IL6 mRNA在進(jìn)展期結(jié)直腸癌低蛋白血癥組織中的表達(dá)

1、IL-6 mRNA在希望期結(jié)直腸癌低卵白血癥構(gòu)造中的表達(dá)【摘要】目的研究白細(xì)胞介素6(interleukin-6,il-6)與希望期結(jié)直腸癌低卵白血癥的干系。要領(lǐng)根據(jù)入院第二天用溴甲酚綠法(brreslgreen，bg)丈量空腹血白卵白(albuin，alb)的濃度，將標(biāo)天職為兩組:低卵白血癥組(alb35g/l)及非低卵白血癥組(alb35g/l)，應(yīng)用rt-pr半定量的要領(lǐng)檢測(cè)il-6rna在低卵白血癥組以及非低卵白血癥組中的表達(dá)。結(jié)果il-6rna在低卵白血癥組癌構(gòu)造中的陽(yáng)性表達(dá)率較非低卵白血癥組癌構(gòu)造中的陽(yáng)性高p=0.000，在兩組相應(yīng)的正常黏膜構(gòu)造標(biāo)本中均不表達(dá)。結(jié)論il-6通過(guò)影響

2、機(jī)體對(duì)白卵白的攝入、排擠及代謝，在希望期結(jié)直腸癌低卵白血癥的產(chǎn)生、生長(zhǎng)中起到緊張作用?！娟P(guān)鍵詞】白細(xì)胞介素6;低卵白血癥;希望期結(jié)直腸癌;rt-pr半定量法expressinandsignifianefinterleukin-6rnainturtissuesfadvanedlretalanerassiatedithhypalbuinaeiahenlisheng,zhuxijia.departentflretalsurgery,thefirstaffiliatedhspitalfguangxiedialuniversity,nanning530021,hinaabstratbjetivetstu

3、dytherelatinshipbeteentheinterleukin-6andtheadvanedlretalanerassiatedithhypalbuinaeia.ethdsardingtthenentratinfeptystahbldalbuin(detetedbybgethdatthesenddayinhspital),thepatientseredividedinthypalbuinaeiagrup(albuin35g/l)andnnhypalbuinaeiagrup(albuin35g/l).rt-prsei-quantityethdasusedtdetettheexpress

4、infil-6rnainthetgrups.resultstheexpressinfil-6rnainhypalbuinaeiagrupassignifiantlyhigherthanthatinnnhypalbuinaeiagrup(p=0.000),butasntexpressedinthepairednraltissuesfthebthtgrups.nlusinitsuggeststhatil-6playsaniprtantrleinthegenesisanddevelpentfhypalbuinaeiainpatientithadvanedlretalaner.keyrdsinterl

5、eukin-6;hypalbuinaeia;advanedlretalaner;rt-prsei-quantityethd結(jié)直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，患者就診時(shí)80%已是希望期1，常歸并有低卵白血癥。低卵白血癥是導(dǎo)致結(jié)直腸癌患者產(chǎn)生術(shù)后并發(fā)癥以及預(yù)后不良的重要緣故原由之一2,3，但導(dǎo)致希望期結(jié)直腸癌患者產(chǎn)生低卵白血癥的因素仍舊不甚明白，如今以為與腫瘤自己所致負(fù)氮平衡以及腫瘤產(chǎn)生的物質(zhì)作用于機(jī)體所導(dǎo)致的代謝非常有關(guān)4。比年已有大量研究報(bào)道了細(xì)胞因子在結(jié)直腸癌患者中的作用，此中有很多涉及il-65,而il-6與結(jié)直腸癌低卵白血癥的干系如今尚未見報(bào)道。本研究接納rt-pr半定量的要領(lǐng)檢測(cè)il-6

6、rna在希望期結(jié)直腸癌患者腫瘤構(gòu)造及其相應(yīng)的正常黏膜構(gòu)造中的表達(dá)，從分子生物學(xué)程度闡發(fā)il-6與希望期結(jié)直腸癌低卵白血癥的干系，探究結(jié)直腸癌低卵白血癥的產(chǎn)生氣制，為結(jié)直腸癌低卵白血癥的治療提供理論根據(jù)。1資料與要領(lǐng)1.1入選及分組入選的病例均為原發(fā)性結(jié)直腸癌患者，除外并有熏染性疾病及肝腎成效非常者。根據(jù)入院第二天用溴甲酚綠法丈量空腹血明凈卵白(albuin，alb)值，將研究工具分為低卵白血癥組(alb35g/l,38例)及非低卵白血癥組(alb35g/l,25例)兩組。研究的63例結(jié)直腸癌患者中，男39例，女24例，年事2577歲。1.2標(biāo)原泉源取自2022年9月至2022年12月間，在廣西

7、醫(yī)科大學(xué)第一隸屬病院結(jié)直腸肛門外科住院的上述低卵白血癥組(38例)及非低卵白血癥組(25例)實(shí)行手術(shù)治療的結(jié)直腸癌病例腫瘤構(gòu)造及其相應(yīng)的正常黏膜構(gòu)造(離癌灶10以上)標(biāo)本。全部病例均顛末病理確診，根據(jù)dukes分期尺度分為b、d期，術(shù)后病理提示切緣無(wú)癌細(xì)胞浸潤(rùn)。網(wǎng)絡(luò)的腫瘤構(gòu)造及其相應(yīng)的正常黏膜構(gòu)造離體后敏捷投入液氮冷凍，然后轉(zhuǎn)移至80超低溫冰箱中保存?zhèn)溆谩?.3引物根據(jù)的il-6rna序列方案并合成一對(duì)擴(kuò)增引物，pr擴(kuò)增產(chǎn)物260bp,il-6上游引物:5-taatgaggagattgtg-3，il-6卑劣引物:5-gatgagttgtatgttg-3。選用gapdh作內(nèi)參照，pr擴(kuò)增產(chǎn)物43

8、9bp,gapdh上游引物:5-tattgataataatg-3，gapdh卑劣引物:5-gagtgatggatggatgt-3。以上引物由上海鼎安生物科技合成。1.4rna的提取及逆轉(zhuǎn)錄合成dna的操做均嚴(yán)酷根據(jù)試劑盒說(shuō)明書舉行。1.5il-6pr擴(kuò)增:擴(kuò)增體系(總體積為25l)10buffer(g2+free)2.5l,dntp2l,gl2(25)1.5l,模版1.5l，上卑劣引物各0.5l，tap酶0.2l,滅菌注射用水16.3l。反響條件：預(yù)變性953in,擴(kuò)增條件9545s,52.21in,721in,34個(gè)循環(huán)，末次延伸7210in。取5l的pr產(chǎn)物經(jīng)2的瓊脂糖凝膠電泳，eb染色，

9、在紫外燈下不雅察并照相。1.6結(jié)果判斷用美國(guó)bi-rad凝膠圖像闡發(fā)體系中quantity-ne軟件測(cè)定il-6rna與gapdhrna逆轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增產(chǎn)物的吸光度值，將il-6rna與gapdhrna的pr產(chǎn)物的吸光度比值界說(shuō)為il-6rna的相對(duì)強(qiáng)度。根據(jù)比值分為：(-)0.1,(+)0.1-0.8,(+)0.8-2.0,(+)2.0。1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰設(shè)查驗(yàn)水準(zhǔn)0.05,統(tǒng)計(jì)軟件利用spss11.5。兩組數(shù)據(jù)比力，計(jì)數(shù)資料用四格表資料的2查驗(yàn)及spearan秩相干查驗(yàn)闡發(fā),計(jì)量資料用成組方案兩樣本資料的秩和查驗(yàn)及直線相干闡發(fā)。品級(jí)資料用成組方案兩樣本資料的秩和查驗(yàn)及spearan秩相干查驗(yàn)闡

10、發(fā)。p0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1兩組基線數(shù)據(jù)年事、性別、病程、dukes分期及分化程度的比力見表1，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。表1兩組年事、性別、dukes分期及構(gòu)造學(xué)范例的比力略2.2兩組腫瘤構(gòu)造中il-6rna表達(dá)環(huán)境的比力見表2、圖2，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.000)。表2兩組患者腫瘤構(gòu)造中il-6rna表達(dá)環(huán)境的比力略2.3兩組中年事、性別設(shè)男1，女2、血清alb濃度，腫瘤的分化程度(按癌細(xì)胞分化程度的由低到高，設(shè)高分化腺癌3，中分化腺癌2，低分化腺癌1)、dukes分期與il-6rna在腫瘤構(gòu)造中表達(dá)相對(duì)強(qiáng)度的相干性闡發(fā)：兩組患者血清alb濃度、腫瘤的構(gòu)造學(xué)范例與il-

11、6rna在腫瘤構(gòu)造中表達(dá)相對(duì)強(qiáng)度呈顯著負(fù)相干，血清alb濃度與il-6rna在腫瘤構(gòu)造中表達(dá)的相對(duì)強(qiáng)度r=-0.571,p=0.000。腫瘤的構(gòu)造學(xué)范例與il-6rna在腫瘤構(gòu)造中表達(dá)的相對(duì)強(qiáng)度r=-0.379,p=0.002。年事、性別、病程、dukes分期與il-6rna在腫瘤構(gòu)造中表達(dá)相對(duì)強(qiáng)度無(wú)關(guān)，p值別離為0.858、0.462、0.893、0.118。3討論il-6是體內(nèi)炎癥反響和一系列病理生理歷程的緊張介質(zhì)，是具有多項(xiàng)生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子6。本實(shí)行表白，il-6rna在結(jié)直腸癌腫瘤構(gòu)造中的陽(yáng)性表達(dá)率較高(59/63),但在相應(yīng)的正常黏膜構(gòu)造中不表達(dá)。il-6rna在低卵白血癥組癌構(gòu)

12、造中的陽(yáng)性表達(dá)率較非低卵白血癥組高，且il-6rna在腫瘤構(gòu)造中表達(dá)相對(duì)強(qiáng)度與血清alb濃度呈顯著負(fù)相干。有研究創(chuàng)造il-6在結(jié)直腸癌患者血清的程度中較正凡人高7，結(jié)直腸癌患者血清中il-6程度的增高大概來(lái)自腫瘤細(xì)胞的排泄8，il-6在結(jié)直腸癌患者血清及腫瘤構(gòu)造中的濃度呈正相干9，il-6在濃度高時(shí)易引起病理?yè)p傷，從而在很多疾病的發(fā)病機(jī)制中起著緊張的作用6。研究提示，在結(jié)直腸癌患者，由結(jié)直腸癌細(xì)胞所產(chǎn)生、排泄的il-6進(jìn)入血液循環(huán)，使血液中il-6的濃度增高，通過(guò)引起一系列病理生理反響，影響機(jī)體對(duì)alb的代謝從而導(dǎo)致低卵白血癥的產(chǎn)生。3.1il-6重要是通過(guò)介導(dǎo)急性炎癥反響直接引起低卵白血癥。

13、illan等學(xué)者10在對(duì)胃癌及肺癌的研究中創(chuàng)造，患者血白卵白的濃度的落落繼發(fā)于以循環(huán)中反響卵白(-reativeprtein,rp)濃度升高為特性的滿身炎癥反響綜合癥，而rp可以刺激il-6在機(jī)體內(nèi)的程度增長(zhǎng)，體內(nèi)rp與il-6的濃度呈正相干11。il-6是到場(chǎng)機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫和炎癥反響的緊張介導(dǎo)因子。在炎癥及腫瘤的刺激下，機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激反響，代謝狀態(tài)敏捷產(chǎn)生變革，出現(xiàn)以高代謝為特性的代謝紊亂。機(jī)體通過(guò)剖析自體構(gòu)造獵取能量，出現(xiàn)“自噬代謝。此時(shí)患者氮卵白的喪失量每每很大，肌肉平剖析放出的氨基酸為肝臟合成急性卵白提供質(zhì)料，而肝臟合成alb、轉(zhuǎn)鐵卵白、前白卵白等受按捺，加之非常喪失，卵白再漫衍，使低

14、卵白血癥敏捷產(chǎn)生。3.2il-6通過(guò)介導(dǎo)急性炎癥反響引起alb的經(jīng)毛細(xì)血管溢出率(transapillaryesaperate,ter)增高而導(dǎo)致低卵白血癥。有研究提示12il-6可活化內(nèi)皮細(xì)胞，明顯上調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞(vesselendthelialells，ves)的構(gòu)造纖溶酶原激活物(tissueplasingenativatr，tpa)排泄和tparna的轉(zhuǎn)錄，誘發(fā)纖溶體系活化，誘發(fā)血管通透性增高，使血管內(nèi)物質(zhì)的ter隨之增高。機(jī)體在炎癥的刺激下alb的ter是正常生理?xiàng)l件的23倍，大量的alb穿出血管壁進(jìn)入血管外間隙，從而引起低卵白血癥13,14。3.3il-6通過(guò)介導(dǎo)炎癥反響引起胰島

15、素對(duì)抗(insulinresistane,ir)造成低卵白血癥。ellen等15以為ir是一種低度的炎病癥態(tài)，il-6大概是導(dǎo)致ir的緊張緣故原由。ir使機(jī)體對(duì)胰島素的利用率落落，低落了胰島素促進(jìn)卵白合成，制止卵白剖析的本領(lǐng)，使血alb濃度落落，嚴(yán)峻者可產(chǎn)生低卵白血癥。3.4il-6通過(guò)引起瘦素(leptin)排泄增多而造成低卵白血癥。瘦素是由脂肪細(xì)胞產(chǎn)生，是胖胖基因編碼的卵白質(zhì)，作用于下丘腦影響神經(jīng)肽y等的開釋，發(fā)出按捺進(jìn)食的信號(hào)，淘汰能量的攝人，增長(zhǎng)能量斲喪。zubaneh等16提出了“細(xì)胞因子瘦素學(xué)說(shuō)，他們以為多種炎癥細(xì)胞因子如：tnf-、il-6等可誘導(dǎo)瘦素天生增長(zhǎng)，造成了熏染，腫瘤狀

16、態(tài)下的瘦弱，低卵白血癥為重要表示的嚴(yán)峻營(yíng)養(yǎng)不良。3.5il-6通過(guò)引起尿alb排擠率增長(zhǎng)而導(dǎo)致低卵白血癥。有資料表現(xiàn)，il-1、il-6、il-8、tnf-等細(xì)胞因子，可導(dǎo)致腎小球系膜細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，細(xì)胞外基質(zhì)增長(zhǎng)，使腎小球基底膜增厚和系膜區(qū)擴(kuò)張,造成尿alb排擠率增長(zhǎng)，漸漸形成連續(xù)性的卵白尿17，大量的alb由尿排擠可引起低卵白血癥的產(chǎn)生。低卵白血癥使患者的對(duì)抗力低落，更易于產(chǎn)生種種細(xì)菌的熏染，從而加重機(jī)體的炎癥反響。此時(shí)不但腫瘤細(xì)胞、血中的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生il-6，并且由于免疫復(fù)合物、內(nèi)毒素或內(nèi)皮素等刺激因素，損傷系膜細(xì)胞，也可誘導(dǎo)排泄il-6。炎癥損傷構(gòu)造又可刺激巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、t淋

17、巴細(xì)胞及種種系膜細(xì)胞排泄il-6。il-6在患者血液中的濃度增高又會(huì)加重低卵白血癥，由此形成“炎癥反響低卵白血癥的惡性循環(huán)。從本實(shí)行結(jié)果可以創(chuàng)造：il-6rna在結(jié)直腸癌腫瘤構(gòu)造中表達(dá)的相對(duì)強(qiáng)度與腫瘤的分化程度成負(fù)相干，而與患者的年事、性別、病程及dukes分期無(wú)關(guān)。有學(xué)者通過(guò)免疫組化實(shí)行創(chuàng)造il-6在結(jié)腸癌細(xì)胞胞漿中表達(dá)18。這說(shuō)明結(jié)直腸癌構(gòu)造產(chǎn)生、排泄il-6量的幾多與腫瘤細(xì)胞自己有關(guān)，分化程度越低的腫瘤表達(dá)il-6rna的量就越多，分化程度越高的腫瘤表達(dá)il-6rna的量就越少。這是由于高分化癌與正常構(gòu)造相似，成熟度高，惡性度低；低分化癌與正常構(gòu)造相差很大，成熟度差，惡性度高，這也與實(shí)行

18、結(jié)果il-6rna在結(jié)直腸癌腫瘤構(gòu)造中的陽(yáng)性表達(dá)率較高(59/63),但在相應(yīng)的正常黏膜構(gòu)造中不表達(dá)的結(jié)果相符合。怎樣治療希望期結(jié)直腸癌患者并發(fā)的低卵白血癥不停是困擾臨床事情者的一個(gè)困難。由于癌癥患者處于自身相食狀態(tài)，此時(shí)患者的斲喪顛末單純的營(yíng)養(yǎng)支持不克不及得到增補(bǔ)，用單純輸注alb等平凡營(yíng)養(yǎng)支持治療癌癥低卵白血癥結(jié)果不佳19。從本實(shí)行結(jié)果可知，il-6與希望期結(jié)直腸癌低卵白血癥的產(chǎn)生、生長(zhǎng)有關(guān)。il-6要與其受體il-6r相結(jié)合才氣發(fā)揮作用，那么利用il-6單抗或il-6受體拮抗劑來(lái)低落il-6的濃度或生物活性大概可成為治療結(jié)直腸癌低卵白血癥的有用要領(lǐng)。但也有研究創(chuàng)造il-6有抗腫瘤作用，這

19、與il-6的免疫調(diào)治作用有關(guān)20。因此，怎樣調(diào)解il-6單抗或il-6受體拮抗劑的量，在抗腫瘤及治療低卵白血癥之間尋到一個(gè)平衡點(diǎn)仍需進(jìn)一步的研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1袁野，肖小煒.希望期結(jié)直腸癌的治療近況j.臨床醫(yī)學(xué)，2022,1812：1762-1764.2alvesa,panisy,athieup,etal.pstperativertalityandrbidityinfrenhpatientsunderginglretalsurgery:resultsfaprspetiveultienterstudyj.arhsurg,2022,140:278-283.3franh-arasg.theeanin

20、gfhypalbuinaeiainlinialpratiej.linnutr,2001,20:265-269.4kurdak,nakashiaj,kanak,erleukin6isassiatedithahexiainpatientsithprstateanerj.urlgy,2022,69:113-7.5ullbergj,dittrihe,rsjhns,etal.theslubleinterleukin-6reeptrisgeneratedsheddingj.eurjiul,2022,23:473-480.6shengh，hiangbl，hangs，eta1.linialan

21、ifestatinsandinflaatryytkinerespnsesinpatientsithsevereauterespiratrysyndrej.jfrsedass，2022,104(10)：715-723.7esfandif,haadzadehghbadls，erleukin-6levelinpatientsithlretalanerj.anerlett,2022,244(1):76-78.8kinshitat,ith,iki,seruinterleukin-6levelrefletstheturprliferetiveativityinpatientsithlret

22、alanerj.aner,1999,85:2526-2531.9esfandif,erleukin-6levelinpatientsithlretalanerj.anerlett,2022,244(1):76-78.10illand,atsns,granp,etal.albuinnentratinsarepriarilydeterinedbythebdyellassandthesysteiinflaatryrespnseinanerpatientsitheightlssj.nutraner,2001,39:210-213.11王海蓉，黃重新，江洪,等.反響卵白直接刺激人單核細(xì)胞腫瘤壞死因子與白細(xì)胞介素6的表達(dá)，中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志，2022,13(2):199-202.12唐小龍，江振友，曾耀英,等.il-6誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞纖溶相干卵白的表達(dá)j.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2022,267:783-787.13ballerpe,hsenbeinaf,shutz-hfanns.transapillaryesaperatef