齊魯醫(yī)學流式細胞術(shù)及其應(yīng)用教程

1、精品醫(yī)學文檔 精品醫(yī)學文檔 精品醫(yī)學文檔 流式細胞術(shù)及其應(yīng)用教程The course of flow cytometry and its application課程簡介該課程包括理論和實習兩部分，理論課程重點介紹與流式細胞術(shù)密切相關(guān)的基本原理、結(jié)構(gòu)及其在臨床和科研工作中的應(yīng)用。內(nèi)容包括流式細胞術(shù)的基本原理、流式細胞儀數(shù)據(jù)的采集和分析、血細胞分化發(fā)育過程、流式細胞術(shù)在免疫學、血液學、腫瘤學及科研工作中的應(yīng)用。通過理論授課使研究生能夠掌握上述領(lǐng)域的基本理論和最新研究進展，達到提高研究生流式細胞術(shù)應(yīng)用水平、拓展研究生思路、開闊眼界，為培養(yǎng)復合型人才打下基礎(chǔ)。實習內(nèi)容包括標本制備、儀器的調(diào)節(jié)與質(zhì)控、淋

2、巴細胞亞群分析、HLA-B27檢測、胞膜、內(nèi)抗原檢測、紅細胞CD55、CD59檢測、血小板膜糖蛋白分析、DNA倍體分析及細胞因子檢測。通過實習使研究生進一步熟悉流式細胞儀的使用程序，操作規(guī)程，為今后的工作、學習提高幫助。 This course includes in lecture teaching and practice lesson. The lecture teaching will be focused on flow cytometric basic theory, structure, data collection and analysis, application in c

3、linic and research. The practice lesson will be focused on sample preparation, instrument setting, analysis of lymphocytes, HLA-B27，extracellular antigen and intracellular antigen, analysis of CD55,CD59, DNA ploidy analysis and cytokine detection. 教學大綱一、課程名稱：流式細胞術(shù)及其應(yīng)用教程二、總學時數(shù)： 38學時，2學分理論課 18學時實驗課 20

4、學時三、授課對象：博士生、碩士生，專業(yè)不限四、教學目的與要求：掌握流式細胞術(shù)基本原理、工作程序、臨床及科研工作中的用途，了解相應(yīng)領(lǐng)域的最新進展，為臨床和科研工作奠定基礎(chǔ)。五、理論課內(nèi)容：第一章 流式細胞術(shù)工作原理（3學時）流式細胞術(shù)發(fā)展簡史要求：了解流式細胞術(shù)的基本概念、發(fā)展簡史、流式細胞儀的基本結(jié)構(gòu)、工作原理。流式細胞儀的基本結(jié)構(gòu)、工作原理要求：了解流式細胞儀的基本結(jié)構(gòu)、工作原理第三節(jié) 流式細胞儀的數(shù)據(jù)分析要求：了解并熟悉CellQuest分析軟件主界面、流式細胞儀數(shù)據(jù)采集與儲存，掌握流式細胞儀數(shù)據(jù)分析方法。1設(shè)門技術(shù)2散射光信號及熒光信號3直方圖4雙參數(shù)散點圖第二章 淋巴細胞的分化發(fā)育過程

5、（6學時）淋巴細胞的分化發(fā)育過程要求：了解T/NK淋巴細胞、B淋巴細胞發(fā)育過程，熟悉各階段淋巴細胞的抗原表達情況。第二節(jié) 髓細胞的分化發(fā)育過程及白細胞分化抗原要求：了解髓細胞的分化發(fā)育過程，熟悉各階段髓細胞的抗原表達情況，了解白細胞分化抗原的組成及應(yīng)用。第三章 流式細胞術(shù)的臨床應(yīng)用（6學時）第一節(jié) 血液淋巴細胞免疫表型分析及其應(yīng)用要求：了解淋巴細胞亞群數(shù)量及免疫表型變化的意義，掌握CD4細胞計數(shù)在艾滋病診斷與治療中的價值，HLA-B27與強直性脊椎炎的關(guān)系。第二節(jié) 干細胞工程與流式細胞術(shù)干細胞分析要求：了解干細胞（包括胚胎干細胞、造血干細胞、間充質(zhì)干細胞等）發(fā)育、抗原表達過程，掌握流式細胞術(shù)干

6、細胞檢測設(shè)門技術(shù)、注意事項、干細胞絕對數(shù)的計算方法。第三節(jié) 白血病/淋巴瘤免疫分型及其應(yīng)用要求：了解急性白血病、淋巴瘤的WHO分類、熟悉幾種特殊類型急性白血病和淋巴瘤的免疫分型特征。第四節(jié) 流式細胞術(shù)粒細胞、紅細胞、血小板分析及其應(yīng)用要求：了解各類細胞CD55/CD59表達情況，了解血小板糖蛋白的種類、意義，了解流式細胞術(shù)分析紅細胞、血小板的注意事項；掌握流式細胞術(shù)分析紅細胞、血小板的設(shè)門技術(shù)及CD55/CD59在診斷PNH中的價值。第四章 流式細胞術(shù)在科研工作中的應(yīng)用（3學時）第一節(jié) 細胞周期與DNA倍體分析 要求：了解流式細胞術(shù)分析DNA/RNA的常用染料、熟悉ModFit LT DNA分

7、析軟件使用方法，掌握細胞周期/DNA倍體分析方法。第二節(jié) CBA分析系統(tǒng)要求：了解CBA分析系統(tǒng)及其檢測原理六、實驗課內(nèi)容：20學時1流式細胞術(shù)的標本處理(3學時)要求：掌握流式細胞術(shù)標本制備方法2儀器的調(diào)節(jié)與質(zhì)控(3學時)要求：熟悉儀器的操作規(guī)程及軟件額使用方法，了解質(zhì)控品的使用方法與操作規(guī)程3淋巴細胞亞群分析；HLA-B27檢測 (3學時)要求：掌握淋巴細胞亞群、HLA-B27自動分析軟件操作規(guī)程4胞內(nèi)抗原檢測 (3學時)要求：熟悉胞內(nèi)抗原標記方法5紅細胞CD55、CD59檢測（3學時）要求：熟悉紅細胞表面抗原的檢測方法，掌握設(shè)門技術(shù)6血小板膜糖蛋白分析(2學時)要求：熟悉血小板膜糖蛋白分

8、析方法、注意事項7DNA倍體分析（3學時） 要求：熟悉DNA染色步驟，ModFit自動分析軟件的使用方法七、重點、難點：八、授課方式：理論授課與實驗操作，多媒體教學九、考試方式：理論課筆試結(jié)合實驗操作評分十教材及主要參考資料：1血液病學，張之南，楊天楹，郝玉書主編，2003年第一版，人民衛(wèi)生出版社2白血病，陸道培，卞壽庚主編，2003年第一版，中國醫(yī)藥科技出版社3臨床流式細胞分析，王建中主編，2005年第一版，上?？茖W技術(shù)出版社4醫(yī)學免疫學,畢愛華主編，2000年第二版，人民軍醫(yī)出版社5流式細胞術(shù)原理與應(yīng)用教程，吳后男主編，2008年第一版，北京大學醫(yī)學出版社6流式細胞術(shù)基本原理與實用技術(shù)，梁

9、智輝，朱慧芬，陳九武編著，2008年第一版，華中科技大學出版社7Maryalice Stetler-Stevenson, Ejaz Ahmad, David Barnett,et al. Clinical Flow Cytometric Analysis of Neoplastic Hematolymphoid Cells;Approved Guideline-Second Edition.Clinical and Laboratory Standards Institute.8Brent. Wood, Maria Arroz, David Barnett, et al. 2006 Bethesda Internation Consensus Recommendation on the Immunophenotypic Analysis of Hematolymphoid Neoplasis by Flow Cytometry:Optimal Reagents and Reporting for th