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文檔簡(jiǎn)介

1、試述乳糖操縱子的阻遏作用、誘導(dǎo)作用及正調(diào)控。阻遏作用:阻遏基因lacl轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生阻遏物單體,結(jié)合形成同源四體,即阻遏物。它是一個(gè)抗解鏈蛋白,當(dāng)阻遏物與操縱基因O結(jié)合時(shí),阻止DNA形成開放結(jié)構(gòu),從而抑制RNA聚合酶的功能。lacmRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。誘導(dǎo)作用:按照lac操縱子本底水平的表達(dá),每個(gè)細(xì)胞內(nèi)有幾個(gè)分子的-半乳糖苷酶和-半乳糖苷透過酶。當(dāng)加入乳糖,在單個(gè)透過酶分子的作用下,少量乳糖分子進(jìn)入細(xì)胞,又在單個(gè)-半乳糖苷酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導(dǎo)物異構(gòu)乳糖,誘導(dǎo)物通過與阻遏物結(jié)合,改變它的三維構(gòu)象,使之因不能與操縱基因結(jié)合而失活,O區(qū)沒有被阻遏物占據(jù)從而激發(fā)lacmRNA的合成。調(diào)控作用:葡糖糖對(duì)

2、lac操縱子的表達(dá)的抑制是間接的,不是葡萄糖本身而是其降解產(chǎn)物抑制cAMP的合成。cAMP-CAP復(fù)合物與啟動(dòng)子區(qū)的結(jié)合是lacmRNA轉(zhuǎn)錄起始所必須的,因?yàn)樵搹?fù)合物結(jié)合于啟動(dòng)子上游,能使DNA雙螺旋發(fā)生彎曲。有利于形成穩(wěn)定開放型啟動(dòng)子-RNA聚合酶結(jié)構(gòu)。如果將葡萄糖和乳糖同時(shí)加入培養(yǎng)基中,lac操縱子處于阻遏狀態(tài),不能被誘導(dǎo)試述 E.coli的RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)和功能。2個(gè)亞基、一個(gè)亞基、一個(gè)亞基和一個(gè) 亞基組成的核心酶,加上一個(gè) 亞基后則成為聚合酶全酶亞基:核心酶組裝、啟動(dòng)子識(shí)別和亞基:和共同形成RNA合成的催化中心因子:存在多種 因子 ,用于識(shí)別不同的啟動(dòng)子試述原核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)。

3、1.原核只有一個(gè)起始位點(diǎn)。2.原核復(fù)制起始位點(diǎn)可以連續(xù)開始新的復(fù)制,特別是快速繁殖的細(xì)胞。3.原核的 HYPERLINK /s?wd=DNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank DNA聚合酶III復(fù)制時(shí)形成 HYPERLINK /s?wd=%E4%BA%8C%E8%81%9A%E4%BD%93&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank 二聚體復(fù)合物。4.原核的 HYPERLINK /s?wd=DNA%E8%81%9A%E5%

4、90%88%E9%85%B6&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank DNA聚合酶I具有5-3外切 HYPERLINK /s?wd=%E9%85%B6%E6%B4%BB%E6%80%A7&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank 酶活性DNA解旋酶 通過水解ATP 產(chǎn)生能量來解開雙鏈DNA單鏈結(jié)合蛋白 保證被解鏈酶解開的單鏈在復(fù)制完成前保持單鏈結(jié)構(gòu)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶 消除解鏈造成的正超螺旋的堆積,消除阻礙解鏈繼續(xù)進(jìn)行的這種壓力,使復(fù)制得以延伸 真核生物hnRNA必須經(jīng)過哪些加工才能成

5、為成熟的mRNA,以用作蛋白質(zhì)合成的模板?(1)、在5端加帽,5端的一個(gè)核苷酸總是7-甲基鳥核苷三磷酸(m7Gppp)。(2)、3端加尾,多聚腺苷酸尾巴。準(zhǔn)確切割,加poly(A)(3)、RNA的剪接,參與RNA剪接的物質(zhì):snRNA、snRNP(4)、RNA的編輯,編輯(editing)是指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。(5.)、RNA的再編碼,mRNA有時(shí)可以改變?cè)瓉淼木幋a信息,以不同的方式進(jìn)行翻譯(6.)、RNA的化學(xué)修飾,人細(xì)胞內(nèi)rRNA分子上就存在106種甲基化和95種假尿嘧啶產(chǎn)物。真核生物的RNA聚合酶有哪幾種?分布在細(xì)胞的什么位置?各有什么功能?RNA聚

6、合酶:核仁 負(fù)責(zé)三種主要的 rRNAs的轉(zhuǎn)錄:28S、18S、5.8SRNA聚合酶:核質(zhì) 負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄生成 mRNAs及一些snRNAsRNA聚合酶:核質(zhì) 負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄生成 tRNAs、5SrRNA、snRNAs增強(qiáng)子的特點(diǎn)及對(duì)DNA 轉(zhuǎn)錄的作用。增強(qiáng)或促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起始影響模板附近的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致DNA雙螺旋彎折或在反式因子的參與下,以蛋白質(zhì)之間的相互作用為媒介形成增強(qiáng)子與啟動(dòng)子之間的成環(huán)連接,活化基因轉(zhuǎn)錄將模板固定在細(xì)胞核內(nèi)特定位置,有利于DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶改變DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的張力,促進(jìn)RNA聚合酶在DNA鏈上的結(jié)合和滑動(dòng)增強(qiáng)子區(qū)可以作為反式作用因子或RNA聚合酶進(jìn)入染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的入口試述原核

7、生物轉(zhuǎn)錄終止的兩種機(jī)制。 HYPERLINK /s?wd=%E5%8E%9F%E6%A0%B8%E7%94%9F%E7%89%A9&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k 轉(zhuǎn)錄的終止有兩種機(jī)制。一是需要蛋白質(zhì)因子(Rho)的參與,因子能與轉(zhuǎn)錄中的RNA結(jié)合,啟動(dòng)因子ATP酶活性,

8、并向RNA的3端滑動(dòng),劃至RNA附近時(shí), HYPERLINK /s?wd=RNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k RNA聚合酶暫停聚合活動(dòng),使RNA:DNA解鏈分離轉(zhuǎn)錄的RNA釋放種植轉(zhuǎn)錄。另一是在立體系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的,純

9、化的的 HYPERLINK /s?wd=RNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k RNA聚合酶不需要其他蛋白質(zhì)因子的參與,可使轉(zhuǎn)錄終止,即不依賴因子的轉(zhuǎn)錄終止機(jī)制,模板DAN在轉(zhuǎn)錄終止點(diǎn)附近有特殊核苷酸序列可以形成頸環(huán)結(jié)

10、構(gòu)影響 HYPERLINK /s?wd=RNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k RNA聚合酶的構(gòu)象使轉(zhuǎn)錄暫停,DAN與RNA雙鏈不穩(wěn)定分離,轉(zhuǎn)錄終止。指出擺動(dòng)假說中密碼子與反密碼的變偶?jí)A基對(duì)是什么?怎樣進(jìn)行變偶配對(duì)?密

11、碼子與反密碼子的配對(duì)中,第一對(duì)和第二對(duì)堿基嚴(yán)格遵守堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,第三位堿基有一定自由度,可以“擺動(dòng)”,因而使某些tRNA可以識(shí)別一個(gè)以上的密碼子。一個(gè)tRNA究竟能識(shí)別多少個(gè)密碼子是由 HYPERLINK /item/%E5%8F%8D%E5%AF%86%E7%A0%81%E5%AD%90 反密碼子的第一位堿基的性質(zhì)決定的,反密碼子第一位為A或C時(shí)只能識(shí)別1種密碼子,為G或U時(shí)可以識(shí)別2種密碼子,為I 時(shí)可識(shí)別三種密碼子。如果有幾個(gè)密碼子同時(shí)編碼一個(gè)氨基酸,凡是第一和第二位堿基不同的密碼子都對(duì)應(yīng)于各自獨(dú)立的tRNA。什么是RNA編輯,其生物學(xué)意義是什么? RNA編輯是某些RNA,特別是mR

12、NA的一種加工方式,它導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息的改變,因?yàn)榻?jīng)過編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模板DNA 生物學(xué)意義:校正作用、調(diào)控翻譯、擴(kuò)充遺傳信息試述tRNA分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是三葉草形,其主要結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和相關(guān)結(jié)合部位如下:受體臂:其3端最后3個(gè)堿基序列永遠(yuǎn)是CCA,此臂負(fù)責(zé)攜帶特異的氨基酸,稱氨基酸接受位點(diǎn)T C臂:是根據(jù)三個(gè)核苷酸命名的。此臂負(fù)責(zé)核糖體上的rRNA識(shí)別結(jié)合,即核糖體識(shí)別位點(diǎn)反密碼臂:常有5bp的徑區(qū)和7Nt的環(huán)區(qū)組成,負(fù)責(zé)對(duì)密碼子的識(shí)別與配對(duì),即密碼子識(shí)別位點(diǎn)D臂:根據(jù)它含有尿氫二嘧啶命名的,負(fù)責(zé)和氨基酰tRNA聚合酶的結(jié)合,形成氨基酰-tRNA合成酶識(shí)別

13、位點(diǎn)額外環(huán):可變性大,從4Nt到2Nt不等其功能是在tRNA的L型三維結(jié)構(gòu)中負(fù)責(zé)連接兩個(gè)區(qū)域細(xì)胞通過哪幾種修復(fù)系統(tǒng)對(duì)DNA損傷進(jìn)行修復(fù)?1. HYPERLINK /s?wd=DNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9n1DvnWcLrjbYrHD3rH-0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3En1c1rHbYn10z DNA

14、聚合酶的 “校正”修復(fù) 2.光復(fù)活修復(fù) 3.切除修復(fù)4.重組修復(fù) 5.錯(cuò)配修復(fù) 6.SOS修復(fù)簡(jiǎn)述原核生物與真核生物mRNA的區(qū)別。1,原核生物mRNA常以多順反子的形式存在。真核生物mRNA一般以單順反子的形式存在;2,原核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的,真核生物轉(zhuǎn)錄的mRNA前體則需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工,加工為成熟的mRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成信息體后才開始工作;3,原核生物mRNA半壽期很短,一般為幾分鐘,最長(zhǎng)只有數(shù)小時(shí)。真核生物mRNA的半壽期較長(zhǎng),如胚胎中的mRNA可達(dá)數(shù)日;4,原核與真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)也不同,原核生物的mRNA的5端無帽子結(jié)構(gòu),3端沒有或只有較短的polyA結(jié)構(gòu)。

15、試述真核生物DNA水平上的基因表達(dá)調(diào)控。真核生物DNA水平上的基因表達(dá)調(diào)控主要有:基因丟失、基因擴(kuò)增、基因重排、甲基化修飾、染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)狀態(tài)等。簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的合成過程。1,氨基酸的活化與搬運(yùn)氨基酰TRNA的合成,氨基酸的氨基和羧基反應(yīng)性不強(qiáng),需要活化,活化反應(yīng):氨基酸先與氨基酸TRNA合成酶形成中間產(chǎn)物再接到TRNA的氨基臂2,蛋白質(zhì)合成過程中,核蛋白體循環(huán),肽鏈合成的起始,在蛋白質(zhì)起始因子作用下形成起始復(fù)合物70SMRNAFMETTRNAFMET肽鏈的延伸,包括進(jìn)位,轉(zhuǎn)肽,移位,需要延長(zhǎng)因子,GTP等的參與。a對(duì)應(yīng)MRNA上第二CODON的AA-TRNA進(jìn)A位b在肽基轉(zhuǎn)移酶的催化下,P位的fM

16、ET轉(zhuǎn)移到A位的TRNA上,與A位的氨基酸殘基的氨基宿和,P位空TRNA掉下,cA位的二肽酰-TRNA移到P位,空出A位,如此,第三四個(gè)N個(gè)氨基酸的AA-TRNA繼續(xù)與肽鏈合成,4肽鏈合成終止,終止因子識(shí)別終止密碼,促進(jìn)P位上肽鏈水解釋放及TRNA的釋放,離開RRNA。終止因子再促進(jìn)亞基解聚,30S.50S又用于新鏈合成核糖體有哪些活性中心? HYPERLINK /s?wd=%E6%A0%B8%E7%B3%96%E4%BD%93&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvr

17、jm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 核糖體有7個(gè)功能部位:mRNA結(jié)合位點(diǎn):與轉(zhuǎn)錄來的 HYPERLINK /s?wd=%E4%BF%A1%E4%BD%BFRNA&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTj

18、CEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 信使RNA相結(jié)合。P位點(diǎn):肽?;鵷RNA位或者給位,是結(jié)合起始tRNA(就是 HYPERLINK /s?wd=%E8%B5%B7%E5%A7%8B%E5%AF%86%E7%A0%81%E5%AD%90&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpy

19、w9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 起始密碼子對(duì)應(yīng)的 HYPERLINK /s?wd=%E8%BD%AC%E8%BF%90RNA&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 轉(zhuǎn)運(yùn)RNA,通

20、常是甲酰甲硫氨酸)的位點(diǎn)。A位點(diǎn):氨基酰-tRNA(就是活化的 HYPERLINK /s?wd=%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E9%85%B8&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 氨基酸與tRNA的結(jié)合物)結(jié)合位點(diǎn)或受位,結(jié)合新進(jìn)入的 HYPER

21、LINK /s?wd=%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E9%85%B8&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 氨基酸。肽基轉(zhuǎn)移酶活性位點(diǎn):將肽鏈轉(zhuǎn)移到另一個(gè) HYPERLINK /s?wd=%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E9%85%B8&tn

22、=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 氨基酸上面,就是將肽鏈延長(zhǎng)。5S RNA位點(diǎn):與 HYPERLINK /s?wd=%E6%A0%B8%E7%B3%96%E4%BD%93&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHc

23、kPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 核糖體小亞基(5SRNA)的結(jié)合位點(diǎn)。注意: HYPERLINK /s?wd=%E6%A0%B8%E7%B3%96%E4%BD%93&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrj

24、m3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 核糖體其實(shí)是兩個(gè)亞基結(jié)合起來的,小的叫小亞基,大的叫大亞基。通常兩個(gè)亞基是分開的,只有當(dāng)開始翻譯的時(shí)候才互相結(jié)合。EF-Tu位點(diǎn):EF-Tu循環(huán)位點(diǎn),可以理解為翻譯過程中能量的供應(yīng)點(diǎn)。轉(zhuǎn)位因子EF-G結(jié)合位點(diǎn):使得新合成的肽鏈轉(zhuǎn)移到P位點(diǎn)。試述E.coli中trp操縱子的調(diào)控機(jī)制。答:trp操縱子是一種阻遏型操縱子,當(dāng)無色氨酸時(shí),輔阻遏蛋白不能結(jié)合O序列,操縱基因開放,開始轉(zhuǎn)錄;當(dāng)細(xì)

25、胞內(nèi)有較大量的色氨酸時(shí),輔阻遏蛋白與色氨酸結(jié)合后,可結(jié)合O序列,阻遏基因轉(zhuǎn)錄。E.coli的trp操縱子的另一個(gè)調(diào)控方式是衰減調(diào)節(jié)機(jī)制。在色氨酸操縱子第一個(gè)結(jié)構(gòu)基因與啟動(dòng)基因之間存在一弱化區(qū)域,當(dāng)細(xì)胞內(nèi)色氨酸濃度很高時(shí),通過與轉(zhuǎn)錄相耦聯(lián)的翻譯過程,形成一個(gè)弱化子結(jié)構(gòu),使RNA聚合酶從DNA上脫落,導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄終止。 試述反式作用因子的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。反式作用因子的分類:具有識(shí)別啟動(dòng)子元件功能的基本轉(zhuǎn)錄因子能識(shí)別增強(qiáng)子或沉默子的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子不需要通過DNA-蛋白質(zhì)互相作用就參與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的共調(diào)節(jié)因子反式作用因子的兩個(gè)功能結(jié)構(gòu)域:DNA識(shí)別或結(jié)合域螺旋轉(zhuǎn)折螺旋結(jié)構(gòu)、鋅指結(jié)構(gòu)、堿性亮氨酸拉鏈、堿性螺旋環(huán)螺旋

26、結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域:反式作用因子結(jié)構(gòu)中用來同其它蛋白因子的結(jié)合,參與募集啟動(dòng)子結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體,控制基因轉(zhuǎn)錄活化的結(jié)構(gòu)區(qū)域。帶負(fù)電荷的螺旋結(jié)構(gòu)、富含谷氨酰胺的結(jié)構(gòu)、富含脯氨酸的結(jié)構(gòu)何為表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)?EST是Expressed Sequence Tag的縮寫,意思是表達(dá)序列標(biāo)簽,指從一個(gè)隨機(jī)選擇的 HYPERLINK /item/cDNA t /item/EST/_blank cDNA克隆,進(jìn)行5端和3端單一次測(cè)序挑選出來獲得的短的cDNA 部分序列。試述真核生物基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)并談?wù)勀銓?duì)基因概念的了解。一個(gè)完整的真核基因不但包括編碼區(qū)還包括5”和3”端長(zhǎng)度不等特異性序,對(duì)基因表

27、達(dá)過程有著重要作用。1、啟動(dòng)子2、轉(zhuǎn)錄模板3、RNA聚合酶4、RNA聚合酶基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)因子了解:答:基因是產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列。 試述DNA甲基化對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。DNA甲基化(DNA methylation)是最早發(fā)現(xiàn)的修飾途徑之一,大量研究表明,DNA甲基化能引起 HYPERLINK /doc/5868199-6081054.html 染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA HYPERLINK /doc/9311701-9647105.html 構(gòu)象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變,從而控制基因表達(dá)。試述人類基因組計(jì)劃(HGP)的科學(xué)意義。1為了解析人類基

28、因組中攜帶的有關(guān)人類個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育、生老病死的全部遺傳信息,揭開人類生長(zhǎng)發(fā)育的奧秘,追求健康,戰(zhàn)勝疾病,提出人類基因組計(jì)劃2確定人類基因組中2萬2.5萬個(gè)編碼基因的序列及其在基因組中的物理位置,研究基因的產(chǎn)物及功能3了解轉(zhuǎn)錄和剪切調(diào)控元件的結(jié)構(gòu)和位置,從整個(gè)基因組結(jié)構(gòu)的宏觀水平上理解基因轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)4從整體上了解染色體結(jié)構(gòu)5研究空間結(jié)構(gòu)對(duì)基因調(diào)節(jié)的作用6發(fā)現(xiàn)與DNA復(fù)制、重組等有關(guān)序列7研究DNA突變、重排和染色體斷裂等,了解疾病的分子機(jī)制,為疾病診斷、預(yù)防和治療提供理論依據(jù)8確定人類基因組中轉(zhuǎn)座子、逆轉(zhuǎn)座子和病毒殘余序列,研究其周圍序列的性質(zhì),研究個(gè)體間各遺傳元件的多態(tài)性試述乳糖操縱子的阻

29、遏作用、誘導(dǎo)作用及正調(diào)控。阻遏作用:阻遏基因lacl轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生阻遏物單體,結(jié)合形成同源四體,即阻遏物。它是一個(gè)抗解鏈蛋白,當(dāng)阻遏物與操縱基因O結(jié)合時(shí),阻止DNA形成開放結(jié)構(gòu),從而抑制RNA聚合酶的功能。lacmRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。誘導(dǎo)作用:按照lac操縱子本底水平的表達(dá),每個(gè)細(xì)胞內(nèi)有幾個(gè)分子的-半乳糖苷酶和-半乳糖苷透過酶。當(dāng)加入乳糖,在單個(gè)透過酶分子的作用下,少量乳糖分子進(jìn)入細(xì)胞,又在單個(gè)-半乳糖苷酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導(dǎo)物異構(gòu)乳糖,誘導(dǎo)物通過與阻遏物結(jié)合,改變它的三維構(gòu)象,使之因不能與操縱基因結(jié)合而失活,O區(qū)沒有被阻遏物占據(jù)從而激發(fā)lacmRNA的合成。調(diào)控作用:葡糖糖對(duì)lac操縱子的表達(dá)

30、的抑制是間接的,不是葡萄糖本身而是其降解產(chǎn)物抑制cAMP的合成。cAMP-CAP復(fù)合物與啟動(dòng)子區(qū)的結(jié)合是lacmRNA轉(zhuǎn)錄起始所必須的,因?yàn)樵搹?fù)合物結(jié)合于啟動(dòng)子上游,能使DNA雙螺旋發(fā)生彎曲。有利于形成穩(wěn)定開放型啟動(dòng)子-RNA聚合酶結(jié)構(gòu)。如果將葡萄糖和乳糖同時(shí)加入培養(yǎng)基中,lac操縱子處于阻遏狀態(tài),不能被誘導(dǎo)試述 E.coli的RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)和功能。2個(gè)亞基、一個(gè)亞基、一個(gè)亞基和一個(gè) 亞基組成的核心酶,加上一個(gè) 亞基后則成為聚合酶全酶亞基:核心酶組裝、啟動(dòng)子識(shí)別和亞基:和共同形成RNA合成的催化中心因子:存在多種 因子 ,用于識(shí)別不同的啟動(dòng)子試述原核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)。1.原核只有一個(gè)起

31、始位點(diǎn)。2.原核復(fù)制起始位點(diǎn)可以連續(xù)開始新的復(fù)制,特別是快速繁殖的細(xì)胞。3.原核的 HYPERLINK /s?wd=DNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank DNA聚合酶III復(fù)制時(shí)形成 HYPERLINK /s?wd=%E4%BA%8C%E8%81%9A%E4%BD%93&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank 二聚體復(fù)合物。4.原核的 HYPERLINK /s?wd=DNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%

32、85%B6&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank DNA聚合酶I具有5-3外切 HYPERLINK /s?wd=%E9%85%B6%E6%B4%BB%E6%80%A7&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6t/_blank 酶活性DNA解旋酶 通過水解ATP 產(chǎn)生能量來解開雙鏈DNA單鏈結(jié)合蛋白 保證被解鏈酶解開的單鏈在復(fù)制完成前保持單鏈結(jié)構(gòu)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶 消除解鏈造成的正超螺旋的堆積,消除阻礙解鏈繼續(xù)進(jìn)行的這種壓力,使復(fù)制得以延伸 真核生物hnRNA必須經(jīng)過哪些加工才能成為成熟的mRNA,

33、以用作蛋白質(zhì)合成的模板?(1)、在5端加帽,5端的一個(gè)核苷酸總是7-甲基鳥核苷三磷酸(m7Gppp)。(2)、3端加尾,多聚腺苷酸尾巴。準(zhǔn)確切割,加poly(A)(3)、RNA的剪接,參與RNA剪接的物質(zhì):snRNA、snRNP(4)、RNA的編輯,編輯(editing)是指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。(5.)、RNA的再編碼,mRNA有時(shí)可以改變?cè)瓉淼木幋a信息,以不同的方式進(jìn)行翻譯(6.)、RNA的化學(xué)修飾,人細(xì)胞內(nèi)rRNA分子上就存在106種甲基化和95種假尿嘧啶產(chǎn)物。真核生物的RNA聚合酶有哪幾種?分布在細(xì)胞的什么位置?各有什么功能?RNA聚合酶:核仁 負(fù)責(zé)三

34、種主要的 rRNAs的轉(zhuǎn)錄:28S、18S、5.8SRNA聚合酶:核質(zhì) 負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄生成 mRNAs及一些snRNAsRNA聚合酶:核質(zhì) 負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄生成 tRNAs、5SrRNA、snRNAs增強(qiáng)子的特點(diǎn)及對(duì)DNA 轉(zhuǎn)錄的作用。增強(qiáng)或促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起始影響模板附近的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致DNA雙螺旋彎折或在反式因子的參與下,以蛋白質(zhì)之間的相互作用為媒介形成增強(qiáng)子與啟動(dòng)子之間的成環(huán)連接,活化基因轉(zhuǎn)錄將模板固定在細(xì)胞核內(nèi)特定位置,有利于DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶改變DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的張力,促進(jìn)RNA聚合酶在DNA鏈上的結(jié)合和滑動(dòng)增強(qiáng)子區(qū)可以作為反式作用因子或RNA聚合酶進(jìn)入染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的入口試述原核生物轉(zhuǎn)錄終止的兩種

35、機(jī)制。 HYPERLINK /s?wd=%E5%8E%9F%E6%A0%B8%E7%94%9F%E7%89%A9&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k 轉(zhuǎn)錄的終止有兩種機(jī)制。一是需要蛋白質(zhì)因子(Rho)的參與,因子能與轉(zhuǎn)錄中的RNA結(jié)合,啟動(dòng)因子ATP酶活性,并向RNA的3端滑

36、動(dòng),劃至RNA附近時(shí), HYPERLINK /s?wd=RNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k RNA聚合酶暫停聚合活動(dòng),使RNA:DNA解鏈分離轉(zhuǎn)錄的RNA釋放種植轉(zhuǎn)錄。另一是在立體系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的,純化的的 HYPER

37、LINK /s?wd=RNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k RNA聚合酶不需要其他蛋白質(zhì)因子的參與,可使轉(zhuǎn)錄終止,即不依賴因子的轉(zhuǎn)錄終止機(jī)制,模板DAN在轉(zhuǎn)錄終止點(diǎn)附近有特殊核苷酸序列可以形成頸環(huán)結(jié)構(gòu)影響 HYPER

38、LINK /s?wd=RNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9P1mYmhuhmvDkPjbYnH7B0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EnHn1nHnknH0k RNA聚合酶的構(gòu)象使轉(zhuǎn)錄暫停,DAN與RNA雙鏈不穩(wěn)定分離,轉(zhuǎn)錄終止。指出擺動(dòng)假說中密碼子與反密碼的變偶?jí)A基對(duì)是什么?怎樣進(jìn)行變偶配對(duì)?密碼子與反密碼子的配

39、對(duì)中,第一對(duì)和第二對(duì)堿基嚴(yán)格遵守堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,第三位堿基有一定自由度,可以“擺動(dòng)”,因而使某些tRNA可以識(shí)別一個(gè)以上的密碼子。一個(gè)tRNA究竟能識(shí)別多少個(gè)密碼子是由 HYPERLINK /item/%E5%8F%8D%E5%AF%86%E7%A0%81%E5%AD%90 反密碼子的第一位堿基的性質(zhì)決定的,反密碼子第一位為A或C時(shí)只能識(shí)別1種密碼子,為G或U時(shí)可以識(shí)別2種密碼子,為I 時(shí)可識(shí)別三種密碼子。如果有幾個(gè)密碼子同時(shí)編碼一個(gè)氨基酸,凡是第一和第二位堿基不同的密碼子都對(duì)應(yīng)于各自獨(dú)立的tRNA。什么是RNA編輯,其生物學(xué)意義是什么? RNA編輯是某些RNA,特別是mRNA的一種加工方式

40、,它導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息的改變,因?yàn)榻?jīng)過編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模板DNA 生物學(xué)意義:校正作用、調(diào)控翻譯、擴(kuò)充遺傳信息試述tRNA分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是三葉草形,其主要結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和相關(guān)結(jié)合部位如下:受體臂:其3端最后3個(gè)堿基序列永遠(yuǎn)是CCA,此臂負(fù)責(zé)攜帶特異的氨基酸,稱氨基酸接受位點(diǎn)T C臂:是根據(jù)三個(gè)核苷酸命名的。此臂負(fù)責(zé)核糖體上的rRNA識(shí)別結(jié)合,即核糖體識(shí)別位點(diǎn)反密碼臂:常有5bp的徑區(qū)和7Nt的環(huán)區(qū)組成,負(fù)責(zé)對(duì)密碼子的識(shí)別與配對(duì),即密碼子識(shí)別位點(diǎn)D臂:根據(jù)它含有尿氫二嘧啶命名的,負(fù)責(zé)和氨基酰tRNA聚合酶的結(jié)合,形成氨基酰-tRNA合成酶識(shí)別位點(diǎn)額外環(huán):可變性

41、大,從4Nt到2Nt不等其功能是在tRNA的L型三維結(jié)構(gòu)中負(fù)責(zé)連接兩個(gè)區(qū)域細(xì)胞通過哪幾種修復(fù)系統(tǒng)對(duì)DNA損傷進(jìn)行修復(fù)?1. HYPERLINK /s?wd=DNA%E8%81%9A%E5%90%88%E9%85%B6&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1d9n1DvnWcLrjbYrHD3rH-0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3En1c1rHbYn10z DNA聚合酶的 “校正”

42、修復(fù) 2.光復(fù)活修復(fù) 3.切除修復(fù)4.重組修復(fù) 5.錯(cuò)配修復(fù) 6.SOS修復(fù)簡(jiǎn)述原核生物與真核生物mRNA的區(qū)別。1,原核生物mRNA常以多順反子的形式存在。真核生物mRNA一般以單順反子的形式存在;2,原核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的,真核生物轉(zhuǎn)錄的mRNA前體則需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工,加工為成熟的mRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成信息體后才開始工作;3,原核生物mRNA半壽期很短,一般為幾分鐘,最長(zhǎng)只有數(shù)小時(shí)。真核生物mRNA的半壽期較長(zhǎng),如胚胎中的mRNA可達(dá)數(shù)日;4,原核與真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)也不同,原核生物的mRNA的5端無帽子結(jié)構(gòu),3端沒有或只有較短的polyA結(jié)構(gòu)。試述真核生物DNA

43、水平上的基因表達(dá)調(diào)控。真核生物DNA水平上的基因表達(dá)調(diào)控主要有:基因丟失、基因擴(kuò)增、基因重排、甲基化修飾、染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)狀態(tài)等。簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的合成過程。1,氨基酸的活化與搬運(yùn)氨基酰TRNA的合成,氨基酸的氨基和羧基反應(yīng)性不強(qiáng),需要活化,活化反應(yīng):氨基酸先與氨基酸TRNA合成酶形成中間產(chǎn)物再接到TRNA的氨基臂2,蛋白質(zhì)合成過程中,核蛋白體循環(huán),肽鏈合成的起始,在蛋白質(zhì)起始因子作用下形成起始復(fù)合物70SMRNAFMETTRNAFMET肽鏈的延伸,包括進(jìn)位,轉(zhuǎn)肽,移位,需要延長(zhǎng)因子,GTP等的參與。a對(duì)應(yīng)MRNA上第二CODON的AA-TRNA進(jìn)A位b在肽基轉(zhuǎn)移酶的催化下,P位的fMET轉(zhuǎn)移到A位的T

44、RNA上,與A位的氨基酸殘基的氨基宿和,P位空TRNA掉下,cA位的二肽酰-TRNA移到P位,空出A位,如此,第三四個(gè)N個(gè)氨基酸的AA-TRNA繼續(xù)與肽鏈合成,4肽鏈合成終止,終止因子識(shí)別終止密碼,促進(jìn)P位上肽鏈水解釋放及TRNA的釋放,離開RRNA。終止因子再促進(jìn)亞基解聚,30S.50S又用于新鏈合成核糖體有哪些活性中心? HYPERLINK /s?wd=%E6%A0%B8%E7%B3%96%E4%BD%93&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPf

45、KWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 核糖體有7個(gè)功能部位:mRNA結(jié)合位點(diǎn):與轉(zhuǎn)錄來的 HYPERLINK /s?wd=%E4%BF%A1%E4%BD%BFRNA&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw

46、9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 信使RNA相結(jié)合。P位點(diǎn):肽?;鵷RNA位或者給位,是結(jié)合起始tRNA(就是 HYPERLINK /s?wd=%E8%B5%B7%E5%A7%8B%E5%AF%86%E7%A0%81%E5%AD%90&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-

47、bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 起始密碼子對(duì)應(yīng)的 HYPERLINK /s?wd=%E8%BD%AC%E8%BF%90RNA&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 轉(zhuǎn)運(yùn)RNA,通常是甲酰甲硫氨酸)

48、的位點(diǎn)。A位點(diǎn):氨基酰-tRNA(就是活化的 HYPERLINK /s?wd=%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E9%85%B8&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 氨基酸與tRNA的結(jié)合物)結(jié)合位點(diǎn)或受位,結(jié)合新進(jìn)入的 HYPERLINK /s?w

49、d=%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E9%85%B8&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 氨基酸。肽基轉(zhuǎn)移酶活性位點(diǎn):將肽鏈轉(zhuǎn)移到另一個(gè) HYPERLINK /s?wd=%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E9%85%B8&tn=44039180

50、_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYETgN-TLwGUv3EPHmzPjT1nW03P1T3rH0kPHmY 氨基酸上面,就是將肽鏈延長(zhǎng)。5S RNA位點(diǎn):與 HYPERLINK /s?wd=%E6%A0%B8%E7%B3%96%E4%BD%93&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y4n1-Ph7bnjT3rju-myfd0ZwV5Hcvrjm3rH6sPfKWUMw85HfYnjn4nH6sgvPsT6KdThsqpZwYTjCEQLGCpyw9Uz4Bmy-bIi4WUvYET

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