醫(yī)用顯微鏡簡介課件

1、醫(yī)用顯微鏡簡介2015.05.27顯微鏡的概念 顯微鏡是用于放大微小物體使人肉眼能夠看到的光學(xué)儀器，是人類進(jìn)入原子時(shí)代的標(biāo)志。顯微鏡的發(fā)展簡史16世紀(jì) 荷蘭的眼鏡商詹森（Zaccharias Janssen）和他的顯微鏡 世界上最早的一臺(tái)顯微鏡顯微鏡的發(fā)展簡史17世紀(jì)羅伯特 虎克（Robert Hook）改進(jìn)了顯微鏡，并發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞 列文虎克（Antony van Leeuwenhoek）首次用顯微鏡發(fā)現(xiàn)微生物顯微鏡的發(fā)展簡史17世紀(jì)顯微鏡分類光學(xué)顯微鏡電子顯微鏡光學(xué)顯微鏡可分為: 普通光學(xué)顯微鏡暗視野顯微鏡相差顯微鏡熒光顯微鏡倒置顯微鏡體視顯微鏡偏光顯微鏡等10多種。 顯微鏡分類光學(xué)顯微鏡可把

2、物體放大2000倍，分辨的最小極限達(dá)0.1微米?？吹郊?xì)胞和部分細(xì)胞器，如線粒體和葉綠體，但只能看到其存在，看不到細(xì)胞器的具體結(jié)構(gòu)（如葉綠體的基粒、線粒體的脊就不能看到） 電子顯微鏡最大放大倍率超過300萬倍，可以看到細(xì)胞器的精細(xì)結(jié)構(gòu)，甚至可以看到病毒這種最小生物的結(jié)構(gòu)，更甚至可以看到大分子，如蛋白質(zhì)普通光學(xué)顯微鏡原理 普通光學(xué)顯微鏡由光學(xué)系統(tǒng)、機(jī)械裝置和照明系統(tǒng)三部分組成。光學(xué)系統(tǒng)由物鏡和目鏡組成，目鏡和物鏡都是凸透鏡，焦距不同。物體通過物鏡成倒立、放大的實(shí)像。目鏡相當(dāng)于普通的放大鏡，該實(shí)像又通過目鏡成正立、放大的虛像。經(jīng)顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像。普通光學(xué)顯微鏡構(gòu)造機(jī)械部分：鏡座、

3、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、粗準(zhǔn)焦螺旋、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋照明部分：反光器、聚光器光學(xué)部分：目鏡、物鏡普通光學(xué)顯微鏡用途 普通光學(xué)顯微鏡在醫(yī)學(xué)中主要是用來生物切片、細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究。普通光學(xué)顯微鏡檢驗(yàn)中的應(yīng)用 在臨床檢驗(yàn)中，普通光學(xué)顯微鏡的使用頻率高，其中臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)、血液學(xué)檢驗(yàn)、微生物學(xué)檢驗(yàn)等都要用到顯微鏡。體液室：尿常規(guī)復(fù)查鏡檢、糞便常規(guī)鏡檢、胸腹水常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)、腦脊液常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)、腦脊液細(xì)胞學(xué)、1小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)及尿紅細(xì)胞形態(tài)等；臨檢室：血常規(guī)有20%左右的標(biāo)本需要進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢；微生物室：細(xì)菌涂片、真菌涂片、結(jié)核菌涂片、培養(yǎng)標(biāo)本菌落涂片、血培養(yǎng)報(bào)陽涂片、墨汁

4、染色等普通光學(xué)顯微鏡保養(yǎng)防潮防塵防腐蝕防震與放熱機(jī)械部件的清潔 可用面紗或綢布擦拭，不能使用乙醇、乙醚等有機(jī)溶劑擦拭，以免損傷漆面光學(xué)系統(tǒng)的清潔 如鏡片表面有擦不掉的污物、油漬或手指印鏡片生霧長霉時(shí)，可用20%左右的酒精和80%左右的乙醚配置清洗劑進(jìn)行清洗。清洗時(shí)應(yīng)用軟毛刷或棉球沾有少量清洗劑，從鏡頭中心向外做圓運(yùn)動(dòng)。切忌把這類鏡頭浸泡在清洗劑中清洗，清洗鏡頭時(shí)不要用力擦拭，否則會(huì)損傷增透膜，損壞鏡頭嚴(yán)禁用干棉球、干布?jí)K或干鏡頭紙擦拭鏡頭表面，否則會(huì)刮傷鏡頭表面，嚴(yán)重?fù)p壞鏡頭；也不能用水擦拭鏡頭，否則會(huì)留下水漬，而且會(huì)滋生真菌，損壞鏡頭暗視野顯微鏡原理 暗視野顯微鏡是在普通光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)上構(gòu)

5、成的，其用強(qiáng)而窄的斜射光束照射標(biāo)本，而又不讓光束進(jìn)入物鏡。在沒有光進(jìn)入物鏡時(shí)，視野是黑暗的，故叫暗視野顯微鏡。而標(biāo)本中的微粒受光照射后能夠散射光線，當(dāng)散射光線進(jìn)入物鏡時(shí)，在顯微鏡中能夠看到微粒的散射光點(diǎn)，好象微粒本身在發(fā)光一樣。暗視野顯微鏡用途 暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因?yàn)榫哂泻椭車h(huán)境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對(duì)比。但只能看到物體的存在、運(yùn)動(dòng)和表面特征，不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。 暗視野顯微鏡常用于檢查梅毒螺旋體，對(duì)早期梅毒的診斷有十分重要的意義。相差顯微鏡原理 光波有振幅（亮度）、波長（顏色）及相位（指在某一時(shí)間

6、上光的波動(dòng)所能達(dá)到的位置）的不同。當(dāng)光通過物體時(shí)，如波長和振幅發(fā)生變化，人們的眼睛才能觀察到，這就是普通顯微鏡下能夠觀察到染色標(biāo)本的道理。而活細(xì)胞和未經(jīng)染色的生物標(biāo)本，因細(xì)胞各部微細(xì)結(jié)構(gòu)的折射率和厚度略有不同，光波通過時(shí)，波長和振幅并不發(fā)生變化，僅相位有變化，而這種微小的變化，人眼是無法加以鑒別的，故在普通顯微鏡下難以觀察到。而相差顯微鏡可以把相差變?yōu)檎穹顏碛^察活細(xì)胞和未染色的標(biāo)本。相差顯微鏡用途 相差顯微鏡主要用于觀察活細(xì)胞或不染色的組織切片，有時(shí)也可用于觀察缺少反差的染色樣品?？梢杂^察到透明標(biāo)本的細(xì)節(jié)，適用于對(duì)活體細(xì)胞生活狀態(tài)下的生長、運(yùn)動(dòng)、增殖情況及微細(xì)結(jié)構(gòu)的觀察。熒光顯微鏡原理 熒光

7、顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。細(xì)胞中有些物質(zhì)，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。 電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理，用電子束和電磁透鏡代替光束和光學(xué)透鏡，作用于被檢樣品的電子束經(jīng)電磁透鏡放大后打到熒光屏上成像，使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像。電子顯微鏡成像原理鏡筒：電子槍、電子透鏡、樣品架、熒光屏和照相機(jī)構(gòu)真空系統(tǒng)：機(jī)械真空泵、擴(kuò)散泵和真空閥門等電源柜：高壓發(fā)生器、勵(lì)磁電流穩(wěn)流器和各種調(diào)節(jié)控制單元組成電子顯微鏡構(gòu)造電子顯微鏡用途電子顯微鏡下的紅細(xì)胞電子顯微鏡下的血凝塊電子顯微鏡缺點(diǎn)電子顯微鏡購買和維護(hù)的價(jià)格都比