2021年整理試驗室生物安全手冊

1、實驗室生物安全手冊實驗室生物安全手冊編輯整理:尊敬的讀者朋友們：這里是精品文檔編輯中心，本文檔內容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的，發(fā)布之前我們對 文中內容進行仔細校對，但是難免會有疏漏的地方，但是任然希望（實驗室生物安全手冊）的內容 能夠給您的工作和學習帶來便利。同時也真誠的希望收到您的建議和反饋這將是我們進步的源泉， 前進的動力。本文可編輯可修改，如果覺得對您有幫助請收藏以便隨時查閱，最后祝您生活愉快業(yè)績進步，以 下為實驗室生物安全手冊的全部內容。實驗室生物安全手冊實驗室生物安全規(guī)范實驗室生物安全手冊目錄 TOC o 1-5 h z 實驗室生物安全規(guī)范2目錄3 HYPERLINK l

2、bookmark0 o Current Document 第一部分基本規(guī)范5 HYPERLINK l bookmark2 o Current Document 進入規(guī)定5人員防護6 HYPERLINK l bookmark8 o Current Document 實驗室工作區(qū)7 HYPERLINK l bookmark10 o Current Document 生物安全管理7 HYPERLINK l bookmark12 o Current Document 第二部分實驗室技術8 HYPERLINK l bookmark14 o Current Document 移液管和移液輔助器的使用8 H

3、YPERLINK l bookmark16 o Current Document 生物安全柜的使用8 HYPERLINK l bookmark18 o Current Document 血清的分離9 HYPERLINK l bookmark20 o Current Document 離心機的使用9 HYPERLINK l bookmark22 o Current Document 冰箱與冰柜的維護和使用10 HYPERLINK l bookmark24 o Current Document 裝有凍干物質安甑的開啟10 HYPERLINK l bookmark26 o Current Docum

4、ent 第三部分消毒和滅菌11 HYPERLINK l bookmark28 o Current Document 一、定義11 HYPERLINK l bookmark30 o Current Document 二、化學殺菌劑11氯（次氨酸鈉）12 HYPERLINK l bookmark32 o Current Document 二氯異氰尿酸鈉13131414 HYPERLINK l bookmark34 o Current Document 氯胺13 甲醛 戊二醒 酚類化合物131414實驗室生物安全手冊 TOC o 1-5 h z HYPERLINK l bookmark40 o Cu

5、rrent Document 季銨鹽類化合物15 HYPERLINK l bookmark42 o Current Document 乙醇15 HYPERLINK l bookmark44 o Current Document 碘和碘伏16 HYPERLINK l bookmark46 o Current Document 過氧化氫和過氧乙酸16 HYPERLINK l bookmark48 o Current Document 三、消除局部環(huán)境的污染17四、洗手/消除手部污染17五、高壓滅菌18 HYPERLINK l bookmark50 o Current Document 高壓滅菌參數(shù)

6、18 HYPERLINK l bookmark52 o Current Document 高壓滅菌器的裝載18 HYPERLINK l bookmark54 o Current Document 高壓滅菌器使用注意事項18 HYPERLINK l bookmark56 o Current Document 附錄120 HYPERLINK l bookmark58 o Current Document 設備的安全性20 HYPERLINK l bookmark60 o Current Document 表A1-1可能產生危害的儀器設備及其操作20 HYPERLINK l bookmark62 o

7、 Current Document 表A1-2儀器設備相關事故的原因 23 HYPERLINK l bookmark64 o Current Document 表A1-3生物安全設備24 HYPERLINK l bookmark66 o Current Document 表A14個體防護裝備26附錄228 HYPERLINK l bookmark68 o Current Document 實驗室有毒、有害物品標準管理規(guī)程28實驗室生物安全手冊第一部分基本規(guī)范根據感染性微生物的相對危害程度（危險度2級，病原體能夠對人致病，但對實驗室工作 人員或環(huán)境不易導致嚴重危害），本實驗室為基礎實驗室,屬于二

8、級生物安全水平。進入規(guī)定1、在實驗室門上應標有國際通用的生物危害警告標志（圖1）。2、只有經批準的人員方可進入實驗室工作區(qū)域.3、實驗室的門應保持關閉。4、兒童不應被批準或允許進入實驗室工作區(qū)域.5、進入動物房應當經過特別批準。6、與實驗室工作無關的動物不得帶入實驗室。實驗室生物安全手冊I生物危害卜授權人員方可進入生物安全水平：責任人：緊急聯(lián)系電話：白天電話：家庭電話:必須得到上述責任人的授權方可進入圖1張貼于實驗室門上的生物危害警告標志人員防護1、在實驗室工作時，任何時候都必須穿著工作服。2、在進行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的 操作時，應戴上合適的

9、手套。手套用完后，應先消毒再摘除，隨后必須洗手。3、在處理完感染性實驗材料和動物后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面 罩（面具）或其他防護設備。5、嚴禁穿著實驗室工作服離開實驗室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間）。實驗室生物安全手冊6、不得在實驗室內穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。9、在實驗室內用過的工作服不得和日常服裝放在同一柜子內。實驗室工作區(qū)1、實驗室應保持清潔整齊，嚴禁擺放和實驗無關的物品

10、.2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結束之后，都必須清除工作臺面的污染.3、所有受到污染的材料、標本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染.4、在進行包裝和運輸時必須遵循國家和/或國際的相關規(guī)定。5、如果窗戶可以打開，則應安裝防止節(jié)肢動物進入的紗窗.生物安全管理1、實驗室主任（對實驗室直接負責的人員）負責制訂和采用生物安全管理計劃以及安全或操 作手冊。2、實驗室主管（向實驗室主任匯報）應當保證提供常規(guī)的實驗室安全培訓.3、要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員，同時要求他們閱讀生物安全或操作手冊, 并遵循標準的操作和規(guī)程。實驗室主管應當確保所有實驗室人員都了解這些要求。實

11、驗室內應 備有可供取閱的安全或操作手冊。4、應當制訂節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。5、如有必要,應為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學評估、監(jiān)測和治療，并應妥善保存相應的醫(yī) 學記錄。實驗室生物安全手冊第二部分實驗室技術實驗室傷害以及與工作有關的感染主要是由于人為失誤、不良實驗技術以及儀器使用不當造成的.本部分概要介紹了避免或盡量減少這類常見問題的技術和方法。移液管和移液輔助器的使用1、應用移液輔助器，嚴禁用口吸取。2、所有移液管應帶有棉塞以減少移液器具的污染。3、不能向含有感染性物質的溶液中吹入氣體。4、感染性物質不能使用移液管反復吹吸混合。5、不能將液體從移液管內用力吹出。6、污染的移液管應完全浸

12、入適當?shù)南疽褐?，并在消毒液中浸泡適當時間后再進行處理。7、盛放廢棄移液管的容器應當放在生物安全柜內。8、為了避免感染性物質從移液管中滴出而擴散，在工作臺面應當放置一塊吸有消毒液的紙， 使用后將其按感染性廢棄物處理。生物安全柜的使用1、生物安全柜運行正常時才能使用。2、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板.3、安全柜內應盡量少放置器材或標本，不能影響后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán)。4、所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到.5、盡量減少操作者身后的人員活動.6、操作者不應反復移出和伸進手臂以免干擾氣流。7、不要使實驗記錄本、移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體

13、流動，引起物品實驗室生物安全手冊的潛在污染和操作者的暴露.8、工作完成后以及每天下班前，應使用70%的酒精對生物安全柜的臺面進行擦拭，但切忌用酒 精擦拭玻璃擋板。9、在安全柜內的工作開始前和結束后，安全柜的風機應至少運行5min。10、在生物安全柜內操作時，不能進行文字工作。血清的分離1、只有經過嚴格培訓的人員才能進行這項工作.2、操作時應戴手套以及眼睛和黏膜的保護裝置。3、血液和血清應當小心吸取，而不能傾倒。嚴禁用口吸液.4、移液管使用后應完全浸入適當?shù)南疽褐?，并在消毒液中浸泡適當?shù)臅r間，然后再丟棄或滅 菌清洗后重復使用。5、帶有血凝塊等的廢棄標本管,在加蓋后應當放在適當?shù)姆缆┤萜鲀雀邏簻?/p>

14、菌。離心機的使用1、應按照操作手冊來操作離心機。2、離心管在使用前應檢查是否破損。3、用于離心的離心管應當始終牢固蓋緊。4、離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內進行。5、離心桶和十字軸應按重量配對，并在裝載離心管后正確平衡.6、操作指南中應給出液面距離心管管口需要留出的空間大小.7、空離心桶應當用蒸餾水來平衡。8、每次使用后，要清除離心桶、轉子和離心機腔的污染.實驗室生物安全手冊9、使用后應當將離心桶倒置存放使平衡液流干。10、應當每天檢查離心機內轉子部位的腔壁是否被污染或弄臟，如污染明顯，應重新評估離心 操作規(guī)范.冰箱與冰柜的維護和使用1、冰箱、低溫冰箱和干冰柜應當定期除霜和清潔

15、，應清理出所有在儲存過程中破碎的安甑和 試管等物品。清理時應戴厚橡膠手套并進行面部防護，清理后要對內表面進行消毒。2、儲存在冰箱內的所有容器應當清楚地標明內裝物品的科學名稱、儲存日期和儲存者的姓名.未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄。3、應當保存一份凍存物品的清單。4、除非有防爆措施，否則冰箱內不能放置易燃溶液。冰箱門上應注明這一點。裝有凍干物質安甑的開啟1、首先清除安甑外表面的污染。2、如果管內有棉花或纖維塞，可以在管上靠近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡。3、用一團酒精浸泡的棉花將安甑包起來以保護雙手,然后手持安甑從標記的銼痕處打開。4、將頂部小心移去并按污染材料處理。5、如果塞子仍然在安甑上

16、，用消毒鑷子除去。6、緩慢向安甑中加入液體來重懸凍干物，避免出現(xiàn)泡沫.10實驗室生物安全手冊第三部分消毒和滅菌一、定義關于消毒和滅菌有許多不同的術語，下面是生物安全中較常用的：抗菌劑(antimicrobial)能夠殺死微生物或抑制它們生長和繁殖的制劑.防腐劑(antiseptic)能夠抑制微生物生長和繁殖但不足將其殺滅的物質。防腐劑經常 應用于體表。生物殺滅劑(biocide)所有能夠殺死生物體的制劑的統(tǒng)稱?；瘜W殺菌劑(chemicalgermcide)用于殺死微生物的化學品或化學混合物。清除污染(decontamination)去除和/或殺死微生物的任何過程。該詞也用于去除或中和 有危害的

17、化學品和放射性物質。消毒劑(disinfectant)用于殺死微生物的化學品或化學混合物，但不一定殺死其胞子。 消毒劑常用于非生命物體或其表面。消毒(disinfection)殺死微生物的物理或化學手段，但不一定殺死其胞子。滅菌劑(microbicide)能夠殺死微生物的化學品或化學混合物。該詞常?？梢源妗吧?物殺滅劑”、“化學殺菌劑”或“抗菌劑”。殺胞子劑(sporocide)用于殺死微生物和胞子的化學品或化學混合物。滅菌(sterilization)殺死和/或去除所有微生物及其胞子的過程.二、化學殺菌劑許多殺菌劑對人或環(huán)境有害，應當按生產商的說明小心地進行選擇、貯存、操作、使用和 廢棄。

18、為了個人的安全，建議在稀釋化學殺菌劑時應戴手套、圍裙和保護眼睛的器具。下面介紹一些常規(guī)使用的化學殺菌劑，并列出它們的一般用途和安全特征。除非另外標注, 殺菌劑的濃度用重量/體積(w/v)來表示。表31匯總了含氯消毒劑的推薦使用濃度。表1含氯消毒劑的推薦使用濃度11實驗室生物安全手冊實驗室生物安全手冊“清潔”情況下a “污染”情況下b所需的有效氯濃度0。1%(1 g/L) 0.5%(5 g/L)所需的有效氯濃度20 mL/L1.4 g/L1.7 g/L每升20 mL/L1.4 g/L1.7 g/L每升1片20 g/L100 mL/L7.0 g/L8。 5 g/L每升4 片20 g/L次氯酸鈣（含

19、有70%的有效氯）二氯異氧尿酸鈉粉劑（含60%的有效氯）二氯異氧尿酸鈉片劑（每片含1.5 g有效氯）氯胺（含有25%的有效氯）ca去除大部分污染材料后b溢流情況（如血液）或大量污染材料沒有除去時c參見正文氯（次氨酸鈉）1、氯屬于快速作用的氧化劑，是一種可廣泛應用的廣譜化學殺菌劑。它一般以次氯酸鈉（NaOCI） 溶液來作為漂白劑銷售。但氯的許多副產物可能對人體及環(huán)境有害，應該避免濫用含氯消毒劑, 特別是漂白劑。2、常規(guī)實驗室消毒劑的有效氯濃度為1 g/L。處理生物危害性物質的溢出以及含有大量有機物 的情況時用含有5 g/L有效氯的更強作用的溶液。家用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有50 g/L的 有效氯

20、，工業(yè)用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有近120 g/L的有效氯，因此必須進行相應的稀釋來 達到工作濃度。3、次氯酸鈣Ca（CIO） 21的顆?；蚱瑒┮话愫?0%的有效氯。用顆?；蚱瑒┡渲茲舛?.4 g/L 或7。0 g/L的溶液，其有效氯濃度分別為1 g/L和5 g/L。4、不建議將漂白劑當作防腐劑使用，但可以用作普通目的的消毒劑以及用于浸泡非金屬類的 污染材料。在緊急情況下也可以用終濃度含12 mg/L有效氯的漂白劑來消毒飲用水。5、氯氣具有強毒性。因此漂白劑只能在通風良好的地方儲存和使用。12實驗室生物安全手冊6、漂白劑不能與酸混合以避免氯氣快速釋放。二氯異氰尿酸鈉1、血液或其他生物危害性液體

21、溢出時，可以使用固體口。，并使其作用至少10min后再除去, 然后對污染區(qū)進行進一步的清理。2、二氯異氨尿酸鈉（NaDCC）的粉劑含有60%的有效氯。用NaDCC粉劑配制的濃度為1。7 g/L 和8.5 g/L的溶液將分別含有1 g/L和5 g/L的有效氯。3、NaDCC片劑一般每片含有1。5g的有效氯，將1片或4片溶于1升水將分別獲得濃度約為1g/L和5 g/L的溶液。4、粉劑或片劑的NaDCC儲存既方便又安全。氯胺1、因氯胺釋放氯的速度比次氯酸慢，且有機物對氯胺溶液的影響沒有次氯酸溶液那么大，在 “清潔”和“污染”情況下都推薦使用20 g/L的濃度。2、氯胺溶液實際上無臭味，但是，浸泡在氯

22、胺中的物品必須要徹底清洗，以除去加入到氯胺 一T粉劑中的填充劑的殘留物。1、市場上出售的產品為多聚甲醛種固體多聚體，呈薄片狀或小塊狀，或為福爾馬林- 一種濃度約為370 g/L （37%）的氣體水溶液，其中含甲醇（100 mL/L）作為穩(wěn)定劑。兩種形式 加熱都可以產生氣體，用于封閉空間（如生物安全柜和房間）的清除污染和消毒。2、甲醛（5%福爾馬林水溶液）可以作為液體消毒劑。3、在溫度高于20時，甲醛（HCHO）是一種能夠殺死所有微生物及其胞子的氣體。但甲醛對13實驗室生物安全手冊朊蛋白沒有殺滅活性。4、甲醛起效相對較慢，并需要相對濕度達70%左右。5、甲醛被懷疑是一種致癌劑.它具有刺鼻的氣味，

23、其氣體能夠刺激眼睛和黏膜，因此必須在通 風櫥或通風良好的地方儲存和使用.必須遵守國家化學品安全規(guī)定.戊二醛1、戊二醛OHC (CH2)3CHO對繁殖的細菌、胞子、真菌和含脂或不含脂的病毒具有活性。它 不具有腐蝕性，比甲醛作用迅速，但也需要幾個小時才能殺死細菌胞子。2、通常供應的戊二醛是濃度約20 g/L (2%)的溶液，絕大部分產品使用前需要加入與產品一 同提供的碳酸氫鹽混合物進行“活化(變成堿性)?；罨娜芤焊鶕渑浞皆O計、應用類型和 使用頻率等情況可以重復使用14周.如果戊二醛溶液變混濁,就應當將其廢棄。3、戊二醛具有毒性，并對皮膚和黏膜具有刺激性，應當避免與其接觸必須在通風櫥或通風良 好

24、的地方使用。不建議采用其噴霧劑或溶液來清除環(huán)境表面的污染。必須遵守化學品安全的國 家規(guī)定.酚類化合物1、許多酚類產品可用于清除環(huán)境表面的污染，有些(如三氯生和氯二甲酚)是最常用的抗菌 劑。2、酚類化合物是一大類最早使用的殺菌劑。但是，最近出于安全考慮而限制了它的使用。3、它們對繁殖細菌和含脂病毒具有活性，適當配制后，對分枝桿菌也有活性它們對胞子沒有 活性，而對于非含脂病毒的活性則不確定.4、三氯生常作為洗手用品。它主要對繁殖的細菌有活性，并且對皮膚和黏膜是安全的。5、有些酚類化合物對水的硬度敏感，并可能導致失活，因此必須使用蒸餾水或去離子水來進14實驗室生物安全手冊行稀釋。6、不建議在食物接觸

25、的表面和幼兒活動場所使用酚類化合物。它們可能被橡膠吸收，也可能 滲透皮膚。必須遵守國家化學品安全規(guī)定。季銨鹽類化合物1、季鏤鹽類化合物對繁殖的細菌和含脂類病毒具有良好活性，但有些具有潛在危害性的細菌 仍能夠在季鏤鹽化合物溶液中生長。某些類型(如苯扎氯鏤)也用作防腐劑。2、這些化合物由于其生物降解能力較低，可能在環(huán)境中蓄積。3、季鏤鹽類化合物大多混合使用，也經常與醇類等其他殺菌劑聯(lián)合使用。4、有些季鏤鹽類化合物的殺菌作用會受有機質、水的硬度以及陰離子去污劑的顯著影響，因 此當使用季鏤鹽化合物進行消毒時，要認真選擇預清潔所用的品種。乙醇1、乙醇(C2H5OH)對于繁殖的細菌、真菌和含脂病毒具有活性

26、，但不能滅活胞子，而對非含脂 病毒的作用則不確定.2、其水溶液最有效的使用濃度約為70%(v/v);更高或更低的濃度均不適宜殺菌。3、醇類溶液的主要優(yōu)點是處理后物品不會留下任何殘留物。4、將乙醇與其他試劑混合使用比單獨使用更有效，如70% (v/v)乙醇和100 g/L的甲醛混合使用，以及使用含有2 g/L有效氯的乙醇。5、70%(v/v)乙醇溶液可以用于消毒皮膚、實驗臺和生物安全柜的工作臺面，以及浸泡小的 外科手術器械。6、由于乙醇可以使皮膚干燥，所以經常與潤滑劑混合使用。7、在不便于或不可能進行徹底洗手的情況下，推薦使用含乙醇的擦手液對輕度污染的手進行15實驗室生物安全手冊消毒。但是必須記

27、住，乙醇對胞子無效，而且不能殺死所有類型的非含脂類病毒。8、乙醇是易揮發(fā)和易燃的，不能在明火附近使用.9、其工作液應儲存在適當?shù)娜萜鲀纫员苊獯碱悡]發(fā)。10、乙醇可以硬化橡膠并溶解某些膠質。11、為了避免乙醇用于其他非滅菌目的，在實驗室里對乙醇進行專門的清點和儲存是非常重要的。12、含有乙醇溶液的瓶子必須清楚標記以避免被意外高壓滅菌.碘和碘伏1、這類消毒劑的作用與氯類似，只是有機質對它們的抑制作用略弱.2、碘可以使纖維和環(huán)境表面著色，一般不適合作為消毒劑。但是，碘伏和碘酊是很好的抗菌 劑。3、多聚碘（polyvidone iodine）是一種安全可靠的外科手術擦手劑和手術前皮膚抗菌劑。4、碘類抗

28、菌劑一般不適于醫(yī)療/牙醫(yī)器械的消毒。5、碘不能在鋁或銅上使用。6、碘有毒性。含有有機碘的產品必須于410儲存，以避免有潛在危害性的細菌在里面生長。過氧化氫和過氧乙酸1、過氧化氫（電。2）和過氧乙酸（CH3COOOH）是強氧化劑，是一種廣譜殺菌劑。對人和環(huán)境它們 較氯安全。2、過氧化氫能夠用于清除實驗臺和生物安全柜工作臺面的污染。3、通常供應的過氧化氫是可以立即使用的3%的溶液,或是用無菌水稀釋510倍體積后使用的30%的水溶液.但是，那種單獨含有36%過氧化氫的溶液殺菌作用緩慢而有限.現(xiàn)有產品中含16實驗室生物安全手冊有其他成分來穩(wěn)定過氧化氫，加速其殺菌作用并降低其腐蝕性。4、過氧化氫和過氧乙

29、酸能腐蝕鋁、銅、黃銅和鋅等金屬，也能使纖維、頭發(fā)、皮膚及黏膜褪 色。5、經它們處理的物品必須經過徹底的漂洗后才能接觸眼睛和黏膜。6、它們應當儲存在避熱和避光的地方。三、清除局部環(huán)境的污染1、清除表面污染時使用次氯酸鈉（NaOCI）溶液；含有1%有效氯的溶液適于普通的環(huán)境衛(wèi)生 設備，但是當處理高危環(huán)境時，建議使用高濃度（5 g/L）溶液。用于清除環(huán)境污染時，含有3% 過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。2、通過加熱多聚甲醛或煮沸福爾馬林所產生的甲醛蒸氣熏蒸來清除房間和儀器的污染.產生甲 醛蒸氣前，房間的所有開口（如門窗等）都應用密封帶或類似物加以密封。熏蒸應當在室溫不 低于21且相對濕度70

30、%的條件下進行。清除污染時氣體需要與物體表面至少接觸8 h。熏蒸后， 該區(qū)域必須徹底通風后才能允許人員進入。在通風之前需要進入房間時,必須戴適當?shù)姆蓝久?具?？梢圆捎脷鈶B(tài)的碳酸氫銨來中和甲醛。這是一項需要由專門培訓的專業(yè)人員來進行的、非 常危險的操作。1、實驗室人員需要經常地、徹底地洗手。2、處理完生物危害性材料和動物后以及離開實驗室前均必須洗手。3、大多數(shù)情況下，用普通的肥皂和水徹底沖洗對于清除手部污染就足夠了.但在高度危險的情 況下，建議使用殺菌肥皂.手要完全抹上肥皂，搓洗至少10秒鐘，用干凈水沖洗后再用干凈的 紙巾或毛巾擦干。4、應使用紙巾或毛巾來關上水龍頭，以防止再度污染洗凈的手.5、

31、如果沒有條件徹底洗手或洗手不方便，應該用酒精擦手來清除雙手的輕度污染。17實驗室生物安全手冊五、高壓滅菌高壓滅菌的濕熱法是最常用、最為有效的清除病原體污染的物理手段。滅菌后的物品必須小心操作并保存，以保證在使用之前不再被污染。高壓滅菌參數(shù)對于大多數(shù)目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果：1、134、3min2、126、10min3、121、15min4、115、25min高壓滅菌器的裝載為了利于蒸汽的滲透和空氣排出，高壓滅菌物品應松散包裝放置在滅菌器內.要使蒸汽能 夠作用到其內容物。高壓滅菌器使用注意事項1、應由受過良好培訓的人員負責高壓滅菌器的操作和日常維護.2、由有資質人員定

32、期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及所有的儀表和控制器.3、應使用飽和蒸汽并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學品，這些物質可能污染正在滅菌的 物品.4、所有要高壓滅菌的物品都應放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中；滅菌器柜腔 裝載要松散，以便蒸汽可以均勻作用于裝載物。5、當滅菌器內部加壓時，互鎖安全裝置可以防止門被打開，而沒有互鎖裝置的高壓滅菌器，應18實驗室生物安全手冊當關閉主蒸汽閥并待溫度下降到80以下時再打開門。6、當高壓滅菌液體時，由于取出液體時可能因過熱而沸騰，故應采用慢排式設置。7、即使溫度下降到80以下,操作者打開門時也應當戴適當?shù)氖痔缀兔嬲謥磉M行防護.8、在進行高壓滅菌效果的常

33、規(guī)監(jiān)測中，生物指示劑或熱電偶計應置于每件高壓滅菌物品的中 心。最好在“最大”裝載時用熱偶計和記錄儀進行定時監(jiān)測，以確定滅菌程序是否恰當.9、應當注意保證高壓滅菌器的安全閥沒有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。19實驗室生物安全手冊附錄1設備的安全性儀器設備在使用時，有些操作可能造成微生物學危害,而另外一些操作或處理則是專門設 計用來避免或減少生物學危害的.表A11可能產生危害的儀器設備及其操作儀器危害如何消除或減少危害皮下注射針意外接種、產生氣不要重新給針頭戴護套或截斷針頭。頭溶膠或有害物質使用針頭鎖定型注射器以避免針頭和注射溢出器的分離，或使用針頭和注射器為一體的一次性注射器。采用規(guī)范的實驗室技術

34、,例如：注射器抽液時要小心,盡可能減少形成氣泡和接種物泡沫。避免用注射器來混合感染性液體；否則，要確保針頭的尖端伸入到容器中液面之下,并避免用力過大。-從有橡皮塞的瓶子中取下針頭之前，應用經適20實驗室生物安全手冊儀器 危害如何消除或減少危害當消毒劑浸濕的脫脂棉來包裹針頭和塞子.豎直向上將注射器中過量的液體和氣泡 排到經適當消毒劑浸濕的脫脂棉或裝有棉花的小 瓶中.操作感染性物質時均應在生物安全柜中進 行。在對動物進行接種時要進行固定.在進行 鼻腔或口腔接種時要使用鈍的針頭或插管。 操作應在生物安全柜中進行.使用后要進行高壓滅菌并確保進行了妥善 處理.如果使用的是一次性針頭和注射器，只 有在高壓

35、滅菌后才能拆卸.離心機產生氣溶膠、噴濺使用可封閉性的容器（安全杯）或密封轉及離心管破裂子.在氣溶膠沉降后（30min）再打開容器或轉子，或在生物安全柜中操作。超速離心機 產生氣溶膠、噴濺在離心機和真空泵之間安裝HEPA過濾器。及離心管破裂每個轉子均有運轉時間的記錄,并應制訂預防性維修保養(yǎng)措施以減少發(fā)生機械故障的風險。在生物安全柜中裝、卸容器或轉子.厭氧罐 爆炸、感染性物質確保催化劑周圍電線盒的完整性。21實驗室生物安全手冊儀器危害如何消除或減少危害擴散干燥器內爆、玻璃碎片和感染性物質擴散置于堅固的金屬絲籠中。勻漿器、組產生氣溶膠、泄漏在生物安全柜中操作并打開儀器?？椦心C和容器破裂使用專門設計

36、可以避免在轉子軸承和0形墊圈處泄漏的儀器型號，或使用消化器。在打開勻漿器以前先等候30min以使氣溶膠沉積。冷卻以使氣溶膠凝聚.如果使用手動組織研磨器，管外用可吸收材料包裹。超聲處理產生氣溶膠、聽力在生物安全柜或密封單元中操作并打開儀器、超聲波清洗儀損傷、皮膚炎口口 PRO確保隔離以免受分頻諧波的傷害。戴上手套以保護清潔劑對皮膚造成的化學危害。培養(yǎng)攪拌產生氣溶膠、噴濺在生物安全柜或專門設計的一級屏障內操器、振蕩器、攪拌器和泄漏作.使用結實的帶螺口蓋的培養(yǎng)瓶，必要時安 裝有過濾器保護的出口，并嚴格固定.冷凍干燥機產生氣溶膠和直使用0形連寸接器來密封整個機器。22實驗室生物安全手冊儀器 危害如何消

37、除或減少危害（凍干機）接接觸污染材料使用空氣過濾器來保護真空管。使用有效的清除污染的方法，例如化學法.配備全金屬脫水器和蒸汽冷凝器.仔細檢查所有玻璃真空管表面是否有擦痕。僅限使用專門設計用于真空作業(yè)的玻璃器具.水浴器 微生物生長。疊氮確保定期清潔和消毒.化鈉與有些金屬不用疊氮化鈉作抑菌劑。形成爆炸性混合物。表A12儀器設備相關事故的原因事故事故原因減少或消除危害設計或建造有缺陷培養(yǎng)箱有電火花電 沒有溫度過高斷路裝置符合國家標準擊沒有提供可靠的接地不適當使用離心事故轉軸上的離心桶吊籃沒有平培訓和監(jiān)督工作人員衡厭氧培養(yǎng)箱爆炸不正確使用氣體培訓和監(jiān)督工作人員不正確配用23實驗室生物安全手冊事故事故原

38、因減少或消除危害家用保溫瓶爆炸液氮運輸不當使用專門設計的儀器設備家用型冰箱爆炸危險性化學品沒有儲存在防低閃點溶劑和提取物火/防爆容器中，如用滲漏 僅貯存在具有火花/爆的螺旋瓶蓋儲存乙醚。炸保護裝置的冰箱或安全柜中.缺乏正確的維護火焰光度計產生的維護過程中各組件的重新組培訓和監(jiān)督工作人員火焰裝不正確.火焰表A1-3生物安全設備設備避免的危害安全性特征生物安全柜1級氣溶膠和噴濺盡量減小工作入口處向內的氣流（正面氣流速度）；排風經充分過濾不能保護操作對象11級氣溶膠和噴濺盡量減小工作窗口處向內的氣流（正面氣流速度）；排風經充分過濾可以保護操作對象-III級氣溶膠和噴濺最高防護如果內部為層流氣流，則可

39、以保護操作對象24實驗室生物安全手冊設備避免的危害安全性特征負壓柔性薄氣溶膠和噴濺最高水平防護膜隔離裝置噴濺罩化學品噴濺在操作人員和工作區(qū)之間形成屏障移液輔助器由于口吸產生的危害，例如 便于使用病原體的食入、吸入用口抽 控制吸管吸入端的污染，保護移液輔助器、操吸吸管時所生成的氣溶膠、作者和口真空管道從吸管中吹出或滴出液體、可以滅菌吸管吸入端的污染等控制吸管尖端的泄漏微型接種環(huán)加移動接種環(huán)時造成的噴濺遮護玻璃管或陶瓷管的開口端，采用氣體或電熱器、一次性接加熱種環(huán) 一次性的，不需加熱設施內用產生氣溶膠、溢出和泄漏有罩或蓋子的防漏結構于收集并運送耐用感染性物質進耐高壓滅菌行滅菌的防漏容器盛放銳器的一

40、意外刺傷耐高壓滅菌次性容器堅固，不易刺破實驗室和單位微生物泄漏堅固間運送物品的能盛放溢出物的防水性一級和二級容器容器用于吸收溢出物的材料手動或自動的感染性物質（以保證丟棄或 經批準的設計25實驗室生物安全手冊設備避免的危害安全性特征高壓滅菌器重復使用時的安全）,有效的加熱火菌螺口蓋的瓶子產生氣溶膠和泄漏,有效的防護真空管道保護裝置氣溶膠和溢出液體對實驗室真空系統(tǒng)的污染可以阻止氣溶膠通過的濾筒式過濾器（顆粒大小0。45 u m）裝有適當;消毒劑的防溢燒瓶。在貯存瓶盛滿時橡皮球閥可自動關閉真空系統(tǒng)整個系統(tǒng)耐高壓滅菌表A1-4個體防護裝備裝備避免的危害安全性特征實驗服、隔離衣、連體衣污染衣服背面開口

41、罩在日常服裝外塑料圍裙污染衣服防水鞋襪碰撞和噴濺不露腳趾護目鏡碰撞和噴濺防碰撞鏡片（必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡）側面有護罩安全眼鏡碰撞防碰撞鏡片（必須有視力校正）26實驗室生物安全手冊裝備避免的危安全性特征害側面有護罩面罩碰撞和噴罩住整個面部濺發(fā)生意外時易于取下防毒面具吸入氣溶在設計上包括一次性使用的、整個面部或一半面膠部空氣凈化的、整個面部或加罩的動力空氣凈化(powered air purifying, PAPR)的以及供氣的防毒面具手套直接接觸得到微生物學認可的一次性乳膠、乙烯樹脂或聚微生物劃睛類材料破保護手網孔結構27附錄2附錄2實驗室有毒、有害物品標準管理規(guī)程目 的：建立實驗室

42、有毒、有害物品的安全管理規(guī)程，防止試劑或藥品的丟失以及人員中毒, 保障人員安全.范圍：下列物品屬危險物品管理的范圍，僅供參考。1、致癌物質黃曲霉素B1、亞硝胺、3一4苯并花等（以上為強致癌物質）；2 乙酰氨基芴、4氨基 聯(lián)苯、聯(lián)苯胺及其鹽類、3, 3 二氯聯(lián)苯胺、4二甲基氨基偶氮苯、1萘腔、2 萘胺、4 一硝基聯(lián)苯、N 亞硝基二甲胺、B一丙內酯、4, 4一甲叉（雙）一2 一氯苯胺、乙撐亞胺、 氯甲甲醚、二硝基萘、竣基鎳、氯乙烯、同苯二酚、二氯甲醚、溴化乙錠（EB）、DEPC （焦碳 酸二乙酯）、放線菌素D、放射性物質（同位素標記時）等。2、居I毒六氯苯、竣基鐵、氧化鈉、氫氟酸、氫氨酸、氯化氰、

43、氯化汞、砷酸汞、汞蒸氣、砷化 氫、光氣、氟光氣、磷化氫、三氧化二砷、有機砷化物、有機磷化物、有機氟化物、有機硼 化物、鍍及其化合物、丙烯腈、乙睛等.（本實驗室無上述劇毒化學品）3、高毒氟化鈉、對二氯苯、甲基丙烯腈、丙酮氨醇、二氯乙烷、三氯乙烷、偶氮二異丁睛、黃 磷、三氯氧磷、五氯化磷、三氯化磷、五氧化二磷、三氯甲烷、溴甲烷、二乙烯酮、氧化亞28實驗室生物安全手冊氮、鉈化合物、四乙基鉛、四乙基錫、三氯化銻、溴水、氯氣、五氧化二釩、二氧化鎰、二 氯硅烷、三氯甲硅烷、苯胺、硫化氫、硼烷、氯化氫、氟乙酸、丙烯醛、乙烯酮、氟乙酰胺、 碘乙酸乙酯、溴乙酸、乙酯、氯乙酸乙酯、有機氰化物、芳香胺、迭氮黃砷化鈉

44、、疊氮鈉等。（本實驗室無上述高毒化學品）4、中毒苯、四氯化碳、三氯硝基甲烷、乙烯毗啶、三硝基甲苯、五氯酚鈉、硫酸、砷化鎵、丙 烯酰胺、環(huán)氧乙烷、環(huán)氧氯丙烷、烯丙醇、二氯丙醇、糖醛、三氟化硼、四氯化硅、硫酸鎘、 氯化鎘、硝酸、甲醛、甲醇、脫（聯(lián)氨）、二硫化碳、甲苯、二甲苯、一氧化碳、一氧化氮、 氯仿、吉姆薩（Giemsa）染料、十二烷基硫酸鈉（SDS）、Trizol等。5、低毒三氯化鋁、鋁酸胺、間苯二胺、正丁醇、叔丁醇、乙二醇、丙烯酸、甲基丙烯酸、順丁 烯二酸酐、二甲基甲酰胺、已內酰胺、亞鐵氰化鉀、鐵氧化鉀、氨及氫化胺、四氯化錫、氯 化鍺、對氯苯氨、硝基苯、三硝基甲苯、對硝基氯苯、二苯甲烷、苯乙

45、烯、二乙烯苯、鄰苯 二甲酸、四氫呋喃、吡啶、三苯基磷、烷基鋁、苯酚、三硝基酚、對苯二酚、丁二烯、異戊 二烯、氫氧化鉀、鹽酸、氯磺甲、乙醚、丙酮、乙酸（濃的）、過硫酸銨等。6、爆炸物品迭氮化鈉、硝酸銨、過氧酸、過氧化氫（雙氧水）等。7、自燃物品黃磷、硝化纖維、膠片等8。易燃物品紅磷、鎂粉、謎、醇、汽油等內容:29實驗室生物安全手冊1。有毒、有害物品的購買1.1依據實際使用情況，由實驗人員填寫計劃單，報實驗室負責人批準。1。2經實驗室負責人批準后，送交采供部購買.1。3采購此類藥品需向所在地省、自治區(qū)、直轄市食品藥品監(jiān)督管理部門或行政部門提出申 請，經批準后從經營單位購買。1.4采供部門二人持“毒

46、品購買證”或麻醉、精神藥品購買證件到指定單位購買，運送途中需 實行有效的防范措施，安全交至倉庫管理部門。有限購買證件嚴禁轉借他人。2。有毒、有害物品的接收2.1此類藥品保管員應由二人擔任，負責有毒、有害物品的管理工作。2。2此類藥品保管員須具備較高的素質和品質，工作認真負責，有一定的專業(yè)知識和安全知識。2。3 保管員驗收2。3.1二位保管員先后核對實物與購買計劃單是否一致。2。3.2檢查有毒、有害物品包裝完好，封口嚴密，標簽清晰，文字完整，易于辨認，無污染、 無滲漏、無破損、無混雜、無啟封痕跡。3精密稱定（未開口狀態(tài)）重量，四人（兩位保管員，兩位采購員）核對確認。以上有一 項驗收不合格，保管員拒絕接收，報主管領導進行調查，直至符合規(guī)定.驗收合格，填寫接收記錄，四人簽名。瓶外貼上標簽。內容包括:編號、購進日期、重量、有毒標志.3。有毒、有害物品的貯存保管3.1此類物品須置于保險柜中貯存，分類碼放整齊，有存放編碼記錄。建立出入庫帳目，及時 盤點