
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1、兩種木賊提取物對(duì)高血脂大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮超微布局的作用甄艷軍姜秀娟劉志敏侯建眀張鳳梅張東輝曹華張雪靜【摘要】目的不雅察兩種木賊提取物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化早期內(nèi)皮細(xì)胞超微布局的影響。要領(lǐng)高脂飼料復(fù)制SD大鼠早期動(dòng)脈粥樣硬化模子,別離予木賊正丁醇提取物及其剩余物灌胃防范性給藥9周,透射電鏡不雅察各組主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的變革。結(jié)果木賊正丁醇提取物及其剩余物組內(nèi)皮細(xì)胞超微布局均較模子組完備,吞飲小泡和脂質(zhì)空泡的數(shù)目、體積顯著淘汰,線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹及脫顆粒征象明顯減輕,且結(jié)果前者優(yōu)于后者。結(jié)論兩種木賊提取物均有顯著改進(jìn)高脂對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞超微布局損傷的作用?!娟P(guān)鍵詞】木賊提取物高脂血癥內(nèi)皮細(xì)胞超微布局Keyrds:Equ
2、isetuextrat;Hyperlipideia;Endthelialell;Ultrastruture木賊水煎劑對(duì)實(shí)行性大鼠動(dòng)脈粥樣硬化atherslersis,AS早期內(nèi)皮細(xì)胞的庇護(hù)作用,已在前期實(shí)行證明1。本實(shí)行進(jìn)一步不雅察木賊正丁醇提取物(脂溶部門)及提取剩余物(水溶部門)對(duì)高血脂大鼠內(nèi)皮損傷超微布局的影響,旨在創(chuàng)造木賊落脂、抗AS的有用部位。1東西1.1動(dòng)物康健雄性SD大鼠50只,干凈級(jí),體重180200g,由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)行動(dòng)物學(xué)部提供醫(yī)學(xué)動(dòng)物及格證號(hào):SXK(e)2022-0007。1.2藥品和試劑木賊購自石家莊市樂仁堂大藥房,吉非羅齊由保定古城制藥廠提供;試劑盒由日
3、本協(xié)和株式會(huì)社提供;其他試劑均為國(guó)產(chǎn)闡發(fā)醇。1.3儀器超薄切片機(jī),型號(hào):萊卡UT;透射電子顯微鏡,型號(hào):日立H-7500。2要領(lǐng)2.1要領(lǐng)SD大鼠隨機(jī)分為正常比較組、模子組、吉非羅齊陽性藥物組、正丁醇提取物組、提取剩余物組。每組10只,均自由攝食、飲水。模子組、吉非羅齊組和木賊兩組天天飼喂高脂飼料高脂飼料的構(gòu)成:87.48%平凡飼料+10%豬油+2%膽固醇+0.5%膽鹽+0.02%他巴唑,陽性藥物組和兩種木賊提取物組天天按10l/kg灌胃量給藥,別離合吉非羅齊0.16g/(kgd)、合木賊生藥12.5g/(kgd);正常比較組和模子組天天灌等量的生理鹽水,隨動(dòng)物體重增長(zhǎng)調(diào)解藥量,實(shí)行9周。2.
4、2樣品制備及檢測(cè)實(shí)行9周后,禁食12h,眶后取血,分散血清,全主動(dòng)生化闡發(fā)儀氧化酶法測(cè)T和TG,化學(xué)修飾酶法測(cè)LDL,HDL。末次給藥24h后,以10%水合氯醛腹腔注射麻醉,4%多聚甲醛灌注結(jié)實(shí),于胸主動(dòng)脈根部取材約35,4預(yù)冷的4%戊二醛液和1%俄酸結(jié)實(shí),乙醇梯度脫水,環(huán)氧樹脂包埋,做超薄切片,醋酸鈾、檸檬酸鉛酸雙染色,透射電子顯微鏡不雅察內(nèi)膜改變。2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰數(shù)據(jù)以s表現(xiàn),血脂各項(xiàng)指標(biāo)舉行組間比力,均接納SPSS11.5軟件舉行單因素方差闡發(fā)。3結(jié)果3.1兩種木賊提取物對(duì)血脂的影響兩組木賊提取物較模子組TG,VLDL明顯低落,此中正丁醇提取物亦能低落T,LDL,提取剩余物升高HDL
5、結(jié)果明顯;與陽性藥的調(diào)脂結(jié)果相近。結(jié)果見表1。3.2主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的電鏡不雅察表1兩組木賊提取物對(duì)大鼠血脂的影響略與模子組比力,P0.05,P0.01;n=104討論脂代謝非常是誘發(fā)AS的緊張因素,其嚴(yán)峻程度隨血漿T程度的升高而加重,特殊是LDL,VLDL程度的連續(xù)升高和HDL程度的低落,與AS的發(fā)病率呈正相干2。脂質(zhì)代謝非常,氧化損傷內(nèi)皮細(xì)胞,引起血管內(nèi)膜一系列病理改變3。本實(shí)行模子組T和LDL較比較組明顯升高,電鏡下主動(dòng)脈內(nèi)皮產(chǎn)生的顯著形態(tài)學(xué)改變,提示了過氧化損傷對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的粉碎作用。用木賊提取物防范性給藥后,大鼠血脂代謝紊亂得以改進(jìn),脂溶性萃取物對(duì)T的影響重要表如今使LDL和VLDL低落
6、;而水溶性提取物結(jié)果略差,但兩者對(duì)TG的影響均較明顯,說明兩種提取物調(diào)脂作用的環(huán)節(jié)有所差異。圖1正常比較組(10.0k)略圖2模子組(20.0k)略圖3吉非羅齊組15.0k略兩種提取物組內(nèi)皮損傷較模子組減輕,脂質(zhì)空泡、吞飲小泡數(shù)目顯著淘汰,其機(jī)制大概是藥物低落了內(nèi)皮細(xì)胞的通透性,通過胞飲方法進(jìn)入細(xì)胞的脂類形成脂質(zhì)空泡的數(shù)目淘汰;其落解產(chǎn)物脂質(zhì)過氧化物也淘汰,減輕了內(nèi)皮細(xì)胞損傷。電鏡下不雅察到的內(nèi)皮細(xì)胞間隙較模子組變窄,破綻毗連清楚可見;胞膜形成的突起淘汰變短,無疑會(huì)淘汰內(nèi)皮細(xì)胞與血漿內(nèi)游離脂質(zhì)和單核細(xì)胞的打仗面積,低落其吞噬脂質(zhì)和捕獲白細(xì)胞的機(jī)率,淘汰單核細(xì)胞和血小板粘附,減輕炎癥反響和內(nèi)皮受
7、損。圖4木賊正丁醇提取物組(10.0k)略圖5木賊提取剩余物組(20.0k)略木賊提取物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞器也具有必然的影響,高脂血癥時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞代謝非常,產(chǎn)生大量活性氧類物質(zhì),線粒體受損,部門嵴膜交融、消散;殘存者代償性擴(kuò)張?jiān)錾?;給藥后,線粒體偶見輕度水腫,數(shù)目與陽性藥物組比未見顯著區(qū)別。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與核糖體在細(xì)胞卵白合成方面具有緊張意義,附著核糖體的解聚和脫顆粒被以為是粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)早期受損的表現(xiàn),脫顆粒后的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)喪失合成卵白的本領(lǐng)。因此,脫顆??梢宰鳛榇置鎯?nèi)質(zhì)網(wǎng)合成受阻、成效停滯的形態(tài)指標(biāo)。木賊提取物組大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞線粒體嵴膜交融減輕、殘存者呈輕度擴(kuò)張狀態(tài);粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹擴(kuò)張、脫顆粒程度較模子組有顯著改進(jìn),表白細(xì)胞器形態(tài)成效漸趨規(guī)復(fù),高脂血癥導(dǎo)致的高代謝狀態(tài)有所緩解,胞質(zhì)內(nèi)吞飲小泡數(shù)目的淘汰有力的證明了這一點(diǎn)。上述兩種木賊提取物對(duì)AS早期血管內(nèi)皮細(xì)胞超微布局的影響,與前期木賊水煎劑對(duì)髙脂動(dòng)物內(nèi)皮的庇護(hù)作用實(shí)行的電鏡不雅察結(jié)果同等,兩次實(shí)行,均顯著支持了木賊抗AS,庇護(hù)血管內(nèi)皮的藥理效應(yīng)。比力正丁醇提取物及其剩余物作用結(jié)果,前者優(yōu)于后者。正丁醇萃取物重要為木賊化學(xué)身分的脂溶性部門,剩余物重要是水溶部門,實(shí)行表現(xiàn)出的差異的活性作用,為深化研究木賊抗AS的有用部位提供了直不雅的形態(tài)學(xué)根據(jù)?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】1甄艷軍,候建明,朱方,等.木賊對(duì)大鼠高脂血癥及主動(dòng)脈內(nèi)膜
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