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1、第3講 免疫球蛋白血清電泳白蛋白球蛋白12抗體活性部分部分球蛋白、丙種球蛋白抗體:球蛋白漿細胞產(chǎn)生B細胞與抗原特異性結(jié)合 具有免疫功能免疫球蛋白: Immunoglobulin, Ig有抗體活性 或 抗體結(jié)構(gòu) 的球蛋白抗體BCR(mIg)骨髓瘤蛋白抗體 (antibody,Ab)一. 免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)(一)基本結(jié)構(gòu): 單體結(jié)構(gòu)(二) 輔助結(jié)構(gòu): J鏈和分泌片1. 單體的基本結(jié)構(gòu)2條重鏈 Heavy chain2條輕鏈 Light chain鏈間二硫鍵連接H2 L2,Y型2. 重鏈和輕鏈H鏈L鏈分子大小450-550個aa 50-75KD214個aa 25KD類、(IgG、IgA、IgM、IgD
2、、IgE)亞類如:1、2、3、4等型、亞型如:144 等4. Ig的功能區(qū) domains110個aa 球狀結(jié)構(gòu)域 行使功能的基本單位結(jié)構(gòu)相似 序列有同源性L鏈: VL、CLH鏈:VH、CH1、CH2、CH3、CH4IgG、IgA、IgDIgM、IgE5. 高變區(qū) hypervariable region,HVRVH和VL各有3個區(qū)域aa序列變化更大組成與Ag結(jié)合的部位抗原結(jié)合部位 antigen binding site,ABS是Ab與Ag決定基互補結(jié)合的關(guān)鍵部位互補決定區(qū) complementarity determing regions,CDRs 表位VLVH7. Ig的水解片段木瓜蛋白
3、酶: IgG 2Fab + Fc 胃蛋白酶: IgG ( Fab )2+ pFc J鏈 參與 IgA (H2L2)2與 IgM (H2L2)5連接 2. 分泌片(secretory piece, SP) 粘膜上皮細胞分泌 保護 sIgA不被蛋白酶降解 介導IgA的轉(zhuǎn)運二、Ig的異質(zhì)性1. Ig的類和型重鏈分5類、Ig分5類 IgG、IgA、IgM、IgD、IgE輕鏈分2型、2. Ig的多樣性10X 抗原10X 抗原受體 淋巴細胞克隆10X 抗體3. Ig的血清型Ig = 蛋白質(zhì)= 抗原 抗原表位同種型同種異型獨特型同種共有同種的不同個體不同同一個體的不同Ig特有三. 免疫球蛋白的功能:1. 結(jié)
4、合抗原與中和作用 2. 激活補體 3. 結(jié)合細胞 介導 I 型超敏反應(yīng) 調(diào)理吞噬作用 ADCC作用4. 通過胎盤和粘膜 (IgG 和 IgA) 1. 特異性結(jié)合抗原 發(fā)揮中和作用 中和病毒或細菌毒素 B細胞膜表面抗原受體不同類抗體所結(jié)合的抗原表位數(shù)不同(單體為2價)3.結(jié)合細胞 Fc段與Fc受體結(jié)合調(diào)理作用:中性粒細胞、巨噬細胞 Fc受體 吞噬 IgG結(jié)合的抗原 抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用 (antibody- dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC)NK細胞、巨噬細胞Fc受體 殺傷 抗體結(jié)合的靶細胞介導 I 型超敏反應(yīng)肥大細胞和嗜堿粒細胞 高
5、親和力的 IgE Fc受體四. 五類免疫球蛋白的特點和功能五類免疫球蛋白的結(jié)構(gòu):五類免疫球蛋白的特性與功能:IgG: IgM: 血清中含量最高, 再次應(yīng)答的主要抗體與SPA結(jié)合 抗感染的主要抗體通過胎盤五聚體 最早出現(xiàn)的 Ig 近期感染的指標 m IgM是BCR無鉸鏈區(qū)五類免疫球蛋白的特性與功能: IgA: IgD: 分泌性和血清型 初乳中含sIgA 黏膜免疫sIgA為二聚體 IgE:含量最少介導I型超敏反應(yīng)無鉸鏈區(qū)B細胞成熟的標志抗原A表位1表位2表位3表位4表位5免疫動物抗體A抗體1抗體2抗體3抗體4抗體5一個淋巴細胞克隆 產(chǎn)生一種抗體 針對一種表位抗體A多克隆抗體抗體1單克隆抗體五、單克隆抗體 單克隆抗體(monoclonal antibody, mAb): 由一個B細胞克隆產(chǎn)生 識別一種抗原表位 高度均一(結(jié)構(gòu)、特異性) 雜交瘤技術(shù)制備Ab1Ab3Ab4單克隆抗體抗原Ab1抗血清Ab1Ab2Ab3
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