基因工程總復(fù)習(xí)課件

1、總復(fù)習(xí)總復(fù)習(xí)基因工程1 基因工程概論2 天然DNA的制備3 分子克隆工具酶4 分子克隆載體 5 表達(dá)載體 6 PCR技術(shù)及其應(yīng)用 7 目的基因的制備8 基因克隆的篩選策略 10 細(xì)菌基因工程 11 酵母基因工程 12 植物基因工程 13 動物基因工程 14 基因工程的安全9 轉(zhuǎn)基因及其表達(dá) 基因工程1 基因工程概論2 天然DNA的制備3 分子克隆工1 名詞解釋 基因工程、遺傳工程、DNA重組、基因克隆、基因操作 2 簡要回答下列問題 1） 簡述基因工程研究發(fā)展歷史。 2） 簡述基因工程研究的主要內(nèi)容。 3） 說明基因工程的理論基石和技術(shù)基礎(chǔ)。 4） 簡述基因工程的主要應(yīng)用領(lǐng)域。 5） 用5個詞

2、描述基因工程的過程。第1章 概論1 名詞解釋第1章 概論 1 名詞解釋 DNA變性；DNA復(fù)性；Tm值 2 簡要回答下列問題 1） 舉例說明濃縮DNA或RNA的方法。 2） 簡述DNA與基因工程有關(guān)的主要特性。 3） 簡要說明天然DNA的主要提取過程。第2章 天然DNA的制備 1 名詞解釋第2章 天然DNA的制備 1 名詞解釋 限制性核酸內(nèi)切酶；同裂酶；同尾酶；限制性核酸內(nèi)切酶星活性；限制性圖譜；平末端；粘性末端；銜接頭；連接子 2 簡要回答下列問題 1）基因工程中常用的酶有哪些？各有何的用途？ 2）何謂定向克??？如何進(jìn)行？ 3）說明限制性核酸內(nèi)切酶產(chǎn)生Star活性的原因及其克服措施。 第4章

3、 分子克隆工具酶 1 名詞解釋第4章 分子克隆工具酶 1 名詞解釋 載體，克隆載體，表達(dá)載體, 質(zhì)粒，cccDNA(scDNA)，松弛型質(zhì)粒，嚴(yán)謹(jǐn)性質(zhì)粒，附加體， 選擇標(biāo)記，轉(zhuǎn)化子，重組子，cosmid，噬菌粒載體，YAC，PAC，BAC，MAC，基因打靶，定位整合平臺，定位整合克隆載體，穿梭載體，結(jié)合型質(zhì)粒，非結(jié)合型質(zhì)粒，遷移作用，顯性質(zhì)粒，隱蔽質(zhì)粒，組織特異性表達(dá)載體，分泌型表達(dá)載體，誘導(dǎo)型表達(dá)載體，報告載體，反義表達(dá)載體，RNAi2 簡要回答下列問題 1）按來源可將基因克隆載體分為哪幾類？并說明各自的主要特點(diǎn)。 2）作為克隆載體必須具備的主要條件是什么？ 3）作為表達(dá)載體必須具備的主要條

4、件是什么？ 4）如何鑒定轉(zhuǎn)化子、重組子和轉(zhuǎn)基因生物？第4、5章 分子克隆載體 1 名詞解釋第4、5章 分子克隆載體 1 名詞解釋 PCR, RT-PCR, 定量PCE, 反向PCR, RACE, TAIL-PCR, 巢式PCR 2 簡要回答問題 特殊PCR主要有那些? 各自的原理是什么? 如何設(shè)計PCR引物?3 分析討論 試述PCR反應(yīng)的原理與應(yīng)用. 第6章 PCR技術(shù)及其應(yīng)用 1 名詞解釋第6章 PCR技術(shù)及其應(yīng)用 1 名詞解釋 SSH、RDA、DDRT-PCR、ESTs、酵母雙雜交、cDNA文庫、基因組文庫2 簡要回答問題 1）簡述cDNA文庫構(gòu)建的原理與步驟 2）簡述基因組文庫構(gòu)建的原理

5、與步驟 3）簡述酵母雙雜交的原理與步驟3 分析討論 試述分離和篩選目的基因的主要方法和原理. 第7、8章 目的基因制備與篩選策略1 名詞解釋第7、8章 目的基因制備與篩選策略一、名詞解釋 受體細(xì)胞、感受態(tài)細(xì)胞、轉(zhuǎn)化子、重組子、-互補(bǔ)、目的重組子、轉(zhuǎn)基因沉默、啟動子、增強(qiáng)子、終止子、絕緣子、反義子、SD序列、外顯子、內(nèi)含子、融合蛋白、表達(dá)標(biāo)簽蛋白、包涵體、RNAi、 MicroRNA二、思考題 1 簡述轉(zhuǎn)基因的主要方法與原理。 2 簡述在基因工程主要表達(dá)受體中提高表達(dá)效 率的策略。 3 簡述重組子的篩選與分子鑒定的主要方法和原理。 4 說明原核與真核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)。 5 說明轉(zhuǎn)基因沉默的

6、機(jī)制與克服措施。第9章 轉(zhuǎn)基因及其表達(dá)一、名詞解釋第9章 轉(zhuǎn)基因及其表達(dá)1 名詞解釋 融合表達(dá), 融合蛋白, 分泌表達(dá), 包涵體, 轉(zhuǎn)導(dǎo), 轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)染，表面展示.2 簡要回答下列問題 試述促進(jìn)轉(zhuǎn)基因在大腸桿菌中表達(dá)的策略。 簡述原核生物基因工程常用的載體和受體細(xì)胞。 簡述細(xì)菌基因工程的主要應(yīng)用。 簡述外源基因在細(xì)菌中的主要表達(dá)形式及優(yōu)缺點(diǎn)。 第10章 細(xì)菌基因工程1 名詞解釋第10章 細(xì)菌基因工程1 名詞解釋 YEp; YIp; YRp; YCp; 營養(yǎng)缺陷型2 簡答題 簡要描述表面展示和酵母雙雜交的原理。 酵母基因工程的主要宿主有哪些 ? 酵母基因工程的載體有哪些 ?各有和特點(diǎn)? 酵母轉(zhuǎn)基因

7、的方法有哪些? 為什么說酵母是一個非常重要的基因工程宿主?3 分析和討論 如何在酵母中實(shí)現(xiàn)高效分泌表達(dá)? 第11章 酵母基因工程1 名詞解釋第11章 酵母基因工程1 名詞解釋 植物整體轉(zhuǎn)化, 全能性, 組成性表達(dá)啟動子, 組織轉(zhuǎn)星星表達(dá)啟動子, 誘導(dǎo)表達(dá)啟動子, 花蕾浸泡轉(zhuǎn)化法, 清潔DNA轉(zhuǎn)化, Ti質(zhì)粒, 卸甲Ti質(zhì)粒, 雙元載體系統(tǒng) 2 解答題 植物轉(zhuǎn)基因的方法主要有那些? 植物轉(zhuǎn)基因的載體主要有那些? 如何利用農(nóng)桿菌進(jìn)行植物遺傳轉(zhuǎn)化? 轉(zhuǎn)基因植物的主要成就有哪些?3 分析討論題 如何控制轉(zhuǎn)基因在轉(zhuǎn)基因植物中的表達(dá)?第12章 植物基因工程1 名詞解釋第12章 植物基因工程1 名詞解釋 胚

8、胎干細(xì)胞, 限制性內(nèi)切酶介導(dǎo)的整合, 插入載體, 替代載體, 穩(wěn)定表達(dá)，瞬時表達(dá)，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)化，乳腺生物反應(yīng)器 2 簡答題 進(jìn)行動物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因的目的是什么? 主要載體有哪些？轉(zhuǎn)基因方法有哪些？ 怎樣獲得轉(zhuǎn)基因老鼠？ 如何獲得轉(zhuǎn)基因蛙? 轉(zhuǎn)基因羊乳腺生物反應(yīng)器是如何獲得的?3 分析討論 如何實(shí)現(xiàn)在高等動物中細(xì)胞中的高效穩(wěn)定表達(dá)?第13章 動物基因工程1 名詞解釋第13章 動物基因工程1 名詞解釋（10個30分）2 填空題（有的話20分）3 載體填圖（10分）4 匹配題（10分）5 簡答題（10分或30分）6 設(shè)計題 （20分）考試題型1 名詞解釋（10個30分）考試題型1. 酵母2質(zhì)粒復(fù)制原點(diǎn) 2.3 4.5. 6.1. 酵母2質(zhì)粒復(fù)制原點(diǎn) 2.31、 啟動子 受體細(xì)胞 N