免疫增殖病的檢測方法培訓課件

1、免疫增殖病的檢測方法免疫增殖病的檢測方法第一節(jié) 免疫增殖病的分類一、定義 免疫增殖?。╥mmunoproliferative disease）是指免疫器官、免疫組織或免疫細胞（包括淋巴細胞和單核巨噬細胞）異常增生（包括良性或惡性）所致的一組疾病。 這類疾病的表現(xiàn)有免疫功能異常及免疫球蛋白質和量的變化。2免疫增殖病的檢測方法第一節(jié) 免疫增殖病的分類2免疫增殖病的檢測方法二、免疫增殖病的分類增殖細胞疾 病T細胞ALL、淋巴母細胞瘤、部分非霍奇金淋巴瘤等。B細胞CLL、MM、傳單、原發(fā)性巨球蛋白血癥、淋巴瘤等組織-單核細胞急單、急性組織細胞增多癥等其它毛細胞白血病、其他霍奇金病等3免疫增殖病的檢測方

2、法二、免疫增殖病的分類增殖細胞疾 病T細胞ALL第二節(jié) 免疫增殖病的免疫損傷機制 一、漿細胞異常增生 漿細胞異常增生是指單克隆漿細胞異常增生并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位合成異常。 4免疫增殖病的檢測方法第二節(jié) 免疫增殖病的免疫損傷機制 4免疫增殖病的檢測方法 對多發(fā)性骨髓瘤細胞的起源觀察表明，骨髓瘤細胞起源于骨髓中的前B細胞進入淋巴細胞階段，當受到抗原刺激后，其增殖產(chǎn)生記憶的B細胞，B細胞在淋巴結中完成免疫球蛋白類別轉換，可變成為漿細胞的瘤細胞并移至骨髓定居并增殖。5免疫增殖病的檢測方法 對多發(fā)性骨髓瘤細胞的起源觀察表明，骨髓瘤細胞起在通常情況下IL-6是支持漿細胞增殖分化的關鍵因子

3、，所以漿細胞的瘤細胞的持續(xù)增殖當有IL-6的持續(xù)高水平存在。而臨床檢測表明骨髓瘤患者血清IL-6確有異常升高。因此，高水平的IL-6是漿細胞瘤的原因之一。6免疫增殖病的檢測方法在通常情況下IL-6是支持漿細胞增殖分化的關鍵因子，所以漿細二、正常體液免疫抑制正常的體液免疫是B細胞的增殖分化產(chǎn)生效應的過程，一系列細胞因子將有序地啟動上述過程，IL-4可啟動休止期的B細胞進入DNA合成期；IL-5促進B細胞繼續(xù)增殖；IL-6促使B細胞分化 為漿細胞，正常條件下IL-6可以反饋抑制IL-4控制B細胞的增殖分化過程，上述過程構成了一個生物信息調(diào)節(jié)回路，恰到好處地控制體液免疫應答過程的有序進行。 7免疫增

4、殖病的檢測方法二、正常體液免疫抑制7免疫增殖病的檢測方法漿細胞瘤患者體內(nèi)IL-6水平異常增高，其直接的效應是抑制IL-4的產(chǎn)生，從而抑制了整個體液免疫反應的過程。另外，漿細胞瘤可以分泌大量無抗體活性的免疫球蛋白，其Fc段與正常B細胞和原漿細胞以及其它有Fc 受體的細胞結合，這些細胞表面將被無活性的免疫球蛋白封閉，影響對其他生物信息的接收，并可阻斷B細胞的增殖、發(fā)育和影響抗原提呈。8免疫增殖病的檢測方法漿細胞瘤患者體內(nèi)IL-6水平異常增高，其直接的效應是抑制IL9免疫增殖病的檢測方法9免疫增殖病的檢測方法三、異常免疫球蛋白增生所造成的病理損傷 漿細胞異常增生的后果是產(chǎn)生大量的單克隆型免疫球蛋白或

5、其片段，這類免疫球蛋白或片段無正常的免疫功能。多為一種類型或為重鏈或輕鏈，其含量遠遠高于正常的免疫球蛋白。這些惡性增殖的免疫球蛋白可以沉積于組織，造成組織變性和淋巴細胞浸潤，導致相應器官的功能障礙，因其血漿濃度過高而導致血液粘稠度增加，產(chǎn)生一系列直接或間接的病理損害。10免疫增殖病的檢測方法三、異常免疫球蛋白增生所造成的病理損傷10免疫增殖病的檢測方第三節(jié) 常見免疫球蛋白增殖病 單克隆免疫球蛋白增殖病是指患者體內(nèi)存在異常增多的單克隆免疫球蛋白的一類疾病。11免疫增殖病的檢測方法第三節(jié) 常見免疫球蛋白增殖病11免疫增殖病的檢測方法免疫球蛋白電泳位置在丙種球蛋白區(qū)域，故又稱丙種球蛋白增殖病，由于單

6、克隆細胞增生，所以其產(chǎn)生的免疫球蛋白理化性質高度均一，但無抗體及其它免疫活性，所以這類免疫球蛋白亦叫副蛋白或M蛋白。M蛋白可通過腎小球從尿中排出，即本-周蛋白。12免疫增殖病的檢測方法免疫球蛋白電泳位置在丙種球蛋白區(qū)域，故又稱丙種球蛋白增殖病，一、多發(fā)性骨髓瘤(一)定義多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma MM)是漿細胞增生的惡性腫瘤，其免疫學特征:血清中和尿中出現(xiàn)M蛋白、血清中正常Ig水平明顯降低、骨髓中不成熟的漿細胞比例顯著升高。13免疫增殖病的檢測方法一、多發(fā)性骨髓瘤13免疫增殖病的檢測方法(二)、臨床表現(xiàn)和病理變化1、早期：無特殊癥狀，僅表現(xiàn)為ESR增快，血中檢出M蛋白、蛋白

7、尿、漿細胞增多。2、典型病人癥狀及病理變化：(1)骨髓瘤細胞增生，浸潤和破壞骨組織，造成骨質疏松和溶骨性病變，導致骨痛和不同部位的骨折；14免疫增殖病的檢測方法(二)、臨床表現(xiàn)和病理變化14免疫增殖病的檢測方法(2)、惡性增殖的骨髓瘤細胞代替了骨髓中的正常成分，引起貧血、粒細胞、血小板減少，由于M蛋白增高，引起血粘增加，或沉積于腎小管中，造成腎小管上皮細胞淀粉樣變性，發(fā)生腎病綜合征，嚴重時可導致腎衰。血粘增高可引起神經(jīng)功能障礙。(3)、骨髓瘤細胞浸潤其它組織時，可引起其相關組織或器官的病變。15免疫增殖病的檢測方法(2)、惡性增殖的骨髓瘤細胞代替了骨髓中的正常成分，引起貧血(三)、分類根據(jù)M蛋

8、白的類別不同可分為：IgG型：約占5060%IgA型：約占2025%IgD型約：占12%IgE型約：罕見根據(jù)漿細胞合成功能不全分類可分為：輕鏈病和重鏈病16免疫增殖病的檢測方法(三)、分類16免疫增殖病的檢測方法二、原發(fā)性巨球蛋白血癥 是一種伴有血清IgM增加的B細胞增殖病。病因不明。臨床癥狀：主要表現(xiàn)為IgM過多所致的血液高粘性綜合征，另外貧血、肝脾、淋巴結腫大、反復感染也常見。17免疫增殖病的檢測方法二、原發(fā)性巨球蛋白血癥17免疫增殖病的檢測方法三、重鏈病 由于漿細胞發(fā)生突變并異常增殖，合成功能障礙，只產(chǎn)生免疫球蛋白的重鏈或有缺陷的重鏈，不能與輕鏈組成完整的免疫球 蛋白分子，致使血清中和尿

9、中出現(xiàn)大量游離的無免疫功能的重鏈，稱為重鏈病。18免疫增殖病的檢測方法三、重鏈病18免疫增殖病的檢測方法四、良性單克隆丙種球蛋白病 是指血清中出現(xiàn)M蛋白，而不伴有漿細胞惡 性增殖的疾病。本病一般無癥狀，往往因其它疾病就診時發(fā)現(xiàn)血中有M蛋白。如果尿中出現(xiàn)本-周氏蛋白則是危險信號。19免疫增殖病的檢測方法四、良性單克隆丙種球蛋白病19免疫增殖病的檢測方法第四節(jié) 免疫檢測方法 免疫球蛋白異常增生病的實驗室診斷主要依靠血液學和免疫學手段，其中免疫學檢測尤為重要。常用以下方法進行檢測：20免疫增殖病的檢測方法第四節(jié) 免疫檢測方法20免疫增殖病的檢測方法一、血清蛋白區(qū)帶電泳 蛋白質區(qū)帶電泳是血清蛋白的經(jīng)典

10、分析方法，血清(或尿液)標本中不同性質的蛋白質可明顯分開形成不同的區(qū)帶，通過正常的電泳圖譜進行比較分析，可發(fā)現(xiàn)患 者電泳圖譜有一狹窄而濃縮的集中帶，即M區(qū)帶。如下圖21免疫增殖病的檢測方法一、血清蛋白區(qū)帶電泳21免疫增殖病的檢測方法22免疫增殖病的檢測方法22免疫增殖病的檢測方法二、免疫球蛋白定量測定 常用單向擴散法和免疫濁度法。惡 性單克隆丙種球蛋白病呈現(xiàn)某一類丙種球蛋白的顯著增高(30mg/ml)。良性單克隆丙種球蛋白病增高不顯著，一般在20mg/ml以下。23免疫增殖病的檢測方法二、免疫球蛋白定量測定23免疫增殖病的檢測方法免疫增殖病的檢測方法培訓課件25免疫增殖病的檢測方法25免疫增殖

11、病的檢測方法圖26-326免疫增殖病的檢測方法圖26-326免疫增殖病的檢測方法1、如果待測標本與某型球蛋白重鏈及輕鏈抗血清產(chǎn)生相同遷移度的特殊沉淀弧，提示存在單克隆丙種球蛋白(M蛋白)，此現(xiàn)象多見于IgG 、IgA、 IgM型多發(fā)性骨髓瘤或原發(fā)性巨蛋白血癥。27免疫增殖病的檢測方法1、如果待測標本與某型球蛋白重鏈及輕鏈抗血清產(chǎn)生相同遷移度的2、在同一抗輕鏈血清的反應中，同時出現(xiàn)兩條相鄰的特殊沉淀弧，則可能是除M蛋白外還存在游離輕，偶爾也可見兩種M蛋白，此時應進一歩測定尿中的本-周蛋白。28免疫增殖病的檢測方法2、在同一抗輕鏈血清的反應中，同時出現(xiàn)兩條相鄰的特殊沉淀弧，3、 患者血清僅與其中一

12、種抗輕鏈抗血清產(chǎn)生一種特殊的沉淀弧，而其它五種抗血清均不產(chǎn)生沉淀弧，這種情況可能是：29免疫增殖病的檢測方法3、 患者血清僅與其中一種抗輕鏈抗血清產(chǎn)生一種特殊的沉淀弧，(1)伴有腎功能不全的輕鏈病，游離輕鏈較少從尿中排出而滯留于血液中；(2)存在輕鏈的四分子多聚體，分子量大，不易從尿中排出而存于血液中；(3)尚未發(fā)現(xiàn)的新重鏈的免疫球蛋白。30免疫增殖病的檢測方法(1)伴有腎功能不全的輕鏈病，游離輕鏈較少從尿中排出而滯留于4、若患者血清只與IgG 、IgA或 IgM中的一種抗重血清產(chǎn)生特殊沉淀弧，但在兩抗輕鏈抗血清中無沉淀弧，提示可能存在重鏈病。5、非分泌型骨髓瘤血清標本在免疫電泳中均不出現(xiàn)特殊

13、沉淀弧。31免疫增殖病的檢測方法4、若患者血清只與IgG 、IgA或 IgM中的一種抗重血清(二)免疫選擇電泳將含抗k或r 血清的瓊脂制成薄層瓊脂板，打孔后加入待測血清進行火箭電泳，與標本相應的免疫球蛋白形成火箭樣沉淀峰。然后于孔的兩側各挖一槽，加入某型免疫球蛋白的抗血清或另一型輕抗血，溫育擴散后，按沉淀弧形成的情況，進行鑒定 。32免疫增殖病的檢測方法(二)免疫選擇電泳32免疫增殖病的檢測方法33免疫增殖病的檢測方法33免疫增殖病的檢測方法(三)免疫固定電泳將待測血清或其它標本在瓊脂平板上作區(qū)帶電泳，分離后于其上覆蓋含抗k或r輕鏈或各類重鏈的抗血清濾紙，當抗體與某區(qū)帶中的單克隆免疫球蛋白結合后，便形成復合物而沉淀下來，再通過漂洗與染色，呈現(xiàn)濃而狹窄的著色區(qū)帶，即可判斷單克隆丙種球蛋白的輕鏈或重鏈型別。34免疫增殖病的檢測方法(三)免疫固定電泳34免疫增殖病的檢測方法35免疫增殖病的檢測方法35免疫增殖病的檢測方法（四）其它檢測方法