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1、羊水基質(zhì)金屬卵白酶與胎膜破碎的干系臨盆時胎膜天然破碎的機理尚不完全明晰,如今以為,胎膜中膠原的落解是其產(chǎn)生的緊張基矗膠原的落解依靠基質(zhì)金屬卵白酶(atrixetallprtEinase,P)的作用1。為探究P與胎膜正常破碎及胎膜早破(preaturerupturefebrane,PR)產(chǎn)生的干系,我們檢測了胎膜正常破碎及PR孕婦羊水中總P的活性及其身分,現(xiàn)報道如下。一、資料與要領(lǐng)1.資料泉源:網(wǎng)絡(luò)本院足月剖宮產(chǎn)臨盆的孕婦60例,胎膜正常破碎者30例為比較組,PR者30例為PR組,每組中未臨產(chǎn)、暗藏期及活潑期各10例,均無妊娠歸并癥。2.要領(lǐng):(1)標本網(wǎng)羅:于剖宮產(chǎn)時抽取羊水3l,立即離心、過

2、濾,-70保存。(2)酶活性的測定:羊水消化生物素標識表記標幟明膠,用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定剩余明膠的含量,換算出酶的活性以37下每1l羊水12h消化的明膠量表現(xiàn),單元:ng/l*12h,用加乙二胺四乙酸(終濃度80l/L)的羊水作陰性比較。3羊水中P身分的酶譜闡發(fā):參照ll等2先容的要領(lǐng)舉行明膠電泳,電泳完畢將凝膠置于造就皿中,經(jīng)2.5%Tritn-X100洗滌后,37下孵育18h,用考馬斯亮藍G-250染色1h,末了脫色48h;酶經(jīng)電泳組分后,將該處的明膠消化,染色后形成不著色的透明帶。3.統(tǒng)計學(xué)處置懲罰:實行效果作t查驗。二、效果1.比較組羊水總P的活性變革:未臨產(chǎn)時為(491

3、5)ng/l*12h,暗藏期為(5815)ng/l*12h,活潑期為(10229)ng/l*12h。暗藏期高于未臨產(chǎn)期,但差異無明顯性,活潑期較暗藏期明顯升高,差異有極明顯性(P0.01)。2.PR組羊水中總P的活性變革:PR組未臨產(chǎn)時羊水中總P活性為(8510)ng/l*12h,暗藏期為(917)ng/l*12h,活潑期為(10423)ng/l*12h。暗藏期高于未臨產(chǎn)期,但差異無明顯性,活潑期較未臨產(chǎn)期明顯升高,差異有極明顯性(P0.01)。在未臨產(chǎn)期和暗藏期,PR組羊水中總P的活性均明顯高于比較組,差異有極明顯性(P0.01)。3.羊水中P的酶譜變革:羊水中較明白的P帶有4條,相對分子質(zhì)

4、量別離為92000、83000、72000和66000。比較組未臨產(chǎn)期羊水中以92000和72000的P條帶為主,活潑期那么4條條帶都有,此中相對分子質(zhì)量為92000和83000的P條帶所消化的明膠帶,較未臨產(chǎn)期顯著增寬。PR組羊水中P的身分與比較組根本雷同,但在未臨產(chǎn)時羊水中各P消化的明膠帶較比較組寬。三、討論1.P的特性:P是一類布局中含有鋅和鈣等金屬離子的卵白水解酶,能水解膠原、彈性卵白、氨基葡聚糖等多種細胞外基質(zhì),如今已創(chuàng)造的有十幾種,其布局相似,均以酶原的情勢從細胞中排泄,活性都能被構(gòu)造金屬卵白酶按捺因子和乙二胺四乙酸按捺。比年來的研究創(chuàng)造,P大概在胎膜破碎、臨盆及產(chǎn)后子宮復(fù)舊等歷程

5、中發(fā)揮緊張的生理成效。2.羊水中P的身分:Vadill-rtega等3在正常臨盆產(chǎn)婦的羊水中,檢測出了3條P條帶,相對分子質(zhì)量別離為183000、92000和83000,別離是P-9的二聚體、酶原和活化情勢。但我們創(chuàng)造,羊水中存在4種P身分,相對分子質(zhì)量別離為92000、83000、72000和66000,未能創(chuàng)造183000的P-9二聚體,推測大概是人種的差異,也有大概是要領(lǐng)的差異。按照相對分子質(zhì)量推測,92000和66000的P大概別離是P-9的酶原和活化情勢,而72000和66000為P-2的酶原和活化情勢。因此,羊水中P的重要身分為P-9,包羅其酶原和活化情勢,畢竟是否存在P-9二聚體

6、和P-2有待進一步的研究證明。3.羊水中P活性變革與胎膜破碎的干系:胎膜完備性的保持依靠宮腔內(nèi)壓與胎膜強度的平衡。正常臨盆活潑期宮內(nèi)壓增長和胎膜強度落落導(dǎo)致胎膜破碎。膠原的合成不敷和落解增長,引起胎膜強度落落。胎膜中膠原的大量落解大概與P活性升高有關(guān)。aj等4創(chuàng)造,臨盆發(fā)動后胎膜構(gòu)造中P的活性明顯升高,并以P-9活性升高更顯著;我們的研究效果表白,比較組羊水中總P的活性在產(chǎn)程的活潑期明顯升高,從明膠酶譜來看,以P-9的升高更顯著。因此活潑期羊水中總P,特殊是P-9活性的增高,引起胎膜中膠原的大量落解,大概是胎膜破碎產(chǎn)生的緊張生理基矗4.羊水中P活性非常與PR的干系:PR患者的胎膜中膠原的含量低

7、于正常同孕周婦女,這與其胎膜中膠原合成淘汰和剖析非常增長有關(guān)。我們創(chuàng)造PR組羊水中總P活性非常升高。尚有研究表白,PR患者羊水中基質(zhì)金屬卵白酶按捺因子的含量那么明顯低于正常孕婦5。因此,羊水中總P活性非常增高和其按捺因子的低落,從而引起胎膜中膠原的過分落解,大概是PR產(chǎn)生的重要緣故原由之一。PR的產(chǎn)生與熏染及炎癥嚴密相干6,熏染或炎癥歷程中產(chǎn)生的細胞因子如白細胞介素1、8(IL-1、IL-8)及細菌產(chǎn)生的脂多糖等都能誘導(dǎo)P的合成和活化。因此我們推測羊水中P活性的非常升高,大概是多種因素誘發(fā)PR的配合環(huán)節(jié)之一。參考文獻2,llU,YunglerbGL,RsinskiKB,etal.Turprte

8、r-stiulatedr93,000gelatinaseseretedbynralandalignanthuanells:IslatinandharaterizatinftheenzyefrHT1080turells.anerResearh,1990,50:6162-6170.3,Vadill-rtegaF,Gnzalez-AvilaG,FuthEE,etal.92-KDtypeIVllagenase(atrixetallprtEinase-9)ativityinhuananihrininreasesithlabr.AJPathl,1995,146:148-156.4,ajJG,Kankfer.Ativityf72-KDand92-KDatrixetallprteinasesinplaentaltissuesfsithandithutretainedfetalebranes.Plaenta,1997,18:683-687.5,Vadill-rtegaF,HernanderzA,Gnzalez-AvilaG,etal.Inreasedatrixetallprteinaseativityandreduedtissueinhibitrfetallprteinase-1levelsinanitifluidsfrpregnaniespliatedbypr

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