流式細(xì)胞術(shù)分析外周血淋巴細(xì)胞亞群在兒科的臨床應(yīng)用

1、流式細(xì)胞術(shù)分析外周血淋巴細(xì)胞亞群在兒科的臨床應(yīng)用湖南師范大學(xué)附屬湘東醫(yī)院兒科 張衛(wèi)國背景流式細(xì)胞術(shù)檢測T、B、NK淋巴細(xì)胞亞群已較為廣泛的應(yīng)用于兒科臨床許多疾病涉及兒童相應(yīng)免疫功能異常臨床工作中更有效的理解和應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)以評估兒童的免疫狀況，指導(dǎo)疾病的診斷、治療還缺乏系統(tǒng)的學(xué)習(xí)材料尤其是臨床一線的兒科醫(yī)務(wù)工作者對流式細(xì)胞術(shù)的臨床應(yīng)用更有待進(jìn)一步加強(qiáng)認(rèn)識和學(xué)習(xí)。免疫細(xì)胞及發(fā)育SLSCProBCFUMPMNPletRBCPreBPTTTHYRUM Epi.BMCD3+CD8+CD4+TH1TH2CTLIFN-、IL-2IL-4 、5 、6、8、9、10、13BPlasmaIgMBPlasmaIg

2、AIgAIgMBPlasmaIgGIgGBPlasmaIgEIgECD19+CD20 +Th檢測對象原則：免疫功能受損者均應(yīng)常規(guī)評估淋巴細(xì)胞亞群免疫功能包括：免疫防御功能免疫自穩(wěn)和耐受功能免疫監(jiān)視功能免疫防御功能受損易發(fā)生感染反復(fù)感染嚴(yán)重感染多種病原與特殊病原感染常規(guī)治療效果不佳的感染除了宿主免疫防御受損容易造成上述少見感染狀況之外，感染本身也可造成繼發(fā)性免疫防御受損，因此免疫評估應(yīng)注意原發(fā)和繼發(fā)兩方面的問題免疫自穩(wěn)和耐受功能受損過敏性疾?。翰⒎撬羞@類患者都需要進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群的檢測。對于一些嚴(yán)重的過敏患者應(yīng)考慮淋巴細(xì)胞亞群的檢測。嬰幼兒時期全身嚴(yán)重濕疹樣表現(xiàn)。嗜酸性粒細(xì)胞顯著增多血清IgE

3、水平明顯增高（IgE1000IU/L）伴有反復(fù)、嚴(yán)重感染的患者自身免疫和自身炎癥性疾病存在難以控制的自身免疫反應(yīng)情況及出現(xiàn)明顯的自身免疫性淋巴增殖情況合并反復(fù)感染的患者存在自身炎癥反應(yīng)長期免疫抑制藥物、生物制劑使用前后免疫監(jiān)視功能受損主要引起腫瘤血液系統(tǒng)腫瘤：兒童時期最為多見的是血液系統(tǒng)腫瘤其他腫瘤及實(shí)體瘤：其他系統(tǒng)腫瘤患者也應(yīng)酌情進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群的檢測，既可能存在原發(fā)性淋巴細(xì)胞亞群的異常，也可能出現(xiàn)繼發(fā)性改變，尤其是進(jìn)行各種化療時，淋巴細(xì)胞亞群大多會受到影響其他特殊情況血常規(guī)中淋巴細(xì)胞明顯異常家族成員中有免疫缺陷病史長期使用免疫抑制劑者基本數(shù)據(jù)判斷應(yīng)進(jìn)行絕對計(jì)數(shù)和相對數(shù)的判別相對數(shù)的三個基本

4、公式公式a CD3+%+CD19+%+CD16/56+%=100%5%公式b CD4+%+CD8+%=CD3%公式c CD4+/CD8+比值1（1.52，新生兒期可達(dá) 4）。絕對計(jì)數(shù)的判斷絕對數(shù)標(biāo)準(zhǔn)不同儀器和年齡段及人群存在差別。個體間變化也比較大。各個實(shí)驗(yàn)室所采用的標(biāo)準(zhǔn)有所不同。應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的參考范圍進(jìn)行評估。如何判斷淋巴細(xì)胞亞群中哪種或幾種細(xì)胞發(fā)生了變化？在淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果判別中既要注意絕對計(jì)數(shù)的判別，也要判別相對數(shù)也就是百分比的變化。淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生變化可以是一種也可以是幾種同時發(fā)生變化。這些變化可以是絕對計(jì)數(shù)的變化，也可以是相對數(shù)的變化，可以增多也可以減少。根據(jù)基本公式a和b ，一種淋

5、巴細(xì)胞亞群絕對數(shù)的變化在檢測結(jié)果中不會影響到其他亞群絕對數(shù)變化，但可能引起自身相對數(shù)和其他淋巴細(xì)胞亞群相對數(shù)的變化。應(yīng)注意判別。淋巴細(xì)胞亞群變化的特點(diǎn)和臨床價值很多情況使用“可能”、“也可 能”等不確定詞匯，說明外周血 T、B、NK 細(xì)胞絕對計(jì) 數(shù)和相對百分比變化程度較大。這種變化一方面來 自于兒童隨年齡變化的特征，另一方面還受到許多環(huán) 境、發(fā)育和疾病因素的綜合影響。因此評估淋巴細(xì)胞 亞群的變化不應(yīng)是孤立的，應(yīng)同時結(jié)合臨床與其他輔 助檢查結(jié)果，對臨床價值作出判斷。淋巴細(xì)胞亞群的 變化也很少與臨床疾病有一一對應(yīng)的情況，這些變化 與臨床疾病往往是一對多或多對一的。淋巴細(xì)胞亞群變化的特點(diǎn)和臨床價值單

6、一淋巴細(xì)胞亞群變化僅CD3+T 細(xì)胞增多 CD3+T% 增高；根據(jù)基本公式a，CD19+%和CD16/56+%相對降低。例：CD3+T 5 000 ；其他淋巴細(xì)胞無變化；CD3+T 90% ；CD19+ 8%；CD16/56+ 1%。CD3+T細(xì)胞增多又可分為：CD4+細(xì)胞增多為主，CD4+%增高；根據(jù)基本公式b，CD8+%相對降低；CD4+/CD8+比值增高。如生理現(xiàn)象，生命早期CD4+T細(xì)胞相對較多，比例較高；一些細(xì)菌感染可使CD4+T增多，比例增高；CD4+/CD8+ 比值也增高。鋅制劑可能使CD4+ 增多。 CD8+ 細(xì)胞增多為主，CD8+%增高；根據(jù)基本公式b，CD4+%相對降低；C

7、D4+/CD8+ 比值降低。如EBV感染引起的傳染性單核細(xì)胞增多癥；其他許多病毒感染、真菌感染及腫瘤等也可出現(xiàn)此類變化。CD4+ 和CD8+T細(xì)胞均增多，CD4+%，CD8+%無改變；CD4+/CD8+ 比值正常。兩種淋巴細(xì)胞亞群變化CD3+ T 和CD19+ B 細(xì)胞增多 CD3+ T 和CD19+ B%增高；根據(jù)基本公式a，CD16/56+%相對降低。例：CD3+ T 5 000 ；CD19+ B3 000 ；CD3+ T 70%；CD19+ 29%；CD16/56+ 1%。注意：CD3+ T 增多也要參照上述“僅CD3+ T 細(xì)胞增多”時判斷CD4+和/ 或CD8+增多的情況進(jìn)行進(jìn)一步判斷。如部分EBV感染病例CD8+ 反應(yīng)性增高，CD19+ 可因感染增高；化膿性細(xì)菌感染可CD19+ B， CD4+ T增多，因此CD3+ T也增多；CD4+/CD8+ 比值增高。其他化學(xué)品（如苯）也可能引起類似改變。 三種淋巴細(xì)胞亞群變化CD3+ T、CD19+ B 和 CD16/56+ NK 細(xì)胞增多 CD3+ T、CD19+ B% 和 CD16/56+ NK%