斑蝥酸鈉治療原發(fā)性肝癌的機(jī)制及臨床應(yīng)用進(jìn)展

1、斑蝥酸鈉治療原發(fā)性肝癌的機(jī)制及臨床應(yīng)用進(jìn)展斑蝥酸鈉是從斑蝥體內(nèi)提取的一種單萜烯類物質(zhì) 斑蝥素的半合成衍生物，其相對(duì)分子質(zhì)量小，易于進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，可較早產(chǎn)生細(xì)胞毒作用，具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用，是一種較為理想的抗癌中藥西制制劑，通過(guò)多種直接機(jī)制和間接機(jī)制起到抗癌作用，同時(shí)具有減輕其他抗癌方式的副作用，減少化療藥物的劑量及費(fèi)用，提高患者生活質(zhì)量等功效。為了更加系統(tǒng)地了解斑蝥酸鈉治療原發(fā)性肝癌的機(jī)制和應(yīng)用效果，筆者就近年來(lái)的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行了整理總結(jié)，現(xiàn)綜述如下?？垢伟┘?xì)胞直接機(jī)制阻滯細(xì)胞周期目前關(guān)于斑蝥酸鈉的抗癌細(xì)胞機(jī)制研究已初具規(guī)模，普遍認(rèn)為斑蝥酸鈉的抗癌細(xì)胞作用主要體現(xiàn)在對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)周期的影響上。 Al

2、biges 等的研究顯示斑蝥酸鈉能夠阻斷癌細(xì)胞生長(zhǎng)周期，并認(rèn)為斑蝥酸鈉中具有競(jìng)爭(zhēng)性攫取癌細(xì)胞生長(zhǎng)必需物的能力。張萌等人將不同濃度的斑蝥酸鈉維生素 B6 注射液作用于人肝癌HepG2 細(xì)胞，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞周期變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)斑蝥酸鈉維生素 B6 可顯著抑制 HepG2 細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，具有顯著的時(shí)間和濃度效應(yīng)， HepG2 細(xì)胞的G0/G1期細(xì)胞比例顯著升高，S期細(xì)胞比例顯著降低。這說(shuō)明斑螫酸鈉維生素 B6 可抑制人肝癌HepG2 細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其凋亡并引發(fā)G0/G1 期阻滯，研究認(rèn)為其機(jī)制可能與斑蝥酸鈉維生素 B6 參與調(diào)控磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B( PI3K/Akt

3、 )通路有關(guān)。 Siegel 等研究了不同濃度斑蝥酸鈉對(duì)肝癌 HepG2 細(xì)胞的干預(yù)效果，結(jié)果顯示肝癌HepG2 細(xì)胞增殖受斑蝥素抑制明顯，用藥后肝癌 HepG2細(xì)胞受阻滯在G2/M期。止匕外，Le等的研究也進(jìn)一步證實(shí)，適當(dāng)濃度斑蝥素干預(yù)后可使肝癌HepG2 細(xì)胞阻滯在細(xì)胞周期的 G2/M 期，顯著增加凋亡細(xì)胞的比例。抑制肝癌細(xì)胞系內(nèi) S100A3 斑蝥酸鈉能夠影響肝癌細(xì)胞的 S100A3信號(hào)通路，從而實(shí)現(xiàn)抗癌作用。孫文藝通過(guò)體外研究斑蝥酸鈉對(duì)兩種肝癌細(xì)胞系（HepG2和Huh7）中S100A3的表達(dá)差異，分析其對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響，發(fā)現(xiàn)肝癌組織中 S100A3 呈高表達(dá)， S100A3 的陽(yáng)

4、性表達(dá)率與肝細(xì)胞癌的分化程度有關(guān)，分化程度越低，陽(yáng)性表達(dá)率越高。同時(shí)發(fā)現(xiàn)斑螫酸鈉可抑制HepG2和Huh7肝癌系田月6系內(nèi)S100A3的表達(dá)，可促進(jìn)HepG2 和 Huh7 肝癌細(xì)胞的凋亡，這說(shuō)明斑蝥酸鈉可能通過(guò)抑制細(xì)胞系內(nèi)S100A3 的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)促凋亡作用。抑制肝癌細(xì)胞ERK1/2蛋白磷酸化施吉吉將不同濃度的斑螫酸鈉維生素B6作用于SMMC-7721細(xì)胞24 h、48 h和72 h后，發(fā)現(xiàn)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721 的增殖和侵襲力均受到抑制，且呈濃度依賴性；斑蝥酸鈉維生素 B6 作用于人肝癌SMMC-7721 細(xì)胞后，細(xì)胞p-ERK1/2 蛋白的表達(dá)受到明顯抑制，且表達(dá)下調(diào)的程度與藥物劑

5、量相關(guān)，但對(duì)ERK1/2蛋白的表達(dá)無(wú)明顯影響。因此認(rèn)為斑螫酸鈉維生素B6可能通過(guò)抑制ERK1/2蛋白磷酸化，對(duì)人肝癌SMMC-7721 細(xì)胞的增殖和侵襲轉(zhuǎn)移發(fā)揮抑制作用。抑制乙酰肝素酶的表達(dá)吳曉慧等應(yīng)用 MTT 法檢測(cè)不同濃度的斑蝥酸鈉維生素 B6 作用于肝癌SMMC-7721 細(xì)胞后的細(xì)胞增殖情況，結(jié)果顯示斑蝥酸鈉維生素 B6 能夠抑制 SMMC-7721 細(xì)胞的增殖，且具有一定的濃度和時(shí)間依賴性。斑蝥酸鈉維生素 B6 作用 48 h 后，肝癌 SMMC-7721 細(xì)胞的凋亡率高于對(duì)照組（ SMMC-7721 細(xì)胞未進(jìn)行任何干預(yù)） ，而侵襲能力低于對(duì)照組。 SMMC-7721 細(xì)胞中 HPA

6、 mRNA 和蛋白的表達(dá)水平低于對(duì)照組，且呈濃度依賴性。因此認(rèn)為斑蝥酸鈉維生素 B6 能夠抑制SMMC-7721 細(xì)胞的增殖和侵襲，可能與抑制乙酰肝素酶（ heparanase ，HPA）的表達(dá)有關(guān)。其他直接機(jī)制 Behrens 等人的研究認(rèn)為，斑蝥酸鈉能夠降低端粒酶濃度，從而抑制肝癌細(xì)胞SMMC-7721 的增殖。杜靜華等人采用 TACE聯(lián)合斑蝥酸鈉維生素 B6 注射液治療肝癌患者，并分別選擇20 例 CHB 患者、健康體檢者作為對(duì)照組，結(jié)果顯示采用TACE聯(lián)合斑螫酸鈉維生素 B6注射液治療后1個(gè)月sFasL sFas水平較治療前顯著升高，治療后 3個(gè)月 sFas及治療后6個(gè)月sFasL、s

7、Fas水平均較治療前顯著降低，這說(shuō)明采用 TACE聯(lián)合斑螫酸鈉維生素 B6注射液治療PLC可通過(guò)調(diào)節(jié)凋亡基因 sFasL、 sFas 的表達(dá)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤生長(zhǎng)?？垢伟┘?xì)胞間接機(jī)制抑制人肝星狀細(xì)胞增殖活化，延緩肝纖維化肝星狀細(xì)胞的活化增殖在肝纖維化形成過(guò)程中發(fā)揮極其重要的作用，而多數(shù)肝癌又是發(fā)生在肝纖維化、肝硬化基礎(chǔ)之上，因此有學(xué)者就斑蝥酸鈉對(duì)肝星狀細(xì)胞活性的影響進(jìn)行了研究。牛麗娟等應(yīng)用斑蝥酸鈉維生素 B6 對(duì)人肝星狀細(xì)胞LX-2進(jìn)行干預(yù)，分別采用 MTT法、熒光定量PCR法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性和I型膠原、田型膠原、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 B 1基因表達(dá)變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)斑螫酸鈉維 生素B6能顯著抑

8、制人肝星狀細(xì)胞 LX-2的增殖活化，I型膠原、m型膠原、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 B 1 mRNA表達(dá)下降。因此認(rèn)為斑螫酸鈉能夠抑制肝星狀細(xì)胞活性，延緩肝臟纖維化進(jìn)程，從而對(duì)預(yù)防肝癌具有一定的作用。提高機(jī)體免疫力國(guó)外學(xué)者就斑蝥酸鈉對(duì)免疫功能的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)應(yīng)用斑蝥酸鈉后患者的 CD3 、 CD4、 CD4/CD8 水平顯著提高，與安慰劑組對(duì)比差異顯著，認(rèn)為斑蝥酸鈉可有效改善肝癌患者的免疫功能。國(guó)內(nèi)學(xué)者以 140 例確診為肝癌晚期的患者作為研究對(duì)象，觀察斑蝥膠囊對(duì)患者免疫機(jī)制的影響，結(jié)果顯示應(yīng)用斑蝥膠囊治療10 天、 30 天后，研究組患者NK細(xì)胞水平、CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD4+/C

9、D8+明顯高于治療前及對(duì)照組， CD8+T 細(xì)胞水平明顯低于治療前及對(duì)照組，表明復(fù)方斑蝥膠囊可有效增強(qiáng)肝癌晚期患者免疫力。抑制腫瘤血管生成動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，斑蝥酸鈉可通過(guò)降低腫瘤細(xì)胞的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)，從而抑制腫瘤血管生成及腫瘤的生長(zhǎng)。徐文會(huì)等通過(guò)應(yīng)用不同濃度的斑蝥酸鈉對(duì)體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞HepG2 進(jìn)行干預(yù)，檢測(cè)在不同濃度和不同作用時(shí)間下斑蝥酸鈉對(duì)細(xì)胞增殖的影響以及VEGF 的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞增殖受到明顯抑制， VEGF的分泌水平一定程度減低，并呈時(shí)間 - 劑量依賴關(guān)系。由此推論抑制腫瘤血管生成是斑蝥酸鈉抑制肝癌生長(zhǎng)的可能作用機(jī)制之一。有體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明：斑蝥酸鈉可顯著抑

10、制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及遷移，這種作用呈時(shí)間、劑量依賴性，且可由 VEGF誘導(dǎo)的JAK1/STAT3通路進(jìn)行介導(dǎo)?？聭训热瞬捎秒S機(jī)對(duì)照研究的方法選擇原發(fā)性肝癌患者120 例，均行碘125粒子植入治療，治療組在此基礎(chǔ)上加用去甲斑蝥酸鈉靜脈滴注 14 d ，對(duì)照組術(shù)后僅常規(guī)對(duì)癥支持治療，術(shù)后30 d、60 d檢測(cè)兩組患者VEGF、復(fù)查CT,發(fā)現(xiàn)兩組病灶均得到控制，治療組控制率優(yōu)于對(duì)照組，血清 VEGF水平均明顯低于對(duì)照組。由此可見斑蝥酸鈉可通過(guò)抑制腫瘤血管生成發(fā)揮抗腫瘤作用。臨床應(yīng)用聯(lián)合一般治療 Goggins 等通過(guò)對(duì)比單用斑蝥酸鈉治療前后患者血清 CA125、 CA199 水平和臨床療效，發(fā)現(xiàn)治

11、療后患者血清 CA125、 CA199水平顯著低于治療前，且安全性較好?？梢妴斡冒唑徕c能夠降低原發(fā)性肝癌患者血清CA125、 CA199 水平，減輕患者癥狀。但也有研究顯示，單獨(dú)應(yīng)用斑蝥酸鈉的效果有限，因?yàn)榘┰钬?fù)荷大，單獨(dú)全身治療較大癌灶血藥濃度無(wú)法達(dá)到抑制或殺滅癌細(xì)胞的濃度。聯(lián)合TACE治療有研究學(xué)者通過(guò)檢索Pubmed、CNKI、萬(wàn)方和VIP等數(shù)據(jù)庫(kù)，納入斑螫酸鈉注射液聯(lián)合TACE治療HCC與TACE治療比較的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，評(píng)價(jià)納入研究質(zhì)量并進(jìn)行Meta 分析，結(jié)果納入7 個(gè)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，共562 例患者。 Meta 分析結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，斑蝥酸鈉注射液聯(lián)合TACE治療能提高HCC

12、治療的有效率RR=1.31, 95%CI（ 1.10， 1.56） ，臨床受益率RR=1.20， 95%C（I 1.04， 1.39） ，改善患者生活質(zhì)量 RR=1.60， 95%C（I 1.26， 2.03） ，并能提高1 年生存率RR=1.57， 95%C（I 1.28， 1.93） 和 2 年生存率RR=2.08， 95%C（I 146，2.97） o由此說(shuō)明斑螫酸鈉注射液聯(lián)合TACE治療HCC優(yōu)于單用TACE治療。Lopez等觀察了在TACE化療基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用斑螫素維生素B6注射液對(duì)患者生存率的影響，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組毒副反應(yīng)發(fā)生率及反應(yīng)程度略高于觀察組，胃腸道反應(yīng)發(fā)生率明顯高于觀察組，在近期

13、療效中，對(duì)照組總體有效率和臨床獲益率均低于觀察組。可見對(duì)不能手術(shù)的中晚期 PHC 患者，在TACE基礎(chǔ)上聯(lián)合使用斑螫酸鈉維生素B6注射液，具有延長(zhǎng)生存時(shí)間，提高遠(yuǎn)期生存率的趨勢(shì)，且能夠降低化療藥物劑量，減少毒副反應(yīng)的作用。3.3 聯(lián)合放療 Nielsen 等對(duì)斑蝥酸鈉聯(lián)合放療的效果進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示放療+斑蝥酸鈉患者的近期療效要顯著優(yōu)于單純放療組( 79.5% VS53.2%， P0.05) 。由此可見在肝癌放療過(guò)程中聯(lián)合使用斑蝥酸鈉注射液能提高病灶局部控制率和患者生活質(zhì)量。陳軍等人以 68 例中晚期原發(fā)性肝癌為研究對(duì)象，對(duì)照組予單純放療，治療組在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用復(fù)方斑蝥膠囊，結(jié)果顯示治

14、療組病灶控制有效率顯著高于對(duì)照組，治療后 1年、 2 年患者生存率均優(yōu)于對(duì)照組；骨髓抑制發(fā)生率顯著低于對(duì)照組。可見放療聯(lián)合復(fù)方斑蝥膠囊治療中晚期原發(fā)性肝癌能提高療效，減輕不良反應(yīng)。陳建軍等通過(guò)選取80 例晚期肝癌患者作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，對(duì)照組在一般對(duì)癥治療上采用斑蝥酸鈉維生素 B6 注射液治療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用放射性碘125 粒子植入病灶，觀察治療前后患者生活質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)觀察組晚期肝癌患者生活質(zhì)量改善的總有效率明顯優(yōu)于對(duì)照組。由此推論晚期肝癌患者進(jìn)行放射性碘125 粒子植入聯(lián)合斑蝥酸鈉維生素 B6 注射液治療效果明顯，值得進(jìn)一步推廣。3.4聯(lián)合全身化療Cheadle

15、等的研究顯示，斑螫酸鈉聯(lián)合 FAP方案進(jìn)行全身化療可有效控制病灶進(jìn)展，且聯(lián)合組在骨髓、肝腎、胃腸道等的毒副反應(yīng)病例減少(P0.05) 。提示在原發(fā)性肝癌化療期間輔助應(yīng)用斑蝥酸鈉可以提高療效，減少毒副反應(yīng)。陳坤燕等以 86 例原發(fā)性肝癌患者作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為觀察組44 例和對(duì)照組 42 例，對(duì)照組按常規(guī)化療方法治療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用復(fù)方斑蝥注射液輔助化療藥物進(jìn)行治療，連續(xù)治療30 d 后，結(jié)果顯示觀察組病灶控制有效率、生存質(zhì)量改善率明顯優(yōu)于對(duì)照組，毒副作用彝生率明顯低于對(duì)照組。由此可見原發(fā)性肝癌在常規(guī)化療基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用復(fù)方斑蝥注射液治療，能夠在確保療效的基礎(chǔ)上，降低其毒副作用，改善患者的生存質(zhì)量，具有重要的臨床價(jià)值。4 小結(jié)綜上可見，斑蝥酸鈉抗腫瘤效果明確，但目前其抗癌的分子生物學(xué)機(jī)制研究大多仍比較膚淺，許多研究結(jié)果提示的機(jī)制多為可能性機(jī)制，沒(méi)有能夠明確指出藥