2022年醫(yī)學(xué)專題-HE4-崔恒-北京大學(xué)人民醫(yī)院

1、新型(xnxng)卵巢癌標(biāo)記物HE4的研究進(jìn)展崔 恒北京大學(xué)人民醫(yī)院婦科(fk)腫瘤中心第一頁(yè)，共六十七頁(yè)。世界(shji)范圍統(tǒng)計(jì)資料 癌 新發(fā) 死亡(swng) 宮頸 470,000 230,000 卵巢 190,000 114,000 內(nèi)膜 188,000 45,000第二頁(yè)，共六十七頁(yè)。美國(guó)(mi u)2008第三頁(yè)，共六十七頁(yè)。第四頁(yè)，共六十七頁(yè)。卵巢癌的現(xiàn)狀(xinzhung)一個(gè)難題：無成熟的早期診斷方法；二個(gè)70%：確診時(shí)約70%已屬晚期；治療后即使是已達(dá)到臨床完全緩解的病人仍有70%最終將復(fù)發(fā)；三個(gè)進(jìn)展：手術(shù)病理分期、腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)、紫杉醇+卡鉑化療方案四個(gè)焦點(diǎn)：保留生育(s

2、hngy)/生理功能、早期的輔助治療、晚期的治療、復(fù)發(fā)的診斷和治療第五頁(yè)，共六十七頁(yè)。卵巢癌的診斷(zhndun)策略-早期診斷卵巢癌的早期診斷一直是卵巢癌研究中最具挑戰(zhàn)性的課題(kt)腫瘤診斷的三大支柱圖像診斷：B超 CT、MRI PET/CT血液與體液檢測(cè)：腫瘤標(biāo)記物細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)診斷第六頁(yè)，共六十七頁(yè)?，F(xiàn)階段卵巢癌的診斷(zhndun)目前常用的診斷方法包括：1）婦科三合診；2）陰式彩色B超；3）血清CA125的檢測(cè)(jin c)；4）計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）、磁共振成像（MRI）、正電子發(fā)射斷層掃描（PET或PET/CT）等第七頁(yè)，共六十七頁(yè)。關(guān)于診斷正在研究中的有：放射免疫顯像（RII

3、）新的或多種血清標(biāo)記物的檢測(cè)血清中卵巢癌特異抗體的檢測(cè)惡性腫瘤危險(xiǎn)指數(shù)評(píng)分（RMI)癌基因和抗癌基因突變的檢測(cè)，特別(tbi)是與遺傳相關(guān)基因的檢測(cè)（芯片）發(fā)現(xiàn)和尋找新的特異抗原和基因第八頁(yè)，共六十七頁(yè)。腫瘤標(biāo)記(bioj)物的定義與腫瘤相關(guān)的抗原或某種生物活性物質(zhì)(wzh) 腫瘤細(xì)胞異常表達(dá) 反映癌變發(fā)生、發(fā)展過程 可被檢出第九頁(yè)，共六十七頁(yè)。有效的腫瘤(zhngli)標(biāo)記物特異性強(qiáng)敏感性高交叉反應(yīng)(fnyng)小早期診斷率高隨病情變化監(jiān)測(cè)值變化明顯第十頁(yè)，共六十七頁(yè)。臨床(ln chun)應(yīng)用 腫瘤診斷及鑒別診斷 腫瘤殘存 復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)及復(fù)發(fā)部位監(jiān)測(cè) 療效觀察及預(yù)后評(píng)估 對(duì)無癥狀早期(zoq

4、)癌及高危人群的篩查 第十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。血清腫瘤(zhngli)標(biāo)志物的檢測(cè)CA125是應(yīng)用最多的卵巢癌血清腫瘤標(biāo)志物，特別是最常用的監(jiān)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)的指標(biāo)(zhbio)。期卵巢癌患者僅有約30-50% 35u/ml，監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值分別為79、95、100。 1健康婦女、3良性卵巢腫瘤、6非卵巢相關(guān)的良性疾病可有血清CA125水平升高。在子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔結(jié)核、炎癥等甚至高達(dá)50-70%第十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。卵巢癌相關(guān)(xinggun)的其它標(biāo)志物基因分析和組織化學(xué)分析已發(fā)現(xiàn)許多(xdu)新的可能與卵巢癌相關(guān)的標(biāo)志物MUC1Kallikreins：hK4, hK6,

5、hK8, hK10MesothelinAntileukoproteinase 1 (ALP1)OsteopontinVEGFS100A1InhibinLPAB7-H4HE4，表達(dá)上調(diào)在卵巢癌中最常見，且在早、晚期患者中mRNA和蛋白的表達(dá)均上調(diào)。第十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4HE4 （Human Epididymis Secretory Protein 4,人附睪分泌蛋白4） 1991年由Kirchhoff等從人的附睪中克隆出cDNA，基因定位在染色體 20q12-q13.1，全長(zhǎng)為12kb左右，由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成，編碼的蛋白質(zhì)與細(xì)胞外蛋白酶抑制劑有很高的同源性，是一種酸性蛋白質(zhì)。19

6、99年Schummer等發(fā)現(xiàn)HE4 mRNA在卵巢癌組織中高表達(dá)，而在癌旁組織中 不表達(dá)。HE4在惡性腫瘤中的高表達(dá)多見于卵巢癌、子宮(zgng)內(nèi)膜癌，少見于肺腺癌及間皮瘤。第十四頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4在早期（I期）的卵巢癌中的敏感性及檢測(cè)卵巢癌總的敏感性均高于CA125，是卵巢癌敏感及特異的標(biāo)志物，可用于對(duì)卵巢癌的早期診斷及輔助監(jiān)控卵巢癌患者(hunzh)的治療情況。 英國(guó)的一項(xiàng)研究對(duì)200，000婦女用30多種腫瘤標(biāo)記物分別單獨(dú)或與CA125聯(lián)合進(jìn)行卵巢癌篩查，HE4可以使診斷卵巢癌的敏感度和特異度提高 第十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。Biochemistry of HE4HE4 - Human

7、Epidiymis secretory protein 4Member of the WAP-gene family of protease inhibitors (new name WFDC-gene family)Characterized by an approx 50 aa sequence with 8 highly conserved cysteine residues that form 4 disulphide bridges.WFDC (Whey Acidic Protein Four Disulphide Core)Tumour associated WFDC-protei

8、nsALP1, Elafin, HE4 (WFDC2), PS20 (WFDC1)Chromosome 20q12- q13.1 contains a locus with several members of the WFDC family.Amplified in several cancers: ovarian, breast, Colon, pancreatic, lung cancerWFDC gene locus第十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4 mRNA expression profileRestricted expression profile in normal tissueEx

9、pressed in normal epididymis, and epithelia of the respiratory and reproductive tract Tumor-restricted expression in ovarian cancer 90 % of serous ovarian cancerHE4 mRNA highly expressed in lung adenocarcinomas 60 % high expression in AdC150pMCUTOFF=73.7pMCUTOFF=150pM上皮性卵巢癌968147491.7（88/96）77.1%(74

10、/96)盆腔良性疾病30526240314.1%(43/305)0.98%(3/305)非盆腔良性疾病956232134.7%(33/95)1.05%(1/95)其它腫瘤患者986233336.7%(36/98)3.1%(3/98)健康人群3633451804.95%(18/363)0干擾樣本11089101119.1%(21/110)10%(11/110)說明(shumng)：在干擾樣本中，提示高膽紅素可能對(duì)HE4的檢測(cè)有干擾，與國(guó)外研究結(jié)果 一致。第三十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4在卵巢癌惡性腫瘤中的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)(jin c)的評(píng)價(jià)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)HE4濃度變化要求：為了避免試劑檢測(cè)中存在的偏差，選擇2.

11、5倍的最大精密度(CV)作為HE4濃度變化的指標(biāo)。HE4的陽性變化（陽轉(zhuǎn)）/陰性變化（陰轉(zhuǎn)）為當(dāng)前結(jié)果比前一測(cè)試結(jié)果的測(cè)定值升高或者降低至少2.5倍最大CV。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)樣本： 多中心臨床動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)(pngji)，共收集34例上皮性卵巢癌患者的64份血清。 32例患者同時(shí)收集了術(shù)前、術(shù)后樣本。 2例患者動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)均為術(shù)后樣本。第三十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4濃度變化與病程(bngchng)發(fā)展情況統(tǒng)計(jì)HE4濃度變化惡化無惡化合計(jì)陽轉(zhuǎn)033無陽轉(zhuǎn)06161合計(jì)06464臨床動(dòng)態(tài)(dngti)監(jiān)測(cè)符合率: 61/64=95.3%，HE4 可以用于上皮性卵巢癌的療效監(jiān)測(cè)。第三十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。32例患者

12、術(shù)前/術(shù)后HE4濃度(nngd)變化圖 備注：HE4濃度變化(binhu)值=（手術(shù)后HE4濃度-手術(shù)前HE4濃度）/手術(shù)前HE4濃度100% 其中1-25號(hào)為陰轉(zhuǎn)樣本，26-32號(hào)為非陰轉(zhuǎn)樣本。 -120.00%-100.00%-80.00%-60.00%-40.00%-20.00%0.00%20.00%1234567891011121314151617181920212223242526272829303132卵巢癌患者姓名HE4濃度變化值（%）第三十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4 EIA精密度的評(píng)價(jià)(pngji) 三家臨床醫(yī)院測(cè)定的3份高、中、低臨床樣本結(jié)果分別(fnbi)進(jìn)行匯總分析每份樣本

13、有30次檢測(cè)結(jié)果，分別計(jì)算CV值，CV值均低于15%符合臨床試驗(yàn)方案要求。第三十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4在交界(jioji)性腫瘤的濃度分布臨床試驗(yàn)過程中共檢測(cè)(jin c)了10例交界性腫瘤，其中2例HE4濃度分布為150-300pM，3例為73.7-150pM，5例低于73.7pM。第四十頁(yè)，共六十七頁(yè)。研究(ynji)結(jié)果當(dāng)以73.7 pM作為CUT-OFF值時(shí)，臨床在進(jìn)行診斷中如果能結(jié)合其它的臨床診斷方法，可以大大提高對(duì)上皮性卵巢癌病人的診斷率，避免漏檢，以免貽誤患者的治療。 當(dāng)以150 pM作為CUT-OFF值時(shí)，HE4在健康人群及良性疾患等對(duì)照組中的具高特異性，能有效的鑒別診斷卵巢

14、良、惡性腫瘤，為臨床上皮性卵巢癌的輔助診斷提供有力幫助。HE4濃度變化與病情發(fā)展(fzhn)間的一致性為95.3% (61/64)，說明HE4 EIA可以用于上皮性卵巢癌的療效監(jiān)測(cè)。精密度試驗(yàn)結(jié)果提示證明試劑盒性能可靠、方法穩(wěn)定。 第四十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4與CA125血清(xuqng)檢測(cè)比較（北京大學(xué)人民醫(yī)院） 總例數(shù) HE4(pmol/L) CA125 (ku/L) P 值 中位數(shù)(范圍) 陽性率 中位數(shù)(范圍) 陽性率 卵巢惡性腫瘤 30 243.8( 27.31306.2) 63.3% 601.4(6.2797.6) 86.7% 0.03 卵巢良性(lin xn)疾病 卵巢良性腫

15、瘤 45 24.7(8 65.7) 0 12.0(2.8735.5) 8.9% 0.058 子宮內(nèi)膜異位 57 38.3(6.567.3) 0 52.9(8.9 644.9) 56.1% 0.000 盆腔炎性疾病 8 26.5(11 36.7) 0 41.3(6.3741.6) 62.5% 0.000 健康人 137 32.4(19.4107.2) 0 11.1(1.428.8) 0 /第四十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。Allard 在2008年ASCO會(huì)議上報(bào)道，對(duì)80例上皮性卵巢癌患者經(jīng)過治療后監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的434個(gè)血清樣本，分別檢測(cè)其CA125和HE4，臨床用CT影像學(xué)來判斷腫瘤(zhngli)大小和

16、復(fù)發(fā)。結(jié)果 CA125 或HE4 聯(lián)合應(yīng)用與臨床一致性較高，為 83.8% (67/80)。連續(xù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)臨床符合率： CA125 78.8% (63/80)； HE4 76.2% (61/80). CA125 不符時(shí), HE4符合率 23.5% (4/17).；HE4 不符時(shí) CA125 符合率 31.6% (6/19). 聯(lián)合 CA125 or HE4 臨床符合率 83.8% (67/80). 第四十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。1 out of 5 women will be diagnosed with an adnexal mass during their lifetime15 - 10% of

17、 women will have surgery for an ovarian neoplasm 13 - 21% of these masses will be malignant由婦科腫瘤專科醫(yī)生施行手術(shù)將改善(gishn)卵巢癌的預(yù)后問題是：How do we identify malignant pelvic masses from benign masses?術(shù)前確診(quzhn)可改善卵巢癌預(yù)后第四十四頁(yè)，共六十七頁(yè)。Improved survival with surgery by ovarian cancer specialistsPaulsen et al, Int J Gy

18、necol Ca, 2006: 16; 11-17C- 45C- 45TH: Teaching hospitalNTH: Nonteaching hospitalType of Surgeon Impacts Survival ratesType of Hospital Impacts Survival rates第四十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。第四十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。 ROMAPremenopausal women Predictive Index (PI) = -12.0 + 2.38*LNHE4 + 0.0626*LNCA125 Postmenopausal womenPredictive In

19、dex (PI) = -8.09 + 1.04*LNHE4 + 0.732*LNCA125 ROMA value = expPI / 1 + expPI x 100 Risk of Ovarian Malignancy Algorithm (ROMA) valueEstimate of the risk of ovarian cancer given that the patient had a pelvic mass; their HE4 and CA125 values; and their menopausal status 第四十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。Biomarker and ROMA

20、Scatterplot第四十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。ROMA Validation trial - ConclusionsAt a specificity of 75%, the overall sensitivity for EOC+LMP was 89% Overall sensitivity for EOC was 94%Pre-menopausal women 89%Post-menopausal women 95%NPV 94% for EOC+LMP in Pre- and postmenopausal women combinedNPV 97% for EOC17/279 (6%) p

21、atients classified as low risk had EOC or LMP9/17 had LMP tumor1 (0.4%) had late stage (III/IV) cancerROMA effectively stratifies patients with pelvic mass into groups with low and high risk of having epithelial ovarian cancer第四十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。C- 50ROMA vs RMIRisk of Malignancy Index (RMI)RMI = U x M x se

22、rum CA 125 levelU= 0 for imaging score of 0= 1 for imaging score of 1= 3 for imaging score of 2-5M= 1 if premenopausal= 3 if postmenopausalJacobs I et al. Br J Obstet Gynecol.1990; 97:992-929.第五十頁(yè)，共六十七頁(yè)。ROMA has increased sensitivity compared with RMIPre & PostMenopausalBenign (n = 315) vs EOC (n =

23、124)Sensitivity* (95% CI)Specificity (95% CI)RMI85% (77% to 90%)75% (70% to 80%)ROMA94% (89% to 98%)75% (70% to 80%)Benign and EOC: All Stages*Two Sample Test of Equality of Proportions p=0.0129CI: Confidence Interval第五十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。ROMA Has Increased Sensitivity vs RMI For Early Stage CancerPre & PostM

24、enopausalBenign (n=315) vs Stage I-II EOC (n=35)Sensitivity* (95% CI)Specificity (95% CI)RMI66% (48% to 81%)75% (70% to 80%)ROMA86% (70% to 95%)75% (70% to 80%)Benign and EOC: Stage I & II*Two Sample Test of Equality of Proportions p=0.0510CI: Confidence Interval第五十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。表 患者(hunzh)被ROMA劃分為高危組和低危

25、組的分布 月經(jīng)狀態(tài) 疾病 高危(例 ) 低危(例) 合計(jì)(例) 敏感性(%) 特異性(%) PPV (%) NPV (%) 絕經(jīng)后 惡性 35 2 37 EOC 28 0 28 良性 4 8 12 合計(jì)a 32 8 40 100.0 66.7 87.5 100.0 合計(jì)b 39 10 49 94.6 66.7 89.7 80.0 絕經(jīng)前 惡性 12 4 16 EOC 8 0 8 良性 23 103 126 合計(jì)a 31 103 134 100.0 81.7 25.8 100.0 合計(jì)b 35 107 142 75.0 81.7 22.9 96.3 全部(qunb) 惡性 47 6 53 EOC

26、 36 0 36 良性 27 111 138 合計(jì)a 63 111 174 100.0 80.4 57.1 100.0 合計(jì)b 74 117 191 88.7 80.4 63.5 94.9 a：指EOC與良性腫瘤的合計(jì)，b：指惡性腫瘤與良性腫瘤的合計(jì) 第五十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4 Clinical InvestigationsItalyMestre-Venice Pelvic massMilano Pelvic massBrescia Endometrial cancerRoma Ongoing real life studyNorwayOslo Many biobank studiesSw

27、edenStockholm Biobank pelvic massBrasilSao Paolo Ovarian cancerBelgiumLeuven Pelvic mass第五十四頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4 Clinical InvestigationsHE4用于卵巢癌的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和對(duì)復(fù)發(fā)的診斷(zhndun)血清HE4與CA125聯(lián)合檢測(cè)用于鑒別卵巢癌和卵巢子宮內(nèi)膜異位癥血清HE4 檢測(cè)用于子宮內(nèi)膜癌的診斷和隨訪血清HE4用于肺癌的診斷 第五十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。HE4聯(lián)合CA125鑒別(jinbi)診斷子宮內(nèi)膜異位癥和卵巢癌HE4的編碼基因WFDC2主要在卵巢子宮內(nèi)膜樣癌、子宮內(nèi)膜癌中有表達(dá), 并且在正常(zhngchng)的子宮內(nèi)膜腺體中也有表達(dá)，但是在子宮內(nèi)膜異位病灶中是否有表達(dá)尚不明確，第五十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。我們實(shí)驗(yàn)室最檢測(cè)了57例卵巢子宮內(nèi)膜異位癥患者血漿中HE4和CA125的濃度。數(shù)據(jù)結(jié)果與49例卵巢癌，60例卵巢良性腫物(zhn w)，50例健康對(duì)照作對(duì)比，初步探討血清人附睪分泌蛋白4(HE4)和CA125水平檢測(cè)在鑒別診斷子宮內(nèi)膜異位癥和卵巢癌的價(jià)值。第五十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。（1）CA125在各組中的中位數(shù) （2）HE4在各組中的中位數(shù) 第五十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。 在子宮(z