竹節(jié)參多糖抗腦衰老作用的實驗研究

1、竹節(jié)參多糖抗腦衰老作用的實驗研究【摘要】目的研究竹節(jié)參多糖的抗氧化和延緩衰老作用。方法頸背部皮下注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型，用自制的竹節(jié)參多糖分為低、中、高劑量的灌胃藥物組,并用生理鹽水灌胃作正常對照組，香菇菌多糖作陽性對照組,連續(xù)用藥60d。結(jié)果中、高劑量竹節(jié)參多糖能明顯進步腦組織中過氧化氫酶(AT)的活性(P0.01)、降低丙二醛(DA)含量(P0.01)，同時能明顯進步血液中超氧化物歧化酶(SD)的活性。結(jié)論竹節(jié)參多糖具有較好的消除自由基、延緩腦衰老的作用?！娟P(guān)鍵詞】竹節(jié)參多糖;抗衰老;過氧化氫酶;丙二醛;超氧化物歧化酶許多研究說明，自由基損傷與衰老親密相關(guān)。人參多糖、香菇多糖等許多

2、中草藥提取物能直接去除自由基，進步SD、AT等抗氧化酶的活性及降低DA含量，發(fā)揮抗衰老作用1,2。竹節(jié)參為五加科人參屬植物竹節(jié)參Panax-japnius.A.ey的根莖，是我國西南地區(qū)土家族、苗族集聚地區(qū)民間常用的中草藥。性味甘苦、溫，具有活血化淤、消腫止痛、止咳化痰、滋補強壯等成效。本課題組前期已報道竹節(jié)參中的粗多糖成分具有抗疲勞作用和進步機體免疫才能3，本實驗旨在通過測定竹節(jié)參多糖提取物對小鼠腦組織AT的活性及DA的含量以及血液中超氧化物歧化酶SD的活性來研究鄂產(chǎn)竹節(jié)參多糖對小鼠抗腦衰老的作用。1材料與方法1.1主要試劑及儀器D-半乳糖(中國上?；菖d生化試劑);FZ-UV2000紫外可見

3、分光光度計(尤尼科上海儀器，H0511012);丙二醛試劑盒、超氧化物歧化酶試劑盒、過氧化氫酶試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號20220801，20220829，20221129);測定參照南京建成生物工程公司SD，AT，DA試劑盒說明書方法測定;香菇菌多糖片(武漢迪奧藥業(yè)，批號20220801)。1.2竹節(jié)參多糖提取物的制備武漢工業(yè)學院藥物研發(fā)中心研制，竹節(jié)參藥材采自于湖北省恩施州湖北省中藥材研究所竹節(jié)參種植基地，經(jīng)武漢工業(yè)學院陳平教授鑒定為五加科人參屬植物竹節(jié)參的根莖，竹節(jié)參的根莖采用水提醇沉法制得樣品，樣品采用硫酸苯酚法測定，其含量達99.5%3，冷凍枯燥保存。實驗前以純水為溶劑配制

4、不同濃度樣品，4低溫保存，備用。1.3實驗動物分組及處理華中科技大學同濟醫(yī)學院實驗動物中心提供的昆明種系實驗小鼠60只(鄂醫(yī)動管證字：19-052。)，體重2730g，隨機分為6組，每組雌雄各5只，分籠飼喂。第1組：空白組，灌胃0.9%Nal滅菌溶液，1次/d;第2組：模型組，頸背部皮下注射D-半乳糖滅菌溶液120gkg-1體重和灌胃等體積生理鹽水，1次/d4，5;第3組：陽性對照組，頸背部皮下注射腹D-半乳糖120gkg-1體重和灌胃等體積香菇菌多糖溶液100gkg-1體重，1次/d。第4、5、6組分別為藥物低、中、高劑量組：根據(jù)預(yù)試驗確定小鼠的每日用量，分別為50，120，200gkg-1

5、體重灌胃，并頸背部皮下注射D-半乳糖120gkg-1體重，1次/d。所有試驗動物均食用全價混合飼料，自由攝食和取水，連續(xù)60d。1.4小鼠腦組織中AT活性、DA含量及血液SD活性的測定末次給藥24h后，眼眶取血，拔眼球采血(肝素鈉抗凝)，冷凍靜置24，取其血漿，按試劑盒說明書分別測定血漿中SD活性;將小鼠斷頭取腦，從頭端至尾端稱取同等重量的組織，加預(yù)冷的生理鹽水進展勻漿制備成10%的組織勻漿。冷凍離心(24)，取其上清液，用AT試劑盒測定過AT活力;用DA試劑盒測定DA的含量。1.5統(tǒng)計學處理實驗中各項數(shù)據(jù)均采用s表示。實驗所得數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進展分析，空白組、陽性對照組、各劑量

6、組與模型組之間的均數(shù)比擬采用方差分析。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2結(jié)果結(jié)果見表1，與生理鹽水空白組相比，模型組小鼠血液SD、AT活性明顯降低及DA含量明顯升高，在統(tǒng)計意義上有明顯的區(qū)別(P0.01)，陽性對照組與模型組相比，小鼠血液SD，腦組織AT活性明顯升高及DA含量明顯降低，在統(tǒng)計意義上有明顯的區(qū)別(P值均為P0.05)，說明本實驗中陽性對照組具有對照作用。竹節(jié)參多糖各劑量組與模型組相比，中、高劑量給藥組小鼠腦AT活性明顯升高(P0.01)及DA含量明顯降低(P0.01);同時中劑量給藥組血液中SD活性明顯升高(P0.01)。以上結(jié)果說明：竹節(jié)參多糖具有升高腦AT活性及降低DA含量的作用，以中

7、、高劑量最為適宜。表1小鼠腦組織的AT活力、DA含量及血液SD活力3討論自由基理論在機體衰老中的作用目前已受到人們的高度重視。自由基(freeradia1)又稱游離基，是指在最外層軌道中含有未配對電子的原子、原子團或特殊狀態(tài)的分子，也就是具有未配對的原子、原子團、分子或離子叫自由基。其化學性質(zhì)活潑，有極強的氧化反響才能，可使各種生物膜的不飽和脂肪酸發(fā)生過氧化，形成過氧化脂質(zhì)6，這些產(chǎn)物具有毒性，能使蛋白質(zhì)分子內(nèi)和分子間發(fā)生交聯(lián)，發(fā)生去氫、加成、裂解等反響，從而引起DNA的雙螺旋交聯(lián)出現(xiàn)錯誤或無法分裂，一些酶的活性改變，影響細胞的代謝。D-半乳糖是機體的正常營養(yǎng)成分，當半乳糖過多時，可由半乳糖氧

8、化酶催化生成醛糖和過氧化氫，產(chǎn)生超氧陰離子自由基。過量的氧自由基可引起神經(jīng)元細胞的損傷，使腦內(nèi)總RNA和蛋白質(zhì)含量下降，腦內(nèi)神經(jīng)元密度降低，造成動物學習記憶才能下降及機體的衰老7。許多中草藥是強有力的抗氧化劑，適當補充外源性抗氧化物質(zhì)，可進步機體抗氧化系統(tǒng)的活力，降低過氧化質(zhì)子含量，從而起到抗衰老作用。竹節(jié)參多糖為竹節(jié)參的根莖采用水提醇沉法制得的提取物,本實驗結(jié)果說明：竹節(jié)參多糖具有進步腦組織AT活性及降低DA含量的作用，以中、高劑量較為適宜;同時能進步血液中SD活性，以中劑量較為適宜。提示竹節(jié)參除可以進步小鼠腦組織AT活性和血液中SD活性,阻斷自由基連鎖反響，進步腦抗活性氧損傷的才能，發(fā)揮抗衰老作用外，另一可能原因是竹節(jié)參多糖成分可以降低腦組織DA含量直接去除自由基作用。【參考文獻】1黃婭琳.抗衰老中藥的研究J.時珍國醫(yī)國藥，2022，18(3)：691.2曲敬波，齊建祥，崔傳芳,等.甘草對老年大鼠SD、AT、GSH-Px、LP影響的實驗研究J.中國醫(yī)學寫作雜志，2022，12(1)：10.3劉桂林，陳平，張俊紅,等.鄂產(chǎn)竹節(jié)參多糖成分抗疲勞作用的研究J.中華醫(yī)院藥學雜志，2022，26(12)：1459.4龔國清，徐黻本.小鼠衰老模型研究J.中國藥科大學學報,1991,25(1)：40.5裘惠霞，姚雷.神香草及提取