細(xì)菌性陰道病(BV)簡(jiǎn)介

1、細(xì)菌性陰道病(BV)簡(jiǎn)介及麗珠BV檢測(cè)產(chǎn)品李生主要內(nèi)容介紹 BV的基礎(chǔ)知識(shí) BV檢測(cè)的臨床意義 BV檢測(cè)常見(jiàn)方法分析 麗珠公司BV檢測(cè)產(chǎn)品介紹BV基礎(chǔ)知識(shí)介紹BV的研究歷史在相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)期里被稱為“非特異性陰道炎”；1955年Gardne和Dukes發(fā)現(xiàn)加德納菌與BV有關(guān)，將BV稱為加德納菌性陰道炎；到1977年有多細(xì)菌混合感染導(dǎo)致BV的觀點(diǎn)代替了單一微生物感染的觀點(diǎn)，并發(fā)現(xiàn)BV與早產(chǎn)、炎癥、腫瘤等婦產(chǎn)科疾病密切相關(guān)；1984年瑞典國(guó)際專題學(xué)術(shù)會(huì)議上正式該病定名為“細(xì)菌性陰道病”。BV的基本定義細(xì)菌性陰道?。˙acterial Vaginosis,BV) 是指一種陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)，在細(xì)菌學(xué)上

2、表現(xiàn)為生殖道正常菌群(產(chǎn)H2O2的乳酸桿菌)數(shù)量減少,代之以一組厭氧菌群(類桿菌屬、加德納菌屬等)數(shù)量增加,引起的陰道分泌物增多，白帶有魚(yú)腥臭味等陰道生化性質(zhì)發(fā)生明顯變化而導(dǎo)致的臨床癥侯。正常菌群對(duì)人體的重要作用乳酸桿菌是正常陰道的最主要的優(yōu)勢(shì)菌，占陰道菌群的90%以上。陰道上皮細(xì)胞中含有豐富的糖原，在陰道乳酸桿菌的作用下，分解為乳酸，維持陰道正常的酸性環(huán)境，抑制堿性環(huán)境中繁殖的病原體，也稱為陰道的自凈作用。乳酸桿菌黏附于黏膜，形成保護(hù)屏障，競(jìng)爭(zhēng)黏附，阻止病原微生物定植。乳酸桿菌提高機(jī)體的免疫功能，刺激巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活性，維持陰道局部的抗感染能力。BV的發(fā)病機(jī)理圖示 乳酸桿菌數(shù)量減少H2O

3、2加德納菌/類桿菌等數(shù)量陰道內(nèi)源性感染陰道菌群失調(diào)功能減退產(chǎn)乳酸 致病因素各類陰道炎癥BV的致病病原體 陰道加德納菌（Gardner Vaginalis） 類桿菌屬（Bacterides spp.） 普氏桿菌屬（Prevotilla spp.） 動(dòng)彎桿菌屬（Mobilucus SPP.） 其它:人型支原體等BV與常見(jiàn)陰道炎簡(jiǎn)介種類病原體比例細(xì)菌性陰道病Bacterial Vaginosis陰道中的乳酸桿菌減少，而加德納菌、各種厭氧菌及支原體大量繁殖而引起的混合感染52%霉菌性陰道炎Volvovaginal Candidiasis霉菌28%滴蟲(chóng)性陰道炎Trichomoniasis滴蟲(chóng)20%BV與

4、常見(jiàn)陰道炎的區(qū)別正常陰道BV霉菌性陰道炎滴蟲(chóng)性陰道炎陰道pH值4.54.5 4.5 4.5優(yōu)勢(shì)微生物乳酸桿菌陰道加德納菌等厭氧菌霉菌滴蟲(chóng)分泌物異味無(wú)有有有分泌物量不定，一般少中等多多分泌物外觀無(wú)色或白色絮狀，非均一性變稀如奶狀，粘度低呈奶酪樣凝塊，粘度高黃綠色泡沫樣，粘度低外陰、陰道上皮炎癥無(wú)無(wú)有有胺試驗(yàn)陰性(無(wú)魚(yú)腥味)陽(yáng)性（有魚(yú)腥味）陰性(無(wú)魚(yú)腥味)陽(yáng)性（有魚(yú)腥味）顯微鏡檢查正常上皮細(xì)胞,乳酸桿菌占優(yōu)勢(shì)線索細(xì)胞,大量混雜菌落,乳酸桿菌較少無(wú)線索細(xì)胞，可見(jiàn)假菌絲和芽孢無(wú)線索細(xì)胞，可見(jiàn)滴蟲(chóng)BV檢測(cè)的臨床意義BV的發(fā)病率患病率隨種族及人群而異 一般人群: 10%30% STD診所患者: 30%37

5、% 美國(guó)每年估計(jì)有300萬(wàn)有癥狀病例和300萬(wàn)無(wú)癥狀者 國(guó)內(nèi)報(bào)道的BV患病率： 健康婦女：6.9% 婦科門診有異常陰道分泌物的患者：9.7% 性亂人群：36.7% 孕婦：10%-25%BV檢測(cè)的臨床意義（一）婦科 - 是導(dǎo)致霉菌性陰道炎的主要原因； - 與滴蟲(chóng)感染密切相關(guān)，80%的滴蟲(chóng)患者同時(shí)伴有BV感染； - 是造成輸卵管炎、盆腔炎、泌尿系統(tǒng)感染、術(shù)后感染的危 險(xiǎn)因素； - 與不孕癥、宮外孕有關(guān)； - 與婦科腫瘤有關(guān)： BV患者發(fā)生CIN危險(xiǎn)是正常婦女的2倍 (CIN：宮頸上皮內(nèi)瘤變,是宮頸癌前病變) BV檢測(cè)的臨床意義（二）產(chǎn)科 -是造成早產(chǎn)、胎膜早破、低體重兒的主要原因。BV陽(yáng)性 的妊娠

6、婦女中40-50%易在37周前早產(chǎn)或分娩低出生體 重兒，比正常婦女高3-4倍，她們的孩子也可能受到直接 感染，患新生兒肺炎、腦膜炎等，并帶來(lái)各種后遺癥； -是導(dǎo)致絨毛膜炎、剖腹產(chǎn)術(shù)后子宮炎的危險(xiǎn)因素。BV患 者產(chǎn)后或剖宮產(chǎn)后發(fā)生產(chǎn)褥期子宮內(nèi)膜炎的是正常人群的 10倍； -是導(dǎo)致某些妊娠不良和妊娠并發(fā)癥的危險(xiǎn)因素； BV檢測(cè)的現(xiàn)實(shí)狀況該病的臨床癥狀不明顯，常被忽視治療不徹底，容易反復(fù)發(fā)作現(xiàn)實(shí)患者認(rèn)識(shí)不足，檢測(cè)率不高醫(yī)院目前檢測(cè)方法不完善BV檢測(cè)常用方法分析BV常見(jiàn)檢測(cè)技術(shù)介紹 革蘭氏染色法 (少用) 陰道加德納菌檢測(cè)(如PCR/培養(yǎng)法等) (少用) 脯氨酸氨基肽酶法(PIP) (少用) Amse

7、l四項(xiàng)法 (少用) pH值+胺試驗(yàn)/多胺快速檢測(cè)法 (常用) 常規(guī)鏡檢法 (常用) 唾液酸酶法 (常用) 多聯(lián)檢測(cè)法 (常用)Amsel四項(xiàng)法目前檢測(cè)BV的“金標(biāo)準(zhǔn)”，由以下四項(xiàng)指標(biāo)構(gòu)成：1）外觀：陰道分泌物增多變稀如奶狀2）pH值：陰道分泌物pH4.53）胺試驗(yàn)（嗅試驗(yàn)）：陰道分泌物中加入10%的氫氧化鉀溶 液,出現(xiàn)魚(yú)腥味4）線索細(xì)胞：分泌物鏡檢有線索細(xì)胞。若鏡下線索細(xì)胞占陰 道復(fù)磷狀上皮細(xì)胞的比例20%，則更具有診斷價(jià)值 凡4項(xiàng)中3項(xiàng)同時(shí)陽(yáng)性，即可診斷BV陽(yáng)性pH值測(cè)定Normal：pH3.0-4.4Unnormal：pH4.5線索細(xì)胞檢查/鏡檢濕片法：在一載玻片上加一滴生理鹽水，將陰道拭

8、子分泌物與生理鹽水混合成懸液，加上蓋玻片后，在高倍（400倍）鏡下檢查。結(jié)果：線索細(xì)胞為陰道鱗狀上皮細(xì)胞表面覆蓋著許多球桿菌（主要是加特納菌，有時(shí)合并有厭氧菌），使細(xì)胞呈斑點(diǎn)狀、顆粒狀外觀，細(xì)胞邊緣模糊不清呈鋸齒狀。意義：當(dāng)線索細(xì)胞占全部上皮細(xì)胞的20%以上時(shí)一般認(rèn)為BV陽(yáng)性。正常的上皮細(xì)胞線索細(xì)胞線索細(xì)胞檢查/鏡檢Amsel四項(xiàng)的缺點(diǎn) 根據(jù)Amsel診斷方法,許多臨床工作者感到要準(zhǔn)確實(shí)施上述標(biāo)準(zhǔn)并不容易， 該方法臨床操作程序過(guò)于復(fù)雜，一些與感染無(wú)關(guān)的因素：如近期性交、陰道沖洗、月經(jīng)、或存在大量宮頸粘液等因素，可改變pH值和產(chǎn)生異味，胺試驗(yàn)的氣味辨別常因人而異，不同實(shí)驗(yàn)人員操作之間差異性較大；

9、而對(duì)線索細(xì)胞的識(shí)別則要受到顯微設(shè)備、樣品采集及操作者的經(jīng)驗(yàn)等等因素共同影響，鏡檢線索細(xì)胞需20%，難以界定，易漏檢與誤檢。 多胺快速檢測(cè)實(shí)驗(yàn)多胺快速試驗(yàn)原理： 感染細(xì)菌性陰道病時(shí)，陰道加特納菌、類桿菌、普氏桿菌、動(dòng)彎桿菌等相關(guān)厭氧菌侵蝕陰道上皮細(xì)胞過(guò)程中產(chǎn)生的主要代謝物，氨基酸代謝生成胺（主要為丁二胺、戊二胺、三甲胺等揮發(fā)性胺），胺在陰道酸性環(huán)境下以鹽的形式存在，加10%KOH置換出氨，以氣體形式揮發(fā)，可以使溴甲酚紫試紙變紫色胺實(shí)驗(yàn)的缺點(diǎn) 胺試驗(yàn)的特異性差，結(jié)果影響因素多，滴蟲(chóng)、宮頸糜爛等都可影響導(dǎo)致結(jié)果陽(yáng)性；眾多醫(yī)院的臨床對(duì)照實(shí)驗(yàn)評(píng)估證實(shí)BV胺實(shí)驗(yàn)試劑假陽(yáng)性率分別為25%-35%，通過(guò)與BV

10、確診結(jié)果對(duì)照發(fā)現(xiàn)，BV胺實(shí)驗(yàn)試劑結(jié)果符合率分別60%-70%，符合率不高。假陽(yáng)性的結(jié)果將導(dǎo)致患者接受抗厭氧菌治療，殺滅陰道正常菌群，造成陰道生態(tài)環(huán)境的失調(diào)，損害身心健康。 唾液酸酶檢測(cè)法 唾液酸苷酶直接由病原體分泌，其活性與病原體的數(shù)量成正比。研究證實(shí)，唾液酸酶濃度與BV致病過(guò)程有關(guān)，唾液酸酶可能通過(guò)提高這些微生物吸附、侵入和破壞膜組織的能力而提高這些微生物的致病性。其活性與早產(chǎn)、胎膜早破、低體重兒等一系列不良妊娠后果有直接關(guān)系。 BV多聯(lián)試劑檢測(cè)法 多項(xiàng)指標(biāo)綜合檢測(cè)，在對(duì)BV診斷的同時(shí)，也可以評(píng)價(jià)女性陰道微生態(tài)的狀態(tài)，理論意義上更具有優(yōu)勢(shì)；可能會(huì)成為BV診斷的主流方法，目前已逐漸獲得很多省份

11、的收費(fèi)認(rèn)可，全國(guó)范圍已經(jīng)逐漸開(kāi)展，部分省份和地區(qū)已經(jīng)相當(dāng)成熟； BV多聯(lián)檢測(cè)目前包括三聯(lián)檢測(cè)（過(guò)氧化氫，白細(xì)胞酯酶，唾液酸苷酶），四聯(lián)檢測(cè)（pH值，過(guò)氧化氫，白細(xì)胞酯酶，唾液酸苷酶），甚至五聯(lián)（過(guò)氧化氫，白細(xì)胞酯酶，唾液酸苷酶，脯氨酸氨肽酶，氨基葡萄糖苷酶);麗珠BV檢測(cè)產(chǎn)品介紹BV Combine-Test KIT粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2009第2400191號(hào)Livzon BV 四聯(lián)試劑組成試劑盒組分： A 唾液酸酶測(cè)試液 1.2ml/瓶1瓶 B 過(guò)氧化氫測(cè)試液 1.2ml/瓶1瓶 C 白細(xì)胞酯酶測(cè)試液 1.2ml/瓶1瓶 D 樣本抽提液 10ml/瓶1瓶 E 反應(yīng)板 20人份 F 樣本抽提管

12、 20支注：試劑2-8避光保存，有效期1年BV Combine-Test KIT組成BV Combine-Test KITpH值比色卡Livzon BV 四聯(lián)各項(xiàng)指標(biāo)含義1、pH值 異常：pH值4.5 正常： pH值4.52、過(guò)氧化氫濃度測(cè)定： 陰性：乳酸菌減少，生態(tài)破壞； 陽(yáng)性：生態(tài)恢復(fù)或正常3、唾液酸酶活性測(cè)定：陽(yáng)性：致病菌、條件致病菌增加，生態(tài)破壞； 陰性：正常，生態(tài)恢復(fù) 4、白細(xì)胞酯酶測(cè)定： 陽(yáng)性 ：粘膜受損，各種陰道感染； 陰性 ：粘膜修復(fù)，炎癥消失產(chǎn)品的臨床應(yīng)用一 STD門診女性病人二 婦科、產(chǎn)科病人 1.有BV臨床癥狀 2.無(wú)BV臨床癥狀： 有BV及其他婦科病感染史 孕婦 有早產(chǎn)

13、史的婦女 有婦科手術(shù)史的婦女 定期婦科檢查 疑有盆腔炎的婦女 3.BV患者治療后復(fù)查 4.手術(shù)前常規(guī)BV檢測(cè)： 人流 置換、取環(huán) 通液 其他宮腔操作等Livzon BV 四聯(lián)操作程序1）取出檢測(cè)液及所需數(shù)量的反應(yīng)板,平衡至室溫；2）將新鮮樣本在試紙上擦拭(點(diǎn)印!),使試紙被分泌物浸潤(rùn),待試紙變色后立即對(duì) 照比色卡判讀；3）在樣品抽提管中滴加6到8滴樣本抽提液約400ul；4）再將采樣拭子浸入到滴有抽提液的樣本抽提管中,反復(fù)攪動(dòng)擠壓5-6次,擠干液體后,棄去拭子；5）蓋上抽提管滴頭,往反應(yīng)板上滴加樣本抽提液，每孔滴加一滴,約35ul;6）陰性對(duì)照孔只加樣本液，其它檢測(cè)孔中分別滴加各對(duì)應(yīng)項(xiàng)檢測(cè)液一

14、滴,輕拍.置于35-37中溫育15分鐘,觀察反應(yīng)孔顏色變化。注:若樣本干燥,可先在樣本抽提管中滴入一到兩滴樣本抽提液,輕輕攪動(dòng)潤(rùn)濕拭子,在繼續(xù)進(jìn)行檢測(cè)操作步驟Livzon BV 四聯(lián)操作程序Livzon BV 四聯(lián)操作程序滴加樣品滴加反應(yīng)液PH值唾液酸酶過(guò)氧化氫白細(xì)胞酯酶陰性對(duì)照Livzon BV 四聯(lián)操作程序結(jié)果判斷Livzon BV 四聯(lián)結(jié)果判讀pH值的檢測(cè)對(duì)照所附比色卡進(jìn)行判讀,正常pH4.4;1）唾液酸酶項(xiàng):檢測(cè)孔顏色變藍(lán)或綠色,BV陽(yáng)性，不變色BV陰性；2）過(guò)氧化氫項(xiàng):檢測(cè)孔顏色變藍(lán)色或綠色,H2O22umol/l陰性,不變色, H2O22umol/l陽(yáng)性；3）白細(xì)胞酯酶:檢測(cè)孔顏色

15、變藍(lán)色或綠色, 白細(xì)胞酯酶陽(yáng)性； Livzon BV 四聯(lián)結(jié)果判讀實(shí)例pH值的檢測(cè)對(duì)照所附比色卡進(jìn)行判讀,正常pH4.4;1）唾液酸酶項(xiàng):檢測(cè)孔不變色BV陰性；2）過(guò)氧化氫項(xiàng): 檢測(cè)孔顏色變藍(lán),H2O22umol/l陰性 ；3）白細(xì)胞酯酶: 檢測(cè)孔不變色，白細(xì)胞酯酶陰性； pH值的檢測(cè)對(duì)照所附比色卡進(jìn)行判讀,正常pH4.4;1）唾液酸酶項(xiàng):檢測(cè)孔顏色變藍(lán),BV弱陽(yáng)性；2）過(guò)氧化氫項(xiàng):檢測(cè)孔顏色不變色, H2O22umol/l陽(yáng)性；3）白細(xì)胞酯酶:檢測(cè)孔顏色變藍(lán), 白細(xì)胞酯酶陽(yáng)性；Livzon BV 四聯(lián)結(jié)果判讀實(shí)例Livzon BV 四聯(lián)操作注意事項(xiàng)樣本采集：用無(wú)菌棉拭子收集女性陰道壁 （陰道

16、下部1/3處）盡可能多的分泌物；樣本運(yùn)輸：采集的樣本應(yīng)立即送樣檢測(cè)；請(qǐng)及時(shí)讀取結(jié)果,超過(guò)規(guī)定時(shí)間5分鐘以上讀取結(jié)果視為無(wú)效；在采樣前72小時(shí)內(nèi)使用過(guò)陰道栓劑、膏劑、乳劑等陰道藥物的婦女.經(jīng)期所取的樣本也會(huì)影響到檢測(cè)結(jié)果。部分樣本的檢測(cè)物含量很高,大量水解底物,可產(chǎn)生沉淀,屬于正?，F(xiàn)象；Livzon BV Combine-Test KIT優(yōu)勢(shì)最關(guān)鍵指標(biāo)-唾液酸酶敏感性,特異性最好 進(jìn)口唾液酸酶原料選擇的底物穩(wěn)定性好，檢測(cè)結(jié)果不會(huì)受到本底干擾 某些唾液酸酶試劑常常出現(xiàn)底物在包被的材質(zhì)上或在貯存過(guò)程中發(fā)生分解變色，有一定程度的本底干擾。如國(guó)內(nèi)某些試劑常常在試劑盒中提示，如有變色可正常使用等字樣 。實(shí)際上顯色體系如果有可見(jiàn)的本底，很難保證不會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的觀察造成一定程度的影響，出現(xiàn)可疑或難以判斷等問(wèn)題。 Livzon BV Combine-Test KIT優(yōu)勢(shì) 結(jié)果易于觀察,精準(zhǔn)性好. 反應(yīng)孔為“U”型孔，背景為白色，不受本底干擾, 顯色結(jié)果顏色系統(tǒng)一致,陰陽(yáng)性結(jié)果顯而易見(jiàn)。 獨(dú)特的陰性對(duì)照孔設(shè)計(jì) 麗珠BV聯(lián)合試劑獨(dú)有的陰性對(duì)