PCR室室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1、室室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的 適用范圍試驗(yàn)人員關(guān)于和分析的室內(nèi)質(zhì)量控制。制定依據(jù)臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)技術(shù)申子瑜李金主編 人民衛(wèi)生出版社 年第一版職責(zé)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量負(fù)責(zé)人和試驗(yàn)人員負(fù)責(zé)本規(guī)程的執(zhí)行。評(píng)估檢測(cè)結(jié)果正確與否，判定當(dāng)日結(jié)果是否可以被采用。5、操作步驟血清質(zhì)量控制品質(zhì)控品的來(lái)源：衛(wèi)生部臨檢中心或試劑盒內(nèi)質(zhì)控品。陰性質(zhì)控品，陽(yáng)性質(zhì)控品，臨床樣本。質(zhì)控品的處理及分析判斷。記錄每次檢測(cè)質(zhì)控結(jié)果。記錄失控原因及糾正措施。室內(nèi)質(zhì)控圖的使用方法：描點(diǎn)：圖中X 2s 3s 為失控線。關(guān)于于同一批號(hào)的質(zhì)控血清不論使用幾個(gè)月，其空?qǐng)D均不變化。只要將圖紙上方“起止日期”項(xiàng)填入每個(gè)月的實(shí)際起止日期即可。每天將該批號(hào)質(zhì)控

2、血清按有關(guān)規(guī)則程序復(fù)融隨同病人的標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)。將日期、檢測(cè)結(jié)果和操作者如實(shí)記錄在圖下方的相應(yīng)位置，并且按前面的方法畫出圖上的關(guān)于應(yīng)點(diǎn)，用直線將該點(diǎn)與前一天的點(diǎn)連接。月底計(jì)算當(dāng)月全部質(zhì)控血清檢測(cè)結(jié)果的s 和行圖形分析和小結(jié)，將質(zhì)量控制圖存入質(zhì)控資料檔案。圖形分析3s 線以外，則為失控，應(yīng)立即報(bào)告有關(guān)負(fù)責(zé)并且將失控情況、查找進(jìn)程及處理結(jié)果等詳細(xì)記錄。2s 6 點(diǎn)以上在一側(cè)等規(guī)律變化，均應(yīng)立即向有關(guān)負(fù)責(zé)人反映，并且積極查找原因。但當(dāng)天的試驗(yàn)結(jié)果一般可以發(fā)出。經(jīng)過觀察圖形的規(guī)律性變化進(jìn)行誤差分析，消除誤差來(lái)源a）曲線漂移：提示有系統(tǒng)誤差，準(zhǔn)確度發(fā)生了一次性的向上或向下改變。這種變化往往是由于一個(gè)新的情

3、況引起的。如更換不同批號(hào)試劑，啟用新批號(hào)的質(zhì)控血清、操作人員的變幻等。在找原因時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)注意“漂移”前后發(fā)生了那些變動(dòng)的因素。b）趨勢(shì)性變化：向下或向上的趨勢(shì)性變化表明檢測(cè)的準(zhǔn)確度發(fā)生了慢慢地變化。這種變化往往是由于一個(gè)逐漸改變的因素造成的。如質(zhì)控血清的降解，試劑效價(jià)的降低等。連續(xù)多點(diǎn)分布在靶值一側(cè)：目前，一般認(rèn)為質(zhì)控血清的檢6 6 1.5 。因此凡出6 天以上出現(xiàn)在靶值同一側(cè)者均有可能存在非隨機(jī)誤差因素。如結(jié)果與靶值偏離并且不太大，不會(huì)給臨床使用帶來(lái)太大影響時(shí)，一般化驗(yàn)報(bào)告可以照常填發(fā)。）經(jīng)過圖形的資料關(guān)于比進(jìn)行誤差分析，消除誤差來(lái)源每個(gè)月的月底將該月的全部質(zhì)控血清檢測(cè)結(jié)果的X和s與該批測(cè)定

4、的X和s Xs 不同側(cè)表明檢測(cè)的精密度發(fā)生了變化。CTXs 按月份列出。如果X逐在月上升，應(yīng)考慮保存不當(dāng)造成的試劑效價(jià)降低或質(zhì)控血清本身出現(xiàn)降解。如果各月份X基本一致而s逐月加理上找原因。等詳細(xì)記錄。陰性關(guān)于照品失控的處理程序：B試劑污染；b.擴(kuò)增產(chǎn)物的“污染” 4個(gè)空管打60 分鐘，然后加入擴(kuò)增反映混合液同時(shí)以水替代核酸樣本進(jìn)行擴(kuò)增，如為陽(yáng)性，而上述僅含擴(kuò)增反映混合物的管為陰性，即可排除試劑污染的可能，表示實(shí)驗(yàn)室有擴(kuò)增產(chǎn)物“污染” 。此時(shí)，應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人， 然后先暫時(shí)停滯實(shí)驗(yàn)，采取各種有效的消毒清潔工作直至產(chǎn)物污染徹底消失后才可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果有試劑污染時(shí)，應(yīng)更換另一批號(hào)的試劑進(jìn)行反復(fù)

5、實(shí)驗(yàn)，待反復(fù)實(shí)驗(yàn)陰性質(zhì)控品無(wú)失控后，方可報(bào)告結(jié)果。斷為實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)程中所致的標(biāo)本間的交叉“污染” ，出現(xiàn)這崩開。因此在實(shí)驗(yàn)前離心管、濾心吸頭的質(zhì)檢以及在實(shí)并且且實(shí)驗(yàn)人員的嚴(yán)格依照操作程序進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的工作態(tài)度 是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。陽(yáng)性關(guān)于照品失控的處理程序：臨界陽(yáng)性關(guān)于照品失控的原因有：核控現(xiàn)象后才報(bào)告結(jié)果。如果仍失控，則考慮：儀器問題儀器問題。如擴(kuò)增儀孔間溫度的不均一性、孔內(nèi)溫度與所示溫度的不一致性等。此時(shí)應(yīng)請(qǐng)廠家即時(shí)校正儀器。儀器校正好之后再反復(fù)操作如無(wú)失控則可報(bào)告結(jié)果。如果仍有失控現(xiàn)象則應(yīng)考慮：試劑問題試劑的問題：如酶的失活、探針的純度及標(biāo)記效率和核酸提取試劑的效率、試劑的靈敏度等?？筛鼡Q另一批號(hào)的試劑反復(fù)實(shí)驗(yàn)，無(wú)失控結(jié)果后才可發(fā)出報(bào)告。強(qiáng)陽(yáng)性關(guān)于照品失控的原因和臨界陽(yáng)性關(guān)于照品失控的原在實(shí)驗(yàn)前關(guān)于試劑的質(zhì)檢是必不可少的環(huán)節(jié)之一。陽(yáng)性標(biāo)本失控的處理程序：失控的主要原因有：標(biāo)本的收集是否契合要求（囊括標(biāo)本采集的時(shí)間是否合；標(biāo)本的運(yùn)送是否延誤；陽(yáng)性質(zhì)控品的失控原因相同。處理程序：a如果是標(biāo)本收集、標(biāo)本保存、標(biāo)本運(yùn)送b如果是標(biāo)本的核酸制備、擴(kuò)增檢測(cè)中所存在的隨機(jī)誤差問題，則可參照以上所述陽(yáng)性質(zhì)控品失控的處理方法，另外關(guān)于實(shí)驗(yàn)人員的培訓(xùn)非常重要。陰性標(biāo)本失控的處理程序：主要原因有：標(biāo)本采集容器是否合格（是否使用一次性采樣材料、使用；