鐵皮石斛組織培養(yǎng)報(bào)告

1、關(guān)于鐵皮石斛組織培養(yǎng)與栽培技術(shù)的報(bào)告培養(yǎng)基配方根據(jù)不同階段，培養(yǎng)基配方有所差異。如表11 各種培養(yǎng)基配方不同階段培養(yǎng)基備注愈傷組（原球莖）的誘導(dǎo)MS+2.0mg/L6-BA+3%蔗糖+0.8%瓊脂pH=5.8原球莖的增殖MS+20%馬鈴薯+3%蔗糖+0.8%瓊脂pH =5.8原球莖的分化幼株的生根壯苗MS+20%馬鈴薯+2.0mg/LNAA+3%蔗糖+0.8%瓊脂MS+10%香蕉+2.0mg/LNAA+3%蔗糖+0.8%瓊脂pH=5.8pH=5.4-5.6配制（1000ml 幼株的生根壯苗培養(yǎng)基為例）10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+0.8%瓊脂（w/w）+2.0mg/L NA

2、A量取 800ml 蒸餾水于潔凈的大燒杯中，加熱至沸騰；準(zhǔn)確稱量 100g 5min，其間攪拌使之充分溶解；按照大量、微量、Fe2+鹽、有機(jī)、有機(jī)順序，量取MS 50ml 蒸餾水的燒杯，混合均勻；將）和）的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NA（0.1mg/m均勻；8g 5min，其間不斷攪拌使之充分溶解；505時(shí)，調(diào)pH5.45.6。分裝于培養(yǎng)瓶內(nèi)，33.3ml/瓶。注意事項(xiàng)溶解香蕉的蒸餾水盡可能多，以確保香蕉各種成分完全溶解；各種母液混合時(shí)，要按照大量、微量、Fe2+鹽、有機(jī)、有機(jī)的順序；煮沸時(shí)，小心溶液溢出；分裝時(shí)不要污染培養(yǎng)瓶瓶口。滅菌檢查滅菌鍋的水位、電源、排氣閥、排氣管、

3、安全閥以及壓力表，確保滅菌鍋各指標(biāo)和功能的正常，以防事故發(fā)生；把帶滅菌的培養(yǎng)基裝入鍋內(nèi)，蓋上鍋蓋，對(duì)稱而均勻地扭緊螺絲；打開電源和排氣閥，調(diào)節(jié)電壓至220V；30s1min 后，關(guān)閉排氣閥；121135V20min；0。10min 后，打開排氣閥和鍋蓋；7）510min 后，取出培養(yǎng)基放于試驗(yàn)臺(tái)上冷卻，待用。2 滅菌時(shí)間統(tǒng)計(jì)單鍋滅菌（耗時(shí)階段64min）多鍋連續(xù)滅菌第一鍋（耗時(shí)63min） 第二鍋（46min）起始22:21排氣22:418:048:239:309:43T=121關(guān)閉電源0注意事項(xiàng)22:5023:1023:258:328:529:079:5010:1010:16啟動(dòng)滅菌前，應(yīng)檢

4、查水位、電源、排氣閥、安全閥、排氣管等，確保正常；滅菌鍋底部應(yīng)鋪墊一層報(bào)紙，以防培養(yǎng)瓶機(jī)械破損；滅菌電壓不宜超過 220V，否則滅菌鍋會(huì)劇烈搖晃，造成不必要的損害和安全隱患；121135V121-122之間；0 后，不宜立即揭蓋；最好在5-10min 后揭蓋，這樣才能緩和內(nèi)外“氣壓和5-10min 后，再轉(zhuǎn)移鍋內(nèi)培養(yǎng)基，以免燙傷。18 瓶轉(zhuǎn)接轉(zhuǎn)接前準(zhǔn)備培養(yǎng)皿、鑷子、剪刀等轉(zhuǎn)接用具的滅菌（可以在培養(yǎng)基滅菌時(shí)附帶；檢查超凈臺(tái)內(nèi)各種用具，及時(shí)補(bǔ)充酒精燈的酒精，確保用具齊全；放置待轉(zhuǎn)接材料和待接入培養(yǎng)基，以“方便操作為宜”而陳列；轉(zhuǎn)接揭去防塵膜，打開電源、通風(fēng)和紫外燈，滅菌1520min；關(guān)掉紫外，打

5、開白熾燈，用 75%酒精仔細(xì)擦拭手指、指甲、材料瓶瓶蓋及蓋邊緣、工作區(qū)等處，確保“消毒”徹底；點(diǎn)燃酒精燈，用無菌鑷子把材料夾取于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，挑選生命力旺盛的植株用于轉(zhuǎn)接；用無菌剪刀修去多余的根系標(biāo)注相關(guān)日期和品系，轉(zhuǎn)至培養(yǎng)室培養(yǎng)。注意事項(xiàng)而導(dǎo)致污染；3-5s5-10s；蓋瓶蓋時(shí)，亦如此操作；轉(zhuǎn)接時(shí)，確保手一直在超凈臺(tái)內(nèi)，以免帶入外界細(xì)菌。培養(yǎng)12h/黑暗 12h20煉苗目的煉苗的主要目的是使組培苗適應(yīng)外界的環(huán)境溫差，濕度差以及微生物環(huán)境。煉苗方法 1）將待煉苗的材料放置于欲移栽的環(huán)境，不開蓋保持4-5 天；2）1-2 2-3 天；方法（整個(gè)過程：適應(yīng)期，半開瓶期，開瓶期，出瓶，洗根，浸泡，移

6、栽或框煉并移栽） 移栽：基質(zhì)選擇，移栽方式基質(zhì)選擇1 1+2+1 1+1 和塊狀椰衣的基質(zhì)配比稍微次之。多數(shù)樹皮中含有較多的酚類物質(zhì)，這對(duì)于植物是有害的，而且樹皮的 C/N 比值都較高，直N (劉士哲，2001；李盛謙，2003)。移栽53011間勿施肥，待小苗恢復(fù)正常生長后才開始常規(guī)的水肥管理。日常管理 給水管理：施肥管理營養(yǎng)生長期施用氮肥較高的花多多復(fù)合肥（N:P:K=30:10:1，花芽分化期開始施偏重磷鉀肥N:P:K=10:30:2，其余時(shí)期施N:P:K=15:20:2）1 次1 0.1%葉面噴施，雨天不施肥。試驗(yàn)結(jié)果表明：營養(yǎng)液施用以荷蘭花卉所（通）配方為最佳。施肥濃度0.24%，施

7、肥頻率 1次/1 周對(duì)石斛蘭營養(yǎng)生長和開花效果最好。馬太和指出：不同植物對(duì)養(yǎng)分濃度的要求不同，但營養(yǎng)液的總質(zhì)量濃度不可超過4g/L。2g/L 左右比較適合。營養(yǎng)液的濃度變化與最適濃度之間的差值不能太大，否則超出根系選擇性吸收能力的范圍就會(huì)抑制植物生 長。用于一類作物，也可能只適用于幾類作物或幾類作物中的幾種作物營養(yǎng)液荷蘭花卉研究所配方荷蘭花卉研究所配方尿素KH2PO4葉面寶花多多復(fù)合肥尿素KH2PO4花生餅發(fā)酵肥花多多復(fù)合肥國產(chǎn)復(fù)合肥組成和比例備注全元素營養(yǎng)液僅包括大量元素尿素：KH2PO4=2：1，葉面寶為廣西化工研究所生1/10000 濃度施用尿素：KH2PO4=2：1，花生餅肥以酵素菌發(fā)

8、酵，以N：P：N：P：K=15：20：25，美國Scotts 花肥公司產(chǎn)N：P：K=10：10：10，富島化肥有限公司產(chǎn)0.3%1 次/1 周，以施清水CK 為對(duì)照。結(jié)果表明施用國外產(chǎn)的花多多肥配制的營養(yǎng)液對(duì)石斛蘭營養(yǎng)生長和開花性狀表現(xiàn)效果最好，施用尿素KH2PO4花生餅發(fā)酵肥配制成的營養(yǎng)液效果次之，僅施清水的對(duì)照效果最差（石斛蘭栽培基質(zhì)和營養(yǎng)液應(yīng)用技術(shù)研究及其生產(chǎn)成本與經(jīng)濟(jì)效益分析，華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)）外源生長素對(duì)鐵皮石斛生長的影響: 本試驗(yàn)用了 BA 和 GA 兩種做試驗(yàn)觀察, 對(duì)鐵皮石斛的產(chǎn)量及其生理生化的影響, 用CK 作對(duì)比。, 0.025 mg/L GA 和 1 mg/L BA 對(duì)促

9、進(jìn)不同時(shí)期的生長有良1 mg/L BA 為主, 生長季節(jié)時(shí),需要促進(jìn)產(chǎn)量可以噴施 0.025 mg/L 赤霉素為主,這樣對(duì)提高鐵皮石斛的品質(zhì)和商品得率都具有良好（鐵皮石斛集約化高產(chǎn)栽培技術(shù)研究）NH NO KNO KH PO Ca(NO3) 4H MgSOFeSO7H 、43324222MnSO 4H O、NaBrO 10H O、ZnSO47H2O、CuSO 5H O、H MnO4272422441.3.2 形態(tài)指標(biāo)測定2007 1 22 日定植，3 6 日開始在正常各種指標(biāo)株高新生的根芽數(shù)新葉數(shù)綜合考慮方案方案營養(yǎng)液：N/P/K=2/1/2，基質(zhì)：陶粒/水苔=1/1，營養(yǎng)0。710 天。營養(yǎng)

10、液：N/P/K=1/1/1，基質(zhì)：樹皮/水苔=1/1，營養(yǎng)0。7%10d。營養(yǎng)液：N/P/K=1/1/1，基質(zhì)：樹皮/水苔=1/1，營養(yǎng)1。510d。營養(yǎng)液：N/P/K=1/1/1，基質(zhì)：樹皮/水苔=1/1，營養(yǎng)0。7%10d。（春石斛無土栽培技術(shù)，中國城市林業(yè)）追肥 既可使石斛儲(chǔ)蓄養(yǎng)分,又可使石斛保溫過冬。可用腐熟的花生鼓、菜籽餅、過磷酸鈣等加入河泥等混合物撒在根部，此外尚可用0.050.1%磷酸二氫鉀進(jìn)行根外追肥。病蟲害管理病蟲害防治以預(yù)防為主，每半個(gè)月施用一次農(nóng)藥，蟲藥與病藥交替使用。常見病害及防治石斛黑斑病。為害葉片使葉片枯萎，35 月發(fā)生，受害嫩葉葉片出現(xiàn)褐色斑點(diǎn),嚴(yán)重時(shí)、 連接成片

11、,使葉片枯萎脫落。防治方法：可用50的多菌靈l000 倍液噴霧l2 次。 l5 1000 800 5000 70甲基托布津 1000 23次。1000 1000 76%3000 倍液。 的菌泥，最后葉片干化而枯死。防治方法：同軟腐病。常見蟲害及防治:700 倍液每隔 7d/ 3次。治方法：預(yù)防和治療相結(jié)合，90%800 1000 倍液交替使用。蝸牛：在 4 月天氣回暖，高溫多濕及大雨過后開始危害，一直延續(xù)到11 月天氣變冷2000 57 1 34 次，而后再用密達(dá)進(jìn)行誘殺。石斛菲盾蚧。寄生于植株葉片邊緣或背面，吸食汁液，5 月下旬為孵化盛期。防治方400040%1000 倍液噴霧殺滅或集中有盾

12、殼老枝集中燒毀（石斛蘭組培苗工廠化育苗管理技術(shù)總結(jié)，熱帶林業(yè)）存在的問題葉黃，水漬原因分析水份，肥料，管理規(guī)范，大棚環(huán)境（）擬采取的方案后期的工作重點(diǎn)80-85%50% 。春夏季，生長旺盛期，干旱高溫早晚各澆水一次，使基質(zhì)保持半干濕狀態(tài)。注：20091027（夜里空氣濕度很大，高達(dá) 8590% ，導(dǎo)致基質(zhì)吸水，根系不能充分呼吸，影響植株生長。晚上可以考慮降低濕度）1）2）3）4）5）6）統(tǒng)計(jì)方法營養(yǎng)生長指標(biāo)：測量指標(biāo)株高： 假鱗莖長最低活葉高假鱗莖粗假鱗莖節(jié)間距葉長葉寬 葉片數(shù)植株成活率生殖生長指標(biāo)測量指標(biāo)花枝長 花梗長 花序長 花枝粗度花朵數(shù)凋落花數(shù)、花朵直徑、花枝數(shù)測量所得數(shù)據(jù)測量方法用直

13、尺測量基質(zhì)表面到植株最頂部的自然高度用直尺測量基質(zhì)表面到假鱗莖最高處的自然高度用直尺測量基質(zhì)表面到最低片活葉處的自然高度用油標(biāo)卡尺測量根莖部的直徑以直尺測定最長節(jié)假鱗莖長用直尺測量最大片葉基部到葉尖的距離用直尺子測量最大片葉最寬處的距離數(shù)植株葉片的數(shù)量測量所得數(shù)據(jù)測量方法注：基本上可不測在生殖生長指標(biāo)，沒有必要。石斛基本常識(shí)形態(tài)特征多年生草本，具有氣生根。莖直立叢生、高30-50cm，肉質(zhì)稍扁，有節(jié)、有槽溝，黃綠 色。單葉互生，葉片革質(zhì)，無柄，狹長橢圓形或近披針形，葉鞘抱莖。總狀花序腋生，每個(gè)2-3 4-6 棱。種子多而細(xì)小?；ㄆ?-6 7-8 月。生物學(xué)特性18-30，生長期以 16-21更為合16-18