CYP1A12A基因多態(tài)性與寧夏漢族乳腺癌遺傳易感性研究

1、CYP1A1*2A基因多態(tài)性與寧夏漢族乳腺癌遺傳易感性研究郭衛(wèi)東，饒寧蓮，劉春蓮，趙巍，霍正浩，彭亮，陳銀濤，焦海燕【摘要】目的闡發(fā)寧夏漢族YP1A1*2A基因多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性的干系。要領(lǐng)應(yīng)用聚合酶鏈反響限定性片斷長度多態(tài)性PR-RFLP技能別離對(duì)144例乳腺癌患者和154例比擬的YP1A1*2A基因多態(tài)性舉行測定，闡發(fā)兩組基因型及等位基因頻率的漫衍特點(diǎn)。效果YP1A1*2A等位基因T、在乳腺癌組和比擬組漫衍的差異無明顯性(P0.05)，此中等位基因的乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)比值比R為1.34(95%I：0.971.86)。YP1A1*2A各基因型漫衍兩組間差異也無明顯性(P0.05)，雜合子突

2、變T、純合子突變別離與野生型TT比擬，乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)R別離為1.32(95%I：0.802.18)和1.86(95%I：0.923.78)。結(jié)論YP1A1*2A基因多態(tài)性其突變純合子和雜合子有增長乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)的趨勢，但未到達(dá)明顯程度。YP1A1*2A基因多態(tài)性大概與寧夏漢族人群乳腺癌的發(fā)病有干系?！娟P(guān)鍵詞】乳腺腫瘤StudyfYP1A1*2AGenePlyrphisandSuseptibilitytBreastanerintheHanNatinalityinNingxiaAbstrat:PurpseTinvestigatetheassiatinbeteenYP1A1*2Ageneplyrphis

3、anditssuseptibilitytbreastanerintheHannatinalityinNingxia.ethdsYP1A1*2Ageneplyrphisin144asesithbreastanerand154ntrlseredetetedbyPR-RFLP.Thefrequeniesfgentypeandalleleereanalyzed.ResultsThefrequeniesfalleleTandshednsignifiantdifferenebeteenthetgrups(P0.05).Theddsrati(R)fbreastaneriththealleleas1.34(9

4、5%I:0.971.86).ThereasnsignifiantdiffereneinthegentypeTT,T,beteenthetgrups(P0.05)t.paredtildtypeTT,theRfbreastanerithgentypesfheterzygteTandhzygteere1.32(95%I:0.802.18)and1.86(95%I:0.923.78),respetively.nlusinItispssiblethattheYP1A1*2AgeneplyrphisislinkedithbreastanerintheHannatinalityinNingxia.Hzygt

5、eandheterzygteightinreaseriskfrbreastaner,butithutsignifiantbeteenbreastanerandntrls.Keyrds:breastneplass;ythreP4501A1*2A;geneplyrphis;Ningxia;Hanppulatin如今已確認(rèn)的乳腺癌傷害因素只能說明30%40%的發(fā)病緣故原由1。除家屬性乳腺癌重要與BRA1、BRA2有關(guān)外，散發(fā)性乳腺癌的產(chǎn)生大概與環(huán)境致癌物的代謝有關(guān)。個(gè)別之間的患癌差異性被稱為腫瘤遺傳易感性。研究表白相與相代謝酶基因多態(tài)性與個(gè)別腫瘤易感性差異有關(guān)。YP1A1是體內(nèi)緊張的相代謝解毒酶之一

6、，能代謝活化多種環(huán)境致癌物或致突變物2，外洋報(bào)道表現(xiàn)其遺傳多態(tài)性與乳腺癌的易感性有關(guān)3。本研究對(duì)144例乳腺癌患者和154例比擬的細(xì)胞色素P4501A1YP1A1基因3端*2A多態(tài)性的闡發(fā)，探究YP1A1*2A基因多態(tài)性與寧夏漢族乳腺癌易感性的相干性。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1研究工具于2022年5月2022年8月，網(wǎng)絡(luò)經(jīng)寧夏醫(yī)學(xué)院第一隸屬病院臨床病理查抄確診的女性乳腺癌患者144例，年事2875歲，均勻年事52.27歲；來自該院的康健體檢女性比擬者154例，年事3070歲，均勻年事52.69歲。全部研究工具均無乳腺炎等乳腺疾病史、無放射和化學(xué)藥物治療史、無自身免疫性疾病史；兩組研究工具均為在寧夏地域

7、生存15年以上且無血緣干系的漢族住民。以上研究工具為去除PR擴(kuò)增失敗的樣本。1.2實(shí)行要領(lǐng)抽取靜脈血35l，EDTA抗凝，低滲溶血法分散白細(xì)胞,酚、氯仿法提取基因組DNA，并用乙醇沉淀，溶解于保存液(TAE)中(濃度為0.1g/L)，置-4冰箱保存。PR擴(kuò)增：體系總體積為25l，包羅10pl/l的引物溶液各1.25l，4dNTP(含種種dNTP2.5l/L)溶液2.0l，10Buffer2.0l，25l/Lgl2溶液1l，Tag酶1U購自華美生物工程公司，基因組DNA溶液2.0l，再加去離子水至25l配成反響體系。應(yīng)用Bi-Rad公司的PE2400PR儀舉行基因擴(kuò)增。反響條件為94預(yù)變性5in

8、，循環(huán)周期依次為解鏈9435s，退火6035s，延伸7260s，33個(gè)循環(huán)周期后72再延伸7in。1%瓊脂糖凝膠電泳，查抄聚合酶鏈反響PR擴(kuò)增產(chǎn)物，擴(kuò)增片斷巨細(xì)為343bp。PR擴(kuò)增產(chǎn)物置-4冰箱保存待用。酶切與電泳：PR擴(kuò)增產(chǎn)物10l，sp(Prega)0.5l(10U)，10Buffer2.0l，BSA2.0l，用去離子水補(bǔ)足至20l，37水浴，轉(zhuǎn)搖40轉(zhuǎn)，消化4h。2%瓊脂糖凝膠電泳40in。酶切效果經(jīng)電泳后，于紫外燈下判斷其基因型，YP1A1*2A野生型TT表現(xiàn)為343bp一條帶；雜合突變型T為343bp、200bp、143bp三條帶；純合突變型為200bp、143bp兩條帶。另取TT

9、和的PR擴(kuò)增樣本數(shù)例送測序，查驗(yàn)基因分型的正確性。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰接納SPSS11.5軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)舉行統(tǒng)計(jì)闡發(fā)。測得的基因型、等位基因頻率與Hardy-Einberg平衡的切合程度接納卡方查驗(yàn)。兩組之間等位基因與基因型頻率比力用2查驗(yàn)，P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用R和95%I確定YP1A1*2A多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病的相對(duì)傷害度。2效果2.1酶切和測序效果經(jīng)電泳后，于凝膠成像體系拍照記載，以直接計(jì)數(shù)法別離統(tǒng)計(jì)兩組各基因型的個(gè)數(shù)。經(jīng)聚合酶鏈反響限定性片斷長度多態(tài)性PR-RFLP技能挑選出野生型和純合突變型PR的擴(kuò)增產(chǎn)物各1例，由北京利嘉生物公司測序，見圖1。2.2群體代表性查驗(yàn)兩組研究工具

10、YP1A1*2A基因型漫衍，經(jīng)2查驗(yàn)，P0.05,切合Hardy-Einberg平衡，表白研究工具來自同一群體，具有較好的代表性。2.3YP1A1*2A基因多態(tài)性漫衍環(huán)境3討論YP1A1由YP1A1基因編碼,該基因位于染色體15q2224，含7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子，如今已創(chuàng)造4個(gè)緊張的多態(tài)性位點(diǎn)。此中等位基因YP1A1*2A，位于YP1A1基因3端非翻譯區(qū)，由3801T多聚A位點(diǎn)卑劣約264bp突變所引起。除野生型純合子TT，突變型雜合子T和突變型純合子均具有sp識(shí)別的酶切位點(diǎn)。3種基因型在差異人群中的漫衍表示出較大的差異。在亞洲人群基因型和基因型T頻率別離是2%18%和32%55%，而在歐洲

11、和美洲碧眼兒群兩種基因型的頻率那么別離是05%和9%28%4。環(huán)境致癌物如多環(huán)芳烴(PAHs)5通過胞漿內(nèi)芳烴受體(AhR)介導(dǎo)而高度誘導(dǎo)YP1A1表達(dá)。前致癌物與受體結(jié)合后，AhR與Hsp90解離，在芳烴受體核轉(zhuǎn)運(yùn)卵白(Ahreeptrnuleartranslatr，ARNT)幫助下進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，AhR/ARNT復(fù)合物敏捷結(jié)合于YP1A1的5區(qū)的外源物反響元件(xenvitirespnsiveeleents,XRE)上，通過強(qiáng)有力的轉(zhuǎn)錄激活布局域激活YP1A1基因的表達(dá)。YP1A1可催化多環(huán)芳烴等環(huán)境致癌物的羥基化等反響，所形成的親電子的中心代謝產(chǎn)物可與DNA共價(jià)結(jié)合,形成DNA與致癌物的加

12、合物,引起癌基因與抑癌基因的突變，啟動(dòng)致癌或誘變歷程。本研究效果表現(xiàn)YP1A1*2A多態(tài)位點(diǎn)的基因型漫衍和等位基因頻率漫衍在乳腺癌組與比擬組之間無明顯性差異。但突變等位基因使患乳腺癌的傷害度增長了1.34倍；突變基因型與野生型TT比擬，患乳腺癌的傷害度增長了1.86倍，表白YP1A1*2A多態(tài)性與乳腺癌易感性大概有關(guān)，突變基因型大概通過上述的機(jī)制增長了環(huán)境毒素的毒性作用，為乳腺癌產(chǎn)生的緣故原由之一。如今外洋對(duì)該基因多態(tài)性與乳腺癌的相干性研究較多，但效果不一樣等。自從Taili等31995年報(bào)道了YP1A1*2A多態(tài)位點(diǎn)與美國黑人女性乳腺癌的傷害有明顯關(guān)聯(lián)以來，相繼有近10項(xiàng)研究報(bào)道了該位點(diǎn)與乳

13、腺癌傷害的干系，在早期的研究中傾向于該位點(diǎn)與一些特別人群如黑人女性、絕經(jīng)婦女的乳腺癌發(fā)病關(guān)聯(lián)，R值在29擺布，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但其時(shí)研究樣本較小(n200)。20世紀(jì)90年代末期美國粹者Bailey6和Ishibe7在兩項(xiàng)大型的乳腺癌病例比擬研究中未創(chuàng)造YP1A1*2A與乳腺癌關(guān)聯(lián)。令浩繁學(xué)者狐疑的是，厥后在日本大阪8、德國和奧地利9的2項(xiàng)研究以為YP1A1*2A雜合子和純合子反而對(duì)乳腺癌有庇護(hù)作用，R為0.60.7擺布，而且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)合本研究效果闡發(fā)，提示YP1A1*2A基因多態(tài)性其突變純合子和雜合子有增長乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)的趨勢，但未到達(dá)明顯程度。因此YP1A1*2A多態(tài)性在散發(fā)性乳腺癌產(chǎn)生

14、、生長中的機(jī)制另有待進(jìn)一步研究。只有在普及思量到遺傳異質(zhì)性作用、環(huán)境因素影響以及種族群體差異的底子上進(jìn)一步擴(kuò)大樣本，并結(jié)合別的連鎖闡發(fā)要領(lǐng)，才氣真準(zhǔn)確定YP1A1基因多態(tài)性與乳腺癌產(chǎn)生的內(nèi)涵接洽。【參考文獻(xiàn)】1HendersnI.RiskfatrsfrbreastanerdevelpentJ.aner,1993,71(6Suppl):2127-2140.2reeHK,NtleyL,unshR,etal.etablisftaxifenbyrebinanthuanythrep450enzyes:fratinfthe4-hydrxy,4-hydrxyandN-desethyletablitesand

15、iserizatinftrans-4-hydrxytaxifenJ.DrugetabDisps,2002,30(8):869-874.3TailiE,TrahanJ,henX,etal.AYP1A1restritinfragentlengthplyrphisisassiatedithbreastanerinAfrian-AerianenJ.anerRes,1995,55(17):3757-3758.4assnLF,SharpL,ttnS,etal.ythreP4501A1geneplyrphissandriskfbreastaner:AHuGErevieJ.AJEpideil,2022,161

16、(10):901-915.5AlexandieAK,arhl,arstensenU,etal.YP1A1andGST1plyrphissaffeturinary1-hydrxypyrenelevelsafterPAHexpsureJ.aringenesis,2000,21(4):669-676.6BaileyLR,RdiN,VerrierS,etal.BreastanerandYPIA1,GST1,andGSTT1plyrphiss:evidenefalakfassiatininauasiansandAfrianAeriansJ.anerRes,1998,58(1):65-70.7IshibeN,HankinsnSE,lditzGA,etal.igarettesking,ythreP4501A1plyrphiss,andbreastanerriskintheNursesHealthStudyJ.anerRes,1998,58(4):667-671.8iysh