DNA重組技術(shù)的基本工具doc-泉州市第七中學(xué)首頁(yè)

1、DNA重重組技術(shù)術(shù)的基本本工具1實(shí)施施基因工工程第一一步的一一種方法法是把所所需的基基因從供供體細(xì)胞胞內(nèi)分離離出來(lái)，這要利利用限制制性?xún)?nèi)切切酶。一一種限制制性?xún)?nèi)切切酶能識(shí)識(shí)別DNNA子中中的GAAATTTC順序序，切點(diǎn)點(diǎn)在G和和A之間間，這是是應(yīng)用了了酶的A酶的的高效性性 BB酶的專(zhuān)專(zhuān)一性CC酶的的多樣性性 D酶的催催化活性性受外界界條件影影響2以下下說(shuō)法正正確的是是 A所有的的限制酶酶只能識(shí)識(shí)別同一一種特定定的核苷苷酸序列列B質(zhì)質(zhì)粒是基基因工程程中惟一一的運(yùn)載載體C運(yùn)載體體必須具具備的條條件之一一是：具具有多個(gè)個(gè)限制酶酶切點(diǎn)，以便與與外源基基因連接接D基基因治療療主要是是對(duì)有缺缺陷的細(xì)細(xì)胞進(jìn)

2、行行修復(fù)33.下列列黏性末末端屬于于同一種種限制性性?xún)?nèi)切酶酶切割的的是（ ）ABCD4.下列列四條DDNA分分子，彼彼此間具具有粘性性末端的的一組是是 A B C D5依右右圖有關(guān)關(guān)基因工工程的工工具酶功功能的敘敘述，不不正確的的是 A切斷斷a處的的酶為限限制核酸酸性?xún)?nèi)切切酶 B連接接a處的的酶為DDNA連連接酶C切斷斷b處的的酶為解解旋酶 D切斷斷b處的的為限制制性?xún)?nèi)切切酶6不屬屬于質(zhì)粒粒被選為為基因運(yùn)運(yùn)載體的的理由是是 AA能復(fù)復(fù)制 BB有多多個(gè)限制制酶切點(diǎn)點(diǎn)C具有標(biāo)標(biāo)記基因因 D它是環(huán)環(huán)狀DNNA7.基因因工程技技術(shù)也稱(chēng)稱(chēng)為DNNA重組組技術(shù)，其實(shí)施施必須具具備的四四個(gè)必要要條件是是A.

3、目的的基因 限制性性?xún)?nèi)切酶酶 運(yùn)載體體 體細(xì)細(xì)胞 B.重組組DNAA RNNA聚合合酶 限制制性?xún)?nèi)切切酶 連連接酶C.工具具酶 目的基基因 運(yùn)載體體 受體體細(xì)胞D.模板板DNAA 信使使RNAA 質(zhì)質(zhì)粒 受體體細(xì)胞8下列列關(guān)于各各種酶作作用的敘敘述，不不正確的的是ADNNA連接接酶能使使不同脫脫氧核苷苷酸的磷磷酸與脫脫氧核糖糖連接BRNNA聚合合酶能與與基因的的特定位位點(diǎn)結(jié)合合，催化化遺傳信信息的轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄C一種種DNAA限制酶酶能識(shí)別別多種核核苷酸序序列，切切割出多多種目的的基因D胰蛋蛋白酶能能作用于于離體的的動(dòng)物組組織，使使其分散散成單個(gè)個(gè)細(xì)胞9.下列列關(guān)于限限制酶的的說(shuō)法不不正確的的是A.限

4、制制酶廣泛泛存在于于各種生生物中，尤其在在微生物物細(xì)胞中中分布最最多B.不同同的限制制酶識(shí)別別不同的的核苷酸酸序列C.限制制酶能識(shí)識(shí)別不同同的核苷苷酸序列列，體現(xiàn)現(xiàn)了酶的的專(zhuān)一性性D.限制制酶的作作用只是是用來(lái)提提取目的的基因10有有關(guān)基因因工程的的敘述中中，不正確的的是 A.DNNA連接接酶將黏黏性未端端的堿基基對(duì)連接接起來(lái) BB.限制制性?xún)?nèi)切切酶可用用于目的的基因的的獲得 C.目的的基因須須由運(yùn)載載體導(dǎo)入入受體細(xì)細(xì)胞D.人工合合成目的的基因不不用限制制性?xún)?nèi)切切酶11下下圖所示示限制酶酶切割基基因分子子的過(guò)程程，從圖圖中可知知，該限限制酶能能識(shí)別的的堿基序序列和切切點(diǎn)是ACTTTAAAG，切

5、切點(diǎn)在CC和T之之間 BCTTTAAGG，切點(diǎn)點(diǎn)在G和和A之間間CGAAATTTC，切切點(diǎn)在GG和A之之間 DGAAATTCC，切點(diǎn)點(diǎn)在C和和T之間間 12.下下列關(guān)于于質(zhì)粒的的敘述，正確的的是（）A、質(zhì)粒粒是廣泛泛存在于于細(xì)菌細(xì)細(xì)胞中的的一種顆顆粒狀細(xì)細(xì)胞器B、質(zhì)粒粒是細(xì)菌菌細(xì)胞質(zhì)質(zhì)中能夠夠自主復(fù)復(fù)制的小小型環(huán)狀狀DNAA分子C、質(zhì)粒粒只有在在導(dǎo)入宿宿主細(xì)胞胞后才能能在宿主主細(xì)胞內(nèi)內(nèi)復(fù)制D、細(xì)菌菌質(zhì)粒的的復(fù)制過(guò)過(guò)程一定定是在宿宿主細(xì)胞胞外獨(dú)立立進(jìn)行的的13科科學(xué)家常常選用的的細(xì)菌質(zhì)質(zhì)粒往往往帶有一一個(gè)抗菌菌素抗性性基因，該抗性性基因的的主要作作用是A提高高受體細(xì)細(xì)胞在自自然環(huán)境境中的耐耐熱性

6、 B有利于于檢測(cè)目目的基因因否導(dǎo)入入受體細(xì)細(xì)胞C增加加質(zhì)粒分分子的相相對(duì)分子子質(zhì)量 D便于與與外源基基因連接接14下下圖是基基因工程程主要技技術(shù)環(huán)節(jié)節(jié)的一個(gè)個(gè)基本步步驟，這這一步需需用到的的工具是是ADNNA連接接酶和解解旋酶 BDNAA聚合酶酶和限制制性核酸酸內(nèi)切酶酶C限制制性核酸酸內(nèi)切酶酶和DNNA連接接酶 DDNAA聚合酶酶和RNNA聚合合酶15限限制酶是是一種核核酸切割割酶，可可辨識(shí)并并切割DDNA分分子上特特定的核核苷酸堿堿基序列列。下圖圖為四種種限制酶酶BammHI，EcooRI，Hinnd以及Bggl的辨識(shí)識(shí)序列。箭頭表表示每一一種限制制酶的特特定切割割部位，其中哪哪兩種限限制酶

7、所所切割出出來(lái)的DDNA片片段末端端可以互互補(bǔ)黏合合？其正正確的末末端互補(bǔ)補(bǔ)序列為為何？ A. BBamHHI和EcooRI；末末端互補(bǔ)補(bǔ)序列AATTTB. BBamHHI和Hinnd；末端端互補(bǔ)序序列GATTCC. EEcoRRI和Hinnd；末端端互補(bǔ)序序列AATTTD. BBamHHI和BgllII；末末端互補(bǔ)補(bǔ)序列GATTC16在在DNAA 測(cè)序序工作中中，需要要將某些些限制性性?xún)?nèi)切核核酸酶的的限制位位點(diǎn)在 DNAA上定位位，使其其成為 DNAA 分子子中的物物理參照照點(diǎn)。這這項(xiàng)工作作叫做“限制酶酶圖譜的的構(gòu)建”。假設(shè)設(shè)有以下下一項(xiàng)實(shí)實(shí)驗(yàn)：用用限制酶酶Hinnd，BaamH和二者者的混

8、合合物分別別降解一一個(gè) 44kb（1kbb即1千千個(gè)堿基基對(duì)）大大小的線線性DNNA 分分子，降降解產(chǎn)物物分別進(jìn)進(jìn)行凝膠膠電泳，在電場(chǎng)場(chǎng)的作用用下，降降解產(chǎn)物物分開(kāi)，如下圖圖所示。據(jù)此分析析，這兩兩種限制制性?xún)?nèi)切切核酸酶酶在該DDNA 分子上上的限制制位點(diǎn)數(shù)數(shù)目是以以下哪一一組？AHiind1個(gè)，BammH2個(gè)BHHindd2個(gè)，BammH3個(gè)CHiind2個(gè)，BammH1個(gè)DHHindd和BaamH各有2 個(gè)17.兩兩個(gè)核酸酸片段在在適宜的的條件下下，經(jīng)XX酶的作作用，發(fā)發(fā)生下述述變化，則X酶酶是A.連接接酶 B.RNAA聚合酶酶 C.DDNA聚聚合酶 D.限限制酶18基基因工程程中涉及及多

9、種工工具酶：（1）限限制性?xún)?nèi)內(nèi)切酶是是一類(lèi)能能識(shí)別特特定核苷苷酸序列列并在特特定位點(diǎn)點(diǎn)切割雙雙鏈DNNA的“基因剪剪刀”。被限限制酶識(shí)識(shí)別的序序列往往往正反讀讀順序相相同，斷斷裂的位位置交錯(cuò)錯(cuò)，但又又是圍繞繞著一個(gè)個(gè)軸線（對(duì)稱(chēng)軸軸）對(duì)稱(chēng)稱(chēng)排列，如下左左圖。PPstII和EccoRII都是限限制酶。請(qǐng)補(bǔ)全全下右圖圖中的互互補(bǔ)鏈，畫(huà)出對(duì)對(duì)稱(chēng)軸以以及切割割后的產(chǎn)產(chǎn)物。（2）DDNA連連接酶是是基因操操作的“針線”，其作作用是把把基于能能力而粘粘貼在一一起但存存在的切切口封閉閉，進(jìn)而而才可能能形成有有意義的的。（3）逆逆轉(zhuǎn)錄酶酶也常被被用于基基因工程程，其存存在于（生物）中，催催化以為為模板合合成DN

10、NA的過(guò)過(guò)程。19.利利用基因因工程生生產(chǎn)蛋白白質(zhì)藥物物，經(jīng)歷歷了三個(gè)個(gè)發(fā)展階階段。第第一階段段，將人人的基因因轉(zhuǎn)入細(xì)細(xì)菌細(xì)胞胞；第二二階段，將人的的基因轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)入小鼠鼠等動(dòng)物物的細(xì)胞胞。前兩兩個(gè)階段段都是進(jìn)進(jìn)行細(xì)胞胞培養(yǎng)，提取藥藥物。第第三階段段，將人人的基因因轉(zhuǎn)入活活的動(dòng)物物體，飼飼養(yǎng)這些些動(dòng)物，從乳汁汁或尿液液中提取取藥物。（1）將將人的基基因轉(zhuǎn)入入異種生生物的細(xì)細(xì)胞或個(gè)個(gè)體內(nèi)，能夠產(chǎn)產(chǎn)生藥物物蛋白的的原理是是基因能能控制。（2）人人的基因因能和異異種生物物的基因因拼接在在一起，是因?yàn)闉樗鼈兊牡姆肿佣级季哂须p雙螺旋結(jié)結(jié)構(gòu)，都都是由四四種_構(gòu)成成，基因因中堿基基配對(duì)的的規(guī)律都都是_。（3）人的

11、基基因在異異種生物物細(xì)胞中中表達(dá)成成蛋白質(zhì)質(zhì)時(shí)，需需要經(jīng)過(guò)過(guò)和翻譯譯兩個(gè)步步驟。在在翻譯中中需要的的模板是是，原料料是氨基基酸，直直接能源源是ATTP，搬搬運(yùn)工兼兼裝配工工是，將將氨基酸酸的肽鍵鍵連接成成蛋白質(zhì)質(zhì)的場(chǎng)所所是_，“翻翻譯”可可理解為為將由_個(gè)“字字母”組組成的核核酸“語(yǔ)語(yǔ)言”翻翻譯成由由個(gè)“字字母”組組成的蛋蛋白質(zhì)“語(yǔ)言”，從整整體來(lái)看看在翻譯譯中充任任著“譯譯員”。（4）利用轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因牛牛、羊乳汁汁提取藥藥物工藝藝簡(jiǎn)單，甚至可可直接飲飲用治病病。如果果將藥物物蛋白基基因移到到動(dòng)物如如牛、羊的膀膀胱上皮皮細(xì)胞中中，利用用轉(zhuǎn)基因因牛羊尿尿液生產(chǎn)產(chǎn)提取藥藥物比乳乳汁提取取藥物的的更大優(yōu)優(yōu)越性在在于：處處于不同同發(fā)育時(shí)時(shí)期的動(dòng)動(dòng)物都可可生產(chǎn)藥藥物。20.在在某一特特定的植植物基因因工程中中，用土土壤農(nóng)桿桿菌中的的Ti質(zhì)質(zhì)粒作為為運(yùn)載體體。把目目的基因因重組入入Ti質(zhì)質(zhì)粒上的的T-DDNA片片段中，再將重重組的TT-DNNA插入入植物細(xì)細(xì)胞的染染色體DDNA中中。(1)科科學(xué)家在在進(jìn)行上上述基因因操作時(shí)時(shí)，要用用同一種種分別切切割質(zhì)粒粒和目的的基因，質(zhì)粒的的黏性末末端與目目的基因因DNAA片段的的黏性末末端就可可通過(guò)而而黏合。(2)將將攜帶抗抗除草劑劑基因的的重組TTi質(zhì)粒粒導(dǎo)入二二倍體油油菜細(xì)胞胞，經(jīng)培培養(yǎng)、篩篩選獲得得一株有有抗除草草劑特性性的轉(zhuǎn)基基因植株株。經(jīng)分分析，該