吸附色譜法課件

1、吸附色譜技術(shù)目錄CONTENTS吸附色譜技術(shù)概述吸附色譜技術(shù)原理吸附色譜技術(shù)應用及展望吸附色譜技術(shù)概述色譜技術(shù)（法）定義及其分類1吸附色譜技術(shù)（法）2吸附色譜操作形式3色譜法定義及其分類目前最常用的現(xiàn)代高效分離方法，亦可用于化合物的定性定量分析。概念：利用混合物的不同組分在兩相中的分配差異進行分離的方法。分類： 按原理： 吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠過濾色譜。 按操作形式： 紙平面色譜、薄層色譜、紙色譜和柱色譜 按流動相狀態(tài)： 液相色譜、氣相色譜和超臨界流體色譜吸附色譜法吸附色譜（Adsorption chromatography）是色譜法的一種，又稱液-固色譜法，以固體吸附劑為固定

2、相，利用被分離組分對固定相表面活性吸附中心吸附能力的差異而實行分離的色譜法。按操作方式又可分為吸附柱色譜和薄層色譜。吸附分離原理吸附色譜分離過程1吸附色譜分離機制2吸附色譜三要素3吸附色譜分離過程吸附-解吸-再吸附-反復多次洗脫-被測組分分配系數(shù)不同-差速遷移-分離分配系數(shù)越大，在流動相中的濃度越高，即吸附能力越弱，該組分先流出；同理，吸附能力強的組分后流出。 分配系數(shù)：指一定溫度下，處于平衡 狀態(tài)時，組分在流動相中的濃度和在 固定相中的濃度之比。吸附色譜三要素1、吸附劑 吸附機理：屬于物理吸附，即吸附劑通過范德華力（固體表面的作用力、氫鍵絡(luò)合、靜電引力）吸附成分。吸附劑的基本要求： a、與被

3、分離成分不發(fā)生化學反應 b、顆粒均勻 c、在所用各溶劑中不溶解 d、較大的表面積和適宜的活性 吸附劑的種類： a、親水性吸附劑：氧化鋁、硅膠、聚酰胺、氧化鎂、硅 酸鎂、碳酸鈣、硅藻土等 b、親脂性吸附劑：活性炭 吸附能力：親脂性吸附劑對極性小的化合物吸附能力強；親水性吸附劑的吸附能力與含水量有關(guān)。吸附色譜三要素最常用的吸附劑：氧化鋁：具有較強的吸附性，適于分離植物中的堿性成分。吸附活性與含水量關(guān)系大，含水量越多，吸附能力越強。 吸附色譜三要素最常用的吸附劑：硅膠（SiO2xH2O）： 1、結(jié)構(gòu)：內(nèi)部硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)-多孔結(jié)構(gòu)； 表面有硅醇基-氫鍵作用-吸附活性中心。 2、優(yōu)點：適用于各種樣品的分離

4、 3、吸附能力：取決于骨架表面的硅醇基。 3、特性：與極性物質(zhì)或不飽和化合物形成氫鍵物質(zhì)極性 越大，吸附能力越強。 吸附色譜三要素3、被分離物質(zhì)對于極性吸附劑而言： 被分離成分極性大，吸附牢，難以洗脫； 被分離成分極性小，吸附力弱，易于洗脫。選擇合適吸附劑和流動相的原則：選擇色譜分離條件時，必須從吸附劑，被分離物質(zhì)、流動相三方面綜合考慮 吸附色譜技術(shù)應用應用于各種醫(yī)藥品種的鑒定 例如各種醫(yī)藥品種成分分析、中成藥鑒別和質(zhì)量標準研究、純度檢查、穩(wěn)定性考察和藥物代謝以及合成工藝監(jiān)控分析、生化和抗生素研究等方面。用于生物分子的分離純化 例如以羥基磷灰石填充色譜柱，可具有較高的分離效率，并能保持生物分子

5、較高的活性，已廣泛用于生物分子的分離純化。其他方面應用 流動吸附色譜法測定固體比表面積，在催化劑、吸附劑、貴金屬漿料、色譜擔體、耐火材料及天然巖石的研究中，是一種測定比表面積的較優(yōu)方法。吸附色譜技術(shù)應用上樣葉黃素溶液：原料中葉黃素的質(zhì)量分數(shù)為0.48%， 制成樣品溶液的質(zhì)量濃度為79ug/mL。 （2g樹脂20mL上樣溶液）圖1：10種樹脂對葉黃素的靜態(tài)吸附量506.4ug/g463.5ug/g308.7ug/g非極性樹脂單位ug/g：每克濕樹脂吸附的葉黃素微克量ug/g葉黃素的純度：皂化液的0.48%提高到5.4%葉黃素收率：92.9%吸附色譜技術(shù)應用圖2：種樹脂對葉黃素的靜態(tài)吸附率與解析率

6、46%50%選用樹脂HZ816E吸附率D解吸率吸附條件：2g樹脂和20mL上樣溶液，30恒溫震蕩10h后HPLC分析溶液中葉黃素質(zhì)量濃度，計算吸附量和吸附率E。解吸條件：將吸附飽和后的樹脂過濾，加入大量無水乙醇于30下恒溫震蕩12h，取樣分析質(zhì)量濃度和解吸率D。q=（0（葉黃素）-e（葉黃素）*V/m，E=0（葉黃素）-e（葉黃素）*100 0（葉黃素）D= x（葉黃素）*Vx*100 0（葉黃素）-e（葉黃素）式中0（葉黃素）為上樣溶液中葉黃素的初始質(zhì)量濃度（u/），e（葉黃素）為吸附飽和后上樣溶液中葉黃素的質(zhì)量濃度（u/），x（葉黃素）為解吸后上樣溶液中葉黃素的質(zhì)量濃度 （u/），為上樣溶

7、液體積（），Vx為解吸液體積（）， 為樹脂質(zhì)量（）。吸附色譜技術(shù)應用圖3：樹脂HZ816在不同溫度下的吸附等溫線該樹脂對葉黃素的最佳吸附溫度為30吸附色譜技術(shù)應用表2：Langmuir和Freundlich方程擬合HZ816樹脂吸附等溫線結(jié)果 葉黃素的吸附過程更符合freundlich方程，表明HZ816樹脂對葉黃素的吸附過程是多分子層吸附。吸附色譜技術(shù)應用穿透曲線：用層析柱做層析時，在一定波長的紫外下檢測，當溶質(zhì)流出層析柱，紫外檢測會有峰出現(xiàn)，所得的這條曲線被稱為穿透曲線。吸附色譜技術(shù)應用5.4%葉黃素的純度：皂化液從0.48%提高到5.4%葉黃素收率：92.9% 參考文獻JUDITH KAMMERER， REINHOLD CARLE， AND DIETMAR R. KAMMERER.Adsorption and Ion Exchange：Basic Principles and Their Application in Food Processing J. Agric. Food Chem. Vol.59.No.1,2011徐向群，陳瑞鋒，王華夫。吸附色譜法用于茶多酚的分離提取。(中國農(nóng)業(yè)科學院茶葉研究所茶葉化學工程農(nóng)業(yè)部重點開放實驗室 31008)王斌，劉道杰。羥基磷灰石色譜在生物分子分離中