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1、關(guān)于化學(xué)性食物中毒的快速檢驗(yàn)第1頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第2頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四復(fù)習(xí)內(nèi)容浸泡試驗(yàn)溶劑選擇綜合項(xiàng)目第3頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第4頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第十四章 化學(xué)性食物中毒的快速檢驗(yàn)14.1 概述14.2 水溶性毒物的快速檢驗(yàn)14.3 揮發(fā)性毒物的快速檢驗(yàn)14.4 不揮發(fā)性有機(jī)毒物的快速檢驗(yàn)14.5 有毒元素的快速檢驗(yàn)14.6 農(nóng)藥的快速檢驗(yàn)14.7 獸藥快速檢驗(yàn)14.8滅鼠藥的快速檢驗(yàn)14.9 生物毒素快速檢驗(yàn)第5頁(yè),共111
2、頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四食物中毒是什么 凡是吃了“不干凈”的食物引起的急性中毒性疾病。 一 般 以 腹 痛、 惡 心、 嘔 吐、腹瀉、發(fā) 熱 等 癥 狀 為 主。 第6頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四2013年5月20日晚,7名青島理工大學(xué)琴島學(xué)院的學(xué)生相繼出現(xiàn)腹痛、腹瀉、抽搐等癥狀,經(jīng)城陽(yáng)人民醫(yī)院急診內(nèi)科檢查,7名學(xué)生均為食物中毒 第7頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第8頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第9頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四2011年5月德國(guó)暴
3、發(fā)腸出血性大腸桿菌(EHEC)疫情,已在德國(guó)各州造成1400多例確診或疑似病例,至少14人因此喪生。瑞典、丹麥、英國(guó)、法國(guó)、荷蘭、瑞士和奧地利等國(guó)也發(fā)現(xiàn)類似病例。據(jù)了解,這些國(guó)家的患者大部分曾到過(guò)德國(guó)。德國(guó)流行病預(yù)防研究的權(quán)威機(jī)構(gòu)羅伯特科赫研究所表示,目前還無(wú)法確定大腸桿菌的來(lái)源,但呼吁民眾尤其是德國(guó)北部地區(qū)的居民避免生吃黃瓜、番茄和生菜。 第10頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第11頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第12頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第13頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分
4、,星期四腸出血性大腸桿菌是大腸桿菌的一種,因其能產(chǎn)生志賀樣毒素而具有較強(qiáng)的致病性。感染到發(fā)病的潛伏期為3至8天,平均為3至4天。臨床表現(xiàn)主要有:腹部絞痛和腹瀉,一些病例為血便樣腹瀉。多數(shù)病人10天內(nèi)康復(fù),少數(shù)病人特別是幼兒和老年人,可出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥,如以急性腎功能衰竭、溶血性貧血和血小板減少為特點(diǎn)的溶血尿毒綜合癥。第14頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四目前正值夏秋季腸道傳染病高發(fā)季節(jié),更要注意飲食衛(wèi)生,盡量不要到衛(wèi)生條件差的街頭攤點(diǎn)就餐;易變質(zhì)的食物(如吃剩的熟食)應(yīng)冷藏存放;處理熟食時(shí)應(yīng)洗凈手或戴上一次性手套;食物煮熟后應(yīng)盡快食用,剩菜剩飯食用前應(yīng)徹底加熱;不要食
5、用變質(zhì)的食物。 第15頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 廣州、佛山、中山、江門、惠州等地學(xué)校、工廠食堂和酒樓相繼發(fā)生10起重大食物中毒事故,中毒人數(shù)達(dá)到709人,死亡2人。(9月26日10:40:10 新快報(bào))廣東: 2008年9月8日9月22日 共14天709人食物中毒 第16頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四1. 8日,廣州番禺區(qū)沙壙村6人自行加工進(jìn)食河豚魚(yú)引起的食物中毒,2人死亡。2. 9日中山市嘉華電子有限公司86名員工食堂進(jìn)食含冷藏魚(yú)類,造成集體高組胺食物中毒事故。3. 15日中山大學(xué)北校區(qū)第一學(xué)生食堂常溫存放熟食,造成細(xì)菌污染,
6、致199名學(xué)生食物中毒。4. 18日惠州藝園學(xué)校97名學(xué)生因進(jìn)食農(nóng)藥污染的蔬菜發(fā)生食物中毒事故。5. 20日河源市和平縣大壩鎮(zhèn)龍獅村106人進(jìn)食老鼠藥污染的牛肉造成食物中毒。6. 22日東莞市黃江鎮(zhèn)裕元花園酒店63人進(jìn)食受污染的蛋糕發(fā)生細(xì)菌性食物中毒。第17頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 重大食物中毒事件31起中毒人數(shù)近1200人死亡16人造成這些事故的主要原因:集體食堂供餐條件達(dá)不到要求不法分子投毒作案誤食有毒動(dòng)植物及食物原料殘留有毒物質(zhì) 2008年1月1日9月22日第18頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四1.化學(xué)性污染:農(nóng)藥、有害金屬
7、、多環(huán)芳族化合物、雜環(huán)胺、N-亞硝基化合物、食品添加劑、食品容器、包裝材料中的單體、助劑、二惡英。2.生物性污染:黃曲霉毒素、單端孢霉烯族化合物、伏馬菌素、椰毒假單孢菌酵米面亞種食物中毒、大腸埃烯氏菌屬食物中毒、單核細(xì)胞增多性李斯特菌; 食源性寄生蟲(chóng)?。?隱孢子蟲(chóng)、園孢子蟲(chóng) 食源性病毒: 甲型肝炎 瘋牛病 3.特殊食品衛(wèi)生問(wèn)題 轉(zhuǎn)基因食品的安全性、 肉乳蛋中獸藥的殘留問(wèn)題、功能性食品的安全性。 污染因素第19頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 中毒原因 報(bào)告起數(shù) 中毒人數(shù) 死亡人數(shù) 細(xì)菌性食物中毒 49 7613 20化學(xué)性食物中毒 90 6121 81有毒動(dòng)植物食物
8、中毒 33 1127 35 其他食物中毒 13 854 10 合 計(jì) 185 15715 146 中毒原因分類第20頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四健康安全控制細(xì)菌繁殖(殺滅細(xì)菌食物中毒預(yù)防 三管齊下!防止污染食品第21頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四食物中毒的含義食物中毒的分類中毒食物14.1 概 述第22頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四化學(xué)性食物中毒:是指攝入了含有化學(xué)性有毒有害物質(zhì)的食品或者把有毒有害物質(zhì)誤作食品攝入后,出現(xiàn)的以急性或亞急性中毒癥狀為主的疾病。第23頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,
9、13點(diǎn)13分,星期四化學(xué)性食物中毒的特點(diǎn):季節(jié)不明顯不同有毒化學(xué)物質(zhì)表現(xiàn)不同,臨床多樣化可以由誤食引起一般有特效解毒藥病死率較高,愈后較差第24頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四化學(xué)性食物中毒的分類化學(xué)性食物中毒快速檢驗(yàn)的程序化學(xué)性食物中毒檢驗(yàn)的特點(diǎn)第25頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 通常采用快速定性分析和實(shí)驗(yàn)室確證分析。快速定性分析適合于可疑目標(biāo)毒物的快速篩查,通常采用試紙、液體或固體試劑、試劑盒等,通過(guò)沉淀反應(yīng)、顏色反應(yīng)、免疫學(xué)反應(yīng)、酶抑制率等與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較定性或半定量。常用的有比色(比濁)法、免疫法以及生物芯片、生物傳感器、金(熒
10、光素)標(biāo)記法等一些現(xiàn)場(chǎng)快速篩選法。目前實(shí)驗(yàn)室常用的確證分析方法也可以用于快速檢測(cè),如氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、液相色譜-質(zhì)譜法等儀器方法,尤其是與相應(yīng)的質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)配合使用,可以對(duì)可疑毒物的進(jìn)行快速篩查和確證。 化學(xué)性食物中毒的快速檢驗(yàn)方法第26頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.2 水溶性毒物的快速檢驗(yàn)亞硝酸鹽的來(lái)源第27頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四大量攝入硝酸鹽和亞硝酸鹽可誘導(dǎo)高鐵血紅蛋白血癥,臨床表現(xiàn)為口唇、指甲發(fā)紺,皮膚出現(xiàn)紫斑等缺氧癥狀,可致死亡。主要是由于人體內(nèi)大量的亞硝酸鹽能將血液中的低鐵血紅蛋白氧化成高
11、鐵血紅蛋白。美藍(lán)硝酸鹽的攝入也能減少人體的碘的消化吸收,從而導(dǎo)致甲狀腺腫。中毒機(jī)理及癥狀:第28頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四檢驗(yàn)方法(格氏法)原理:第29頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四分光光度法測(cè)定食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉;分光光度法測(cè)定磺胺類獸藥;分光光度法測(cè)定亞硝胺總量;糧食中氯化苦的測(cè)定;水產(chǎn)品中組胺的測(cè)定;第30頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四操作方法格氏試劑配制:提取:510g樣品搗碎,加20ml水+1ml乙酸.檢測(cè):第31頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四檢驗(yàn)方法(聯(lián)苯
12、胺-冰乙酸法)原理:亞硝酸鹽在酸性溶液中將聯(lián)苯胺重氮化,然后水解并氧化成紅色的聯(lián)苯醌,可在白色滴板上進(jìn)行顏色反應(yīng),觀察有無(wú)紫紅色產(chǎn)生,以檢驗(yàn)亞硝酸鹽存在。第32頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四檢驗(yàn)方法(聯(lián)苯胺-冰乙酸法)再與亞硝酸作用生成重氮鹽:重氮鹽水解生成聯(lián)苯二酚:最后脫氫,氧化成紫紅色醌式化合物:第33頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.3 揮發(fā)性毒物的快速檢驗(yàn)生氰糖苷的毒性甚強(qiáng),對(duì)人的致死量為18mg/kg體重。生氰糖苷的毒性主要是氫氰酸和醛類化合物的毒性。氫氰酸被吸收后,隨血液循環(huán)進(jìn)入組織細(xì)胞、并透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入線粒體,氰化物通
13、過(guò)與線粒體中細(xì)胞色素氧化酶的鐵離子結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)胞的呼吸鏈中斷。第34頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四生氰糖苷的急性中毒癥狀包括心智紊亂、肌肉麻痹和呼吸窘迫。氫氰酸的最小致死口服劑量為0.53.5mg/kg體重。氰化鈉為0.1g,氰化鉀為0.12g。第35頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四處理急性氰化物類物質(zhì)中毒時(shí),首先應(yīng)立刻讓病人口服亞硝酸鹽或亞硝酸酯(如亞硝酸異戊酯),使病人體中的血紅蛋白(Fe 2)轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞F血紅蛋白Fe3),高鐵血紅蛋白的加速循環(huán)可將氰化物從細(xì)胞色素氧化酶中脫離出來(lái),使細(xì)胞繼續(xù)呼吸。其后應(yīng)讓病人口服硫代硫酸鹽等解毒劑,
14、使氰化物容易形成硫氰化物而隨尿排出。第36頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第37頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四檢驗(yàn)方法(普魯士藍(lán)法)原理:氰化物在酸性條件下生成HCN氣體,可與NaOH-FeSO4生成Na4Fe(CN)6,用鹽酸酸化后與部分亞鐵離子氧化生成的高價(jià)鐵離子作用,生成亞鐵氰化高鐵,即普魯士藍(lán)。第38頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四HCN NaOH NaCN+H2OFeSO4 6NaCN Na4Fe(CN)6+Na2SO44FeCl3 3Na4Fe(CN)6 Fe4Fe(CN)63+12NaCl第39
15、頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四操作方法NaOH-FeSO4試紙: 100g/L。步驟: 取510g樣品粉碎,放入100ml錐形瓶,加20ml水+10ml 100g/L酒石酸,立即在瓶口蓋上NaOH-FeSO4試紙,緩慢加熱,待瓶?jī)?nèi)溶液沸騰后停止加熱,取下試紙浸入10鹽酸。第40頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四苦味酸試紙法硫化物、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽 紅色對(duì)硝基苯甲醛法縮合反應(yīng) 紅色氣-質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)法 樣品在酸性條件下蒸餾出無(wú)機(jī)氰化物,將氰根離子衍生化,用氣相毛細(xì)管色譜柱分離,以離子阱質(zhì)譜檢測(cè)器檢測(cè),為快速檢驗(yàn)氰化物是否存在的確證
16、方法, 第41頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.3 揮發(fā)性酚類快速檢驗(yàn) 1溴化法 苯酚與溴水反應(yīng),能生成三溴苯酚的白色沉淀或渾濁,借以檢出苯酚的存在。 2三氯化鐵法 三氯化鐵能與酚類物質(zhì)形成藍(lán)紫色化合物,借以檢出酚類物質(zhì)的存在。水楊酸3氣相色譜法 食物中毒樣品經(jīng)蒸餾提取揮發(fā)性酚類物質(zhì)后,通過(guò)固相萃取柱凈化、濃縮后進(jìn)行氣相色譜分離,常用的色譜柱為含硝基對(duì)苯二酸改性聚乙二醇的不銹鋼色譜柱,或經(jīng)溴化或酯化后注入毛細(xì)管色譜柱(5%苯基甲基硅氧烷),用火焰離子化檢測(cè)器(溴化時(shí)采用ECD檢測(cè)器)檢測(cè), 第42頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.
17、4 不揮發(fā)性有機(jī)毒物的快速檢驗(yàn)不揮發(fā)性有機(jī)毒物:相對(duì)分子量較大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、不易揮發(fā)。酸性有機(jī)毒物堿性有機(jī)毒物兩性有機(jī)毒物中性有機(jī)毒物第43頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四斯-奧氏法(乙醇-乙醚提取法)第44頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 巴比妥類安眠藥的快速檢驗(yàn)理化性質(zhì):巴比妥酸的衍生物。白色結(jié)晶粉末,呈弱酸性。難溶于水,易溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷等有機(jī)溶劑。加堿成鹽后易溶于水。第45頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 巴比妥類安眠藥的快速檢驗(yàn)硝酸鈷法原理:巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中的環(huán)酰脲,在堿性條件下與鈷鹽作用
18、生成紫堇色絡(luò)合物。與米龍?jiān)噭┲泄}生成沉淀,沉淀溶于過(guò)量米龍?jiān)噭┲?。?6頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第47頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四米龍?jiān)噭┡渲疲喝」?ml,加硝酸9ml溶解,再以等量水稀釋。第48頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四操作步驟1.樣品提取簡(jiǎn)易提取法:取樣品50g搗碎,加入濃鹽酸5ml研磨,再加硫酸銨30g,研磨后加入乙醇50ml和三氯甲烷50ml,過(guò)濾,濾渣用三氯甲烷淋洗。分離有機(jī)相并水浴揮干,殘?jiān)脽崴芙膺^(guò)濾,取濾液備用。第49頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星
19、期四2.硝酸鈷反應(yīng):取樣品提取液少許,于蒸發(fā)皿上揮干,加數(shù)滴10g/L硝酸鈷無(wú)水乙醇溶液,在濃氨水瓶口熏片刻,陽(yáng)性顯紫堇色,陰性顯污綠色。第50頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四3.米龍?jiān)噭┓磻?yīng):取殘?jiān)僭S溶于少量水中,呈飽和溶液,滴加米龍?jiān)噭?2滴,則產(chǎn)生灰白色沉淀,繼續(xù)滴加米龍?jiān)噭?,沉淀溶解,表示有巴比妥類藥物存在。?1頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四生物堿類的快速檢驗(yàn)生物堿:一類含氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)的堿性有機(jī)化合物。1. 沉淀反應(yīng)2. 顏色反應(yīng)3. TLC第52頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.5 有毒元素的
20、快速檢驗(yàn)雷因許氏預(yù)試驗(yàn)原理:金屬銅在酸性條件下,能使砷、汞、銀、銻、鉍等金屬還原成元素狀態(tài)或生成銅的合金而沉積于銅的表面,顯示出不同的顏色及光澤。第53頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四操作方法1.銅片處理:將銅片或銅絲置于試管中,加入2mol/L硝酸處理,除去酸液水洗,再用乙醇洗滌,后用乙醚洗滌。第54頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四2.取20ml樣品于50ml燒杯中,加入5ml鹽酸(28)和1ml氯化亞錫鹽酸溶液,記錄液面位置,加熱微沸10min,加入2片銅片,保持20min。第55頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,
21、星期四3.取出銅片,用水洗滌,檢查銅片顏色變化情況(大量的汞或鉍需要長(zhǎng)時(shí)間加熱)??沙醪脚袛嗫赡苡泻畏N金屬毒物存在。第56頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第57頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四砷的確證試驗(yàn)升華法:將預(yù)試驗(yàn)變色的銅絲放入一端封口的毛細(xì)管,小火加熱使銅絲變紅色。顯微鏡下觀察,如有正四面體或八面體閃光的結(jié)晶,可確定砷化物存在。第58頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四砷的確證試驗(yàn)砷斑法原理:又稱古蔡法,在酸性條件下,五價(jià)砷化物可被碘化鉀或氯化亞錫還原為三價(jià)砷化物,然后與新生態(tài)的氫反應(yīng)生成砷化氫,砷化氫遇溴
22、化汞試紙能產(chǎn)生黃色至棕色的斑點(diǎn)。第59頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四汞的確證試驗(yàn) 升華法:將預(yù)試驗(yàn)變色的銅絲放入一端封口的毛細(xì)管,小火加熱使銅絲變紅色。顯微鏡下觀察,如呈現(xiàn)黑色光亮小球,表示有汞存在。第60頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四汞的確證試驗(yàn)(碘化亞銅法)實(shí)驗(yàn)原理:碘化亞銅與汞作用,生成紅色碘化亞銅汞沉淀。操作:將銀白色銅片放入白瓷板凹穴中,加少許碘化亞銅粉將銅片掩蓋,在3040環(huán)境中放置10min,如有紅色則表示有汞存在。第61頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四汞的確證試驗(yàn)(二苯碳酰二肼法)實(shí)驗(yàn)原理:
23、樣品經(jīng)破壞有機(jī)質(zhì)后,在0.2mol/L硝酸條件下,汞離子與二苯碳酰二肼生成藍(lán)紫色配合物,可以檢出汞離子的存在。第62頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 鋇的快速檢驗(yàn)1.玫瑰紅酸鈉法:在中性或酸性溶液中,鋇鹽與玫瑰紅酸鈉作用,生成紅棕色至桃紅色沉淀。2.硫酸鋇沉淀法:第63頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.6 農(nóng)藥的快速篩檢1速測(cè)卡法(卡片法)原理:膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色),有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過(guò)程發(fā)生改變,由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥
24、的存在。第64頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.6 農(nóng)藥的快速篩檢2酶抑制率法(分光光度法)原理:在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶的正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值,計(jì)算出抑制率,通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。第65頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.6 農(nóng)藥的快速篩檢3酶聯(lián)免疫吸附法(試劑盒法)原理:采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法
25、。方法:樣品以甲醇提取有機(jī)磷農(nóng)藥。在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物有機(jī)磷農(nóng)藥與微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合有機(jī)磷農(nóng)藥的抗體,形成包被抗原-抗體復(fù)合物,再加入酶標(biāo)二抗體后,用底物四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色,樣本吸光值與其所含有機(jī)磷農(nóng)藥的含量成負(fù)相關(guān),根據(jù)抗原抗體的反應(yīng),確定有機(jī)磷農(nóng)藥的種類,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出有機(jī)磷農(nóng)藥殘留物的含量。測(cè)定機(jī)磷農(nóng)藥的線性范圍0.5g /ml10g /ml;靈敏度:1g/ml。第66頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.6 農(nóng)藥的快速篩檢4免疫傳感器法免疫傳感器(immunolsensor)是根據(jù)抗原和抗體特異性結(jié)合所引發(fā)的
26、免疫反應(yīng)的原理研制成的傳感器。具有穩(wěn)定性強(qiáng)、選擇性高、檢測(cè)速度快等特點(diǎn)。以免疫生物分子作為識(shí)別元件,通過(guò)固定化技術(shù)將免疫蛋白結(jié)合到感受器表面,發(fā)生免疫識(shí)別反應(yīng)后,生成的免疫復(fù)合物與產(chǎn)生的物理或化學(xué)信號(hào)相關(guān)聯(lián),由換能器將其轉(zhuǎn)化為與待測(cè)物質(zhì)濃度(或活度)有關(guān)的可定量或者可處理的物理化學(xué)信號(hào),如電信號(hào)、光信號(hào)或者聲波信號(hào)等,再通過(guò)二次儀表放大并且輸出信號(hào),從而可實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)分子的快速靈敏檢測(cè)。第67頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四1.對(duì)硫磷的檢驗(yàn)(1)硝基酚反應(yīng):氫氧化鈉將對(duì)硫磷水解成對(duì)硝基苯酚的鈉鹽,在堿性條件下互變異構(gòu)生成黃色醌型化合物。第68頁(yè),共111頁(yè),2022年
27、,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四1.對(duì)硫磷的檢驗(yàn)(2)靛酚反應(yīng):在氫氧化鈉存在下對(duì)硫磷水解成對(duì)硝基苯酚的鈉鹽,加入鋅粉,生成的氫還原對(duì)硝基苯酚鈉成對(duì)氨基苯酚鈉,與鄰甲酚作用,并在空氣中氧的氧化下生成藍(lán)色化合物。第69頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.6 農(nóng)藥的快速檢驗(yàn)2.敵百蟲(chóng)和敵敵畏的檢驗(yàn)(1)異腈法原理:在堿性溶液中,敵百蟲(chóng)和敵敵畏水解成二氯乙醛,在強(qiáng)堿性溶液中,二氯乙醛與苯胺作用生成具有特殊臭味的異腈化苯。第70頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.6 農(nóng)藥化學(xué)定性鑒定法2.敵百蟲(chóng)和敵敵畏的檢驗(yàn)(2)間苯二酚法原理:在堿性溶液
28、中,敵百蟲(chóng)和敵敵畏水解成二氯乙醛,再與間苯二酚反應(yīng)生成紅色化合物。第71頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第72頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四操作方法提取:樣品粉碎后,放入錐形瓶,加入10ml苯或乙醚振搖10min,濾液備用。反應(yīng):取12滴濾液于濾紙上,加5間苯二酚乙醇溶液和5氫氧化鈉乙醇溶液各一滴,微熱數(shù)分鐘,若呈現(xiàn)紅色表示存在。第73頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.6 農(nóng)藥化學(xué)定性鑒定法三、儀器快速測(cè)定方法樣品中農(nóng)藥毒物經(jīng)有機(jī)溶劑提取、固相萃取提取和凈化分離提純后,進(jìn)行定量檢測(cè)。主要方法有:薄層色譜掃
29、描法、氣相色譜法(GC)、氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析法(GC/MS)。通過(guò)已建立的農(nóng)藥色譜圖數(shù)據(jù)庫(kù)、質(zhì)譜圖數(shù)據(jù)庫(kù),可對(duì)已知農(nóng)藥或未知農(nóng)藥進(jìn)行快速的定性和定量。定量測(cè)定方法在本書農(nóng)藥殘留測(cè)定中有詳細(xì)介紹。第74頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.7 獸藥的快速檢驗(yàn)1免疫膠體金試紙法 該方法運(yùn)用抗原抗體的特異反應(yīng)、側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)和膠體金技術(shù),對(duì)樣品中鹽酸克倫特羅分子進(jìn)行快速定性檢測(cè)。第75頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.7 獸藥的快速檢驗(yàn)將半抗原鹽酸克倫特羅小分子與牛血清白蛋白(BSA)偶聯(lián)成為結(jié)合抗原,與膠體金顆粒結(jié)合后,包被在醋酸纖維素
30、膜(NC)上;在硝酸纖維素膜上將鹽酸克倫特羅抗體和BSA抗體分別包被在檢測(cè)區(qū)(T)和質(zhì)控區(qū)(C)。將樣本提取液加入加樣孔后,樣本中的鹽酸克倫特羅與結(jié)合抗原一起層析泳動(dòng)到檢測(cè)區(qū)競(jìng)爭(zhēng)與抗體結(jié)合,剩余的結(jié)合抗原繼續(xù)泳動(dòng)到質(zhì)控區(qū)與BSA抗體結(jié)合。 第76頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.8 滅鼠藥的快速檢驗(yàn)磷化鋅、敵鼠、毒鼠強(qiáng)、氟乙酰胺第77頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14.8 滅鼠藥的快速檢驗(yàn)磷化鋅的檢驗(yàn)1.硝酸銀預(yù)試法2.鉬藍(lán)法 三者合一3.亞鐵氰化鉀法第78頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四敵鼠的檢驗(yàn) Fe
31、Cl3毒鼠強(qiáng)(四亞甲基二砜四氨)的檢驗(yàn) 424、鼠沒(méi)命 、三步倒、聞到死、一掃光 變色酸法:用硫酸分解為甲醛和二甲磺胺,甲醛與 變色酸在硫酸下生成紫紅色化合物。 二巰丙磺鈉 第79頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四氟乙酰胺:采用納氏試劑法,其原理是在堿性水溶液中氟乙酰胺水解成氟乙酸鈉,同時(shí)釋放出氨,氨與納氏試劑生成紅棕色沉淀。乙酸胺無(wú)水乙醇 5ml溶于 100ml葡萄糖液中、靜脈滴入 第80頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14. 9生物毒素快速檢驗(yàn) 人類至今已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的食物種類是很豐富的,這是人類在不斷地探索自然的過(guò)程中積累的成果,其中絕大多
32、數(shù)是不含任何天然有害物質(zhì)的,但也有少數(shù)含有天然有害物質(zhì)。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們發(fā)現(xiàn)一些原來(lái)被認(rèn)為是安全的食物事實(shí)上也含有某種或某些天然有害的物質(zhì)。 第81頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14. 9生物毒素快速檢驗(yàn)一、真菌毒素快速檢驗(yàn) 膠體金免疫層析法(快速檢測(cè)卡法) 將樣品提取液加入檢測(cè)卡上的加樣孔,檢測(cè)液中的黃曲霉毒素B1(AFTB1)與金標(biāo)墊上的金標(biāo)抗體結(jié)合形成復(fù)合物,若AFTB1在檢測(cè)液中的濃度低于靈敏度值,未結(jié)合的金標(biāo)抗體在檢測(cè)區(qū)(T區(qū))與固定在硝酸纖維素(NC)膜上的AFTB1-BSA偶聯(lián)物結(jié)合,形成可見(jiàn)T線;若AFTB1在檢測(cè)液中的濃度高于靈敏度值,金
33、標(biāo)抗體全部形成復(fù)合物,不會(huì)再與的AFTB1-BSA偶聯(lián)物結(jié)合形成可見(jiàn)T線。未固定的復(fù)合物與對(duì)照區(qū)(C區(qū))的二抗體形成對(duì)照線,表明檢測(cè)卡有效。第82頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四14. 9生物毒素快速檢驗(yàn)二、河豚毒素的快速檢驗(yàn) 硫酸-重鉻酸鉀呈綠色反應(yīng)、生物檢驗(yàn)法三、毒蕈的快速檢驗(yàn) TLC第83頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 1.動(dòng)物肝臟中的毒素 動(dòng)物肝中主要的毒素是膽酸、?;悄懰岷兔撗跄懰帷K鼈兪侵袠猩窠?jīng)系統(tǒng)的抑制劑,其中牛磺膽酸的毒性最強(qiáng),脫氧膽酸次之。許多試驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn),脫氧膽酸對(duì)結(jié)腸癌、直腸癌的發(fā)生有促進(jìn)作用。豬肝臟中的膽酸含量
34、較少,一般不會(huì)產(chǎn)生明顯的毒性作用,但食用過(guò)多或食用時(shí)處理不當(dāng)也會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生一定的危害。 一、常見(jiàn)的動(dòng)物性天然毒素第84頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 2河豚毒素 河豚魚(yú)是一種味道鮮美又含劇毒的魚(yú)類。全球有200種左右,我國(guó)有70多種,廣泛分布于各海區(qū)。河豚魚(yú)的肝、脾、胃、卵巢、卵子、睪丸、皮膚以及血液均含有毒素,其中以卵和卵巢的毒性最大,肝臟次之。一般品種的河豚魚(yú)肌肉的毒性較低,但雙斑圓鯨純、蟲(chóng)紋圓純、鉛點(diǎn)圓純肌肉的毒性較強(qiáng)。毒素含量的大小隨著生長(zhǎng)水域、品種及季節(jié)的不同而不同。 豚魚(yú)中毒是世界上最嚴(yán)重的動(dòng)物性食物中毒。 第85頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月2
35、0日,13點(diǎn)13分,星期四河豚魚(yú)第86頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 3螺類毒素 螺的種類很多,絕大多數(shù)食用安全性較高,但少數(shù)種類如接縫香螺、間肋香螺、油螺、節(jié)棘骨螺及蠣敵荔枝螺等含有四甲胺、骨螺毒素、千里酰膽堿、丙烯酰膽堿等有毒物質(zhì)。 第87頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 姓名 福壽螺(曾用名:大瓶螺)物種 兩棲淡水貝類軟體生物產(chǎn)地 南美亞馬遜流域罪行 管圓線蟲(chóng)的從犯,并廣泛傳播廣州管圓線蟲(chóng)病。第88頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四二、常見(jiàn)的植物性天然毒素 4氰苷 氰苷進(jìn)人體內(nèi)水解后產(chǎn)生HCN,從而具有較
36、強(qiáng)的毒性。含有氰苷的食源性植物有木薯、豆類以及一些果樹(shù)的種子如杏仁、桃仁、枇杷仁及亞麻仁等。氰化物在酸性條件下可產(chǎn)生HCN氣體,HCN可使苦味酸試紙顯紅色,據(jù)此可對(duì)含有氰苷的物質(zhì)進(jìn)行定性檢測(cè)。第89頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四對(duì)人的致死量0.41mg/kg(體重)氰甙植物中的天然毒素:苦杏仁甙預(yù)防:1、勿生食2、脫氰第90頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 木薯、苦杏仁中毒預(yù)防措施 去皮 加水浸泡2天 蒸煮(打開(kāi)鍋蓋 ) 毒素:氰甙第91頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 5紅細(xì)胞凝集素 這是一類對(duì)紅細(xì)胞具有凝
37、集作用的蛋白質(zhì),多為糖蛋白。含有紅細(xì)胞凝集素的食源性植物有蓖麻、豆類及花生的種子。不同植物的紅細(xì)胞凝集素其毒性是不同的,以蓖麻凝集素的毒性最強(qiáng),紅細(xì)胞凝集素比較耐熱,80數(shù)小時(shí)不能使之失活,100需經(jīng)過(guò)1 h可完全破壞其活性。第92頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四凝聚素植物中的天然毒素:預(yù)防:燒熟煮透第93頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 四季豆中毒(豆角、菜豆、梅豆角、云豆,扁豆等)食物:炒、煮不透的四季豆;毒素:皂素和血球凝集素;預(yù)防措施:四季豆要熟透;涼拌四季豆,切絲煮沸10分鐘以上;第94頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,1
38、3點(diǎn)13分,星期四皂 甙主要存在于菜豆、大豆中植物中的天然毒素:第95頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四6. 未煮熟豆?jié){中毒生豆?jié){毒素: 皂素; 抗胰蛋白酶因子; 植物血球凝集素等;預(yù)防措施: 文火維持煮沸5分鐘; 第96頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四預(yù)防:充分加熱,燒熟煮透注意豆?jié){的“假沸”, “假沸”后持續(xù)加熱不少于5min。第97頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 7.龍葵堿 龍葵堿又名茄堿、馬鈴薯毒素、龍葵毒素,不溶于水,能溶于乙醇,與稀酸共熱可發(fā)生分解。龍葵堿廣泛存在于馬鈴薯、番茄及茄子等中。馬鈴薯中龍
39、葵堿的含量一般在0.01 0.1305 ,且隨著貯存時(shí)間的增加而漸增,發(fā)芽的馬鈴薯其幼芽及芽眼部分的含量可高達(dá)0.30.5。人攝入0.20.4 g龍葵堿即可引起中毒。 (土豆,洋芋、山藥蛋) 第98頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四茄堿植物中的天然毒素:癥狀:綠色、發(fā)芽預(yù)防:1、龍葵素溶于水,吃前如把土豆削皮、挖芽、切好,放在水中浸泡2小時(shí)以上;2、遇醋酸易分解;第99頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四第100頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四 8秋水仙堿 秋水仙堿是鮮黃花菜(也稱金針菜)中的一種生物堿,其本身無(wú)毒,但當(dāng)它進(jìn)人人體后會(huì)轉(zhuǎn)化成一種劇毒物質(zhì):二秋水仙堿,后者對(duì)胃腸道、泌尿系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等具有毒性。成人一次攝人0.10.2 mg秋水仙堿可引起中毒,攝入320mg可致死。食用鮮黃花菜時(shí)一定要用開(kāi)水焯,浸泡后,再經(jīng)充分烹飪,以防中毒。食用干黃花菜較安全。 (萱草、金針萊)第101頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期四預(yù)防措施:食用新鮮黃花菜要去其長(zhǎng)柄;開(kāi)水焯后再冷水浸泡2小時(shí);開(kāi)水焯后曬干食用;第102頁(yè),共111頁(yè),2022年,5月20日,
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