葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖濃度版本

1、xxxQQ:xxxxxxxxxx電話:xxxxxxxxxxx血糖測(cè)定（葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法）及腎上腺素對(duì)血糖濃度的影響, 尿糖檢測(cè)1實(shí)驗(yàn)課安排二、注射腎上腺素三、30min（尿糖檢測(cè)）四、注射后取血五、血糖檢測(cè)一、注射前取血2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：測(cè)定血糖濃度，觀察腎上腺素對(duì)血糖濃度的影響半定量測(cè)量尿糖實(shí)驗(yàn)要求：掌握葡萄糖氧化酶測(cè)定血糖的方法、原理、測(cè)定操作、正常參考值、臨床意義熟悉尿糖測(cè)定及意義3血糖的調(diào)節(jié)血糖過(guò)高血糖不足胰高血糖素糖皮質(zhì)激素血糖的來(lái)源和去路血糖氧化分解合成轉(zhuǎn)化H2O+CO2+ATP糖原其它糖、非糖物質(zhì)食物糖原非糖物質(zhì)消化吸收分解糖異生胰島素血糖平衡腎上腺素血糖調(diào)節(jié)相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)：下

2、丘腦+自主神經(jīng)尿糖注射葡萄糖血糖指血液中所含的葡萄糖，它是給機(jī)體提供能量的主要物質(zhì)，也是體內(nèi)糖代謝情況的重要生理指標(biāo)。一）神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)：下丘腦+自主神經(jīng)二）體液調(diào)節(jié)，也叫激素調(diào)節(jié)，有升糖激素和 降糖激素三）還有一些器官：肝、肌肉以及腎臟等 化學(xué)感受器4腎上腺素是腎上腺髓質(zhì)分泌的一種兒茶酚胺類(lèi)激素，主要在應(yīng)激狀態(tài)下發(fā)揮升高血糖的作用。腎上腺素機(jī)制cAMP肝、肌細(xì)胞的膜受體血中的腎上腺素磷酸化酶葡萄糖乳酸肝糖原糖酵解乳酸循環(huán)級(jí)聯(lián)激活受刺激結(jié)合促進(jìn)肌糖原分解5糖代謝紊亂高血糖低血糖6.93.03.89-6.11檢測(cè)1.臨床醫(yī)生：作為疾病診斷依據(jù)、指導(dǎo)用藥以及判斷升糖藥或降糖藥的療效2.糖尿病患者：監(jiān)

3、控自身血糖及尿糖變化，調(diào)節(jié)飲食、運(yùn)動(dòng)、就醫(yī)等生活規(guī)律。腎糖閾8.96-10.08單位：mmol/L尿糖正常血糖病理性病理性生理性生理性生理性長(zhǎng)期饑餓、劇烈運(yùn)動(dòng)后病理性胰島細(xì)胞增生、胰島細(xì)胞瘤、胰高血糖素分泌不足、嚴(yán)重肝病患者生理性餐后、情緒緊張時(shí),腎上腺素分泌增加、注射葡萄糖病理性糖尿病、內(nèi)分泌腺功能障礙、顱內(nèi)壓增高、嚴(yán)重脫水臨床上重要的糖代謝紊亂也主要是血糖濃度過(guò)高（高血糖癥）和過(guò)低（低血糖癥）。6血糖測(cè)定方法葡萄糖氧化酶法廣泛使用,特異性強(qiáng)、價(jià)廉、操作簡(jiǎn)單福林-吳憲法鄰甲苯胺法己糖激酶法超微量還原鐵氰化鉀法7第一步：第二步：Trinder反應(yīng)H2O2 苯酚4-氨基安 替比林H2O 醌亞胺

4、+O2紅色氧化縮合37oC505nm比色測(cè)定37oC葡萄糖O2H2O葡萄糖酸H2O2氧化葡萄糖氧化酶法原理葡萄糖氧化酶（GOD）辣根過(guò)氧化物酶（POD）8具體操作（1）空腹稱(chēng)重（已稱(chēng)好）（2）耳緣靜脈取血取血部位去毛，接著擦拭酒精，涂二甲苯、凡士林。用三棱針刺破耳緣靜脈放血，離心管收集血液2-3ml（干棉球壓迫止血），離心，1500rpm，10min，取出放試管架上備用。（3）注射腎上腺素腹側(cè)皮下注射腎上腺素(0.4mL/kg體重)，記錄在注射時(shí)間，操作如圖：9正確抓兔耳緣靜脈皮下注射1.注射時(shí)，把兔子皮膚提起來(lái)，在褶皺處，豎著進(jìn)針1.5-2cm。2.注射完后等一會(huì)再把針頭拔出。輕按注射部位。

5、30 min后再采血。錯(cuò)誤抓兔10（5）取4支試管，按下表加入試劑:（6）混勻后，37OC水浴15min；取出冷卻，空白管調(diào)零，505nm處比色測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)正常注后空白血清樣品葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液蒸餾水酶酚混合試劑0.023.000.023.000.023.000.023.00（4）注射后取血: 2-3ml,離心，取出備用。(ml)11標(biāo)準(zhǔn)正常注后A血糖檢測(cè)結(jié)果記錄12計(jì)算：1.注射前、后的血糖濃度2. 注射后血糖濃度增高率A腎 - A正A正 100%增高率 = C測(cè)A測(cè) A標(biāo) C標(biāo)=（mmol/L）家兔血糖正常參考值（5.34-6.62 mmol/L)131.葡萄糖氧化酶試紙法（干化學(xué)法）：特異性強(qiáng)，

6、臨床常用。檢測(cè)原理是葡萄糖氧化酶法。2.班氏定性試驗(yàn)：價(jià)廉，操作簡(jiǎn)單，比較常用，但易受尿中還原性物質(zhì)干擾。尿糖測(cè)定14班氏定性試驗(yàn)原理： 根據(jù)沉淀顯色的深淺，對(duì)尿糖作半定量檢測(cè)。(CHOH)nCH2OH+4OH-(CHOH)nCH2OH+H2O2CuOHH2O+黃色堿性葡萄糖葡萄糖酸紅色COOH2CuOHCHO2Cu2+Cu2O煮沸分解15操作步驟A尿2滴 B尿2滴再煮沸5min班氏劑20滴班氏劑20滴煮沸5min待完全沉淀到管底后（10min），對(duì)比判斷標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。16沉淀顏色結(jié)果符號(hào)葡萄糖含量（g/100ml）藍(lán)色-無(wú)糖 0綠色+微量 0.5以下黃綠色+少量 0.51.0土黃色+中量 1.02.0紅棕+大量 2.0以上尿糖結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)17尿糖檢測(cè)結(jié)果記錄顏色 結(jié)果符號(hào)A尿B尿18【注意事項(xiàng)】1.微量加樣槍的使用2.先加0.02ml，完全沖到管底。3.0.02ml加樣要精確19下一次實(shí)驗(yàn)牛血清白蛋白的分離、純化及鑒定20尿糖：指尿中的葡萄糖