蛹蟲草人工代料栽培技術(shù)

1、蛹蟲草人工代料栽培技術(shù)蛹蟲草（又稱北冬蟲夏草、北蟲草、黃金草），作為一種藥 用真菌， 其藥效成分和營養(yǎng)成分與冬蟲夏草完全相同， 屬于世間 珍貴而稀有的生物藥材 1-2 。蛹蟲草含有蟲草素、蟲草酸、蟲 草多糖、超氧化物歧化酶 SOD和微量元素硒等多種生物活性物 質(zhì)，具有特殊的藥用價(jià)值和滋補(bǔ)功效 3-4 。蛹蟲草作為冬蟲夏 草的替代品，目前已廣泛用于制藥，深受消費(fèi)者的青睞。人工代 料培育蛹蟲草不僅占地少，栽培周期短，而且經(jīng)濟(jì)效益好，是農(nóng) 村農(nóng)民、 下崗和退休職工興業(yè)致富的好項(xiàng)目， 也為我國名貴藥材 產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)又開辟了一個(gè)新的途徑。菌種制備優(yōu)質(zhì)菌種是種植成功和高效的關(guān)鍵， 蛹蟲草菌種不可長期保 存或

2、多次轉(zhuǎn)管擴(kuò)繁， 否則菌種容易退化變異， 產(chǎn)量和品質(zhì)會(huì)明顯 下降。因此，需要經(jīng)常留種和更新菌種。制種方法是采取組織分離法。選擇適應(yīng)性強(qiáng)、發(fā)菌快、見光 轉(zhuǎn)色快、性狀穩(wěn)定、速生高產(chǎn)的菌株進(jìn)行組織分離制種，也可直 接購買斜面培養(yǎng)基試管母種自行進(jìn)行擴(kuò)繁。 目前有固體菌種和液 體菌種 2 種類型，其中以液體菌種接種為好 5 。液體配制液體配比為葡萄糖20 g、蛋白胨10 g、磷酸二氫鉀3 g、 硫酸鎂1 g、維生素B1 1片（10 mg）、水1 000 mL（ pH值6-7）。先將1 000 mL水加熱增溫（約40 C），倒入蛋白胨攪拌 溶解，再倒入其余原料，充分?jǐn)嚢瑁蝗缓笥胮H試紙測試酸堿度（標(biāo)準(zhǔn)pH值

3、是67）,若偏酸則用氫氧化鈉調(diào)和，偏堿則用白 醋或鹽酸調(diào)節(jié)。營養(yǎng)液配制的多少應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)量靈活掌握。 實(shí)踐證明， 使用 吸液管噴灑接種，每個(gè)培養(yǎng)瓶噴灑菌種45 mL,每瓶液體菌種（指小型醫(yī)用鹽水瓶）可接種 3740 瓶；也可用蒸餾水或高壓 滅菌水將液體菌種稀釋 23 倍進(jìn)行接種,可大大提高菌種使用 率。裝瓶選用500 mL的醫(yī)用鹽水瓶或250 mL小型醫(yī)用鹽水瓶作為液 體菌種培養(yǎng)瓶（500 mL大瓶可分裝300 mL培養(yǎng)液，250 mL小瓶 裝至 1/2/ 以上）。裝瓶時(shí)用玻璃漏斗,以免培養(yǎng)液粘附于瓶口、 瓶頸或瓶壁上而招致雜菌感染。 瓶口用聚丙烯薄膜或化學(xué)棉、 脫 脂棉棉球封塞嚴(yán)密。高壓滅菌

4、用手提式高壓滅菌鍋滅菌。將上述培養(yǎng)瓶整齊地?cái)[放鍋內(nèi),上面用干毛巾蓋好瓶口，關(guān)緊鍋蓋。大火加熱至110 C，壓力表指針指向 0.05 時(shí)打開排氣閥以便排出冷空氣,待壓力表回至 0時(shí)關(guān)掉排氣閥；然后大火加熱，讓其快速升溫至125126 C,壓力表指針指向 0.15 時(shí)改用小火,維持 1.25 h 后停火,等壓力 表回到 0 位,冷卻后打開鍋蓋,取瓶出鍋。放種培養(yǎng)瓶完全冷卻后方可下種， 母種擴(kuò)繁在接種箱進(jìn)行無菌操 作。先將接種用一切用品、 工具和試管母種及培養(yǎng)瓶事先放入接 種箱內(nèi)進(jìn)行消毒。 操作人員從接種口把手伸入箱內(nèi)， 在消毒碗內(nèi) 點(diǎn)燃至少 2 袋起舞消毒劑， 進(jìn)行薰蒸消毒。 隨即用袖頭把接種口

5、堵塞嚴(yán)密，密閉 30 min 。操作人員將手洗凈，并用 75%酒精擦洗 1 遍，通過袖頭伸入 接種箱。再用 75%酒精把手連同手腕部位一并擦洗 1 遍，用皮筋 把袖頭在手腕部扎緊，嚴(yán)防雜菌進(jìn)入箱內(nèi)。點(diǎn)著酒精燈，把接種 工具用 75%酒精擦洗 1 遍再放在酒精燈上方燎烤消毒；拿起母種 試管，用 75%酒精擦洗管口周圍， 并在酒精燈火焰上方燎烤一下。 打開母種試管，用接種工具將試管母種切割成0.5 mmx 0.5 mm大小菌塊，在靠近酒精燈的無菌區(qū)進(jìn)行放種，每瓶放種23塊。液體菌種培養(yǎng)為利于菌種繁殖和菌絲生長， 應(yīng)將放完種的培養(yǎng)瓶放置黑暗 環(huán)境中，在搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，可全天 24 h 不停振蕩培

6、養(yǎng)或 間歇式每隔 1 h 左右振搖 1 次，每次 30 min 左右。經(jīng)過 8 12 d 振蕩培養(yǎng)， 瓶中便有大量絮狀、 片狀菌絲體和菌絲球充滿整個(gè)培 養(yǎng)瓶；若無搖床條件，可用手搖措施振動(dòng)瓶液，每隔 12 h 搖 動(dòng) 1 次為好。注意不可將營養(yǎng)液打濕封膜或棉塞。培養(yǎng)基原料配制原料配方實(shí)踐表明，人工代料栽培還是選用大米（雜交米）作主料為 最好，具有發(fā)菌均勻、 出草快、產(chǎn)量高的特點(diǎn)。 每瓶裝大米 30 g、 黃豆粉（豆面）3 g、營養(yǎng)液50 mL;營養(yǎng)液配方為水1 000 mL（pH值67）、葡萄糖25 g、蛋白胨10 g、磷酸二氫鉀1.5 g、 硫酸鎂 1 g 、檸檬酸銨 1 g 、維生素 B1

7、 2 片。實(shí)例為提高拌料和裝瓶的效率，可一次性拌好能裝 1 000 2 000 瓶的原料，同時(shí)應(yīng)精確地計(jì)算出主料和各種輔料的用量?，F(xiàn)以每批裝1 000瓶為例，配料如下。主料：大米 30 g X 1 000=30 kg，黃豆粉 3 gX 1 000=3 kg；輔料：水 50 gX 1 000=50 kg，葡萄糖1 250 g，蛋白胨500 g，磷酸二氫鉀150 g，硫酸 鎂 50 g ，檸檬酸銨 50 g ，維生素 B1 100 片。拌料在地坪上鋪 1 塊干凈塑料布， 將上述 2 種主料稱好倒在塑料 布上充分摻拌均勻。再將幾種輔料分別精準(zhǔn)秤好倒入 50 kg 的水 中，充分?jǐn)嚢枋蛊淙芑?。用pH試

8、紙測試酸堿度，以pH值67為準(zhǔn)。裝瓶可分別自制幾個(gè)能定量盛裝 33 g 主料（大米 30 g ，黃豆粉 3 g ）的容器和定量盛裝 50 mL 液體的容器進(jìn)行裝瓶。裝瓶時(shí)， 應(yīng)先裝主料，再裝營養(yǎng)液，裝好后用皮筋封好膜后，搖動(dòng)瓶里原 料，使固體與液體充分混合均勻，以利于發(fā)菌好、生長整齊。滅菌可用高壓蒸汽爐進(jìn)行滅菌，即在 121 C高溫和1.5 kg/m2 的壓力下密閉滅菌 30 min ，冷卻后取出即可；也可常壓滅菌， 當(dāng)溫度升至100 C時(shí)，再改小火維持 810 h即可，悶鍋一夜， 次日早出鍋接種。接種于接種箱中進(jìn)行無菌操作， 點(diǎn)燃酒精燈， 在靠近酒精燈的安 全區(qū)打開液體菌種瓶，用吸液管吸取液

9、體菌種，每瓶以45 mL種量均勻噴注到培養(yǎng)基上，立即封口扎緊（下種量要均勻，噴注 菌種盡量勻稱） ；接好一批培養(yǎng)瓶后及時(shí)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室 （黑暗環(huán)境） 進(jìn)行菌絲培養(yǎng)； 接種操作每批之間必須重新消毒， 點(diǎn)燃起舞消毒 劑23袋（第1箱消毒時(shí)3袋，之后2袋）。密閉30 min即達(dá) 消毒效果；將接種好培養(yǎng)瓶整齊擺放在培養(yǎng)架上。菌絲培養(yǎng)蛹蟲草屬中低溫真菌類，菌絲最適宜生長溫度是1525 C, 子座最適宜溫度為1822 C。要求培養(yǎng)室內(nèi)具備調(diào)節(jié)溫度、濕 度和光照的基本條件； 培養(yǎng)室放置培養(yǎng)架， 培養(yǎng)架可設(shè) 67 層， 層高40 cm,保證每個(gè)培養(yǎng)瓶都能得到光照。一般 2530 m2的 房間可擺放 10 000

10、個(gè)培養(yǎng)瓶，可生產(chǎn) 80 kg 左右干品。初始階段（前 5 d） 菌絲萌發(fā)階段，要求做到“三控”：一是控光，需要黑暗環(huán) 境；二是控溫，培養(yǎng)室內(nèi)溫度最好控制在 1518 C;三是控濕， 室內(nèi)空氣相對濕度控制在 60%左右。接種第 2天，培養(yǎng)瓶料面上可見到點(diǎn)片或連片發(fā)菌； 第 3天 菌絲已大面積展開， 占領(lǐng)料面 50%以上；第 4 天菌絲占領(lǐng)料面 80% 以上；第 5 天菌絲全部發(fā)滿料面， 并已開始向培養(yǎng)基內(nèi)滲透一指 左右。稀釋與未稀釋菌種，其菌絲萌發(fā)能力完全相同，采取稀釋 23倍方法可解決菌種不足問題。經(jīng)過 5 d時(shí)間培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶 里菌絲很快布滿整個(gè)料面。待菌絲布滿料面后（ 5 d 后）可將溫度提

11、高至2023 C,再繼續(xù)培養(yǎng)15 d左右，菌絲 就可吃透整瓶培養(yǎng)基， 至此菌絲就完成營養(yǎng)生長階段， 標(biāo)志菌絲 體已發(fā)育成熟，開始進(jìn)入生殖生長時(shí)期。進(jìn)入生殖生長階段后（接種后 20 d 左右） 進(jìn)行光照刺激，促進(jìn)菌絲體轉(zhuǎn)色。打開日光燈，進(jìn)行全天24 h 光照，直到蛹蟲草發(fā)芽長出小子實(shí)體時(shí)，再改為白天光照 1415 h,夜晚關(guān)燈。白天溫度控制在 20 C,晚上控制在10 C 左右，通過溫差刺激能促進(jìn)菌絲快速發(fā)育；室內(nèi)濕度60% 65%。見光第 1 天，料面上菌絲出現(xiàn)微黃；第 2 天顯現(xiàn)正黃色；第 3 天 培養(yǎng)基內(nèi)菌絲全變鮮黃或米黃色；第 4 天整瓶呈橘黃色；第 5 7 天，菌絲基本轉(zhuǎn)完色； 第 7

12、 10 天，料面上出現(xiàn)米粒大小原基。出草管理 經(jīng)菌絲體生長發(fā)育，待培養(yǎng)基料面有突起形成米粒狀原基 時(shí)，蛹蟲草即行發(fā)芽出草。扎孔透氣將牙簽或鐵絲經(jīng)75%酉精擦洗消毒后，在封口膜上扎 68 個(gè)通氣孔，加強(qiáng)氣體交換，促使子實(shí)體的生長。加強(qiáng)室內(nèi)通風(fēng)換氣 打開換氣扇或用電風(fēng)扇吹風(fēng)，每天早、中、晚各通風(fēng)1 次，以便補(bǔ)充新鮮空氣和排出 C02防止C02積累過多，子座不能正 常分化，影響生長發(fā)育。溫濕度管理到了出草階段， 溫度和濕度對子實(shí)體的生長十分重要。 溫度 控制在1821 C。盡量使空氣相對濕度提高到 80%85%室內(nèi) 濕度過小時(shí)， 瓶內(nèi)培養(yǎng)基容易提早失水而影響產(chǎn)量； 若室內(nèi)濕度 過大時(shí)，容易誘發(fā)氣生菌絲，對子實(shí)體生長同樣不利?？刹扇≡?地面上灑水或潑水， 空間用空氣加濕器增加室內(nèi)濕度； 無條件用 空氣加濕器者，可用噴霧器在空間噴霧增濕。光照管理生長一段時(shí)間， 部分瓶里的子實(shí)體有一邊倒現(xiàn)象， 這是由于 蛹蟲草較強(qiáng)的趨光性所致。 因此， 應(yīng)注意在子實(shí)體形成后可根據(jù) 生長情況調(diào)整培養(yǎng)瓶與光源相對方向， 讓其受光均勻， 以提高產(chǎn) 品的品質(zhì)和產(chǎn)量。采收經(jīng)過4550 d的精心培育，子實(shí)體長至 78 cm,子實(shí)體 呈橘紅色或橘黃色棒