農(nóng)產(chǎn)品行業(yè)生豬養(yǎng)殖專題系列報(bào)告十三：全球非洲豬瘟疫苗研發(fā)綜述~道阻且艱

1、目錄 HYPERLINK l _TOC_250008 全球非洲豬瘟疫苗研發(fā)綜述4 HYPERLINK l _TOC_250007 復(fù)雜的病毒結(jié)構(gòu)是研發(fā)的首要障礙4 HYPERLINK l _TOC_250006 非洲豬瘟病毒分子結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜4 HYPERLINK l _TOC_250005 非洲豬瘟病毒很難誘發(fā)產(chǎn)生中和抗體6 HYPERLINK l _TOC_250004 實(shí)驗(yàn)室診斷成為疫情防控的主要監(jiān)測(cè)手段7 HYPERLINK l _TOC_250003 已有疫苗均難以兼顧安全性和有效性10 HYPERLINK l _TOC_250002 非洲豬瘟對(duì)感染疫情國(guó)家影響深遠(yuǎn)10 HYPERLI

2、NK l _TOC_250001 疫苗研發(fā)的主要技術(shù)路徑均面臨挑戰(zhàn)13 HYPERLINK l _TOC_250000 安全性和有效性成為主要的技術(shù)難點(diǎn)17圖表目錄圖1：非洲豬瘟病毒的基因組結(jié)構(gòu)4圖2：非洲豬瘟病毒的形狀5圖3：非洲豬瘟病毒的分子結(jié)構(gòu)5圖4：非洲豬瘟病毒的復(fù)制周期5圖5：非洲豬瘟病毒在豬肉制品中的存活時(shí)間6圖6：非洲豬瘟病毒在不同條件下的存活時(shí)間6圖7：病毒免疫的主要機(jī)理6圖8：ASFV傳播途徑8圖9：ASFV主要傳播形式8圖10：ASFV發(fā)病機(jī)制和診斷9圖11：20062018年俄羅斯家庭農(nóng)場(chǎng)提供的豬肉量快速減少圖12：20072012年俄羅斯 ASF病毒傳播途徑圖13：近十

3、年俄羅斯工業(yè)化農(nóng)場(chǎng)發(fā)展迅速圖14：20082019年俄羅斯 ASF病毒爆發(fā)點(diǎn)圖示12圖15：2019年 3月俄羅斯 ASF疫情圖示12圖16：20072017年全球非洲豬瘟疫情動(dòng)態(tài)變化（單位：例）13圖17：非洲豬瘟疫情爆發(fā)的臨床描述15圖18：非洲豬瘟疫苗沒(méi)有研發(fā)成功的原因16圖19：滅活疫苗的研發(fā)流程和研發(fā)難點(diǎn)16圖20：全球 21個(gè)非洲豬瘟疫苗均難以兼顧有效性和安全性18圖21：全球關(guān)于非洲豬瘟疫苗研發(fā)的文章非常少18表 ：1株已知全基因組序列非洲豬瘟病毒的特征7表2：非洲豬瘟與其他臨床相似疫病鑒別診斷的要點(diǎn)7表3：ASFV基因及其編碼蛋白在診斷學(xué)中的作用9表4：用于 ASFV抗體檢測(cè)的

4、抗原及其作用9表5：ASF部分發(fā)病國(guó)家采取措施及效果10表6：藍(lán)耳病和非洲豬瘟病毒的對(duì)比12表7：不同類型疫苗的優(yōu)缺點(diǎn)13表8：不同疫苗研發(fā)途徑存在的問(wèn)題14表9：活減毒疫苗類型、疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系和攻毒保護(hù)率14表10：ASF滅活疫苗實(shí)驗(yàn)室研制17表弱毒活疫苗實(shí)驗(yàn)室研制17表12：主要基因工程疫苗的保護(hù)效果比較19表13：ASF基因缺失活疫苗保護(hù)效果總結(jié)19表14：不同非洲豬瘟毒株基因序列19表15：非洲豬瘟疫苗研發(fā)政策推進(jìn)相關(guān)進(jìn)展20全球非洲豬瘟疫苗研發(fā)綜述截至 2018 年 21 的科研單位進(jìn)行參與研發(fā)，預(yù)計(jì)成熟的疫苗產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)上市還需 5 年左右的時(shí)間。復(fù)雜的病毒結(jié)構(gòu)是研發(fā)的首要障礙復(fù)雜的病

5、毒結(jié)構(gòu)是非洲豬瘟疫苗研發(fā)的首要障礙。非洲豬瘟病毒結(jié)構(gòu)復(fù)雜且基因組龐大，擁有自己獨(dú)特的宿主和生態(tài)循環(huán)（野豬軟蜱家豬。從基因組結(jié)構(gòu)來(lái)看，非洲豬瘟病毒是雙鏈 DNA 病毒，基因編碼至少含有 150 非洲豬瘟病毒分子結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟相關(guān)病毒科的唯一成員，也是目前已知的唯一蟲媒 DNA 病毒，該病毒結(jié)構(gòu)復(fù)雜且基（野豬軟蜱家豬非洲豬瘟病毒是雙鏈 DNA 病毒，基因編碼至少含有 150 20 面體對(duì)稱，有囊膜。170190kb（堿基圖 1：非洲豬瘟病毒的基因組結(jié)構(gòu) 1995年首次全基因組測(cè)序（BA71v） 雙鏈DNA，大小分布170190kb 不具有感染性，高度變異 編碼至少150多種蛋白

6、，超過(guò)一半功能未知； 37-nt 發(fā)卡環(huán)結(jié)構(gòu) MGF（MGF100,110,300,360,500/530）可變區(qū)（約40kb）穩(wěn)定區(qū)（大約20kb）可變區(qū)（約20kb）發(fā)卡環(huán)結(jié)構(gòu)ASFV基因組結(jié)構(gòu)示意圖發(fā)卡環(huán)結(jié)構(gòu)資料來(lái)源：哈爾濱獸藥研究所， 圖 2：非洲豬瘟病毒的形狀圖 3：非洲豬瘟病毒的分子結(jié)構(gòu)資料來(lái)源：規(guī)模 e 豬, 資料來(lái)源：哈爾濱獸藥研究所, 圖 4：非洲豬瘟病毒的復(fù)制周期資料來(lái)源：哈爾濱獸藥研究所，長(zhǎng)江證券研究所從非洲豬瘟pH3.911.5 有極強(qiáng)的生產(chǎn)能力。非洲豬瘟病毒具有細(xì)胞內(nèi)病毒顆粒和細(xì)胞外病毒顆粒兩種復(fù)制形圖 4：非洲豬瘟病毒的復(fù)制周期資料來(lái)源：哈爾濱獸藥研究所，長(zhǎng)江證券研

7、究所圖 5：非洲豬瘟病毒在豬肉制品中的存活時(shí)間圖 6：非洲豬瘟病毒在不同條件下的存活時(shí)間資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 非洲豬瘟病毒很難誘發(fā)產(chǎn)生中和抗體B （特異性反應(yīng)有發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟病毒中有任何能誘導(dǎo)中和作用的蛋白。在非洲豬瘟病毒可編碼的蛋白100 圖 7：病毒免疫的主要機(jī)理資料來(lái)源動(dòng)物疫苗學(xué)， ）表 1：11 株已知全基因組序列非洲豬瘟病毒的特征）分離地毒株名稱毒株縮寫GenBank登錄號(hào)基因組大小（bpORFs數(shù)量毒株來(lái)源毒株毒力西班牙BA71VASFV-BA71VNC_001659170101160細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)毒力貝寧共和國(guó)Ben

8、in97ASFV-Benin97AM712239182284156家豬高毒力肯尼亞Kenya 1950ASFV-KenAY261360193886161家豬高毒力馬拉維Malawi Lil-20-11983ASFV-MalAY261361187612160軟蜱高毒力摩庫(kù)茲Mkuzi 1979ASFV-MkuAY261362192714167軟蜱未知葡萄牙OurT88_3ASFV-OurT88/3AM712240171719157軟蜱低毒力南非共和國(guó)Pretorisuskop-96-4ASFV-PRETAY261363190324167軟蜱高毒力馬拉維Tengani62ASFV-TengAY26

9、1364185689162家豬高毒力納米比亞WarthogASFV-WarAY261366186528164野豬未知南非共和國(guó)WarmbathsASFV-WarmAY261365190244167軟蜱未知西班牙E75ASFV-E75FN557520181187166家豬高毒力資料來(lái)源：非洲豬瘟， 表 2：非洲豬瘟與其他臨床相似疫病鑒別診斷的要點(diǎn)臨床癥狀病理變化疾病名稱發(fā)病年齡發(fā)燒（） 皮膚出血發(fā)紺流 產(chǎn) 死胎發(fā)病率（%）死亡率（%）淋巴結(jié)腎心膀 胱 其 他非洲豬瘟（急性）所有年齡40-42高熱末梢發(fā)紺+100100出血、壞死出血點(diǎn)出血出血 結(jié)膜炎豬瘟（強(qiáng)毒株）所有年齡40-42高熱末梢發(fā)紺+1

10、00100出血、壞死出血點(diǎn)出血回盲口扣狀出血潰瘍高致病性豬藍(lán)耳病所有年齡40-42高熱末梢發(fā)紺明顯10080以上出血、壞死出血點(diǎn)出血偶爾 結(jié)膜炎偽狂犬病未斷奶仔豬發(fā)熱+仔豬高發(fā)病豬100壞死壞死灶肝壞死灶豬丹毒（急性）育肥40-42高熱打火印狀疹塊+窩中散發(fā)可治愈充血，腫大斑點(diǎn)狀出血出血胃出血資料來(lái)源：非洲豬瘟， 實(shí)驗(yàn)室診斷成為疫情防控的主要監(jiān)測(cè)手段組 DNA 和血清抗體的檢測(cè)。非洲豬瘟基因組由 170190kb 個(gè)堿基組成，包括 125kb 或健康豬血清可發(fā)生相互作用的蛋白至少有 50 碼蛋白主要有，B646LE183LP54（ELISA（圖 8：ASFV 傳播途徑污染的動(dòng)物尸體或廢棄的食物

11、感染的野豬易感的家豬和野豬感染的家豬污染的車量或設(shè)備資料來(lái)源：IRTA， 圖 9：ASFV 主要傳播形式資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 圖 10：ASFV 發(fā)病機(jī)制和診斷資料來(lái)源：DVM， 表 3：ASFV 基因及其編碼蛋白在診斷學(xué)中的作用基因名稱蛋白名稱蛋白特性與功能分子檢測(cè)中的作用免疫學(xué)檢測(cè)的作用B646LP72（VP73）結(jié)構(gòu)蛋白，主要核衣殼蛋白，在病毒感染晚期表達(dá)，免疫原性好，保守性強(qiáng)PCR/熒光PCR因分型ELISA檢測(cè)抗原、抗體，DIF、IEH檢測(cè)抗原（P72單抗）E183LP54結(jié)構(gòu)蛋白，保守性較強(qiáng)熒光PCR檢測(cè)技術(shù)、基因分型ELISA、IB檢測(cè)抗體CP204LP3

12、0（P32）結(jié)構(gòu)蛋白，病毒感染早期表達(dá)基因分型ELISA、IB檢測(cè)抗體B602LORF9（9RL）分子伴侶基因分型CP530RPP62（P60）P35和P15前體多聚蛋白ELISA檢測(cè)抗體資料來(lái)源：非洲豬瘟， 表 4：用于 ASFV 抗體檢測(cè)的抗原及其作用抗原類別抗原名稱制備方法應(yīng)用方法特點(diǎn)全病毒抗原胞漿可溶性蛋白（CS-P）ASFV細(xì)胞培養(yǎng)物蔗糖密度滴度離心IEOP、RIA、ELISA、IB等感染早期檢測(cè)，首次檢測(cè)到抗體時(shí)間為第7天P72（VP73）同CS-P（20%蔗糖層與60%蔗糖層之間的蛋白）ELISA（間接、阻斷，有商品化試劑盒）感染晚期檢測(cè)，首次檢測(cè)到抗體時(shí)間為第9天P30昆蟲幼蟲

13、）ELISA、IB（有商品化蛋白試劑）CS-PELISA反應(yīng)病毒蛋白抗原大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)、桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)（昆蟲細(xì)胞）產(chǎn)生抗體早，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，線性表位多，適合IB反應(yīng)P54ELISA、IBPP62ELISA敏感性，特異性高，檢測(cè)效價(jià)高于P32（P30）和P54已有疫苗均難以兼顧安全性和有效性滅活而基礎(chǔ)研究的不足以及限制條件眾多是目前非洲豬瘟疫苗研發(fā)的兩大主要障礙。非洲豬瘟對(duì)感染疫情國(guó)家影響深遠(yuǎn)年，西班牙發(fā)生首例非洲豬瘟疫情，政府采取了撲殺、隔離、限制豬只流動(dòng)等多種措施來(lái)進(jìn)行疫情的防控，最終非洲豬瘟病毒到 1982 年才在22 年的時(shí)間。1978 最終該疫情導(dǎo)致馬耳他整個(gè)國(guó)家的生豬全部撲殺。20

14、07 年，俄羅斯發(fā)生首例非洲豬瘟250300 2018 8 2019 3 月底，根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的數(shù)據(jù)，非洲豬瘟導(dǎo)致中國(guó)能繁母豬存欄同比下滑 21%左右，生豬存欄同比下滑 18.8%表 5：ASF 部分發(fā)病國(guó)家采取措施及效果國(guó)家國(guó)家發(fā)生時(shí)間爆發(fā)原因采取措施損失效果西班牙1960與葡萄感染接觸入1、撲殺；2、隔離；3、限制豬只流動(dòng)；4、消毒圈舍；5、先免疫后停止用苗1.12億美元1982年撲滅法國(guó)1964與葡萄感染接觸入1、隔離；2、國(guó)內(nèi)限制豬只流動(dòng)；3、消毒豬舍；4、248萬(wàn)法郎1964年撲滅不免疫；5、不對(duì)感染動(dòng)物治療1971與相鄰家感豬接；1、撲殺；2不免疫撲殺32524頭豬1971年撲滅古

15、巴1980與相鄰家感豬接觸1、撲殺；2不免疫940萬(wàn)美元年撲滅馬耳他1978散養(yǎng)豬觸港殘余飯1、撲殺；2不免；3、毒舍萬(wàn)英撲殺有年撲滅科特迪瓦1996尼日利亞200121、與相鄰國(guó)家感染豬接觸；2、非法販運(yùn)豬1、撲殺；2、隔離；3、消毒圈舍；4、不免疫；5、國(guó)內(nèi)限制豬只流動(dòng)；6、監(jiān)測(cè)1、撲殺；2、隔離；3、限制豬只流動(dòng)；4、消毒圈舍；5、豬只圈養(yǎng)，避免與野豬接觸；6、不免疫1、撲殺；2、隔離；3、限制豬只流動(dòng)；4、消毒圈萬(wàn)美元年撲滅94萬(wàn)美元年撲滅格魯吉亞2007飛機(jī)上殘余飯喂豬舍；5、豬只圈養(yǎng)，避免與野豬接觸；6、不免疫死亡和撲殺50多萬(wàn)頭豬 2008年撲滅俄羅斯20071、與野豬接觸；2、

16、與相鄰區(qū)感染 1、撲殺；2、隔離；3、國(guó)內(nèi)限制豬只流動(dòng)；250300億盧布未撲滅中國(guó)2018豬接觸；3、野豬跨國(guó)界遷徙4、消毒圈舍；5、不免疫；6、監(jiān)測(cè)1、撲殺；2、隔離；3、國(guó)內(nèi)限制豬只流動(dòng)；4、消毒圈舍；5、不免疫；6、監(jiān)測(cè)行業(yè)產(chǎn)能淘汰20%以上 未撲滅資料來(lái)源：非洲豬瘟， 市場(chǎng)份額不斷提升。俄羅斯 2007 萬(wàn)噸，全行業(yè)占比 58%2007 年俄羅斯工業(yè)化農(nóng)場(chǎng)提供的豬肉量從 81 萬(wàn)噸增加到 315 萬(wàn)噸，產(chǎn)量增加接近 4 倍， 20072018 42%85%。綜合來(lái)看，非洲豬瘟核心生物安全防控能力的企業(yè)可以脫穎而出并引領(lǐng)行業(yè)實(shí)現(xiàn)快速發(fā)展。圖 11：20062018 年俄羅斯家庭農(nóng)場(chǎng)提供

17、的豬肉量快速減少14080%11011912011010810370%10060%100907850%807063615740%605530%4020%2010%00%2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018E家庭農(nóng)場(chǎng)提供的豬肉量（萬(wàn)噸）全行業(yè)占比資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 圖 12：20072012 年俄羅斯 ASF 病毒傳播途徑圖 13：近十年俄羅斯工業(yè)化農(nóng)場(chǎng)發(fā)展迅速12040%35%10030%8025%6020%15%4010%205%00%受污染進(jìn)食受未查明相 鄰 農(nóng) 場(chǎng) 野 豬

18、 接觸受感染 養(yǎng)殖人員帶的 車 輛 污 染 的 食材之間的傳播豬買賣 的污染廢物感染數(shù)量（例）占比35031529630027624725022820420016615013093545002006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018家庭農(nóng)場(chǎng)提供的豬肉量（萬(wàn)噸）工業(yè)化農(nóng)場(chǎng)提供的豬肉量（萬(wàn)噸）資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 圖 14：20082019 年俄羅斯 ASF 病毒爆發(fā)點(diǎn)圖示圖 15：2019 年 3 月俄羅斯 ASF

19、疫情圖示家豬野豬2008-2018 ASF家豬野豬受感染區(qū)域資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 回顧中國(guó)生豬養(yǎng)殖行業(yè)的發(fā)展史，疫情一直是行業(yè)發(fā)展過(guò)程中面臨的一大關(guān)鍵問(wèn)題。2006 15%2008年生豬價(jià)格快2019年 321%， 100行業(yè)生豬撲殺數(shù)量只有 安全防控能力的養(yǎng)殖企業(yè)有望逆勢(shì)發(fā)展并最終帶領(lǐng)行業(yè)走出當(dāng)前的疫情防控困境。表 6：藍(lán)耳病和非洲豬瘟病毒的對(duì)比藍(lán)耳病非洲豬瘟病毒介紹影響母豬的生育能力，其仔豬死亡率高非洲豬瘟病毒致死率極高，死亡率可達(dá)100%疫情防控疾病得到控制，豬肉產(chǎn)量在兩年內(nèi)恢復(fù)疫情仍在持續(xù)，短期防控壓力較大爆發(fā)時(shí)間2

20、006年集中爆發(fā)2018年8月爆發(fā)，目前疫情仍在持續(xù)是否有疫苗1年內(nèi)有疫苗研發(fā)上市目前沒(méi)有有效的疫苗能繁母豬下滑幅度15%截至3月底已經(jīng)下滑21%生豬撲殺數(shù)量11.65萬(wàn)頭左右超過(guò)100萬(wàn)頭對(duì)行業(yè)的影響?zhàn)B殖規(guī)?；潭瓤焖偬嵘锇踩揽仡I(lǐng)先的企業(yè)有望崛起資料來(lái)源：非洲豬瘟， 整理圖 16：20072017 年全球非洲豬瘟疫情動(dòng)態(tài)變化（單位：例）資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 疫苗研發(fā)的主要技術(shù)路徑均面臨挑戰(zhàn)ASFV DNA DNA+ASFV ASFV ASFV ASFV ASFV 基因組編碼 167 個(gè)DNA p30 p54 基因克隆到識(shí)別 SLA-細(xì)胞應(yīng)答，但卻檢測(cè)不到中和抗體

21、，也不能對(duì)強(qiáng)毒提供免疫保護(hù)。綜合來(lái)看，DNA 和抗原肽疫苗能夠刺激中和抗體產(chǎn)生以及特異性 T 細(xì)胞應(yīng)答，但只能提供部分保護(hù)。表 7：不同類型疫苗的優(yōu)缺點(diǎn)種類優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)滅活疫苗安全不能提供保護(hù)自然弱毒能提供完全同源保護(hù)有殘留毒力亞單位/DNA疫苗能提供有限保護(hù)無(wú)法阻止發(fā)病和排毒基因缺失疫苗能提供同源和交叉保護(hù)有殘留毒力資料來(lái)源：非洲豬瘟， 8疫苗類型研發(fā)途徑保護(hù)效果存在的問(wèn)題能否研發(fā)成功滅活疫苗不同形式非洲豬瘟病毒，不同的滅活方式以及不同的佐劑可以產(chǎn)生抗體，但是基本沒(méi)有保護(hù)效果缺少細(xì)胞免疫，抗體依賴性增強(qiáng)作用不能天然弱毒疫苗從慢性感染豬、阮蜱中分離的天然弱毒株（NH/P68、OURT8/3）持續(xù)感

22、染和排毒，亞臨床癥狀不能亞單位疫苗利用桿狀病毒表達(dá)的不同蛋白及其組合安全、可鑒別診斷，可誘導(dǎo)抗體，但是幾乎無(wú)保護(hù)作用保護(hù)效果比較差，連續(xù)攻毒之后免疫效果不足不能核酸疫苗利用幾種或者幾十種表達(dá)質(zhì)粒來(lái)進(jìn)行研發(fā)安全、可鑒別診斷，可誘導(dǎo)抗體和CTL反應(yīng)，但是幾乎無(wú)保護(hù)作用保護(hù)效果比較差，連續(xù)攻毒之后免疫效果不足不能病毒活載體疫苗痘苗病毒、腺病毒和偽狂犬病毒載體允許鑒別診斷，可誘導(dǎo)特異性抗體和CTL反應(yīng)，可提供部分保護(hù)需要進(jìn)一步明確反應(yīng)機(jī)理，從而優(yōu)化設(shè)計(jì)，有可能提供完全保護(hù)可以嘗試基因缺失活疫苗基于強(qiáng)毒株（格魯吉亞07株）或天然弱毒株（NH/P68）進(jìn)行研發(fā)完全的同源保護(hù)、完全或部分交叉保護(hù)存在病毒血癥

23、和殘余毒力可以嘗試ASFV 紅細(xì)胞吸附的基因 EP402R9（B19L和 （DP96F360/505、涉及抑制 IFN 應(yīng)答的基因敲除來(lái)使強(qiáng)毒致弱。研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)強(qiáng)毒 ASFVGeorgia07 的 6 個(gè) MGF360/505 基因或?qū)?9GL 進(jìn)行敲除后，免疫動(dòng)物后都能提供對(duì)親本毒株的攻毒保護(hù)。對(duì) MGF360/505 和 9GL 同時(shí)敲除后，雖然安全性提高了，但卻失去了保護(hù)效力， ASFV Georgia07 9GL UK 基因同時(shí)敲除時(shí)則能提供對(duì)親本毒株攻毒的 100%疫苗類型毒株ASFV/重組ASFV生產(chǎn)細(xì)胞系疫苗類型毒株ASFV/重組ASFV生產(chǎn)細(xì)胞系自然弱毒株NH/P68NH/P6

24、8PAM攻毒存活率同源L60100%異源攻毒存活率同源L60100%異源Armenia07100%異源Armenia0733%異源Armenia0733%同源OURT/88/1100%異源UG65100%同源L60100%異源Armenia070%同源L60100%OURT/88/3OURT/88/3BMNH/P68A238LCOS-7基因修飾的自然弱毒株NH/P68NH/P68A224LCOS-7NH/P68EP153RCOS-7異源Armenia0750%同源L60100%異源Armenia070%NH/P68A238LCOS-7（percoll化）異源Armenia0740%NH/P68

25、A276RPAMNH/P68A276RPAM異源Armenia070%OURT/88/3DP71LDP96ROURT/88/3BM同源OURT/88/166%（DP2）Georgia079GLPBM同源Georgia07100%Georgia07MGFPBM同源Georgia07100%Georgia079GLMGFPBM同源Georgia070%基因修飾的強(qiáng)Georgia079GLDP96R/UKPBM同源Georgia07100%毒株Benin 97/1DP148RBM同源Benin 97/1100%Benin 97/1MGFBM同源Benin 97/1100%同源E75100%Ba71B

26、A71EP402RCOS-1同源Georgia07100%Benin97/1資料來(lái)源：Virus Research， 圖 17：非洲豬瘟疫情爆發(fā)的臨床描述NegativeGiltWorsening ofPositiveClinical signsresults tomovementsclinical signsresults toDay 0ASFvto GDUASFvDay 3Day 7Day 10Day 11Day 11臨床癥狀單豬欄內(nèi)將沒(méi)有臨床感染豬的臨后備培育舍證實(shí)非洲豬豬群發(fā)的育成豬癥狀的后備床癥狀在惡運(yùn)輸?shù)暮髠湮敛《敬嬖跓?，輕度死亡率增豬轉(zhuǎn)移到后化并影響更豬群出現(xiàn)了于育肥場(chǎng)腹瀉加3%

27、備培育舍多豬舍臨床癥狀0天3天7天10天11天11天資料來(lái)源：非洲豬瘟， 整理基礎(chǔ)研究的不足以及限制條件眾多是目前非洲豬瘟疫苗研發(fā)的兩大主要障礙。P3 以上生物安全級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室才可以5 年左右的時(shí)間。圖 18：非洲豬瘟疫苗沒(méi)有研發(fā)成功的原因病毒生物學(xué)特性復(fù)雜，毒株特異性基礎(chǔ)研究不足基因組龐大，但超過(guò)一半基因未知活病毒操作受限（P3/P4實(shí)驗(yàn)室）病毒分離、增殖需用原代細(xì)胞限制條件眾多缺乏生產(chǎn)疫苗的細(xì)胞系缺少經(jīng)濟(jì)方便的動(dòng)物模型資料來(lái)源：非洲豬瘟， 圖 19：滅活疫苗的研發(fā)流程和研發(fā)難點(diǎn)疫苗研發(fā)流程難點(diǎn)提取毒株病毒容易擴(kuò)散毒株培育和繁殖找到適合毒株繁殖的生物環(huán)境收獲病毒進(jìn)行滅活滅活疫苗保護(hù)比較差加入

28、佐劑進(jìn)行分裝選取合適的佐劑資料來(lái)源：動(dòng)物疫苗學(xué), 研制者 研制時(shí)間 制苗毒株 研制者 研制時(shí)間 制苗毒株 滅活劑 佐劑免疫方式劑量 免疫程序攻毒毒株免疫保護(hù)果 病毒血癥 脾 BPL弗 氏完全 佐有Stone 1967毒 和 細(xì) 胞 AEL劑、鋁、硅 頸部皮注射5ml 免疫2次間隔周 脾毒 1/6有毒GDA 膠0/6有4/4保護(hù)，空白Forman 1982MAL弗氏完全佐劑肌注2mL免疫1次MAL株有對(duì)照4/4保護(hù)KWH去污劑肌注5mLKWH株0/5保護(hù)有Becker 1987OBG 弗氏完全佐劑肌注5mL免疫1次4/8保護(hù)有BPL白油2/8保護(hù)有11：ASF研制者研制時(shí)間毒株細(xì)胞代次免疫反應(yīng)攻

29、毒毒株攻毒保護(hù)病毒血癥Winston1962HindePK2a755/5Hinde5/5有Malmquist1962HindePK2a900/5Hinde5/5有Hess1965馬拉維株烏干達(dá)株豬白細(xì)胞1100/5馬拉維株烏干達(dá)株5/5有Bannister1967Lisbon豬骨髓組織815/5Lisbon4/4有Stone1968Lisbon60PK2a6022/22Lisbon6022/22有Alexandre2001NH/P68AM612/31ASFV/L6019/19有安全性和有效性成為主要的技術(shù)難點(diǎn)根據(jù)2018年 21個(gè)非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)（細(xì)菌或病毒圖 20：全球 21 個(gè)非洲豬瘟疫苗均難

30、以兼顧有效性和安全性21個(gè)非洲豬瘟疫苗情況簡(jiǎn)介Type of ViccineReferenceProtectionSafetyof by DNA and ASFV immunogenic proteinsJvirol 2018 pii:JVI.02219-17 9NoYesLAV:Protection of pigs with deletion mutant of MGF genes in ASFV Benin bydifferent does and routesVaccine.2018 36:707-715YesNot Testedof ASFV Gene DP148R Reduces P

31、igs and InducesProtection against ChallengeJ Virol.2017 91(24).pii:e01428-17YesNot TestedLAV:BA71CD2:Recombinant Live Attenuated ASFV with Cross-ProtectiveCapabilitiesJ Virol.2017 91(21).pii:e01058-17YesNot TestedLAV:Adapted ASFV strain a LAV protecting against parental Arch Virol.2017(10):3081-3088

32、YesNot TestedSubunit vaccine:Adenovirus-vectored novel ASFV antigens elicit robust immuneresponses in swinePLoS One.2017 Mar;185:20-33Not TestedYesSubunit vaccine:Safety and immunogenicity of Modified Vaccinia Ankara vectoredASFV subunit antigens in swineVet Immunol Immunopathol.2017 Mar;185:20-33No

33、t TestedYesLAV:Naturally attenuated ASFV OURT88/3 protects against virulent homologousfield isolateAntiviral Res.2017 138:1-8YesNoof and UK Genes from ASFV Isolate Increased Safety and Protection against Homologous Challenge.J vorol.2016 91(1).pii:e01760-16YesNot Testedof Prets strain protects again

34、st parentalisolateViruses.2016 8(10).pii:E291YesNot TestedSubunit vaccine:Induction of Immune Responses in Swine by Using a Cocktail ofAdenovirus-Vectored ASFVClin Vaccine Immunol.2016 23(11):888-900Not TestedYesLAV:Deletion of MGF genes in ASFV Bening isolate reduces virulence in domesticpigs and i

35、nduces a protective responseVaccine.2016 34(39):4698-4705YesNot TestedLAV:ASFV Georgia isolate harboring deletions of 9GL and MGF360/505 genes ishighly attenuated but does not confer protection against parental virus challenge.Virus Res. 2016 Aug 2:221:8-14NoYesLAV:ASFV proteins CD2 and Lectine conf

36、er serotype-specific protection. Amodelusing adapted attenuated strains.J Gen Virol.2015 96(Pt 4):866-73YesNot TestedLAV:ASFV Georgia 2007 with a Deletion in 9GL gene Leads to Attenuation andInduces an Effective Protection against Homologous ChallengeJ Virol. 2015 89(16):8556-66YesNoLAV: ASEV Isolat

37、e of and Genes IsAttenuated and Confers Protection Against Challenge with Virulent Parental Virus.J Virol. 2015 89(11):6048-56YesNot TestedLAV: Naturally attenuated ASFV OURT88/3 Induces Protection Against Challengewith Virulent Strains of Genotype I.Transbound Emerg Dis. 2016 63(5):e323-7YesNoSubun

38、it vaccine:Inactivated virus and use of Modern adjuvants do not enhance theefficacy of an ASFV vaccineVaccine.2014 Jun 30;32(31):3879-82NoYesLAV: 9GL and UK genes deletion from attenuated ASFV OUR T88/3 decreases itsability to protect against challengeVirology.2013 Aug 15;443(1):99-105NoNot Testedva

39、ccine: DNA protects against sublethal ASFV.Antiviral Res.2013 98(1):61-5NoYesSubunit vaccine: DNA vaccination partially protects against ASFV lethal challenge.PLoS One.2012;7(9):e40942NoYes資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 疫疫 苗 領(lǐng) 域亞單位疫苗7個(gè)減毒活疫苗14個(gè)是是 否 具 有 保 護(hù) 性具有保護(hù)性12個(gè)不具有保護(hù)性或未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)9疫疫 苗 安 全 性疫苗安全性有保障8個(gè)不具有安全性或未進(jìn)行

40、實(shí)驗(yàn)13總結(jié)：同時(shí)兼顧保護(hù)性和安全性的疫苗一個(gè)都沒(méi)有圖 21：全球關(guān)于非洲豬瘟疫苗研發(fā)的文章非常少3,5003,0002,5002,0001,5001,0005000非洲豬瘟病毒豬藍(lán)耳病毒總論文數(shù)（篇）關(guān)于疫苗論文數(shù)（篇）資料來(lái)源：俄羅斯聯(lián)邦病毒及微生物學(xué)研究中心， 表 12：主要基因工程疫苗的保護(hù)效果比較基因/蛋白類型保護(hù)作用參考文獻(xiàn)p54/E183L+p30/CP204L桿狀病毒表達(dá)部分Gomez et al.,1998p54/E183L+p30/CP204L+p72/B646L桿狀病毒表達(dá)無(wú)Neilan et al.,2004CD2v/pEP402R桿狀病毒表達(dá)部分Ruiz et al.,1996p54/E183L+p30/CP204L核酸疫苗無(wú)Argilaguet et al.,2012CD2v/pEP402R+p54/E183L+p30+CP204L核酸疫苗部分Argilaguet et al.,2011DNA expression library核酸疫苗部分Lecasta et al.,2014ASFV proteins and DNAPrime-Boost部分Revilla,et al.,201647 antigens活病毒載體疫苗無(wú)James et al.,20