清潔消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)

1、清潔消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)A.1清洗與清潔效果監(jiān)測(cè)A.1 .1 診療器械、器具和物品清洗的效果監(jiān)測(cè)A.1 .1 .1 日常監(jiān)測(cè) 在檢查包裝時(shí)進(jìn)行，應(yīng)目測(cè)和（或）借助帶光源的放大鏡檢查。清洗后的器械表面及其關(guān)節(jié)、齒牙應(yīng)光潔、無(wú)血漬、污漬、水垢等殘留物質(zhì)和銹斑。A.1 .1 .2 定期抽查 每月應(yīng)隨機(jī)至少抽查3個(gè)待滅菌的包內(nèi)全部物品的清洗效果，檢查的方法與內(nèi)容同日常監(jiān)測(cè)，并記錄監(jiān)測(cè)結(jié)果。A.1 .1 .3 可采用蛋白殘留測(cè)定、ATP生物熒光測(cè)定等監(jiān)測(cè)清洗與清潔效果的方法及其靈敏度的要求，定期測(cè)定診療器械、器具和物品的蛋白殘留或其清洗與清潔的效果。A.1 .2 清洗消毒器及其效果監(jiān)測(cè)A.1.2.1 日

2、常監(jiān)測(cè)應(yīng)每批次監(jiān)測(cè)清洗消毒器的物理參數(shù)及運(yùn)轉(zhuǎn)情況，并記錄。A.1 .2 .2 定期監(jiān)測(cè)A.1 .2 .2.1 對(duì)清洗消毒品的清洗效果可每年采用清洗效果測(cè)試指示物進(jìn)行監(jiān)測(cè).當(dāng)清洗物品或清洗程序發(fā)生改變時(shí),也可采用清洗效果測(cè)試指示物進(jìn)行清洗效果的監(jiān)測(cè)。A.1 .2 .2.2 監(jiān)測(cè)方法應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說(shuō)明或指導(dǎo)手冊(cè)；監(jiān)測(cè)結(jié)果不符合要求，清洗器應(yīng)停止使用。清洗效果測(cè)試指示物應(yīng)符合有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。A.1 .2 .2.3 清洗消毒器新安裝、更新、大修、更換清洗劑、消毒方法、改變裝載方法等時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說(shuō)明或指導(dǎo)手冊(cè)進(jìn)行檢測(cè)，清洗消毒效果檢測(cè)合格后，清洗消毒器方可使用。A.2 滅菌效果的監(jiān)測(cè)A

3、.2.1 壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)A.2.1.1 壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)包括物理監(jiān)測(cè)法、化學(xué)監(jiān)測(cè)法和BD測(cè)試，應(yīng)遵循WS310.3的要求。A.2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試包的制作方法如下a）標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽孢，菌片含菌及抗力符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；b）標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包的制作：由16條41cm66cm的全棉手術(shù)巾制成。制作方法：將每條手術(shù)巾的長(zhǎng)邊先折成3層，短邊折成2層，然后疊放，制成23cm23cm15cm的測(cè)試包；c）標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試包或生物PCD的制作方法：將至少一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)指示菌片裝入滅菌小紙袋內(nèi)或至少一個(gè)自含式生物指示劑，置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包的中心部位即完成標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試包或生物PCD的制作；d）培養(yǎng)方法：

4、經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，在無(wú)菌條件下取出標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包的指示滅片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)561培養(yǎng)7d（自含式生物批示物按產(chǎn)品說(shuō)明），觀察培養(yǎng)結(jié)果；e）結(jié)果判定 陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照駔培養(yǎng)陰性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陽(yáng)性，則滅菌不合格，同時(shí)應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗(yàn)組陽(yáng)性的細(xì)菌是否為指示菌或是污染所致。自含式生物批示物不需要做陰性對(duì)照；f）小型壓力蒸汽滅菌器因一般無(wú)標(biāo)準(zhǔn)生物監(jiān)測(cè)包，應(yīng)選擇滅菌器常用的、有代表性的滅菌包制作生物測(cè)試包或生物PCD，置于滅菌器最難滅菌的部位，且滅菌器應(yīng)處于滿載狀態(tài)。生物測(cè)試包或生物PCD應(yīng)側(cè)放，體積大時(shí)

5、可平放；g）采用快速壓力蒸汽滅菌程序滅菌時(shí)，應(yīng)直接將一支生物批示物，置于空載的滅菌器內(nèi)，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后取出，規(guī)定條件下培養(yǎng)，觀察結(jié)果；h）可使用一次性標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試包，對(duì)滅菌器的滅菌質(zhì)量進(jìn)行生物監(jiān)測(cè)；i）注意事項(xiàng)1）監(jiān)測(cè)所用菌片或自含式菌管應(yīng)取得衛(wèi)生部消毒產(chǎn)品衛(wèi)生許可證批件，并在有效期內(nèi)使用；2）如果1d內(nèi)進(jìn)行多次生物監(jiān)測(cè)，且生物指示劑為同一批號(hào)，則只設(shè)一次陽(yáng)性對(duì)照即可。A.2.1.3 B-D測(cè)試方法如下：a）B-D測(cè)試包的制作方法 B-D測(cè)試包由100%脫脂棉布或100%全棉手術(shù)巾折疊成長(zhǎng)302cm、寬252cm、高25cm28cm大小的布包；將專用B-D測(cè)試紙，放入上述布包的中間；制成的B

6、-D測(cè)試包的重量要求為4kg0.2kg，或采用一次性使用或反復(fù)使用的B-D測(cè)試包。b）B-D測(cè)試方法 測(cè)試前先預(yù)熱滅菌器，將B-D測(cè)試包水平放于滅菌柜內(nèi)滅菌車的前底層，靠近柜門與排氣口底前方；柜內(nèi)除測(cè)試包外無(wú)任何物品；在134溫度下，時(shí)間不超過(guò)3.5min，取出測(cè)試包，觀察B-D測(cè)試紙顏色變化。c）結(jié)果判定 B-D測(cè)試紙均勻一致變色，說(shuō)明B-D試驗(yàn)通過(guò)，滅菌器可以使用；變色不均說(shuō)明B-D試驗(yàn)失敗，可再重復(fù)一次B-D測(cè)試，合格，滅菌器可以使用；不合格，需檢查B-D測(cè)試失敗原因，直至B-D測(cè)試通過(guò)后該滅菌器方能使用。A.2.2 干熱滅菌的效果監(jiān)測(cè)A.2.2.1 干熱滅菌效果的物理監(jiān)測(cè)法、化學(xué)監(jiān)測(cè)法

7、和生物測(cè)監(jiān)測(cè)法，應(yīng)遵循WS310.3的要求。A.2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試管的制作方法如下：a）標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽孢，菌片含菌及抗力符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；b）標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試管的制作方法：將標(biāo)準(zhǔn)指示菌片分別裝入滅菌中試管內(nèi)（1片/管）；c）監(jiān)測(cè)方法：將標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試管，置于滅菌器最難滅菌的部位，即滅菌器與每層門把手對(duì)角線內(nèi)、外角處放置2個(gè)含菌片的試管，試管帽置于試管旁，關(guān)好柜門，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，待溫度降至80時(shí)，加蓋試管帽后取出試管，并設(shè)陽(yáng)性對(duì)照對(duì)和陰性對(duì)照；d）培養(yǎng)方法：在無(wú)菌條件下，加入普通營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（5mL/管），361培養(yǎng)48h，觀察初步結(jié)果，無(wú)菌生長(zhǎng)管繼續(xù)培養(yǎng)至第7d；e）結(jié)

8、果判定：陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，若每個(gè)指示菌片接種的肉湯均澄清，判為滅菌合格，若陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，而指示菌片之一接種的肉湯管混濁，判為不合格，對(duì)難以判定的肉湯管，取0.1mL接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,用滅菌L棒或接種環(huán)涂勻,置于361培養(yǎng)48h,觀察菌落形態(tài),并做涂片染色鏡檢,判斷是否指示菌生長(zhǎng),若有指示菌生長(zhǎng)，判為滅菌不合格；若無(wú)指示菌生長(zhǎng),判為滅菌合格；f)注意事項(xiàng):監(jiān)測(cè)所用菌片應(yīng)取得衛(wèi)生部消毒產(chǎn)品衛(wèi)生許可批件,并在有效期內(nèi)使用。A.2.3過(guò)氧化氫低溫等離子滅菌和低溫甲醛蒸汽滅菌的效果監(jiān)測(cè)過(guò)氧化氫低溫等離子和低溫甲醛蒸汽滅菌的效果監(jiān)測(cè)應(yīng)遵循WS310.3的要

9、求。A.2.4環(huán)氧乙烷氣體滅菌效果的監(jiān)測(cè)A.2.4.1環(huán)氧乙烷氣體滅菌的物理監(jiān)測(cè)法、化學(xué)監(jiān)測(cè)法和生物監(jiān)測(cè)法，應(yīng)遵循WS310.3的要求。A.2.4.2常規(guī)生物測(cè)試包的制作方法如下：a）標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽孢，菌片含菌及抗力符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；b）常規(guī)生物測(cè)試包的制作方法：取一個(gè)20ml的無(wú)菌注射器，去掉針頭，拔出針?biāo)ǎ瑢?biāo)準(zhǔn)生物指示菌放入針筒內(nèi)，帶孔的塑料帽應(yīng)朝向針頭處，再將注射器的針?biāo)ú寤蒯樛玻ㄗ⒁獠灰黾吧镏甘疚铮?，之后用一條全棉小毛巾兩層包裹，置于塑料包裝袋中，封裝；c）監(jiān)測(cè)方法：將常規(guī)生物測(cè)試包放在滅菌器最難滅菌的部位（整個(gè)裝載滅菌包的中心部位）。滅菌周期完成后應(yīng)立即取出指

10、示菌片接種于含有復(fù)方中和劑的0.5%的葡萄糖肉湯培養(yǎng)基管中，361培養(yǎng)7d（自含式生物指示物應(yīng)遵循產(chǎn)品說(shuō)明），觀察培養(yǎng)基顏色變化，同時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照；d）結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性。判定為滅菌合格。陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陽(yáng)性，則滅菌不合格；同時(shí)應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗(yàn)組培養(yǎng)陽(yáng)性的細(xì)菌是否為指示菌或污染菌所致；e）注意事項(xiàng)：監(jiān)測(cè)所用菌片應(yīng)取得衛(wèi)生部消毒產(chǎn)品衛(wèi)生許可批件，并在有效期內(nèi)使用。A.3 紫外線消毒的效果監(jiān)測(cè)A.3.1 紫外線燈輻照度值的測(cè)定A.3.1.1監(jiān)測(cè)方法A.3.1.1.1 紫外線燈輻照計(jì)測(cè)定法開(kāi)啟紫外線燈5min后，將測(cè)定波長(zhǎng)為253.7nm的紫外線輻照計(jì)探頭置于被

11、檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處，特殊紫外線燈在推薦使用的距離下測(cè)定，待儀表穩(wěn)定后，所示數(shù)值即為該紫外線燈的幅照度值。A.3.1.1.2 紫外線強(qiáng)度照射指示卡監(jiān)測(cè)法開(kāi)啟紫外線燈5min后，蔣指示卡置于置于紫外線燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上，照射1min，紫外線照射后，觀察指示卡色塊的顏色，將其與標(biāo)準(zhǔn)色塊比較，讀出照射強(qiáng)度。A.3.1.2 結(jié)果判定普通30w直管型紫外線燈，新燈管的輻照強(qiáng)度應(yīng)符合GB19258要求；使用中紫外線燈照射強(qiáng)度70W/cm2為合格；30W高強(qiáng)度紫外線燈的輻射強(qiáng)度180W/cm2為合格。A.3.1.3 注意事項(xiàng)測(cè)定時(shí)電壓220V5V，溫度2025，相對(duì)濕度60%，紫

12、外線輻照計(jì)應(yīng)在計(jì)量部門檢定的有效期內(nèi)使用；指示卡應(yīng)在獲得衛(wèi)生部消毒產(chǎn)品衛(wèi)生許可批件，并在有效期內(nèi)使用。A.3.2生物監(jiān)測(cè)法空氣消毒的有效監(jiān)測(cè) 按A.6的要求執(zhí)行。A.3.3 注意事項(xiàng)A.3.3.1 紫外線燈在投放市場(chǎng)之前應(yīng)按照衛(wèi)生部有關(guān)規(guī)定進(jìn)行產(chǎn)品衛(wèi)生安全評(píng)價(jià)。A.3.3.2 紫外線消毒效果監(jiān)測(cè)時(shí)，采樣液（平板中）不加中和劑。A.4 手和皮膚消毒效果監(jiān)測(cè)A.4.1手的消毒效果監(jiān)測(cè)應(yīng)遵循WS/T313的要求A.4.2 皮膚的消毒效果監(jiān)測(cè)A.4.2.1 采樣時(shí)間按照產(chǎn)品使用說(shuō)明規(guī)定的作用時(shí)間，達(dá)到消毒效果后及時(shí)采樣。A.4.2.2 采樣方法用5cmx5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢皮膚處，用浸有含相應(yīng)

13、中和劑的無(wú)菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入10ML含相應(yīng)中和劑的無(wú)菌洗脫液的試管內(nèi)，及時(shí)送檢，不規(guī)則的皮膚可用棉拭子直接涂擦采樣。A.4.2.3 檢測(cè)方法將采樣管在混勻器上震動(dòng)20s或用力振打80次，用無(wú)菌吸管吸取1.0mL待檢樣品接種于滅菌平皿，每一本接種2個(gè)平皿，平皿內(nèi)加入已溶化的4548的營(yíng)養(yǎng)瓊脂15ml18 ml ,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置361溫箱培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。細(xì)菌菌落數(shù)計(jì)算方法見(jiàn)式（A.1）：細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/cm2）= 平板上菌落數(shù)稀釋倍數(shù) 采樣面積（cm2) （A.1）A.4.2.4 結(jié)果

14、判定皮膚消毒效果的判定標(biāo)準(zhǔn)遵循WS/T313中外科手消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。A.4.2.5 注意事項(xiàng)采樣皮膚表面不足5cmx5cm，可用相應(yīng)面積的規(guī)格板采樣。A.5 物體表面的消毒效果監(jiān)測(cè)A.5.1 采樣時(shí)間在消毒處理后或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)進(jìn)行采樣。A.5.2 采樣方法用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無(wú)菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS）或生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣4個(gè)規(guī)格板面積，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2取100cm2。剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml無(wú)菌檢驗(yàn)用洗脫液的試管中送檢

15、。門把手等小型物體則采用，棉拭子直接涂抹物體表面采樣。采樣物體表面有消毒劑殘留時(shí)，采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。A.5.3 檢測(cè)方法充分震蕩采樣管后，取不同稀釋數(shù)倍的洗脫液1.0ml接種平皿，將冷至4045的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml20ml，361恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)，進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測(cè)。A.5.4 結(jié)果計(jì)算A.5.4.1 規(guī)則物體表面物體表面菌落總數(shù)計(jì)算方法見(jiàn)式（A.2）;物體表面菌落總數(shù)（cfu/ cm2）=平均每皿菌落數(shù)洗脫液稀釋倍數(shù) 采樣面積（cm2) （A.2）A.5.4.2 小型物體表面的結(jié)果計(jì)算，用cfu/件表示。A.5.5 結(jié)果判定A.5.

16、5.1 潔凈手術(shù)部、其他潔凈場(chǎng)所，非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)等；物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)5cfu/ cm2。A.5.5.2 兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)室、血液透析中心（室）、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等，；物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)10 cfu/ cm2A.6 空氣消毒效果監(jiān)測(cè) A.6.1 采樣時(shí)間采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣；未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間在消毒或規(guī)定的通風(fēng)換氣后與從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣；或懷

17、疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)采樣。A.6.2 監(jiān)測(cè)方法A.6.2.1潔凈手術(shù)部（室）及其他潔凈用房可選擇沉降法或浮游菌法，參照GB50333要求進(jìn)行監(jiān)測(cè)。浮游菌法可選擇六級(jí)撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)驗(yàn)證的空氣采樣器。監(jiān)測(cè)時(shí)將采樣器置于室內(nèi)中央0.8m1.5m高度，按采樣器使用說(shuō)明書操作，每次采樣時(shí)間不應(yīng)超過(guò)30min。房間面積10 m2者，每增加10 m2增設(shè)一個(gè)采樣點(diǎn)。A.6.2.2 未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間采用沉降法：室內(nèi)面積30 cm2，設(shè)內(nèi)、中、外對(duì)角線三點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)應(yīng)距墻壁1m處；室內(nèi)面積30 cm2，設(shè)四角及中央五點(diǎn)，四角的布點(diǎn)位置應(yīng)距墻壁1m處。將普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿（90mm）放置各采

18、樣點(diǎn)，采樣高度為距地面0.8m1.5m；采樣時(shí)將平皿蓋打開(kāi)，扣放于平皿旁，暴露規(guī)定時(shí)間后蓋上平皿蓋及時(shí)送檢。A.6.2.3 將送檢平皿置361恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，若懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)，進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測(cè)。A.6.3 結(jié)果計(jì)算A.6.3.1 沉降法按平均每皿的菌落數(shù)報(bào)告：cfu/（皿暴露時(shí)間）A.6.3.2 浮游菌發(fā)計(jì)算公式見(jiàn)式（A.3）空氣中菌落總數(shù)（cfu/m3）= 采樣器各平皿菌落數(shù)之和（cfu) 、采樣速度（L/min）采樣時(shí)間（min）1000 （A.3）A.結(jié)果判定A.潔凈手術(shù)部（室）和其他潔凈場(chǎng)所，空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)要求應(yīng)遵循3A.非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓

19、移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)cfu（直徑平皿）。A.兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)4cfu/(5min直徑9cm平皿)。A.5 注意事項(xiàng) 采樣前，關(guān)閉門、窗，在無(wú)人走動(dòng)的情況下，靜止10min后采樣。A7 消毒液的監(jiān)測(cè)A71 常用消毒液有效成分含量測(cè)定 庫(kù)存消毒劑的有效成分含量依照產(chǎn)品企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)；使用中消毒液的有效濃度測(cè)定可用上述方法，也可使用經(jīng)國(guó)家衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)的消毒劑濃度紙（卡）進(jìn)行監(jiān)測(cè)。A72 使用中消毒液染菌量測(cè)定A721 .1 用無(wú)菌吸管按無(wú)菌操作方法吸取1.0mL被檢消毒液，加入9mL中和劑中