傳染病病例標(biāo)本采集和運(yùn)輸課件

1、病原微生物標(biāo)本的采集、保存及運(yùn)輸方法病原微生物標(biāo)本的采集標(biāo)本采集種類血液標(biāo)本（抗凝血與非抗凝血）呼吸道標(biāo)本上呼吸道標(biāo)本（咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、痰液等）下呼吸道標(biāo)本（呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、胸腔積液、肺組織活檢標(biāo)本等）。消化道標(biāo)本 （糞便和肛拭子）尿液標(biāo)本其他人體標(biāo)本 （腦脊液、皰疹液、淋巴結(jié)穿刺液等）尸體解剖標(biāo)本采集媒介和動(dòng)物標(biāo)本采集環(huán)境標(biāo)本采集病原微生物標(biāo)本的采集標(biāo)本采集中的注意事項(xiàng)采樣時(shí)生物安全的考慮采樣時(shí)間及部位采樣容器采樣標(biāo)本的標(biāo)識(shí)各種標(biāo)本的采樣方法病原微生物標(biāo)本的采集采樣時(shí)間及部位時(shí)間:一般在懷疑細(xì)菌感染時(shí)應(yīng)盡量在急性發(fā)病期和使用抗生素之前采集標(biāo)本，進(jìn)行細(xì)菌的分離培

2、養(yǎng)，否則這種標(biāo)本在分離培養(yǎng)時(shí)要加藥物拮抗劑。作病毒分離和病毒抗原檢測(cè)的標(biāo)本，應(yīng)在發(fā)病初期和急性期采樣，因?yàn)榇藭r(shí)病毒在體內(nèi)大量繁殖，檢出率高，病毒分類標(biāo)本最好在發(fā)病12天內(nèi)采取。部位：根據(jù)致病菌在患者不同病期的體內(nèi)分布和排出部位，采集不同的標(biāo)本。例如傷寒病人應(yīng)在發(fā)病早期未使用抗生素之前采血培養(yǎng)，在23周時(shí)停用抗生素2天后采糞便培養(yǎng)。全病程可做骨髓培養(yǎng)。病原微生物標(biāo)本的采集采樣容器采集標(biāo)本應(yīng)使用無(wú)菌容器，一個(gè)標(biāo)本一個(gè)容器。對(duì)容器基本要求是選耐用材料制成，容器包裝好后可防滲漏。能承受空中地面運(yùn)送過(guò)程中可能發(fā)生的溫度和壓力變化。病原微生物標(biāo)本的采集采樣標(biāo)本的標(biāo)識(shí)包括種類、原始采樣容器、標(biāo)本性質(zhì)、數(shù)量、

3、運(yùn)送人和接受人及其包裝日期、運(yùn)輸日期、統(tǒng)一的識(shí)別編號(hào)及病人聯(lián)系方式、姓名、檢驗(yàn)?zāi)康摹⑴R床診斷等信息。其他信息如病人信息（年齡、性別、完整地址），臨床資料（發(fā)病日期、臨床癥狀、治療史、可疑的發(fā)病原因、采樣前是否用抗生素），急性或恢復(fù)期標(biāo)本，癥狀類似病人的其他標(biāo)本。接收標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室也應(yīng)記錄接收日期和時(shí)間、接受標(biāo)本者的姓名、標(biāo)本性質(zhì)和狀態(tài)等。這些信息都是解釋檢驗(yàn)結(jié)果所必需的。病原微生物標(biāo)本的采集各種標(biāo)本的采樣方法(1)血液采集全血：作血液病原培養(yǎng)時(shí)，嚴(yán)格用無(wú)菌穿刺法采靜脈血，移入無(wú)菌的有螺口的抗凝的容器或培養(yǎng)瓶中送檢。采集量為3-5毫升。做核酸檢測(cè)時(shí)，抗凝劑一般使用EDTA-K3或枸櫞酸鈉，不可用肝

4、素。血清：用于檢測(cè)IgM的血清一般采于發(fā)病1個(gè)月內(nèi)；用于檢測(cè)IgG的血液應(yīng)收集兩次，第一次于發(fā)病初期（13天），越早越好，第二次血樣一般在恢復(fù)期（第一次采血后34周）。雙份血清同時(shí)檢測(cè)，如抗體滴度有4倍以上升高才有意義。 （2）糞便采集：應(yīng)在急性腹瀉期及用藥前采集自然排出的糞便。采集時(shí)應(yīng)用滅菌棉拭子多點(diǎn)蘸取患者新鮮排出糞便的膿血、粘液、水樣便或稀便部分，采樣量一般3-5克。（3）咽拭子：令患者仰頭張口，用壓舌板壓舌，將無(wú)菌棉拭子伸入口腔，適度用力拭涂抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位，放入盛有3-5mlHanks液的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。病原微生物標(biāo)本的采集各種標(biāo)本的采樣方法

5、（5）腦脊液：在無(wú)菌條件下由腰椎穿刺，用無(wú)菌試管收集35ml，（作厭氧培養(yǎng)時(shí)標(biāo)本應(yīng)注入?yún)捬跗績(jī)?nèi)），操作最好在醫(yī)院內(nèi)由有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生按腰椎穿刺術(shù)進(jìn)行。（6）皰疹液：可同時(shí)采集多個(gè)皰疹作為一份標(biāo)本。先用75%酒精對(duì)皰疹周?chē)钠つw進(jìn)行消毒，然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入盛有3-5mlHanks液中、在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。病原微生物標(biāo)本的采集禽流感環(huán)境標(biāo)本采集1、水標(biāo)本禽類飲用水：在每個(gè)籠具旁的飲水槽采集一份飲用水標(biāo)本,將水槽中的水樣用無(wú)菌的、一次性的玻璃棒或棉簽充分混勻后采集5-10ml置于15ml外螺旋蓋的管內(nèi)。水溝或水池:清洗禽類的污水:病原微生物標(biāo)本的采

6、集3、糞便標(biāo)本 從禽舍或環(huán)境中采集新鮮禽類糞便樣品5g左右，放入含5ml采樣液的采樣管中，充分混勻。同一地點(diǎn)多份糞便標(biāo)本可置于同一采樣管中。 4、其它標(biāo)本籠具周?chē)鷺?biāo)本（籠具下地面，籠具墊草等）內(nèi)臟拭子皮毛拭子等。病原微生物標(biāo)本的保存總原則：根據(jù)標(biāo)本種類及檢測(cè)內(nèi)容確定標(biāo)本的保存方式。用于細(xì)菌檢測(cè)的標(biāo)本：常需無(wú)菌、無(wú)抗生素保存，從而能確保目標(biāo)細(xì)菌的存活并抑制其他微生物的過(guò)度生長(zhǎng)。一般在4 C或室溫保存。用于病毒檢測(cè)的標(biāo)本：一般應(yīng)放在保溫容器（0C4C）里，不可放置超過(guò)2天，如不能立即分離病毒時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本凍存保存。若長(zhǎng)期儲(chǔ)存，最好在70C凍存。病原微生物標(biāo)本的保存如懷疑是寄生蟲(chóng)，所取糞便中加入10%

7、福爾馬林和PVA防腐劑（充分混合）。用于檢測(cè)抗原或抗體的標(biāo)本可在4C8C保存2428h，在20C保存時(shí)間更長(zhǎng)。檢測(cè)抗體的血清可在4C保存約一個(gè)星期，最長(zhǎng)10天；超過(guò)一周必須在-20C下冷凍。病原微生物標(biāo)本的保存實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)所有標(biāo)本建立追蹤系統(tǒng)，此系統(tǒng)中必須嚴(yán)格注明標(biāo)本基本信息，如標(biāo)號(hào)，標(biāo)本唯一識(shí)別碼，采樣日期，地點(diǎn)，采樣人等；患者的基本信息、臨床診斷檢測(cè)結(jié)果，以及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)信息，如檢測(cè)項(xiàng)目、時(shí)間和結(jié)果。從而可隨時(shí)了解標(biāo)本淶源信息，追蹤原始出處。病原微生物標(biāo)本的包裝任何感染性材料的包裝和運(yùn)輸都必須遵循WHO對(duì)傳染性物質(zhì)和診斷性標(biāo)本的安全運(yùn)送指南（WHO，1997）。標(biāo)準(zhǔn)的包裝方法和材料應(yīng)能確保即

8、使在運(yùn)送中包裝意外受損時(shí)也能保護(hù)人員的安全及標(biāo)本的完整。因此運(yùn)送標(biāo)本時(shí)要進(jìn)行三層包裝。病原微生物標(biāo)本的包裝國(guó)際民航組織危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則中將感染性物質(zhì)分為A和B兩類。A類指人感染后發(fā)病的可能性大，傳染性強(qiáng)，對(duì)人群危害性大的烈性感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)。高度懷疑具有嚴(yán)重危害性的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)也屬于A類。A類感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)聯(lián)合國(guó)編號(hào)UN2814和UN2900（只導(dǎo)致動(dòng)物致?。┎捎肞620包裝要求。 A類之外，僅具有一般危險(xiǎn)性，引起感染的機(jī)會(huì)較少的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)為B類（聯(lián)合國(guó)編號(hào)UN3373），采用P650包裝要求。A類包裝和B類包裝區(qū)別1A類包裝B類包裝定義對(duì)人或動(dòng)物致死或永

9、久性致殘不符合列入A類標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì)運(yùn)輸專用名稱感染性物質(zhì)，可感染人的診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本或生命物質(zhì)B類英文運(yùn)輸專用名Infectious substance affecing humansBiological substane,category BUN編號(hào)UN2814UN3373運(yùn)輸對(duì)象名錄中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物及其樣本；第三類中包裝分類為A類的病原微生物名錄中規(guī)定的第三類、第四類病原微生物及其樣本UN專用標(biāo)記需要不需要A類感染性物質(zhì)的包裝材料B類感染性物質(zhì)的包裝材料A類感染物質(zhì)的標(biāo)識(shí)病原微生物標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室間傳遞應(yīng)制定對(duì)危險(xiǎn)材料運(yùn)輸?shù)恼吆统绦?，包括危險(xiǎn)材料在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)、實(shí)驗(yàn)室所在機(jī)

10、構(gòu)內(nèi)及機(jī)構(gòu)外部的運(yùn)輸，應(yīng)符合國(guó)家和國(guó)際規(guī)定的要求。應(yīng)以防止污染人員或環(huán)境的方式運(yùn)輸危險(xiǎn)材料，并有可靠的安保措施。危險(xiǎn)材料應(yīng)置于被批準(zhǔn)的本質(zhì)安全的防漏容器中運(yùn)輸。病原微生物標(biāo)本的運(yùn)輸?shù)孛孢\(yùn)送標(biāo)本時(shí)注意將裝有標(biāo)本的箱子緊緊固定在交通工具上，車(chē)上還應(yīng)備有吸水材料、消毒劑、手套、口罩、護(hù)目鏡、密封防水的廢棄物容器等防護(hù)用品。為避免路途顛簸引起標(biāo)本溶血，可在運(yùn)送前分離血清。 在國(guó)際、國(guó)家、商業(yè)的有關(guān)規(guī)定允許下，診斷標(biāo)本也可空運(yùn)，應(yīng)注意規(guī)范包裝。 病原微生物標(biāo)本的運(yùn)輸分離培養(yǎng)細(xì)菌、病毒的標(biāo)本大多數(shù)要求冷藏運(yùn)送。腦膜炎球菌等應(yīng)在35C37C保溫運(yùn)送。血液標(biāo)本用于細(xì)菌、病毒或寄生蟲(chóng)分離時(shí)，需低溫保存，不能冷凍

11、。用冰塊而不是干冰運(yùn)送。做立克次體類微生物的全血標(biāo)本要求干冰保存和冷凍運(yùn)送。檢測(cè)核酸樣品的運(yùn)送要求低溫快速。從標(biāo)本采集到檢測(cè)的間隔時(shí)間要盡可能短，并盡可能將標(biāo)本處于冷藏狀態(tài)。檢測(cè)前保存時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)則需冷凍標(biāo)本防止核酸降解?？筛腥救祟惖母咧虏⌒圆≡⑸锞ǘ荆┓N或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定可感染人類的高致病性病原微生物（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定已于2005年11月24日經(jīng)衛(wèi)生部部務(wù)會(huì)議討論通過(guò)，現(xiàn)予以發(fā)布，自2006年2月1日起施行。可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定目的：為加強(qiáng)可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸?shù)墓芾?，保障人體健康和公共衛(wèi)生，依據(jù)中華人民共和國(guó)傳染

12、病防治法、病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例等法律、行政法規(guī)的規(guī)定，制定本規(guī)定。定義：本規(guī)定所稱可感染人類的高致病性病原微生物（毒）種或樣本是指在人間傳染的病原微生物名錄中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物菌（毒）種或樣本。 適用范圍：本規(guī)定適用于可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的運(yùn)輸管理工作。人間傳染的病原微生物名錄中第三類病原微生物運(yùn)輸包裝分類為A類的病原微生物菌（毒）種或樣本，以及疑似高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，按照本規(guī)定進(jìn)行運(yùn)輸管理。 可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定運(yùn)輸以上范圍內(nèi)規(guī)定的菌（毒）種或樣本（以下通稱高致病性病原微生物菌（毒）種或樣

13、本），應(yīng)當(dāng)經(jīng)省級(jí)以上衛(wèi)生行政部門(mén)批準(zhǔn)。未經(jīng)批準(zhǔn)，不得運(yùn)輸。申請(qǐng)單位：從事疾病預(yù)防控制、醫(yī)療、教學(xué)、科研、菌（毒）種保藏以及生物制品生產(chǎn)的單位，因工作需要，可以申請(qǐng)運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本。運(yùn)輸申請(qǐng)：申請(qǐng)運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的單位（以下簡(jiǎn)稱申請(qǐng)單位），在運(yùn)輸前應(yīng)當(dāng)向省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)提出申請(qǐng)，并提交以下申請(qǐng)材料（原件一份，復(fù)印件三份）：1.可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸申請(qǐng)表 （接收單位）具備從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資格的實(shí)驗(yàn)室； （接收單位）取得有關(guān)政府主管部門(mén)核發(fā)的從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等的批

14、準(zhǔn)文件。 接收單位應(yīng)當(dāng)符合以下條件： 1.具有法人資格； 2.具備從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資格的實(shí)驗(yàn)室； 3.取得有關(guān)政府主管部門(mén)核發(fā)的從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等的批準(zhǔn)文件。 在固定的申請(qǐng)單位和接收單位之間多次運(yùn)輸相同品種高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，可以申請(qǐng)多次運(yùn)輸。多次運(yùn)輸?shù)挠行跒?個(gè)月；期滿后需要繼續(xù)運(yùn)輸?shù)?，?yīng)當(dāng)重新提出申請(qǐng)。省內(nèi)運(yùn)輸審批： 申請(qǐng)?jiān)谑?、自治區(qū)、直轄市行政區(qū)域內(nèi)運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，由省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門(mén)審批。 省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)應(yīng)當(dāng)對(duì)申請(qǐng)單位提交的申請(qǐng)材料及時(shí)審查，對(duì)申請(qǐng)材料不齊全或者不

15、符合法定形式的，應(yīng)當(dāng)即時(shí)出具申請(qǐng)材料補(bǔ)正通知書(shū)；對(duì)申請(qǐng)材料齊全或者符合法定形式的，應(yīng)當(dāng)即時(shí)受理，并在5個(gè)工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定；符合法定條件的，頒發(fā)可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準(zhǔn)運(yùn)證書(shū)；不符合法定條件的，應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說(shuō)明理由?？缡∵\(yùn)輸審批： 申請(qǐng)跨省、自治區(qū)、直轄市運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，應(yīng)當(dāng)將申請(qǐng)材料提交運(yùn)輸出發(fā)地省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)進(jìn)行初審；對(duì)符合要求的，省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)應(yīng)當(dāng)在3個(gè)工作日內(nèi)出具初審意見(jiàn)，并將初審意見(jiàn)和申報(bào)材料上報(bào)衛(wèi)生部審批。 衛(wèi)生部應(yīng)當(dāng)自收到申報(bào)材料后3個(gè)工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定。符合法定條件的，頒發(fā)可感染人類的高致病性病原

16、微生物菌（毒）種或樣本準(zhǔn)運(yùn)證書(shū)；不符合法定條件的，應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說(shuō)明理由。突發(fā)疫情 對(duì)于為控制傳染病暴發(fā)、流行或者突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處理的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的運(yùn)輸申請(qǐng)，省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)與衛(wèi)生部之間可以通過(guò)傳真的方式進(jìn)行上報(bào)和審批；需要提交有關(guān)材料原件的，應(yīng)當(dāng)于事后盡快補(bǔ)齊。 根據(jù)疾病控制工作的需要，應(yīng)當(dāng)向中國(guó)疾病預(yù)防控制中心運(yùn)送高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，向中國(guó)疾病預(yù)防控制中心直接提出申請(qǐng)，由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心審批；符合法定條件的，頒發(fā)可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準(zhǔn)運(yùn)證書(shū)；不符合法定條件的，應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說(shuō)明理由。中國(guó)疾病預(yù)防

17、控制中心應(yīng)當(dāng)將審批情況于3日內(nèi)報(bào)衛(wèi)生部備案。 運(yùn)輸申請(qǐng)單位衛(wèi)生部科教司中國(guó)CDC(實(shí)驗(yàn)室管理處)出發(fā)地省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)初審（3個(gè)工作日）核發(fā)準(zhǔn)運(yùn)證或出具不予批準(zhǔn)的決定及理由核準(zhǔn)申請(qǐng)的單位，在運(yùn)輸任務(wù)結(jié)束后，書(shū)面報(bào)告運(yùn)輸情況3日內(nèi)報(bào)衛(wèi)生部備案審批陸路運(yùn)輸水路運(yùn)輸民用航空運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)鏡檢形態(tài)學(xué)觀察細(xì)菌的分離培養(yǎng)細(xì)菌的鑒定病毒的分離培養(yǎng)直接涂片鏡檢形態(tài)學(xué)觀察直接涂片染色后鏡檢適用于形態(tài)和染色上具有特征性的病原菌。例如痰中查見(jiàn)抗酸性細(xì)長(zhǎng)桿菌，膿液中發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽(yáng)性葡萄串狀球菌，咽喉假膜中有異染顆粒的棒狀桿菌及霍亂弧菌、艱難梭菌等。優(yōu)點(diǎn)是方便快捷，缺點(diǎn)是適用范圍小。電鏡技術(shù)：可快速診斷病毒，適用于形

18、態(tài)特殊且并病毒量較多的標(biāo)本。缺點(diǎn)是設(shè)備昂貴，對(duì)技術(shù)人員要求高，并需要一定的病毒量。細(xì)菌的分離培養(yǎng)無(wú)菌部位采集的腦脊液、血液等標(biāo)本，可直接接種至營(yíng)養(yǎng)豐富的液體或固體培養(yǎng)基。有正常菌群存在部位所取標(biāo)本（如糞便），應(yīng)接種至選擇或鑒別性培養(yǎng)基。缺點(diǎn)：耗時(shí)較長(zhǎng)（需4872h），過(guò)程繁瑣，優(yōu)點(diǎn)：能獲得病原菌，特異性為100%，是許多細(xì)菌性傳染病實(shí)驗(yàn)室確診的最重要證據(jù)，因此，在暴發(fā)疫情中要求盡可能進(jìn)行病原菌分離來(lái)獲得實(shí)驗(yàn)室確診證據(jù)。 抗生素敏感性檢測(cè)對(duì)分離的病原菌進(jìn)行抗生素敏感性試驗(yàn)?zāi)軌蛑琅R床用藥和制定暴發(fā)疫情中高危人群的預(yù)防服藥控制措施；還能觀察病原菌的耐藥譜變遷，了解局部地區(qū)細(xì)菌耐藥的危害程度，對(duì)細(xì)菌

19、性傳染病的有效控制和減少抗生素濫用具有重要意義。細(xì)菌的鑒定生化鑒定生化代謝特征是鑒定病原菌的重要方法之一。如糖發(fā)酵試驗(yàn)等?，F(xiàn)有多種微量、快速、半自動(dòng)或全自動(dòng)細(xì)菌生化反應(yīng)試劑盒和檢測(cè)儀器，極大地方便了菌株鑒定工作。血清鑒定與分型利用已知的特異抗體的診斷血清可以確定細(xì)菌的種和型。常用方法是玻片凝集實(shí)驗(yàn)，在數(shù)分鐘內(nèi)能可得出結(jié)果。4.、免疫學(xué)檢測(cè)凝集反應(yīng)包括直接凝集反應(yīng)、間接凝集反應(yīng)、間接凝集抑制反應(yīng)和協(xié)同凝集反應(yīng)。沉淀反應(yīng)主要有單免疫擴(kuò)散、雙免疫擴(kuò)散和對(duì)流免疫電泳。免疫標(biāo)記技術(shù)包括免疫熒光技術(shù)、放射免疫測(cè)定和免疫酶技術(shù)，其中免疫酶技術(shù)還包括酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）、夾心法，以及生物素加親和素的

20、ELISA方法。現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用最多的是ELISA方法。6、核酸檢測(cè)核酸診斷主要用于檢測(cè)難以培養(yǎng)的微生物、或目前培養(yǎng)方法不敏感、花費(fèi)高或耗時(shí)太久的情況。優(yōu)點(diǎn)：省時(shí)，靈敏性高。在嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)過(guò)程的條件下，對(duì)于病因診斷有很好的作用。缺點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)過(guò)程控制不嚴(yán)格時(shí)可能產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)條件、經(jīng)驗(yàn)和試劑成本要求高。因此在應(yīng)用時(shí)要考慮對(duì)疫情控制的需要，考慮必要性和可行性。核酸檢測(cè)方法主要有如下幾種：聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）分子雜交技術(shù)（molecular hybridization）基因芯片技術(shù)序列分析具有特異、敏感、快速、簡(jiǎn)便和容易自動(dòng)化等特點(diǎn)。為增加靈敏度和特

21、異度，普通PCR又演化有多種方法，如RT- PCR、PCR-RFLP、套式PCR、多重PCR、實(shí)時(shí)PCR技術(shù)。近來(lái)實(shí)時(shí)PCR技術(shù)用于臨床檢測(cè)得到迅速發(fā)展和普及，可實(shí)時(shí)檢測(cè)到信號(hào)的變化，并且整個(gè)反應(yīng)過(guò)程為密閉，不需電泳檢測(cè)結(jié)果，避免了產(chǎn)物的擴(kuò)散和交叉污染，具有較好應(yīng)用前景。聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）通常在支持膜上進(jìn)行，又稱為核酸印跡雜交。根據(jù)檢測(cè)樣品的不同又被分為DNA印跡雜交和RNA印跡雜交。DNA探針雜交在檢測(cè)沒(méi)有成熟可靠的培養(yǎng)方法的臨床標(biāo)本時(shí)具有突出的優(yōu)點(diǎn)，如HPV、乙肝病毒（HBV）、和EB病毒的檢測(cè)。與傳統(tǒng)鑒定方法相比，針對(duì)莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌和新生隱球菌的檢測(cè)探針具有獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。分子雜交技術(shù)（molecular hybridization）基因芯片技術(shù)核酸檢測(cè)芯片是一塊方形的玻璃，上面鋪了一層肉眼看不見(jiàn)的DNA探針。待測(cè)的樣品基因被切成長(zhǎng)短不一的片斷，用熒光化學(xué)物質(zhì)標(biāo)記，然后作為一種溶液注射到嵌有芯片的膠片上。用裝有激光設(shè)備的儀器來(lái)檢測(cè)，通過(guò)激光光束激發(fā)后會(huì)發(fā)出熒光。熒光的強(qiáng)弱與DNA探針雜交程度有關(guān)，根據(jù)熒光強(qiáng)弱的圖案就可以檢測(cè)目的基因。用于現(xiàn)場(chǎng)診斷有一定應(yīng)用前景。序列分析測(cè)定核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的方法，是目前鑒定細(xì)菌或病毒特征