動物細(xì)胞培養(yǎng)

1、關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)第一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段動物細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)動物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體 核移植納歸題問第二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月2.2.1動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)第三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月一、動物細(xì)胞培養(yǎng)為什么要進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)？材料一：在治療燒傷病人時，通常是取病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植。對于大面積燒傷的病人，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，且會產(chǎn)生排斥反應(yīng)。怎樣才能獲得大量的自體健康皮膚呢？材料二：許多動物細(xì)胞能分泌蛋白質(zhì)，如抗體等。但是，單個細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)很少，怎樣才能獲得大量的分泌蛋白呢

2、？境情設(shè)創(chuàng)第四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月、什么是動物細(xì)胞培養(yǎng)？、具體培養(yǎng)過程（1）為什么要把動物組織分散成單個細(xì)胞？ 完成44頁兩個問號。（2）什么叫細(xì)胞貼壁？什么叫接觸抑制？（3）什么叫原代培養(yǎng)？什么叫傳代培養(yǎng)？（4）總結(jié)出具體的培養(yǎng)過程？習(xí)學(xué)主自任務(wù)：閱讀教材第44-46頁第一段時間：4分鐘問題：第五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后,放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。1、概念：一、動物細(xì)胞培養(yǎng)納歸題問第六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月2、培養(yǎng)過程：納歸題問為什么要把動物組織分散成單個細(xì)胞？

3、怎樣分散成單個細(xì)胞的？完成44頁兩個問號成塊的組織中細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起，彼此限制了細(xì)胞的生長和增殖。另外，單個細(xì)胞所需的營養(yǎng)容易供應(yīng)，其代謝廢物容易排出。所以分散成單個細(xì)胞后培養(yǎng)。第七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.28.4。多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.27.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時的消化。 44頁兩個小問題的答案 胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外，長時間的作用

4、也會消化細(xì)胞膜蛋白，對細(xì)胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。 納歸題問第八張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月3、幾個重要的概念細(xì)胞貼壁懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上(單層)。要求：培養(yǎng)瓶（皿）內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。納歸題問第九張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月接觸抑制當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。納歸題問第十張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理讓細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為傳代培養(yǎng)。（即從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)過程。）通常將動物

5、組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。納歸題問第十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 細(xì)胞株 傳到40-50代后有部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化，具有癌細(xì)胞的特點，失去接觸抑制，可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去。 從原代培養(yǎng)細(xì)胞群中篩選出進(jìn)行傳代培養(yǎng)的細(xì)胞，能傳到40-50代，其遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化。 細(xì)胞系納歸題問注意目前使用的細(xì)胞通常為10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。第十二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物胚胎或幼齡動物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個細(xì)胞加培養(yǎng)液細(xì)胞 懸浮液10代細(xì)胞部分細(xì)胞“癌變”，無限傳代動物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動物體50代細(xì)胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞

6、貼壁剝離、分瓶細(xì)胞培養(yǎng)過程：分化程度低，增殖能力強(qiáng)去掉組織間蛋白第十三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞 懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系細(xì)胞貼壁生長隨細(xì)胞增多，出現(xiàn)接觸抑制部分細(xì)胞癌變，失去接觸抑制，無限傳代納歸題問第十四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物細(xì)胞培養(yǎng)都需要滿足什么條件？習(xí)學(xué)主自任務(wù)：閱讀教材第46頁黑體字后面時間：4分鐘問題：第十五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月4、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件無菌、無毒的環(huán)境（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清、微量元素等）溫度和PH溫度36.

7、5+0.5度，pH 7.27.4氣體環(huán)境O2和CO2（95%空氣和5%CO2）離體培養(yǎng)的細(xì)胞對微生物和有毒物質(zhì)沒有防御能力。保證細(xì)胞順利的生長增殖納歸題問第十六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月CO2培養(yǎng)箱 哺乳動物離體細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)細(xì)胞一樣,需要在恒足溫度下才能生存,溫差變化一般不應(yīng)超過0.5度，因此培養(yǎng)箱對溫度應(yīng)具有較高靈敏度。 CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點在于能恒定地供應(yīng)一定量的CO2,一般5%即可維持培養(yǎng)液PH值穩(wěn)定。培養(yǎng)基的類型天然培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基：營養(yǎng)價值高，成分復(fù)雜。成分明確，便于控制試驗條件。納歸題問第十七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月5、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用（1

8、）生產(chǎn)蛋白生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；（4）用于檢測有毒物質(zhì)；（2）獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮；（3）作為基因工程的受體細(xì)胞。（5）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)；納歸題問第十八張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月6、植物細(xì)胞和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的獲得細(xì)胞或 細(xì)胞分泌蛋白細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體快速繁殖、培育無病毒植株等葡萄糖、動物血清促生長因子蔗糖、植物激素液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基細(xì)胞增殖第十九張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)小堂課第二十張，PP

9、T共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物細(xì)胞培養(yǎng)特點原理概念：貼壁生長，接觸抑制動物組織胰蛋白酶剪碎單個細(xì)胞加培養(yǎng)液細(xì)胞懸液分瓶培養(yǎng)10代細(xì)胞50代細(xì)胞不死細(xì)胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系適宜條件培養(yǎng)條件無菌無毒，營養(yǎng)，溫度、PH，氣體環(huán)境過程細(xì)胞增殖第二十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月1、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是（ ） A細(xì)胞系 B細(xì)胞株 C原代細(xì)胞 D傳代細(xì)胞2、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是（）A.動物細(xì)胞融合 B.單克隆抗體 C.胚胎移植 D.動物細(xì)胞培養(yǎng)AD習(xí)練饋反第二十二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月3、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞（ ）A.容易產(chǎn)生各種變異 B.具有更強(qiáng)的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力強(qiáng)D習(xí)練饋反4.動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)