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1、第七講 酶學(xué)習(xí)目標(biāo)3. 酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)1.回顧探究實(shí)驗(yàn)的一般思路觀察、發(fā)現(xiàn)問(wèn)題提出假說(shuō)(假設(shè))設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)施實(shí)驗(yàn)方案分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持假說(shuō)則建立某一理論 否定假說(shuō)則放棄假說(shuō)否定假說(shuō)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)再試驗(yàn)四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)2.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案A.實(shí)驗(yàn)變量B.實(shí)驗(yàn)原則思考:實(shí)驗(yàn)過(guò)程中涉及到哪些變量呢?自變量因變量無(wú)關(guān)變量人為改變的變量隨自變量變化而變化的變量除自變量外,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能還會(huì)存在一些可變因素,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響的變量對(duì)照原則單一變量原則平行重復(fù)原則科學(xué)性原則思考:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要遵循哪些原則?在實(shí)驗(yàn)中,自變量可以有多個(gè),但是在對(duì)照實(shí)驗(yàn)組內(nèi),自變量是唯一的 ( )
2、步P45四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.鑒定酶的本質(zhì)例14:某科研小組經(jīng)研究得知X酶存在于人的肝細(xì)胞中,能將糖原分解為還原糖。酶必須保持正常的結(jié)構(gòu)才能發(fā)揮催化作用,請(qǐng)利用這一原理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),探究X酶的化學(xué)本質(zhì)究竟是蛋白質(zhì)還是RNA。簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路,并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論(要求:實(shí)驗(yàn)包含可相互印證的甲、乙兩組)。實(shí)驗(yàn)思路:甲組:將X酶用蛋白酶處理,再與適量糖原溶液混合,適宜條件下保持一段時(shí)間后,檢測(cè)是否有還原糖的產(chǎn)生。乙組:將X酶用RNA酶處理,再與相同且等量糖原溶液混合,在適宜條件下保持相同一段時(shí)間后,檢測(cè)是否有還原糖的產(chǎn)生。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)本設(shè)計(jì)應(yīng)用了酶的什么特性?預(yù)期結(jié)果及結(jié)論:若甲組有還原
3、糖生成,乙組沒(méi)有還原糖生成,則說(shuō)明X酶的化學(xué)本質(zhì)是RNA;若甲組沒(méi)有還原糖生成,乙組有還原糖生成,則說(shuō)明X酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。例14:某科研小組經(jīng)研究得知X酶存在于人的肝細(xì)胞中,能將糖原分解為還原糖。酶必須保持正常的結(jié)構(gòu)才能發(fā)揮催化作用,請(qǐng)利用這一原理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),探究X酶的化學(xué)本質(zhì)究竟是蛋白質(zhì)還是RNA。簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路,并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論(要求:實(shí)驗(yàn)包含可相互印證的甲、乙兩組)。四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.鑒定酶的本質(zhì)四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)變式:(2017全國(guó),29)根據(jù)遺傳物質(zhì)的化學(xué)組成,可將病毒分為RNA病毒和DNA病毒兩種類型。有些病毒對(duì)人類健康會(huì)造成很大危害。通常,一種新病毒出現(xiàn)后需要確
4、定該病毒的類型。假設(shè)在宿主細(xì)胞內(nèi)不發(fā)生堿基之間的相互轉(zhuǎn)換。請(qǐng)利用放射性同位素標(biāo)記的方法,以體外培養(yǎng)的宿主細(xì)胞等為材料,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)以確定一種新病毒的類型。簡(jiǎn)要寫(xiě)出:(1)實(shí)驗(yàn)思路,(2)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論即可。(要求:實(shí)驗(yàn)包含可相互印證的甲、乙兩個(gè)組)(1)實(shí)驗(yàn)思路:甲組:將宿主細(xì)胞培養(yǎng)在含有放射性標(biāo)記的尿嘧啶的培養(yǎng)基中,之后接種新病毒。培養(yǎng)一段時(shí)間后收集病毒并檢測(cè)其放射性。乙組:將宿主細(xì)胞培養(yǎng)在含有放射性標(biāo)記的胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中,之后接種新病毒。培養(yǎng)一段時(shí)間后收集病毒并檢測(cè)其放射性。四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)(2)結(jié)果及結(jié)論:若甲組收集的病毒有放射性,乙組無(wú)放射性,即為RNA病毒;反之為DNA病毒。變
5、式:(2017全國(guó),29)根據(jù)遺傳物質(zhì)的化學(xué)組成,可將病毒分為RNA病毒和DNA病毒兩種類型。有些病毒對(duì)人類健康會(huì)造成很大危害。通常,一種新病毒出現(xiàn)后需要確定該病毒的類型。假設(shè)在宿主細(xì)胞內(nèi)不發(fā)生堿基之間的相互轉(zhuǎn)換。請(qǐng)利用放射性同位素標(biāo)記的方法,以體外培養(yǎng)的宿主細(xì)胞等為材料,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)以確定一種新病毒的類型。簡(jiǎn)要寫(xiě)出:(1)實(shí)驗(yàn)思路,(2)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論即可。(要求:實(shí)驗(yàn)包含可相互印證的甲、乙兩個(gè)組)例15:如圖表示A、B兩種酶用蛋白酶處理后酶活性與處理時(shí)間的關(guān)系,據(jù)圖分析:四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.鑒定酶的本質(zhì)(1)A、B兩種酶的化學(xué)本質(zhì)是否相同?請(qǐng)說(shuō)明理由:不相同。因?yàn)橛玫鞍酌柑幚砗?,B酶被
6、破壞,活性降低,其化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì);而A酶活性不變,其化學(xué)本質(zhì)不是蛋白質(zhì)(2)A酶曲線能否充分說(shuō)明該酶本質(zhì)是RNA ?步P37不能蛋白酶處理過(guò)程中其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使其活性喪失(3)B酶活性改變的原因是(4)還有沒(méi)有其他的方法證明A、B酶的本質(zhì)呢?四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.鑒定酶的本質(zhì)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組材料待測(cè)酶溶液已知蛋白液(等量)試劑分別加入等量的雙縮脲試劑現(xiàn)象是否呈現(xiàn)紫色呈現(xiàn)紫色結(jié)論呈現(xiàn)紫色說(shuō)明該酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),否則該酶的化學(xué)本質(zhì)不是蛋白質(zhì)步P41四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.驗(yàn)證酶的高效性思考:a.請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明酶具有高效性?b.實(shí)驗(yàn)中自變量和因變量分別是什么?c.因變量的檢測(cè)指標(biāo)是
7、什么?無(wú)機(jī)催化劑的種類酶促反應(yīng)的速率觀察指標(biāo):產(chǎn)生氣泡的速度或單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生氣泡的量四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.驗(yàn)證酶的高效性例16:已知2H2O2=2H2OO2,可以通過(guò)觀察反應(yīng)過(guò)程中O2的生成速率(即氣泡從溶液中釋放的速率)來(lái)判斷H2O2分解反應(yīng)的速率。請(qǐng)用所給的實(shí)驗(yàn)材料和用具設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),使其能同時(shí)驗(yàn)證過(guò)氧化氫酶具有催化作用和高效性。要求寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)步驟,預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論,并回答下列問(wèn)題:實(shí)驗(yàn)材料與用具:適宜濃度的H2O2溶液,蒸餾水,3.5%FeCl3溶液,0.01%過(guò)氧化氫酶溶液,恒溫水浴鍋,試管。實(shí)驗(yàn)步驟步P41典例選材、分組、編號(hào)分組施加實(shí)驗(yàn)條件培養(yǎng)、觀察、記錄遵循對(duì)照原則和單一變
8、量原則相同且適宜的環(huán)境四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.驗(yàn)證酶的高效性例16:已知2H2O2=2H2OO2,可以通過(guò)觀察反應(yīng)過(guò)程中O2的生成速率(即氣泡從溶液中釋放的速率)來(lái)判斷H2O2分解反應(yīng)的速率。請(qǐng)用所給的實(shí)驗(yàn)材料和用具設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),使其能同時(shí)驗(yàn)證過(guò)氧化氫酶具有催化作用和高效性。要求寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)步驟,預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論,并回答下列問(wèn)題:實(shí)驗(yàn)材料與用具:適宜濃度的H2O2溶液,蒸餾水,3.5%FeCl3溶液,0.01%過(guò)氧化氫酶溶液,恒溫水浴鍋,試管。實(shí)驗(yàn)步驟步P41典例1)選擇三根試管,分別加入等量且適宜的H2O2溶液,編號(hào)為1、2、3、2)向1、2、3號(hào)試管中分別添加等量且適量的蒸餾水、 3.5
9、%FeCl3溶液、 0.01%過(guò)氧化氫酶溶液3)把3根試管放在相同且適宜的溫度保溫,觀察氣泡生成的快慢四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)3.驗(yàn)證酶的高效性例16:已知2H2O2=2H2OO2,可以通過(guò)觀察反應(yīng)過(guò)程中O2的生成速率(即氣泡從溶液中釋放的速率)來(lái)判斷H2O2分解反應(yīng)的速率。請(qǐng)用所給的實(shí)驗(yàn)材料和用具設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),使其能同時(shí)驗(yàn)證過(guò)氧化氫酶具有催化作用和高效性。要求寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)步驟,預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論,并回答下列問(wèn)題:實(shí)驗(yàn)材料與用具:適宜濃度的H2O2溶液,蒸餾水,3.5%FeCl3溶液,0.01%過(guò)氧化氫酶溶液,恒溫水浴鍋,試管。步P41典例(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)測(cè)及結(jié)論:整個(gè)實(shí)驗(yàn)中,不同處理的試管中O2
10、的釋放速率從快到慢依次是_,由此可得出的結(jié)論是_。3、2、1過(guò)氧化氫酶具有催化作用和高效性(3)如果僅將實(shí)驗(yàn)中的恒溫水浴改為80 ,重做上述實(shí)驗(yàn),O2釋放的速率最快的是_,原因是:2在此溫度下,過(guò)氧化氫酶因高溫變性而失去了活性,而FeCl3仍有催化活性。四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)4.驗(yàn)證酶的專一性思考:若用DNA酶、蔗糖酶、-淀粉酶、淀粉、蔗糖來(lái)驗(yàn)證“酶的專一性”,實(shí)驗(yàn)中自變量和因變量分別是什么?因變量用什么試劑進(jìn)行檢測(cè)是什么?斐林試劑自變量:淀粉、蔗糖;淀粉酶、蔗糖酶因變量:底物的剩余量;產(chǎn)物生成量用碘液可不可以驗(yàn)證酶具有專一性?若可以,實(shí)驗(yàn)該如何設(shè)計(jì)?四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)4.驗(yàn)證酶的專一性例17
11、:乙同學(xué)利用下列相應(yīng)的材料和用具設(shè)計(jì)驗(yàn)證酶具有催化作用和專一性的實(shí)驗(yàn)。備選材料用具:蛋白質(zhì)塊,脂肪塊,牛胰蛋白酶溶液,牛胰淀粉酶溶液,蒸餾水,雙縮脲試劑,試管若干,恒溫水浴鍋,時(shí)鐘等。實(shí)驗(yàn)步驟:取兩支潔凈的相同試管,分別編號(hào)為甲、乙。取5 mL牛胰蛋白酶溶液加到甲試管中,再取等量牛胰淀粉酶溶液加到乙試管中。將兩支試管置于恒溫水浴鍋中,保溫(37 )5分鐘。分別加入等體積等質(zhì)量的蛋白質(zhì)塊,其他條件相同且適宜。一段時(shí)間后,分別加入等量的雙縮脲試劑進(jìn)行檢測(cè),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。上述實(shí)驗(yàn)步驟中,有兩處明顯錯(cuò)誤,請(qǐng)找出這兩處錯(cuò)誤并更正。第一處錯(cuò)誤:_。修訂方案:_。第二處錯(cuò)誤:_。修訂方案:_。缺少對(duì)照組增設(shè)
12、一組加5 mL蒸餾水和等體積、等質(zhì)量蛋白質(zhì)塊的試管不能用雙縮脲試劑檢測(cè)直接觀測(cè)蛋白質(zhì)塊體積的大小步P42 T2(2)1.先指錯(cuò),再改錯(cuò)2.實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)糾錯(cuò)的主要關(guān)注點(diǎn):一看“對(duì)照”(若無(wú)對(duì)照,則參照實(shí)驗(yàn)組補(bǔ)充對(duì)照組;若有對(duì)照,則看對(duì)照是否有標(biāo)記、是否遵循單一變量原則和等量原則)。二看“步驟”(順序是否合理,步驟是否完整)。三看“材料”(材料選擇是否合適,實(shí)驗(yàn)儀器、藥劑的使用是否準(zhǔn)確)。四看“條件”(是否需要攪拌、冷卻等,溫度、光照等條件是否合理)。五看“檢測(cè)”(實(shí)驗(yàn)結(jié)果的檢測(cè)方法、現(xiàn)象等是否合理)。四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)4.驗(yàn)證酶的專一性四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)5.探究酶的最適溫度、PH材料:淀粉/淀粉
13、酶、H2O2 /過(guò)氧化氫酶?思考:1、該實(shí)驗(yàn)中選用哪種材料探究酶的最適溫度?為什么?寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)方案。選淀粉/淀粉酶,受熱會(huì)加速H2O2 分解。自變量:溫度/PH 因變量:酶活性3、用什么來(lái)衡量酶的活性?應(yīng)用碘液還是斐林試劑進(jìn)行檢測(cè)?淀粉是否分解碘液2、該實(shí)驗(yàn)的自變量是什么?因變量是什么?4、請(qǐng)寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)步驟?試管編號(hào)112233實(shí)驗(yàn)步驟一2 mL淀粉酶溶液2 mL可溶性淀粉溶液2 mL淀粉酶溶液2 mL可溶性淀粉溶液2 mL淀粉酶溶液2 mL可溶性淀粉溶液二冰水中水浴5 min60 溫水水浴5 min沸水中水浴5 min三1與1試管內(nèi)液體混合,搖勻2與2試管內(nèi)液體混合,搖勻3與3試管內(nèi)液體混合,搖
14、勻四冰水水浴數(shù)分鐘60 溫水水浴數(shù)分鐘沸水中水浴數(shù)分鐘五取出試管,分別滴加2滴碘液,搖勻,觀察現(xiàn)象四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)5.探究酶的最適溫度、PH能否交換?Why?四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)5.探究酶的最適溫度、PH5、該實(shí)驗(yàn)中選用哪種材料探究酶最適PH?為什么?寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)方案。用什么衡量酶活性?選H2O2 /過(guò)氧化氫酶,淀粉在酸性條件下被分解。氣泡產(chǎn)生的速率6、請(qǐng)寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)步驟?序號(hào)實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容試管1試管2試管31注入等量的過(guò)氧化氫酶溶液2滴2滴2滴2注入等量的不同pH的溶液1 mL蒸餾水1 mL 5%的HCl1 mL 5%的NaOH3注入等量的體積分?jǐn)?shù)為3%的H2O2溶液2 mL2 mL2 mL能否交
15、換?Why?例18: (2016課標(biāo)1卷.3)若除酶外所有試劑均已預(yù)保溫,則在測(cè)定酶活力的試驗(yàn)中,下列操作順序合理的是A.加入酶加入底物加入緩沖液保溫并計(jì)時(shí)一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量B. 加入底物加入酶計(jì)時(shí)加入緩沖液保溫一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量C. 加入緩沖液加入底物加入酶保溫并計(jì)時(shí)一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量D. 加入底物計(jì)時(shí)加入酶加入緩沖液保溫并計(jì)時(shí)一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)5.探究酶的最適溫度、PHC例19:某同學(xué)從溫度為5565 的泉水中篩選出能合成脂肪酶的細(xì)菌,并從該細(xì)菌中提取了脂肪酶。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(3)根據(jù)該細(xì)菌的生活環(huán)境,簡(jiǎn)要寫(xiě)出測(cè)定該酶催化作用最適溫度的實(shí)驗(yàn)思路。課時(shí)P299 T11在一定溫度范圍(5565 )內(nèi)設(shè)置溫度梯度,分別測(cè)定酶活性。若所測(cè)得的數(shù)據(jù)出現(xiàn)峰值,則峰值所對(duì)應(yīng)的溫度即為該酶催化作用的最適溫度。否則,擴(kuò)大溫度范圍,繼續(xù)實(shí)驗(yàn),直到出現(xiàn)峰值。四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)5.探究酶的最適溫度、PH四、酶的相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)5.探究酶的最適溫度、PH變式:某同學(xué)從溫度為5565 的泉水中篩選出能合成脂肪酶的細(xì)菌,并從該細(xì)菌中提取了脂肪酶。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(3)根據(jù)該細(xì)菌的生活環(huán)境,寫(xiě)出測(cè)定該酶催化作用最適溫度的實(shí)驗(yàn)步驟。A.取12根相同的試管,編號(hào)為1、1、2、2、3、3、4、4、5、5、6、6 ,1-6每根試管裝入等體積的脂肪塊;1-6裝入
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