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1、課堂導(dǎo)學(xué)提綱(高三生物) 高三生物 第 1頁(共4頁)2022-8-5 高三生物 第 2頁(共4頁)5.1 DNA的粗提取與鑒定班級:_ 姓名:_小組:_【學(xué)習(xí)目標】1說出DNA的物理化學(xué)性質(zhì);2闡述DNA粗提取及鑒定的原理;3.嘗試對植物或動物組織中的進行粗提取?!局攸c難點】重點: DNA的物理化學(xué)性質(zhì);難點:DNA粗提取及鑒定的原理。【導(dǎo)學(xué)流程】基礎(chǔ)感知一、提取DNA的方法1基本思路提取生物大分子的基本思路是選用一定的_方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。對于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。2提取方法
2、與原理(1)利用DNA的溶解性。DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的_中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離目的。在_ NaCl溶液濃度下,DNA的溶解度最小。此外,DNA不溶于_溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)能溶于其中。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步地分離。(2)利用DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080的高溫,而DNA在_以上才會變性。洗滌劑能夠_,但對DNA沒有影響。3DNA的鑒定在_的條件下,DNA遇_會被染成_色,因此_可以作為鑒定DNA的試劑。鑒定
3、時溶液顏色的深淺與溶液中DNA含量的多少有關(guān)。二、實驗設(shè)計1實驗材料的選取選用_的生物組織,如雞血、菜花、洋蔥等。2實驗操作的過程(1)破碎細胞,提取含DNA的濾液動物細胞:以雞血為例,在雞血細胞液中加入一定量的_,同時用_攪拌,過濾后收集濾液。植物細胞:以洋蔥為例,先將洋蔥切碎,加入一定量的_,充分攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。(2)去除濾液中的雜質(zhì)方案一:通過控制_的濃度去除雜質(zhì)。方案二:直接在濾液中加入_,反應(yīng)10 min15 min,嫩肉粉中的_能夠分解蛋白質(zhì)。方案三:將濾液放在60 75 的恒溫水浴箱中保溫10 min15 min,使蛋白質(zhì)變性而與DNA分離。 (3)DNA析出在濾液
4、中加入同體積、冷卻的_(體積分數(shù)為95%),靜置2 min3 min,溶液中會出現(xiàn)_(DNA),用玻璃棒_攪拌,卷起絲狀物。(4)DNA鑒定設(shè)計:A組試管中加入絲狀物和2 mol/L NaCl溶液5 mL;B組試管中加入2 mol/L NaCl溶液5 mL。然后,向兩支試管中各加入4 mL二苯胺試劑。條件:在_中加熱5 min。結(jié)果:A組_,B組_。3操作提示(1)以血液為實驗材料,每100 mL血液中需要加入3 g_,防止血液凝固。(2)加入洗滌劑后,動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要_,以免加劇DNA分子的_,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。(3)二
5、苯胺試劑必須_,否則會變成淺藍色,從而影響實驗結(jié)果。二、探究未知你還有什么疑惑或新的發(fā)現(xiàn)?請在下方空白處至少寫出一條:1DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何變化的?2制備雞血細胞液時,要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因是什么?三、遷移運用1. 下圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗裝置,請據(jù)圖回答:(1)實驗材料選用雞血細胞液,而不用雞全血,主要原因是雞血細胞液中有較高含量的_。(2)在圖A所示的實驗步驟中加蒸餾水的目的是_,通過圖B所示的步驟取得濾液,再在溶液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_ ,圖C所示實驗步驟中加蒸餾水的目的是_。(3)為鑒定實驗所得絲狀物的主要成分是DNA,可滴加_溶液,結(jié)果絲狀物被染成淺綠色。答案:(1)DNA(2)使血細胞破裂使濾液中的DNA溶于濃鹽溶液使DNA析出(3)甲基綠2. 實驗中對DNA進行鑒定時,做如下操作:試管序號AB1加入物質(zhì)的量濃度為2 mol/L NaCl溶液5 mL加入物質(zhì)的量濃度為2 mol/L NaCl溶液5 mL2不加加入提取的DNA絲狀物攪拌3加4 mL二苯胺,混勻加4 mL二苯胺,混勻4沸水浴5 min沸水浴5 min實驗現(xiàn)象實驗結(jié)論(1)根據(jù)上圖,完成表格空白處的實驗內(nèi)容。(2)對B試管,
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