羅氏試劑盒說明書 TSH 11810430001V17

1、1181043001V17促甲狀腺激素（Thyroid-stimulating hormone，TSH） Elecsys 和 cobas e 分析儀 4/4 2009-04, V 17 11731459 122 200測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于體外定量檢測人體血清或血漿中的TSH。Elecsys和cobas e 免疫分析儀的工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫分析“ECLIA”。臨床應(yīng)用促甲狀腺激素（TSH，thyrotropin）是一種分子量為30kD的糖蛋白

2、，由二種亞單位組成。亞基具有TSH特異的免疫原性和生物學(xué)信息；亞基具有種族特異性，并且與LH、FSH和hCG的亞基的氨基酸序列一致。TSH由垂體前葉特異性嗜堿細胞生成并呈晝夜節(jié)律性分泌。垂體釋放的TSH能中樞性的調(diào)節(jié)甲狀腺激素的生物活性。TSH能刺激各期的甲狀腺激素的生成和分泌，并有增殖效應(yīng)。1，2TSH檢測是甲狀腺功能診斷的首選指標。細微的游離甲狀腺素的濃度變化就會引起TSH濃度的負反饋顯著性變化。因此，TSH是評估甲狀腺功能的非常敏感且特異的指標，特別適合于早期診斷或排除下丘腦、垂體對甲狀腺進行中樞性調(diào)節(jié)的功能紊亂性疾病。3，4，5，6Elecsys TSH檢測應(yīng)用特異性的抗人TSH單克隆

3、抗體。其中釕標記的抗體復(fù)合物具有人和特異性鼠成份的嵌合性結(jié)構(gòu)，因此可極大程度地消除HAMA（人抗鼠抗體）對檢測的干擾。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕檢測原理雙抗體夾心法，總檢測時間：18分鐘第一次孵育：50l標本、生物素化的TSH單克隆特異性抗體和釕（Ru）a標記的TSH特異性單克隆抗體一起孵育，形成抗原抗體夾心復(fù)合物。第二次孵育：添加包被鏈霉素的磁珠微粒進行孵育，復(fù)合體與磁珠通過生物素和鏈霉素的作用結(jié)合。將反應(yīng)液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加

4、以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強度。儀器自動通過2點校正的定標曲線計算得到檢測結(jié)果。試劑工作溶液M包被鏈霉素的磁珠微粒（透明瓶蓋），每瓶12ml；包被鏈霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑。R1 生物素化的抗TSH單克隆抗體（灰蓋），每瓶，14ml；生物素化的單克隆抗TSH抗體（鼠），濃度2.0mg/L，磷酸緩沖液100mmol/L，pH 7.2；防腐劑。R2 Ru(bpy)32+標記的抗TSH單克隆抗體（黑蓋），每瓶，12ml，釕標記的單克隆抗TSH抗體（鼠/人）復(fù)合物，濃度1.2mg/L，磷酸緩沖液100mmol/l，pH7.2；防腐劑。警告和注意事項僅用于

5、體外診斷。在使用本試劑盒時必需遵循所有試驗室試劑操作的注意事項。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報告。避免試劑和樣本（樣本、定標液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒（M,R1和R2）為即用型，不能分開使用。試劑相關(guān)信息可以通過試劑條形碼閱讀獲取。儲存及穩(wěn)定性存放于28。請垂直擺放Elecsys TSH試劑盒，確保儀器的自動攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開封試劑，2812周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上6周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置

6、分析儀Elecsys 1010上8周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)開蓋的情況下至多20小時）樣本的采集和準備僅以下羅列的樣本類型通過測試并符合檢測要求。血清樣本須用標準試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、鈉、銨，K3-EDTA，枸櫞酸鈉，氟化鈉/草酸鉀抗凝的血漿都適用。標準：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。穩(wěn)定性： 2-8可保存7天；-20可保存1個月，一次凍融。選擇合適的試管進行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會影響檢測結(jié)果。如果使用原始管進行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所

7、提供的指導(dǎo)。有沉淀和冰凍的樣本檢測前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品均不能使用。檢測前，樣本、定標液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25)。由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測必須2小時內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號04738551190, TSH CalSet, 規(guī)格4 x1.3 ml貨號11776479122, PreciControl TSH，規(guī)格4 x2 ml貨號11731416122, PreciControl Universal，規(guī)格2 x3 ml，分別為PreciControl Univers

8、al 1和2或貨號11731416190, PreciControl Universal，規(guī)格2 x3 ml，分別為PreciControl Universal 1和2貨號03609987190，Diluent MultiAssay，規(guī)格2 x16 ml，樣本稀釋液實驗室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號11662970122, CleanCell, 6 x

9、380 mL,測量池洗液 貨號11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號11933159001, SysClean 適配器 貨號11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應(yīng)管或者貨號11706802001, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反應(yīng)管貨號11706799001, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120 移液管吸頭 MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號04880340190,ProCell M, 2 x 2 L

10、系統(tǒng)緩沖液貨號04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L測量池洗液 貨號03023141001, PC/CC杯, 12個用于在檢測前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑時清洗試劑針。貨號12102137001,反應(yīng)杯/吸頭 組合裝,84反應(yīng)杯/吸頭 組合裝48盒,廢物袋 貨號03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號03027651001,系統(tǒng)清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號11298500316, Elecsys SysClea

11、n, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測要優(yōu)化檢測性能，請遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊。試劑使用前分析儀自動攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動讀取條碼信息時，請輸入條碼標簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動調(diào)節(jié)試劑溫度和開、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤（20-

12、 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前后手動開關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。定標溯源性：該檢測可溯源至2nd IRP WHO參考標準 80/558。每套Elecsys TSH試劑的條碼標簽上均含有其批號特異的定標信息。使用Elecsys TSH 定標液可調(diào)整定標曲線。定校頻率：新批號試劑必須進行定標（新試劑盒在分析儀上放置不能超過24小時）。以下情況建議重新進行定標：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析儀:使用同一批號試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010 分析儀:每盒試劑7天后（室溫

13、20-25C）3天后（室溫 25-32C）所有儀器根據(jù)需要：如失控。質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl Universal 1和2，Elecsys PreciControl TSH。也可以使用其他合適的質(zhì)控品。各濃度質(zhì)控至少每24小時內(nèi)檢測一次，每次更換試劑盒或定標后也須進行質(zhì)控。每個實驗室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個試驗室必須采取相應(yīng)的糾正措施。計算儀器會自動計算每個樣本中的分析物濃度，單位是uIU/mL或mIU/L。干擾因素檢測結(jié)果不受黃疸（膽紅素701mol/L或41 mg/dL）, 溶血（血紅蛋白0.621

14、mmol/L或 1g/dL）, 脂血(脂肪乳劑 1500mg/dL)和生物素102 nmol/L或 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時后采集樣本。濃度高達3250 IU/ml的類風(fēng)濕因子和血液透析樣本均對檢測無影響。濃度高達1000 uIU/mL的TSH不會產(chǎn)生HOOK效應(yīng)的影響。體外對26種常用藥物進行試驗未發(fā)現(xiàn)會影響檢測結(jié)果。少數(shù)病例中極高濃度的HAMA、鏈霉素抗體釕抗體會影響檢測結(jié)果。通過適宜性的實驗設(shè)計可將影響因素降到最低。試劑含有的添加成份減少了上述因素的影響。作為診斷指標，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評估檢測結(jié)果。檢測范圍0.005-100.0 uIU/mL

15、（通過最低檢出限和廠商定標曲線的最高值確定）。功能靈敏度為0.014 uIU/mL。6低于檢出限的值報告100 uIU/mL。（或10倍稀釋后1000 uIU/mL）稀釋高于檢測范圍的標本可用Elecsys Diluent MultiAssay稀釋。建議1:10稀釋（MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 1010/2010 和cobas e 分析儀可以自動稀釋，也可以手工稀釋）。稀釋的標本AFP濃度必須高于10 uIU/mL。如用手工稀釋，結(jié)果應(yīng)乘稀釋倍數(shù)。如果是機器自動稀釋，機器會自動計算結(jié)果。期望值0.27-4.2 uIU/mL該期望值通過檢測516健康個體的TS

16、H，取2.5th和97.5th的百分位點值獲得。如果需要獲取兒童、青春期和妊娠婦女的參考區(qū)間信息可參見名為兒童和成人參考區(qū)間的小冊子，貨號：04640292（英語）；04625889（德語）。該手冊還包含了參考人群組的甲狀腺參數(shù)影響因素的研究結(jié)果。參照NACB導(dǎo)則的入選及排除規(guī)則也羅列在內(nèi)（如：甲狀腺超聲檢測的量和密度）。每個實驗室應(yīng)通過實驗確定參考范圍的適用性，必要時建立本實驗室的參考范圍。特殊的性能指標試劑在分析儀上的性能試驗數(shù)據(jù)如下。各實驗室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人混合血清/血漿樣本和質(zhì)控品驗證重復(fù)性，按照CLSI的EP5-A執(zhí)行：

17、每天6次，共10天 (n=60)。批內(nèi)精密度由 MODULAR ANALYTICS E170分析儀完成，n=21下面是獲得的結(jié)果。分析靈敏度（最低檢出限） 0.005 uIU/mL最低檢出限是最低濃度標準品+2SD得到的濃度（廠商定標品1+2SD，批內(nèi)精密度，n=21）。方法學(xué)比較使用臨床標本比較Elecsys TSH檢測和酶免 TSH 檢測，相關(guān)性數(shù)據(jù)如下（pmol/L）：標本數(shù)n=109Passing/Bablok8 線性回歸y = 1.01x + 0.01 y = 0.98x + 0.04r = 0.944 r = 0.993比較樣品濃度約為0.19 uIU/mL。分析特異性抗體交叉反應(yīng)

18、如下：LH 0.038；FSH 0.008；hGH和HCG無交叉反應(yīng)。參考文獻1. Wheeler MH, Lazarus JH. Diseases of the Thyroid. London, Glascow, Weinheim, New York, Tokyo, Melbourne, Madras: Chapman and Hall Medical, 1994:109-115.2. Pfannenstiel P, Saller B. Schilddrsenkrankheiten Diagnose und Therapie. Berliner Medizinische Verlagsans

19、talt GmbH 1995;2:43-54.3. Surks MI, Chopra IJ, Mariash CN, Nicoloff JT, Solomon DH. American Thyroid Association Guidelines for the Use of Laboratory Tests in Thyroid Disorders. JAMA 1990;263:1529-1532.4. Keffer JH. Preanalytical Considerations in Testing Thyroid Function. Clinical Chemistry 1996;42:1,125-135.5. Ladenson PW. Optimal laboratory testing for diagnosis and monitoring of thyroid nodules, goiter an