羅氏試劑盒說明書 Digoxin

1、Digoxin地高辛11820796 322100測(cè)試主要用途用于體外定量檢測(cè)人體血清、血漿中的地高辛。該檢測(cè)用于診斷與治療地高辛過量以及監(jiān)測(cè)地高辛的療效，以確保合理的治療。Elecsys及cobas e 系列免疫分析儀工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法“ECLIA”。臨床應(yīng)用地高辛廣泛用于治療充血性心衰和多種心律失調(diào)。使用地高辛治療可增強(qiáng)心肌收縮力，有助于提高心輸出量、減小心臟大小、降低靜脈壓力和減小血容量。地高辛治療也能穩(wěn)定和降低心室脈搏1。盡管晶體地高辛的使用使藥物劑量標(biāo)準(zhǔn)化成為可能，但治療給藥稍一馬虎就會(huì)引起地高辛中毒。尤其是地高辛中毒癥狀類似心律不齊，而地高辛本身用于治療心律不齊。血清或

2、血漿中地高辛治療濃度范圍是0.9-2.0 ng/ml2。人地高辛中毒癥狀通常僅出現(xiàn)在濃度超過2.0 ng/ml時(shí)，但也有報(bào)道稱濃度在1.4 ng/ml時(shí)也可能發(fā)生中毒3。基于“2008 歐洲心臟學(xué)會(huì)關(guān)于急慢性心臟疾病診斷指南”中的相關(guān)內(nèi)容，推薦的地高辛治療濃度為0.6-1.2ng/ml。4當(dāng)?shù)馗咝翝舛瘸^1.2ng/ml時(shí)，死亡風(fēng)險(xiǎn)上升。5地高辛中毒表現(xiàn)在下述幾個(gè)方面：a 藥物治療比率低（如治療和中毒劑量很接近，差異小）；b. 不同個(gè)體對(duì)地高辛反應(yīng)不同；c. 不同制劑的地高辛吸收率存在差異，最大相差兩倍6,7；d. 隨年齡增大洋地黃苷中毒可能性明顯升高。結(jié)合其他臨床信息，血清或血漿地高辛濃度監(jiān)

3、測(cè)可為臨床醫(yī)師提供有用的信息，有助于調(diào)整患者劑量和獲得最佳治療效果，同時(shí)避免藥物劑量過低和藥物劑量過高導(dǎo)致中毒8。Elecsys 地高辛測(cè)定采用競(jìng)爭(zhēng)性檢測(cè)原理，使用的單克隆抗體能特異性作用地高辛。標(biāo)本中地高辛與添加的生物素標(biāo)記的地高辛衍生物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合釕標(biāo)記抗體復(fù)合物的位點(diǎn)a。*Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕檢測(cè)原理競(jìng)爭(zhēng)原理。總測(cè)定時(shí)間：18分鐘第一次孵育：10l標(biāo)本和一份釕復(fù)合物標(biāo)記抗地高辛特異性單克隆抗體一起孵育，反應(yīng)形成復(fù)合體，復(fù)合體量取決于標(biāo)本中反應(yīng)物濃度。第二次孵育：添加生物素標(biāo)記的地高辛衍生物和鏈酶親和素包被

4、的微粒后，釕復(fù)合物標(biāo)記抗體空閑位點(diǎn)結(jié)合抗原，反應(yīng)生成一“抗體半抗原”樣復(fù)合體，并在生物素和鏈酶親和素的相互作用下結(jié)合到固相載體上。將反應(yīng)液吸入檢測(cè)池中，檢測(cè)池中的微粒通過電磁作用吸附在電極表面。未結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell除去。在電極上加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，用光電倍增器檢測(cè)發(fā)光的強(qiáng)度。通過檢測(cè)儀的定標(biāo)曲線得到最后的檢測(cè)結(jié)果，定標(biāo)曲線是通過2點(diǎn)定標(biāo)點(diǎn)和試劑條形碼上獲得的主曲線生成的。試劑工作溶液M 鏈酶親和素包被的微粒（透明瓶蓋）每瓶6.5ml。鏈酶親和素包被的微粒，0.72mg/ml； 結(jié)合力：470ng生物素/mg微粒；防腐劑。R1 抗地高辛特異性抗體（灰色瓶蓋），每瓶10ml

5、：釕復(fù)合物標(biāo)記的單克隆抗地高辛抗體（鼠）：15g/L；磷酸鹽緩沖液：100 mmol/L，PH值7.0；防腐劑。R2 生物素化地高辛衍生物（黑色瓶蓋），每瓶10ml：生物素化地高辛 1.06 ng/L；生物素15g/L；磷酸鹽緩沖液：100 mmol/L，PH值7.0；防腐劑。注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。避免與任何形式的試劑或任何形式的樣本（樣品、定標(biāo)品和質(zhì)控）形成泡沫。試劑處理本試劑盒的任何一種試劑只可與試劑盒的其它試劑聯(lián)合使用，不可單獨(dú)使用?？蓮脑噭l形碼讀取有關(guān)如何正確使用該試劑的所有信息。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性

6、存放于28。請(qǐng)垂直擺放Elecsys 地高辛試劑盒，以確保使用前自動(dòng)混合過程中微粒完全有效。穩(wěn)定性：28（未開封）：有效期內(nèi)均可使用。開封后，28：可存放12周。在MODULAR ANALYTICS E170及cobas e系列分析儀上： 可保存8周。在Elecsy 2010及cobas e 411分析儀上：可保存8周。在Elecsy 1010分析儀上：可保存8周（存放在冰箱內(nèi)或分析儀上，溫度2025）；徹底暴露情況下可保存20小時(shí)。標(biāo)本的采集和準(zhǔn)備地高辛檢測(cè)的樣本須在用藥后68個(gè)小時(shí)內(nèi)收集。9只有按如下方法收集的標(biāo)本才適合用本試劑盒檢測(cè)。血清必須用標(biāo)準(zhǔn)試管收集。內(nèi)有分離膠的試管不適用于治療藥

7、物監(jiān)測(cè)。請(qǐng)注意廠商提供的數(shù)據(jù)。肝素鋰、肝素鈉、肝素胺、草酸鈉、K3-EDTA血漿、檸檬酸鈉。（標(biāo)準(zhǔn)：回收率90110或斜率0.91.1+截距0.95）.穩(wěn)定性： 28C可保存48小時(shí)；在-20C可保存6月，只可凍溶一次。7，8選擇檢測(cè)時(shí)市場(chǎng)上能獲得的標(biāo)本收集試管收集標(biāo)本和檢測(cè)，不是所有能獲得的廠商的試管均可用于檢測(cè)。不同廠商標(biāo)本收集系統(tǒng)可能含有不同材料，某些情況下會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。在使用原始試管處理標(biāo)本時(shí)，應(yīng)遵循試管生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。如標(biāo)本中有沉淀出現(xiàn)，必須先作離心處理再進(jìn)行分析。已經(jīng)加熱失活的標(biāo)本無法分析。使用疊氮化物作為穩(wěn)定劑的標(biāo)本或質(zhì)控液無法分析。檢測(cè)前，請(qǐng)確?；颊邩?biāo)本、定標(biāo)液及質(zhì)控液放

8、置在2025C的環(huán)境中。由于蒸發(fā)因素的影響，標(biāo)本、定標(biāo)液及質(zhì)控液在放入分析儀后請(qǐng)?jiān)?小時(shí)內(nèi)完成測(cè)定。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號(hào)11820907，Elecsys Digoxin CalSet, 4 x 1.5 mL貨號(hào)03530477, Elecsys PreciControl Cardiac, 2 x 2 mL各含 PreciControl Cardiac 1和2貨號(hào)11732277, Elecsys Diluent Universal, 2 x 18 mL樣品稀釋液或貨號(hào)03183971, Elecsys Diluent Universal, 2 x 40

9、mL常規(guī)實(shí)驗(yàn)設(shè)備Elecsys 1010/2010，MODULAR ANALYTICS E170或cobas e系列免疫分析儀 Elecsys 1010/2010及cobas e 411分析儀所需材料: 貨號(hào)11662988122, Elecsys ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)11662970122, Elecsys CleanCell, 6 x 380 mL,檢測(cè)池洗液 貨號(hào)11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液 貨號(hào)11933159001, SysClean 適配器 貨號(hào)11706829001, Elecsys

10、 1010 分析杯, 12 x 32 反應(yīng)管，或貨號(hào)11706802001, Elecsys 2010分析杯,60 x 60反應(yīng)管 貨號(hào)11706799001, Elecsys 2010 分吸吸頭, 30 x 120 移液管吸頭 Modular Analytics E170及cobas e 601免疫分析儀所需材料: 貨號(hào)12135019190, ProCell M, 1 x 2 L 系統(tǒng)緩沖液 貨號(hào)12135027190, CleanCell M, 1 x 2 L 檢測(cè)池洗液貨號(hào)03023141001, PC/CC杯, 50杯用于在測(cè)定前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號(hào)0

11、3005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測(cè)完畢后或更換試劑時(shí)清洗系統(tǒng)。貨號(hào)12102137001,分析杯/分析吸頭 組合裝 M, 48 分析杯x 84 反應(yīng)管或加液器吸頭,廢物袋 貨號(hào)03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號(hào)03027651001, SysClean 適配器 M 三種分析儀均需要的材料: 貨號(hào)11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測(cè)要獲得最佳的測(cè)定結(jié)果，請(qǐng)遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀特定檢測(cè)的操作手冊(cè)。MODULAR ANALYTIC

12、S E170及cobas e 601分析儀：需要PreClean M。在使用前分析儀自動(dòng)使微粒處于懸浮狀態(tài)。通過各試劑條形碼可讀取其詳細(xì)實(shí)驗(yàn)參數(shù)。在少數(shù)情況下，分析儀無法自動(dòng)讀取信息時(shí)，請(qǐng)輸入標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170，Elecsys2010及cobas e系列分析儀：將各試劑降溫至20C左右，放到分析儀的試劑盤（20C）上，避免泡沫產(chǎn)生。分析儀將自動(dòng)調(diào)節(jié)反應(yīng)溫度及各試劑瓶瓶蓋的開關(guān)狀態(tài)。Elecsys 1010分析儀：將各試劑降溫至2025C左右，放到分析儀的試劑盤上（環(huán)境溫度2025C），避免泡沫產(chǎn)生。在測(cè)定過程中需手動(dòng)開關(guān)各試劑瓶的瓶蓋。使用后儲(chǔ)

13、存于28C。定標(biāo)溯源性：本測(cè)定方法已按照參考標(biāo)準(zhǔn)定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化，即將美國(guó)藥典（USP）地高辛參考品加入無分析成分的人血清，。每批Elecsys地高辛試劑都有條形碼標(biāo)記，條形碼含有特定批次試劑對(duì)應(yīng)的特定定標(biāo)信息。預(yù)先定義的主曲線適用于使用Elecsys Digoxin CalSet的分析儀。定校間隔：每批不同試劑須重新進(jìn)行定標(biāo)（例如在試劑盒被分析儀識(shí)別后的24小時(shí)內(nèi)）。除此之外，以下情況必須重新進(jìn)行定標(biāo)：MODULAR ANALYTICS E170,Elecsys 2010及cobas e系列分析儀：同一批號(hào)的試劑盒在分析儀上使用超過1個(gè)月（28天）。同一試劑盒在分析儀上使用超過7天Elecsys

14、1010分析儀：每換一個(gè)試劑盒就要定標(biāo)一次。系統(tǒng)溫度在2025C時(shí)7天定標(biāo)一次。所有分析儀：根據(jù)需要：如質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)超過額定的限度。質(zhì)控Elecsys PreciControl Cardiac,1和2試劑和其它適合的試劑均可作為測(cè)定時(shí)的質(zhì)控液。在測(cè)定時(shí)，對(duì)于不同濃度范圍的標(biāo)本，每24小時(shí)內(nèi)必須進(jìn)行一次質(zhì)控測(cè)試。每次更換試劑盒或進(jìn)行定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控測(cè)試。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室須根據(jù)各自的情況確定合適的質(zhì)控間隔和范圍。測(cè)定值必須處于規(guī)定的范圍內(nèi)。若測(cè)定值不在規(guī)定的范圍內(nèi)，則每個(gè)試驗(yàn)室必須建立相應(yīng)的矯正方法。計(jì)算分析儀自動(dòng)計(jì)算得出每份標(biāo)本的測(cè)定濃度（單位可為nmol/L 或 ng/mL).換算公式nmol/L x

15、 0.78 = ng/mLng/mL x 1.28 = nmol/L干擾因素下列情況不影響測(cè)定結(jié)果：黃疸（膽紅素濃度小于1112 umol/l或65 mg/dL），溶血（血紅蛋白小于0.621mmol/L 或1.0 g/dL），脂血（脂類乳劑小于1500 mg/dL），和生物素（小于409 nmol/L 或100ng/mL）。標(biāo)準(zhǔn)：地高辛濃度小于1.5 ng/mL （1.92 nmol/L）時(shí)，重現(xiàn)性 0.15 ng/mL ；或地高辛濃度大于1.5 ng/mL （1.92nmol/L）時(shí)，重現(xiàn)性10初始值。對(duì)于因某些疾病需要而接受高劑量生物素治療的患者（ 5mg/天），必須在末次生物素治療8小

16、時(shí)后采集標(biāo)本。濃度達(dá)1630IU/ml的風(fēng)濕因子對(duì)測(cè)定無影響。體外對(duì)69種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)有藥物影響檢測(cè)結(jié)果。烏扎拉和萘丁美酮可能會(huì)導(dǎo)致假性地高辛結(jié)果偏高。安體舒通和坎利酮當(dāng)結(jié)果低于3 ng/mL的檢測(cè)范圍內(nèi)，可能會(huì)出現(xiàn)假性結(jié)果偏高。腎衰、肝臟衰竭患者和懷孕晚期婦女血中存在地高辛類似免疫反應(yīng)物質(zhì)（DLIS）。研究發(fā)現(xiàn)使用商業(yè)免疫試劑測(cè)定地高辛?xí)r，標(biāo)本中DLIS會(huì)使地高辛檢測(cè)結(jié)果偏高10,11,12。地高辛免疫FAb（抗體片斷治療）制造商認(rèn)為只能用免疫技術(shù)定量測(cè)定來自這種治療患者血清中的地高辛11。由于檢測(cè)試劑中含有單克隆抗體，因此某些接受單克隆鼠抗體治療或診斷的患者標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果可能有誤。

17、試劑盒附帶有試劑添加劑以減少以上不良影響。少數(shù)病例中極高濃度的鏈霉抗生物素蛋白和釕抗體會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。必須結(jié)合患者病史，各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查及其它臨床資料來綜合評(píng)估測(cè)定結(jié)果。檢測(cè)范圍0.15-5.0 ng/mL 或 0.19-6.4 nmol/L（由系統(tǒng)主曲線的最低限和最高限決定）。地高辛濃度低于檢測(cè)最低限則報(bào)告為0.15ng/mL或 5.0 ng/mL或 6.4 nmol/L,或最多2倍稀釋10.0 ng/mL 或 12.8 nmol/L。稀釋若標(biāo)本中地高辛濃度超過測(cè)定范圍，則可使用Elecsys Diluent Universal稀釋標(biāo)本。推薦的稀釋倍數(shù)是1：2（MODULAR ANALYTIC

18、S E170，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析儀自動(dòng)或手動(dòng)稀釋）。稀釋標(biāo)本的濃度必須大于2.5ng/mL 或3.2 nmol/L。手動(dòng)稀釋后，則結(jié)果需乘以稀釋倍數(shù)。使用分析儀自動(dòng)稀釋，則MODULAR ANALYTICS E170，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析儀計(jì)算標(biāo)本濃度時(shí)會(huì)自動(dòng)考慮稀釋因素。參考范圍地高辛一般治療范圍是0.9-2.0 ng/ml(1.2-2.6 nmol/l)。濃度大于2.0 ng/ml(2.6 nmol/l)通常被認(rèn)為中毒14。也有報(bào)道認(rèn)為中毒和非中毒值范圍有重疊3。因此，臨床診斷必須根據(jù)臨床和實(shí)驗(yàn)室結(jié)果。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室

19、必須調(diào)查各自患者群體的參考范圍變異性，必要時(shí)根據(jù)具體情況制訂自己的參考范圍。特殊性能指標(biāo)分析儀的代表性試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。各實(shí)驗(yàn)室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度根據(jù)NCCLS（全國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化操作委員會(huì)）制訂的改良試驗(yàn)計(jì)劃(EP5-A)，應(yīng)用Elecsys試劑盒、人血液標(biāo)本和質(zhì)控液驗(yàn)證Elecsys 地高辛試劑盒檢測(cè)重復(fù)性。每日測(cè)6 次共10 日（n60）；在E170 分析儀上的批內(nèi)精密度（n21），得結(jié)果如下：分析靈敏度（最低濃度檢測(cè)限）0.15 ng/mL (0.19 nmol/L)檢測(cè)限制定義為可以區(qū)別零濃度定標(biāo)液的最低可測(cè)濃度值，計(jì)算公式為定標(biāo)液最小濃度2SD（標(biāo)準(zhǔn)差）（系統(tǒng)定標(biāo)，定標(biāo)液最小濃度2SD，組間精密度范圍之內(nèi)，標(biāo)本數(shù)21）。方法學(xué)比較將Elecsys Digoxin試劑按照USP參考品（y）和Elecsys Digoxin試劑舊版本（x）進(jìn)行比較，檢測(cè)相