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1、水中大腸菌群的測(cè)定10食安實(shí)驗(yàn)組成員:吳軍,馮妙,熊婷,戴婉蓉。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?總大腸菌群可用多管發(fā)酵法或?yàn)V膜法檢驗(yàn)。多管發(fā)酵法的原理是根據(jù)大腸菌群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,以及具備革蘭氏染色陰性,無(wú)芽孢,呈桿狀等有關(guān)特性,通過三個(gè)步驟進(jìn)行檢驗(yàn)求得水樣中的總大腸菌群數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果以最可能數(shù)表示。 實(shí)驗(yàn)原理:目的:學(xué)習(xí)檢測(cè)水中大腸菌群的方法,了解大腸菌群數(shù)量與水質(zhì)狀況的關(guān)系。 內(nèi)容:用多管發(fā)酵法檢測(cè)大腸菌群。2實(shí)驗(yàn)材料和用具培養(yǎng)基:乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基,乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,三倍濃乳糖培養(yǎng)液,伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基。儀器及用具:發(fā)酵用試管,杜氏小管,培養(yǎng)皿,刻度吸管或移液管,接種環(huán),酒精燈。3步驟流程示意
2、:采集水樣多管發(fā)酵法檢測(cè)大腸桿菌菌群1,a.取五只發(fā)酵管(裝有3倍濃乳糖蛋白胨培養(yǎng)基) 分別加入水樣10ml 貼標(biāo)簽搖勻 37攝氏度恒溫箱中培養(yǎng)24h。b.另取五只初發(fā)酵管(裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)基) 分別加入水樣1ml 貼標(biāo)簽搖勻 37攝氏度恒溫箱中培養(yǎng)24h.C.另取五只初發(fā)酵管分別加入水樣1ml 9(按1:10稀釋) 貼標(biāo)簽搖勻 37攝氏度恒溫箱中培養(yǎng)24h.42,取出培養(yǎng)后的發(fā)酵管發(fā)酵液變?yōu)辄S色記錄為產(chǎn)酸杜氏小管內(nèi)有氣泡記錄為產(chǎn)氣劃線接種(產(chǎn)酸、產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸的發(fā)酵管分別接種于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基) 37攝氏度恒溫箱中培養(yǎng)18-24h. 挑選菌落取部分涂片革蘭氏染色觀察。3.鏡檢選出革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌接種于復(fù)發(fā)酵管中(裝有倒置杜氏小管的乳糖乳糖蛋白胨培養(yǎng)液) 37攝氏度恒溫箱中培養(yǎng)24h 記錄(產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽(yáng)性管)5注意事項(xiàng)1.認(rèn)真配制不同。類型的培養(yǎng)基2.檢
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