管中溶液的顏色變化 觀察現(xiàn)象：溶解絲狀物的溶液變?yōu)樗{(lán)色（四）