淺談腫瘤標(biāo)志物課件

1、淺談腫瘤標(biāo)志物黃慧瑾2016年5月19日腫瘤標(biāo)志物（tumor markers，TM) 腫瘤標(biāo)志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過程中，由腫瘤細(xì)胞合成、釋放或者是機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，這些物質(zhì)在血液、體液及組織中可檢測(cè)到，達(dá)到一定的水平時(shí)能提示某些腫瘤的存在。 腫瘤標(biāo)志物高與查到癌細(xì)胞是兩回事，也不一定是代表患有腫瘤！血清腫瘤標(biāo)志物分類 一、為什么要查腫瘤標(biāo)記物？我們知道，早期診斷是治愈腫瘤的關(guān)鍵；而有些腫瘤標(biāo)記物的升高往往早于臨床癥狀的出現(xiàn)，因此腫瘤標(biāo)記物有助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤跡象，早診斷、早治療，從而提高療效。比如，我們國(guó)家70年代以后在上海等地，通過對(duì)大量人群的甲胎蛋白普查，曾檢出不少

2、肝癌特別是小肝癌患者，使很多病人得到了及時(shí)手術(shù)切除的機(jī)會(huì)。二、腫瘤標(biāo)記物還能用于以下方面出現(xiàn)腫瘤癥狀或可疑腫物后的鑒別診斷腫瘤生物特點(diǎn)和疾病階段的判斷腫瘤治療后的療效觀察和判斷預(yù)后提示腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移腫瘤指標(biāo)升高是不是肯定就有腫瘤了？答案是不一定。腫瘤標(biāo)志物不僅存在于惡性腫瘤中，也存在于良性腫瘤、胚胎組織、甚至正常組織中；腫瘤的診斷不能單獨(dú)依靠腫瘤標(biāo)志物的檢查，需要由臨床檢查、影像檢查、內(nèi)鏡檢查或手術(shù)探查等綜合判斷，而病理診斷是腫瘤診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”除了惡性腫瘤，引起腫瘤標(biāo)記物升高的其他因素包括：良性疾病，如炎癥性疾?。焊闻K良性疾病時(shí)，AFP、CA19-9、CEA會(huì)升高；腎功能衰竭時(shí)2-微球蛋白

3、及CA15-3、CA19-9、CEA和PSA會(huì)升高；風(fēng)濕病時(shí)CA19-9濃度可增高；生理變化：妊娠時(shí)AFP、CA125、HCG會(huì)升高；不良習(xí)慣：吸煙、酗酒；檢查引起：屢次進(jìn)行直腸指檢后，PSA值可升高；服用某些藥物；飼養(yǎng)寵物；此外，抽血過程中的污染、抽血引起的紅細(xì)胞破裂、標(biāo)本保存不當(dāng)、試劑差異及檢測(cè)欠規(guī)范等因素也會(huì)干擾檢查結(jié)果。腫瘤標(biāo)志物升高了，可不可以明確是哪個(gè)部位的腫瘤？有時(shí)可以，但多數(shù)不能單憑借腫瘤標(biāo)記物來明確，還需要結(jié)合其他檢查。一種腫瘤標(biāo)記物往往與多種惡性腫瘤有關(guān)，以下是一些常見的腫瘤標(biāo)記物及其所提示可能有腫瘤發(fā)生的臟器：CA19-9 胰腺、胃腸道和肝膽CA15-3 乳腺、肺、卵巢、

4、肝CA242 結(jié)直腸、胰腺、卵巢CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺CA125 卵巢、子宮、胰腺、肝、肺CA50 胰腺、乳腺、肺、胃腸道和肝膽ADVIA Centaur XP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)檢測(cè)原理經(jīng)典直接化學(xué)發(fā)光方法吖啶酯(AE)為放光劑采用微磁顆粒分離兩種結(jié)合模式：競(jìng)爭(zhēng)法夾心法免疫測(cè)定抗體抗原示蹤/發(fā)光劑：吖啶酯分離方法：微磁顆粒分離檢測(cè)裝置發(fā)光劑是檢測(cè)的技術(shù)核心AE抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)吖啶酯簡(jiǎn)介提升擴(kuò)散速率最大程度避免結(jié)合位點(diǎn)的遮蔽提高分析靈敏度堿性磷酸酶哎啶酯哎啶酯直接化學(xué)發(fā)光法的優(yōu)點(diǎn)無需額外的信號(hào)放大或底物光的釋放快速對(duì)溫度和pH值的影響不敏感背景干擾最小微磁顆粒分離技術(shù)氧化鐵顆粒被

5、吸引至磁場(chǎng)區(qū)與抗原或抗體發(fā)生共價(jià)結(jié)合微磁顆粒(PMP)抗體用于分離結(jié)合與未結(jié)合的反應(yīng)物磁場(chǎng)未結(jié)合的AE微磁顆粒分離技術(shù)檢測(cè)原理的反應(yīng)模式夾心法競(jìng)爭(zhēng)法標(biāo)記抗原檢測(cè)方法標(biāo)記抗體檢測(cè)方法抗體捕獲模式夾心法 步驟 1AE-標(biāo)記抗體加入樣品中，與樣品抗原結(jié)合哎啶酯 (AE)抗體樣品中的分析物特異性抗原其它顆粒PMP-抗體-抗原-抗體AE復(fù)合物加入與特異性抗體結(jié)合的微磁顆粒PMP，孵育，結(jié)合抗原的PMP再與AE-標(biāo)記抗體結(jié)合夾心法 步驟 2樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度夾心法 步驟 4采用標(biāo)記抗原的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 1微磁顆粒(PMP)抗體樣品抗原AE- 標(biāo)記抗原AE-標(biāo)記抗原

6、與樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合與PMP共價(jià)結(jié)合的有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度采用標(biāo)記抗原的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 3采用標(biāo)記抗體的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 1AE-標(biāo)記抗體PMP- 標(biāo)記抗原樣品中的分析物特異性抗原結(jié)合抗原的PMP與樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)AE-標(biāo)記抗體上有限的抗原結(jié)合位點(diǎn) 磁場(chǎng)PMP-抗原-抗體AE復(fù)合物孵育后將反應(yīng)混合物置于磁場(chǎng)下，分離并除去未結(jié)合的AE采用標(biāo)記抗體的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 2樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度采用標(biāo)記抗體的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 3夾心法與競(jìng)爭(zhēng)法反應(yīng)原理小結(jié)競(jìng)爭(zhēng)法夾心法樣品濃度樣品濃度光釋放(RLUs)光釋放(RLUs)抗體捕獲模式分析物是樣品中含有的抗體采用一種直接針對(duì)樣品中抗體的特異性抗體抗體捕獲模式結(jié)合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒（PMP）被加入到樣品中人類IgM抗體與PMP上結(jié)合的抗人類IgM抗體進(jìn)行結(jié)合樣品中的抗體通過磁場(chǎng)作用與可能造成干擾的其它物質(zhì)進(jìn)行分離抗體捕獲模