培養(yǎng)基適用性檢查

1、1010倍遞稀釋微生物計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查記錄.培養(yǎng)基名稱：批號：.對照培養(yǎng)基批號：對照培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家：.配制日期：年月日實驗日期：年月日一、方法依據(jù)：中國藥典2010年版。二、菌液制備：（1）大腸埃希菌新鮮肉湯培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無菌NaCl溶液10倍遞稀釋（2）金黃色葡萄球菌新鮮肉湯培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無菌NaCl溶液10倍遞稀釋（3）枯草芽孢桿菌新鮮肉湯培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無菌NaCl溶液10倍遞稀釋（4）白色念珠菌新鮮改良馬丁培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無菌NaCl溶液10倍遞稀釋（5）黑曲霉新鮮改良馬丁培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無菌NaCl溶液需要的菌種在內(nèi)劃三、每m

2、l菌液含菌量的計數(shù)測定。測定方法：取稀釋后的菌液1ml,置直徑90mm的無菌平皿中，注入15-20ml，溫度不超過45的溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細菌類別計數(shù)選用該培養(yǎng)基）或玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基（霉菌、酵母菌類別計數(shù)選用該培養(yǎng)基），混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2個平板。細菌類別培養(yǎng)溫度3035；霉菌、酵母菌類別培養(yǎng)溫度為2328。細菌類別培養(yǎng)3天，霉菌類別培養(yǎng)5天。四、結(jié)果判斷：若被檢培養(yǎng)基上的菌落平均不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大小應與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，則判斷該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。菌種類被檢型培養(yǎng)基菌種類被檢型培養(yǎng)基養(yǎng)基B被檢與對照培養(yǎng)基菌落

3、形態(tài)（%大菌腸埃皿1大菌腸埃皿1皿2平均皿1皿2平均B金黃色葡萄球枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉結(jié)果判斷檢驗人：復核人：微生物計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查記錄驗證目的：細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用培養(yǎng)基應進行培養(yǎng)基的適應性檢查，本次驗證的目的是為了確證營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細菌、霉菌及酵母菌測定。參照標準：2010年版中國藥典驗證項目：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基驗證所用培養(yǎng)基：名稱批號生產(chǎn)廠家名稱批號生產(chǎn)廠家77、結(jié)果記錄：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基121220北京三藥科技開發(fā)公司玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂對照培養(yǎng)基玟瑰紅鈉瓊脂對照培基130107135003-201103135005-2011

4、03北京三藥科技開發(fā)公司營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基121220北京三藥科技開發(fā)公司玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂對照培養(yǎng)基玟瑰紅鈉瓊脂對照培基130107135003-201103135005-201103北京三藥科技開發(fā)公司中國藥品生物制品鑒定所中國藥品生物制品鑒定所配制日期：2013年3實驗日期2013年3月月1日20日5、菌液制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面上。培養(yǎng)24小時；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面，培養(yǎng)24小時，上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液10倍稀釋制成每1ml含菌數(shù)為50-100cfu的菌懸液。6、適用性檢查：取大腸埃希菌、

5、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各50-100cfu，分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，每株實驗平行制備2個平皿，另1平皿不接種菌作為空白對照，置30-35培養(yǎng)48小時，計數(shù)；取白色念珠菌50-100cfu，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，每株實驗菌平行制備2個平皿，另1平皿不接種菌作為空白對照，置23-28培養(yǎng)72小時，計數(shù)。同時，用相應對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基同步進行上述試驗。驗證菌株皿號供試培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基回收率%應菌落形態(tài)組Cfu/ml組Cfu/ml加與大小大腸埃希菌1（培養(yǎng)2天計數(shù)）788280合格2688476平均738378金黃色葡萄1球菌（培養(yǎng)2天計數(shù)）807678合格2746871平均787476枯草芽孢桿1菌（培養(yǎng)2天計數(shù)）677370合格2756972平均717171白色念珠菌1（培養(yǎng)3天837981合格計數(shù)）2776973平均807477備注：空白皿均