中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室SPF級環(huán)境設施工作條例

1、中山大學生命科學學院SPF級環(huán)境設施工作條例中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室編寫第一章總則第一條：為了加強 SPF級動物房的管理工作，保證實驗質(zhì)量，故制定本條例。第二條：本條例適用范圍為本設施及其工作人員，包括需要在動物房內(nèi)進行實驗的實驗人員。第三條：進入動物實驗設施的實驗人員和工作人員，必須嚴格遵守本條例。第二章動物房進出工作條例第一節(jié)人員進出 SPF級和普通級動物房工作條例第四條：進出 SPF級動物設施的實驗室工作人員應嚴格遵守流動走向，按箭頭所指方向行進，不可逆反，詳見附圖。附圖SPF級人員進出動物房消毒管理運行路線圖第五條：詳細操作程序：、人進入一更室應脫去外衣，將個人物品放入

2、自己的衣袋中，在鞋柜前換專用拖鞋。二、在淋浴間進行淋浴清潔。三、進入二更室，然后穿戴隔離服、帽和口罩并套上鞋套。風淋3min 后打開清潔走廊向的門，進入清潔走廊。四、人進入清潔走廊后，通常先進入潔凈貯藏間，取籠器具、飼料、墊料等回到清潔走廊，再進入動物飼養(yǎng)室和實驗室。在動物飼養(yǎng)室， 實施飼喂與清潔操作后或在實驗室完成實驗工作后， 打開通向污染走廊的門，廢棄物、換下的籠器具推入污染走廊，關好通向污染走廊的門。人可打開指向清潔走廊的門回到清潔走廊， 然后再進入另一飼養(yǎng)室， 在每一室都應注意隨手關門。七、工作完后， 人從飼養(yǎng)室或?qū)嶒炇覐拇螡崈糇呃?，進入污染走廊，收集推入污染走廊的廢棄物，籠器具推入洗

3、消間，回到一更室，脫下工作農(nóng)、帽、鞋和口罩，放入洗衣筐，換上自己的衣服和第一次換鞋時穿著的鞋離開一更室。八、在換鞋柜前，換上自己的鞋，在一更室外更衣柜換上自己的外衣，取回自己的用品，離開動物房。第二節(jié)物品進出動物房工作條例第六條：動物房的物品包括籠具、工作服、飼料、墊料、飲水和動物房的廢棄物。飼料和飲水不在本節(jié)內(nèi)，另辟一節(jié)。第七條： 實驗工作人員務必使進出動物房的物品嚴格遵守流動走向及消毒、 滅菌程序， 防止發(fā)生污染?；\具應按箭頭所指方向行進，不可逆反（附圖 -2 ） 。籠具附圖物品進出動物房消毒、滅菌管理路線圖第八條：籠具進出動物房詳細操作程序：一、飼養(yǎng)人員將籠具送入洗消間，關好通向洗消間的

4、門。二、籠器具應用水沖洗，再加洗滌劑刷洗，然后用水沖洗干凈。三、籠器具經(jīng)消毒渡槽的消毒與傳遞：消毒水池位于洗消間與動物室之間，消毒用水首選1:200的次氯酸鈉，消毒操作由2人合作進行，一人于消毒間（屏障外），不斷地將洗凈的籠器具通過傳遞渡槽傳入動物室（屏障內(nèi)），另一人于動物室（屏障內(nèi)）將傳入的鼠盒口朝下堆放好。四、籠器具的高壓滅菌與傳遞：本實驗室選用雙門高壓消毒滅菌柜，一扇高壓滅菌柜門打開時，另一扇門必須關閉。打開通向洗滌消毒間的一扇門，放入籠器具，關上門，并旋緊安全螺桿，選擇與調(diào)節(jié)控制按鈕，開啟滅菌器，釋放高壓蒸氣，壓力達到1.2kg/cm 2保持20min , 動物房（屏障內(nèi)）的操作者，在

5、開啟內(nèi)側一扇門前，先抽去滅菌器內(nèi)的濕熱蒸氣，旋動安全螺桿，打開內(nèi)側門，取出滅菌的籠器具。五、籠器具經(jīng)傳遞窗的消毒與傳遞：小而少量的籠器具宜采用本法傳遞。滅菌傳遞窗應具有1h后，開啟通向動物室（屏雙扇窗，一扇門打開時，另一扇窗必須關閉。 打開通向洗滌消毒間的一扇窗，放入鼠盒并口 朝下堆放好，關閉通向操作間的窗，開啟滅菌紫外線燈，照射 障內(nèi)）的窗，將籠盒傳入動物房。第九條：工作服、工作鞋的使用規(guī)范：一、實驗動物飼養(yǎng)室的工作服應特殊的標記， 專人、專用不得亂穿。工作服不允許穿著于其他場所，如一經(jīng)發(fā)現(xiàn)則按違章操作處罰。二、工作人員每進入一次動物房需更換一套經(jīng)洗滌消毒、滅菌的工作服。消毒或滅菌過的鞋應放

6、置在二更室， 其穿在工作人員的腳上進入動物房的清潔走廊、 動物房、污染走廊，最后回到動物房的一更室時從工作人員的腳上脫下。脫下的鞋刷洗、 1:100 的次氯酸鈉或1:200 的百毒殺藥液浸泡消毒后與清潔工作服一起放在二更室。第十條：墊料的管理使用：一、墊料的運行路線：墊料-滅菌（121 C, 30min ）-傳遞通道-清潔貯藏間-動物房。墊料的驗收： 實驗動物的墊料應是無毒、 清潔、 少塵、 無異味、 沒有營養(yǎng)不被動物食用、吸水性強的材料，通常選用干凈的木屑。墊料的外包裝擦干凈后經(jīng) 121 高溫高壓滅菌。 采用雙扇通道滅菌器的， 直接打開動物房側的門，將滅菌后的墊料傳入動物房清潔貯物間。四、墊

7、料在清潔貯物間內(nèi)裝入經(jīng)晾干的鼠盒，然后將帶墊料的鼠盒推入動物房換盒。五、對于不打算清洗的鼠盒，可將墊料帶入動物房，先將使用過的墊料倒入污物桶，再裝入清潔的墊料于鼠盒中。第十一條：廢棄物的處理：一、廢棄物運行路線：廢棄物（產(chǎn)生于動物房）-塑料袋打包-次潔凈走廊-污染走廊-清洗消毒間-醫(yī)療垃圾處理場。二、動物的廢棄物按垃圾分類丟入污物桶相應的塑料袋內(nèi)，并扎好袋口。每天將動物房扎好袋口的廢棄物經(jīng)污染走廊送入洗消間， 與洗消間袋裝封口的廢棄物一起運到樓外。廢棄物應及時送到醫(yī)療垃圾處理場， 不得在動物室外停留， 以防蚊蠅、 野生動物的叮咬，污染環(huán)境。第三節(jié)動物進出動物房工作條例第十二條： 實驗工作人員務

8、必使進出動物房的實驗動物嚴格遵守流動走向及消毒程序， 防止發(fā)生污染。第十三條：詳細操作程序：一、動物的運行路線：動物進入動物接收走廊：帶動物的包裝箱-消毒劑擦拭外包裝-傳送窗內(nèi)紫外照射-檢疫間取出動物f動物飼養(yǎng)室二、動物進入動物房的管理規(guī)范（一）進入屏障動物房的動物必須來自廣東省實驗動物供應基地，并持有SPF 級別實驗動物質(zhì)量合格證書。（二） 將帶有動物的包裝箱運到動物接收走廊傳遞窗前， 消毒劑擦拭外包裝后將其放入傳遞窗中，關上傳遞窗的外側門。（三）開紫外燈照射10min 后在檢疫間打開傳遞窗的內(nèi)側門和包裝箱的盒蓋，把小鼠抓入預先準備好的鼠盒。（四） 動物包裝箱內(nèi)的動物取完后， 關閉傳遞窗的內(nèi)

9、側門， 包裝箱由傳遞窗退回動物接收走廊之后，工作人員將鼠盒放入動物飼養(yǎng)室。第四節(jié)飼料和飲用水進入動物房工作條例第十四條： 實驗工作人員務必使進出動物房的飼料和飲用水嚴格遵守流動走向及包裝、 滅菌程序，防止發(fā)生污染。第十五條：詳細操作程序：一、實驗動物飼料首選商品化的全價營養(yǎng)配合顆粒飼料（經(jīng)輻射滅菌） 。二、實驗動物飼料的滅菌方法：飼料購進后連外包裝置于傳遞窗內(nèi)紫外燈照射15min ，進置于潔凈貯物室內(nèi)專用飼料盒行滅菌， 然后從潔凈貯物室一側取出滅菌好的帶外包裝飼料，中備用。三、飼料的運行路線：滅菌飼料-洗消間-傳遞窗-清潔貯物間-動物飼養(yǎng)室四、水的運行路線：純凈飲用水裝入耐高溫飲用水瓶滅菌柜1

10、21 C, 20min -潔凈貯物室送入動物飼養(yǎng)室使用第五節(jié)空氣進入動物房第十六條：實驗工作人員務必使進出動物房的空氣嚴格遵守滅菌程序，防止發(fā)生污染。第十七條：詳細操作程序：一、空氣進入動物房的運行路線：室外空氣-吸風口-機房-初效過濾器-空調(diào)機-中效過濾器-進風管道-高效過濾器-動物房-室內(nèi)排風口-初效過濾器-排風管道-排風機-通風豎井-室外二、空氣的運行與管理（一）室外的空氣由于機房風機所形成的負壓，每天檢查保持吸風口的通暢。空氣經(jīng)初效過濾器被吸入進風機， 每半月要清理一次空調(diào)機進風口的空氣過濾網(wǎng)， 每周更換一次初效過濾器的過濾材料，以減少進風的阻力?？諝饨?jīng)中效過濾器進入通風管道， 穿過位

11、于動物室頂層上的高效過濾器， 進入動物房，每年更換高效過濾器一次。（四）動物室空氣經(jīng)排風口、初效過濾器、排風管道、排風機送入通風豎井，最后排放于屋頂。為了保證排氣暢通，每月要更換一次初效過濾材料。（五） 每周檢測一次各排風口的風速， 以便及時更換因過濾材料阻塞而使風速減小的初效過濾器。第六節(jié)外來人員進出動物房第十八條外來實驗人員進入實驗室前必須經(jīng)培訓合格后才可以進入實驗室開展工作， 所有進入實驗室的工作人員必須遵守實驗室的有關規(guī)定，防止污染及錯誤操作發(fā)生。第十九條：詳細工作程序一、外來實驗人員進入實驗室需經(jīng)有關領導批準，并遵守實驗室的有關規(guī)定。二、 實驗人員要進入實驗動物實驗室， 必須進入一更

12、室更衣， 淋浴間淋浴， 二更室穿隔離服，戴工作帽、口包、換專用拖鞋、并套上鞋套、戴上手套。三、打開清潔走廊門，進入清潔走廊。四、實驗人員穿的隔離服等防護性用品每次使用后經(jīng)洗滌、滅菌。五、動物實驗室內(nèi)禁止大聲喧嘩；一切與實驗無關的東西禁止帶入。第三章動物房內(nèi)部相關工作的工作條例第一節(jié)喂飼、喂水與更換墊料的工作第二十條： 實驗工作人員務必對實驗動物的喂飼、 喂水與更換墊料嚴格遵守本節(jié)條例， 防止發(fā)生污染。第二十一條：詳細工作程序：一、實驗動物自由采食、飲水，不能斷料、斷水，嚙齒類動物的采食主要在夜晚，白天鼠蓋上的飼料略有剩余即可。二、 每天上班后和工作結束前兩次全面檢查各鼠盒， 注意觀察飲水瓶是否

13、漏水， 鼠盒內(nèi)墊料的潮濕度，應及時更換漏水的水瓶和潮濕的鼠盒。三、大、小鼠的喂飼（一） 每天上午上班時和下午下班前各給鼠盒加料一次， 加料時打開飼料袋， 戴上一次性手套或用加料勺向盒蓋上加料。（二）加料的量取決于動物的大小和數(shù)量，以到第二天上午上班檢查時每盒剩下12根鼠料為宜。（三）應注意觀察記錄動物采食的量。四、大、小鼠的喂水（一）每周 2 次更換飲水瓶、換水瓶時將洗滌滅菌的飲水瓶放在飲水瓶箱中，裝滿4/5 水瓶水，緊緊蓋上瓶塞。（二）將飲水瓶箱搬入動物房，從鼠盒的盒蓋上取下用過的水瓶，丟入空飲水瓶存放箱中，同時取一新裝滿水的水瓶插在盒蓋上。每插上一個水瓶， 細細觀察一會兒， 確信飲水瓶不會

14、漏水后， 再換下一鼠盒的飲水瓶。漏水飲水瓶不得再使用。大、 小鼠飲水采用更換水瓶的方式和不采用向瓶中加水的方式， 更換下的水瓶需傳出動物房，送到洗消間，經(jīng)清洗高壓消毒后方可使用。五、大、小鼠換盒（一）在清潔貯物間，用手將滅菌墊料放入消毒晾干的鼠盒中。（二）將盛有墊料的鼠盒一盒盒壘起，送入動物房（三）從鼠盒架上取下鼠盒放置于工作車上，顛倒飲水瓶，取下鼠盒蓋放于鼠盒旁。用鑷子或手輕輕抓住鼠尾近根部， 將鼠提起放入盛有新鮮、 滅菌墊料盒中， 蓋上原鼠蓋，插上飲水瓶，放回鼠架上。（五）換下的盒子疊放在一起，最后經(jīng)次潔凈走廊、污染走廊送入洗消間。第二節(jié)動物房的清掃與衛(wèi)生管理第二十二條： 實驗工作人員務必

15、對動物房的清掃與衛(wèi)生管理嚴格遵守本節(jié)條例， 防止發(fā)生污染。第二十三條：詳細工作程序：一、應保持動物房的地面、墻壁、頂棚、室內(nèi)一切設施潔凈無塵，無飼料、墊料碎屑，無臟污。二、每天擦拭地面一次，每兩天擦拭墻壁一次，每周擦拭頂棚一次。三、空氣消毒：每天工作結束，開啟紫外線燈 30min 。四、換墊料后用滅菌消毒液擦拭飼養(yǎng)架、層流架和動物房的各種器具、設施。五、飼養(yǎng)區(qū)內(nèi)各類飼養(yǎng)用具、物品要擺放整齊，并保持清潔， 與飼養(yǎng)動物無關的物品不得帶入或存放在飼養(yǎng)區(qū)外。六、每天工作結束，將動物房的垃圾袋扎好，經(jīng)次潔凈走廊及污染走廊送出。七、專用消毒液：過氧乙酸（0.5%1%噴霧），百毒殺或消毒靈（0.2%0.5%

16、空氣噴霧，0.1% 擦拭） ，新潔爾滅（ 0.1%表面擦拭） ，漂白精片（每5000ml 水加 2 片拖地） ，次氯酸 鈉（ 1% 空氣噴霧） 。第三節(jié)動物房的空調(diào)、通風、滅菌設備的維護管理第二十四條： 實驗工作人員務必對動物房的空調(diào)、 通風、 滅菌設備的維護管理嚴格遵守本條例，防止發(fā)生誤操作與損壞儀器。第二十五條：詳細工作程序：一、每周對空調(diào)機擦拭一次，清理空氣過濾器，降低進阻力。二、每年春、秋分別對空調(diào)機進行兩次保養(yǎng)、檢漏，充足氟里昂。三、每年春、秋分別對風機進行兩次保養(yǎng)，緊固螺絲、軸承加油或更換軸承。四、每周更換一次初效、 6 個月更換一次中效、 1 年更換一次高效過濾材料，以減少通風阻

17、力。五、使用壓力容器人員必須經(jīng)過專業(yè)培訓，并取得崗位證書。六、壓力容器開啟前應先檢查水位、壓力表頭、安全閥等，使其處于良好的工作狀態(tài)。七、每月對高壓滅菌容器進行一次保養(yǎng)，每年由壓力容器安檢部門校檢一次。第四節(jié)動物房的使用與維護工作記錄第二十六條： 實驗工作人員務必對動物房的使用與維護工作記錄嚴格遵守本條例， 防止發(fā)生誤操作與損壞儀器。第二十七條：詳細工作程序：一、工作日每天上、下午記錄或觀察實驗室和飼養(yǎng)室內(nèi)溫度和相對濕度各一次。二、動物籠盒應有容易識別的標牌， 標牌上應有籠盒編號，籠盒放在籠架或?qū)恿骷苌蠒r，必須按籠盒標牌的編號次序一一放置整齊。三、標牌上的各項記錄必須認真、及時、完整地填寫。四

18、、認真做好工作日記。記錄當天的主要工作（包括實驗項目記錄、始止時間、給藥周期、實驗負責人等情況） ，并記錄各種異常情況。五、建立異常情況及時報告制度，及時報告主管人員，并協(xié)同處理。第五節(jié)實驗室安全操作第二十八條： 為保障進入清潔級動物實驗室開展實驗工作的工作人員工作過程的安全保護而制定。第二十九條：詳細工作程序： 一、成立實驗室安全工作委員會，負責實驗室安全工作的布置、安排和檢查。對實驗室工作人員進行例行體檢及預防免疫注射。 對實驗室人員進行各種危險物品的性質(zhì)、 使用要求及各種儀器設備的安全使用培訓及中毒、受傷急救措施的培訓，做好個人防護。二、實驗室應保持實驗臺面、地面、各種儀器設備的干凈、整

19、潔。禁止在實驗室內(nèi)大聲喧嘩及攜帶與實驗無關的物品。實驗操作時須穿戴工作衣、帽、手套。非本實驗室工作人員未經(jīng)許可不得入內(nèi)。三、實驗室應保持清潔，定期做熏蒸消毒處理。每次使用前用紫外燈照射30 分鐘，使用后用 70 的酒精消毒臺面，對實驗廢棄的物品進行消毒、高壓滅菌處理。四、常規(guī)試驗用過的培養(yǎng)基、試劑、試管、平皿、吸管等試驗用品須經(jīng)有效的消毒處理后方可丟棄或清洗。每日上班后檢查溫箱、 冰箱的工作情況， 并建檔記錄溫度升降情況。 下班前檢查水、 電、氣、門、窗，確保安全。發(fā)現(xiàn)隱患，及時報主管領導。在存放、 操作有毒試劑的設備上和存在對工作人員健康危害的地方加貼危害標記和安全提示語。七、易燃、易爆、劇

20、毒物品應嚴格按照實驗室試劑管理規(guī)定的各項要求去做。八、 實驗室應備有適用于各種火災的小型滅火器， 所有實驗室人員都應學會滅火器的使用方法，發(fā)現(xiàn)火災及時報警。第六節(jié)實驗動物尸體及廢棄物的處理第三十條： 實驗工作人員務必對實驗動物尸體及廢棄物的處理嚴格遵守本條例， 防止發(fā)生污染與錯誤操作發(fā)生。第三十一條：詳細工作程序：一、實驗動物尸體的處理（一） 實驗處死的動物及飼養(yǎng)人員在飼養(yǎng)管理過程中發(fā)現(xiàn)動物尸體時， 應在籠子標簽上記錄死亡只數(shù)， 并將動物尸體放入準備好的黃色膠袋中； 交本次實驗負責人， 做好動物死亡記錄及大體解剖檢查分析；最后再放入指定垃圾袋內(nèi)。（二）感染實驗的動物尸體、糞尿等，未經(jīng)消毒和滅菌

21、處理不準廢棄。二、實驗系統(tǒng)廢棄物的處理（一）實驗中的廢棄物及用過的墊料等廢棄物均需放入指定垃圾袋內(nèi)。第七節(jié)實驗室儀器設備的管理第三十二條： 實驗工作人員務必對實驗室儀器設備的管理嚴格遵守本條例， 防止發(fā)生誤操作與損壞儀器。第三十三條：詳細工作程序：一、按中山大學設備處要求建立固定資產(chǎn)登記卡 ，其內(nèi)容包括：設備名稱、廠家、型號、儀器編號、校編號、單價、購買日期、固定資產(chǎn)日期、儀器使用情況、儀器放置地點和保管員等等。每物一卡，長期保存。二、儀器設備的使用和保管要實行“三定制度” ，即定位（固定放置位置） 、定人（固定管理人員） 、定操作規(guī)范。三、使用、 保管有關儀器設備的人員，須熟練掌握有關儀器設

22、備的操作程序和保養(yǎng)要求，按照規(guī)定的操作程序進行操作。四、對于超過10 萬元以上的儀器需按照學校規(guī)定設立貴重儀器的使用登記簿。每次用畢，使用人員須登記儀器使用情況。五、各種儀器設備須定期維護、校正。六、 外單位工作人員因工作需要使用本單位的貴重儀器時， 憑單位介紹信和本人工作證接洽，經(jīng)領導同意后方可使用，并在貴重儀器使用登記簿上登記，酌情收取使用費。七、儀器設備故障時應由專業(yè)人員維修，并先報告設備維修登記表 ，由實驗室辦公室安排維修人員進行檢查， 如果屬于本單位無法維修范圍， 則由辦公室負責聯(lián)系儀器廠家進行維修工作，要求儀器出現(xiàn)故障后一周內(nèi)落實相關檢修工作。八、儀器設備需作廢處理的，提出書面申請， 經(jīng)中山大學設備處固定資產(chǎn)管理科核實后，按規(guī)定辦理報廢手續(xù)。第九節(jié)實驗器材的洗滌、包裝和滅菌第三十四條： 實驗工作人員務必對實驗器材的洗滌、 包裝和滅菌過程嚴格遵守本條例， 防止 污染發(fā)生。第三十五條：詳細工作程序：一、玻璃器皿（大小鼠飲水瓶的清洗工作）（一）玻璃器皿的洗滌、用過的不帶病原微生物的玻璃器皿：先用洗滌劑洗滌， 后用自來水沖洗， 然后晾干或烘干， 再放入硫酸- 重鉻酸鉀液中浸泡過夜。取出后用自來水和蒸儲水分別沖洗46遍，晾干或烘干，包裝。、帶病原微生物的玻璃器皿：先浸泡在5%來蘇爾液或5%NaOH溶液或15%鹽酸溶液（依病毒、