羅氏試劑盒說明書 DHEA-S 12175690001-en-t

1、硫酸脫氫表雄酮Dehydroepiandrosterone sulfate12175690001V14硫酸脫氫表雄酮Dehydroepiandrosterone sulfate Elecsys 和 cobas e 分析儀 4/5 2008-05, V 14中文2009-05, V 14中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析儀03000087 122 100測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用免疫學(xué)方法定量測定人血清或血漿中硫酸脫氫表雄酮（DHEA

2、-S）含量。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys和cobas e免疫測定分析儀。臨床應(yīng)用DHEA-S（硫酸脫氫雄甾酮）是一種由腎上腺皮質(zhì)網(wǎng)狀帶和闊筋膜內(nèi)的膽固醇前體物質(zhì)產(chǎn)生的類固醇類激素。1檢測DHEA-S值升高有助于診斷婦女多毛癥和女性男性化。2，3除了對(duì)婦女多毛癥和女子男性化進(jìn)行鑒別診斷，該檢測值還可用于診斷各種雄性化，高催乳素血癥，多囊卵巢綜合癥和排除腎上腺皮質(zhì)產(chǎn)生雄激素的腫瘤。2DHEA-S僅表現(xiàn)出微弱的雄激素活性，但其代謝產(chǎn)物，例如雄烯二酮和睪丸酮的雄激素活性較強(qiáng)，能間接引起婦女多毛癥和女子男性化。2,4從七歲起，可檢測到DHEA-S值逐步升高，在三十歲之后又逐步下降。5

3、僅DHEA-S的單純升高具有臨床意義；其它導(dǎo)致DHEA-S過度產(chǎn)生的因素包括遺傳性腎上腺皮質(zhì)酶缺陷（腎上腺性腺綜合癥），6腎上腺皮質(zhì)增生和產(chǎn)生雄激素的腫瘤。2DHEA-S分泌入血的速率僅僅比DHEA略快。但由于DHEA-S的半衰期約為一天，DHEA-S的濃度比DHEA要高約一千倍。7DHEA-S相對(duì)更容易與白蛋白結(jié)合，僅有一小部分不與蛋白質(zhì)結(jié)合，且不會(huì)與性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）結(jié)合。8由于它的高濃度以及在日內(nèi)和日間變異性小的特點(diǎn)，DHEA-S是腎上腺皮質(zhì)激素診斷相關(guān)疾病的良好指標(biāo)。7,9結(jié)合睪丸酮測定DHEA-S是了解婦女多毛癥患者雄激素水平是否提高的初篩試驗(yàn)中值得選擇的方法。大約84%的

4、婦女多毛癥患者中的雄激素水平升高。10該檢測的主要目的是排除產(chǎn)生雄激素的腫瘤（來自腎上腺皮質(zhì)或卵巢）。患腫瘤的婦女中DHEA-S的含量超過700ug/dL。6Elecsys DHEA-S檢測采用競爭檢測原則，使用了特異性抗DHEA-S的多克隆抗體（兔）。樣本中內(nèi)源性DHEA-S與釕標(biāo)記的DHEA-S衍生物一起競爭生物酰化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕檢測原理雙抗體夾心法，總檢測時(shí)間：18分鐘第一次孵育：15l標(biāo)本、生物素化的DHEA-S特異性抗體一起反應(yīng)生成一種免疫復(fù)合物，該復(fù)合物的量取決于樣本

5、中分析物的濃度。第二次孵育：添加包被鏈霉親和素的磁珠微粒和釕標(biāo)記的DHEA-S衍生物后，隨著抗體半抗原復(fù)合物的形成，生物素化抗體的空白位點(diǎn)被占據(jù)。該復(fù)合物通過生物素和鏈霉素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。將反應(yīng)液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強(qiáng)度。儀器自動(dòng)通過2點(diǎn)校正的定標(biāo)曲線計(jì)算得到檢測結(jié)果。試劑工作溶液M包被鏈霉親和素的磁珠微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml；包被鏈霉親和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑。R1 生物素化的抗DHEA-S抗體（灰蓋），1瓶，9mL：生物

6、素化抗DHEA-S多克隆抗體（兔）600ng/L；磷酸鹽緩沖液100mmol/L，pH 值6.8；防腐劑。R2 Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗DHEA-S抗體（黑蓋），1瓶，9mL；釕標(biāo)記的DHEA-S衍生物（合成）0.5ng/mL；磷酸鹽緩沖液100mmol/L，pH值6.8；防腐劑。警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報(bào)告。避免試劑和樣本（樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒（M、R1和R2）為即用型，不能分開使用。試劑相關(guān)信息可以通過試劑條形碼閱讀獲取。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于

7、28請(qǐng)垂直擺放Elecsys DHEA-S試劑盒，確保使用前儀器通過自動(dòng)攪拌能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開封試劑，2812周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 6018周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析儀Elecsys 2010上4周（交替儲(chǔ)存在冷藏室和分析儀上室溫20-25樣本的采集和準(zhǔn)備僅以下羅列的樣本通過檢測要求。血清樣本須用標(biāo)準(zhǔn)試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、肝素鈉、肝素銨、K3-EDTA、枸櫞酸鈉、草酸鉀和氟化鈉抗凝的血漿都適用。標(biāo)準(zhǔn)：回收率在血清值的90-110%以

8、內(nèi)或斜率0.9-1.1截距0.95。穩(wěn)定性：2-8保存2天，-20保存2個(gè)月。樣本只能冰凍選擇合適的試管進(jìn)行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會(huì)影響檢測結(jié)果。如果使用原始管進(jìn)行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀的樣本和冰凍樣本檢測前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。避免使用添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品。檢測前，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測必須2小時(shí)內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號(hào)03000095

9、122，DHEA-S定標(biāo)液，41mL貨號(hào)11731416122，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分別為23mL，或貨號(hào)11731416190，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分別為23mL貨號(hào)11731416160，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分別為23mL（美國專用）實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsy

10、s 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號(hào)11662988122，ProCell，6380 mL，系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)11662970122，CleanCell，6380mL，測量池洗液 貨號(hào)11930346122，Elecsys SysWash，1500mL，附加洗液貨號(hào)11933159001，SysClean適配器貨號(hào)11706829001，Elecsys 1010分析杯，1232反應(yīng)管或貨號(hào)11706802001，Elecsys 2010分析杯，6060反應(yīng)管貨號(hào)11706799001，Elecsys 2010分析吸頭，30120移液管吸頭MODULAR ANALYTI

11、CS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號(hào)04880340190，ProCell M，22L貨號(hào)04880293190，CleanCell M，22L貨號(hào)12135027190，CleanCell M，12L貨號(hào)03023141001，PC/CC杯，12個(gè)用于在檢測前預(yù)熱Procell M及Cleancell M貨號(hào)03005712190，ProbeWash M，1270mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑時(shí)清洗試劑針貨號(hào)12102137001，反應(yīng)杯/吸頭組合裝84反應(yīng)杯/吸頭組合裝48盒，廢物袋 貨號(hào)03023150001，WasteLiner，廢物袋 貨號(hào)030276

12、51001，系統(tǒng)清潔適配器M所有分析儀需要：貨號(hào)11298500316，Elecsys SysClean，5100mL系統(tǒng)清洗液美國專用：貨號(hào)03004970122，Elecsys DHEA-S CalCheck，3種濃度范圍檢測要優(yōu)化檢測性能，請(qǐng)遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊(cè)。MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀：必須使用PreClean M溶液。試劑使用前分析儀自動(dòng)攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動(dòng)讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動(dòng)讀取條碼信息時(shí)，請(qǐng)輸入條碼標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR AN

13、ALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動(dòng)調(diào)節(jié)試劑溫度和開、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的樣本盤/試劑盤（室溫20-25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前手工打開瓶蓋，使用后手工關(guān)上瓶蓋。使用后儲(chǔ)存在2定標(biāo)溯源性：通過使用比重測定法生產(chǎn)的廠商定標(biāo)液（在去除特異組分的人血清基質(zhì)中含確定濃度的DHEA-S）進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。每個(gè)Elecsys DHEA-S試劑組都有一張條形碼編碼的標(biāo)簽，其中含有定標(biāo)各個(gè)試劑批次的專用信息。通

14、過使用Elecsys DHEA-S定標(biāo)液，預(yù)定義的廠商定標(biāo)曲線適用于分析儀。定校頻率：新鮮試劑必須進(jìn)行定標(biāo)（新試劑盒注冊(cè)后在分析儀上放置不能超過24小時(shí)）。以下情況建議重新進(jìn)行定標(biāo)：MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析儀：使用同一批號(hào)試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010分析儀：使用每個(gè)試劑盒7天后（室溫20-253天后（室溫20-32所有分析儀：根據(jù)需要：如失控。質(zhì)控質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl Universal 1和2。多個(gè)濃度范圍的質(zhì)控品至少每24小時(shí)內(nèi)檢測一次，每次更

15、換試劑盒或定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個(gè)試驗(yàn)室必須采取相應(yīng)的糾正措施。質(zhì)控應(yīng)遵循地方規(guī)則和當(dāng)?shù)刂敢?。?jì)算分析儀自動(dòng)計(jì)算每份樣本的分析物濃度（以mol/L、g/dL或g/mL為單位）。轉(zhuǎn)換因子：mol/L36.846g/dL g/dL0.02714mol/L g/dL0.01g/mL干擾因素本測定法不受黃疸（膽紅素222mol/L或13mg/dL）、溶血（血紅蛋白0.35mmol/L或0.56g/dL）、脂血（脂肪乳劑Intralipid2000mg/dL）和生物素5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集樣

16、本。濃度為600 IU/ml的類風(fēng)濕因子對(duì)檢測無影響。體外對(duì)17種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)，未發(fā)現(xiàn)會(huì)影響檢測結(jié)果。少數(shù)病例中極高濃度分析物特異性抗體，鏈霉素抗體和釕抗體會(huì)影響檢測結(jié)果。適合的試驗(yàn)設(shè)計(jì)可將影響因素降到最低。作為診斷指標(biāo)，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評(píng)估檢測結(jié)果。檢測范圍0.003-27mol/L或0.100-1000g/dL（通過最低檢出限和廠商定標(biāo)曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報(bào)告0.003mol/L或27mol/L或1000g/dL(1：5稀釋結(jié)果可報(bào)告至135mol/L或5000g/dL)。線性范圍：1.09-27mol/L或40-1000g/dL稀釋高于檢測

17、范圍的標(biāo)本可用分析物含量較低的人樣本稀釋。建議1：5稀釋。稀釋標(biāo)本的DHEA-S濃度必須高于 1.5mol/L（45g/dL）。如果內(nèi)源性DHEA-S濃度可忽略，結(jié)果應(yīng)乘稀釋倍數(shù)或使用以下方程進(jìn)行計(jì)算。Cc4（cD）C樣本中正確的DHEA-S濃度c檢測的DHEA-S濃度D稀釋樣本（人樣本）中DHEA-S濃度期望值使用Elecsys DHEA-S檢測的擴(kuò)展研究在德國的兩個(gè)臨床中心進(jìn)行，研究納入總共519份來自女性個(gè)體的樣本、489份來自男性個(gè)體的樣本和269份來自兒童的樣本，得出各年齡組的參考范圍如下（研究協(xié)議編號(hào)：C00P032和P01P005狀態(tài)05/01至11/01）：*檢驗(yàn)了絕經(jīng)對(duì)相應(yīng)年

18、齡組女性樣本結(jié)果的影響，發(fā)現(xiàn)該效應(yīng)可忽略不計(jì)。由于母體激素可透過胎盤屏障，新生兒的DHEA-S值很大程度上受母體激素的影響。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)確定參考范圍的適用性，必要時(shí)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。特殊的性能指標(biāo)試劑在各分析儀上的性能試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。各實(shí)驗(yàn)室得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度NCCLS（國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)）的改良協(xié)議（EP5-A）應(yīng)用Elecsys試劑盒、人血清樣本和質(zhì)控品驗(yàn)證重復(fù)性：每日6次，共10天（n=60）；MODULAR ANALYTICS E170分析儀上驗(yàn)證批內(nèi)精密度：n21。下面是獲得的結(jié)果。b）HS人血清c）PC UPreciControl Universal

19、分析靈敏度（最低檢出限）0.003mol/L（0.10g/dL）最低檢出限指區(qū)別于零濃度的分析物最低檢測濃度。最低檢出限是最低濃度標(biāo)準(zhǔn)品+2SD得到的濃度（廠商定標(biāo)品1+2SD，批內(nèi)精密度，n=21）。方法學(xué)比較使用臨床標(biāo)本比較Elecsys DHEA-S檢測（y）和市面上有售的Elecsys DHEA-S檢測（x），相關(guān)性數(shù)據(jù)如下（g/dL）：標(biāo)本數(shù)：603Passing/Bablok12 線性回歸y1.06x4.78 y0.94x14.0r0.865 r0.952樣品濃度約為0.33至19.8mol/L（12至730g/dL）。分析特異性對(duì)于使用的抗體衍生物，發(fā)現(xiàn)以下交叉反應(yīng)性（）：a）加

20、入的底物，每1000g/dL：雄烯二酮 0.399DHEA 0.178b) 加入的底物，每2000g/dL：雄甾酮 0.033睪酮 0.033c) 加入的底物，每5000g/dL：醛固酮 0.008葡糖苷酸鹽雄酮 0.014硫酸雄酮 0.137葡糖苷酸鹽DHEA 0.020雌二醇 0.005雌二醇-3-硫酸酯-17-葡糖苷酸鹽 0.009雌三醇 0.006雌酮 0.012雌酮-3-硫酸酯 0.136黃體酮 0.0345-雙氫睪酮 0.02819-羥雄烯二酮 0.018d) 加入的底物，每10000g/dL:可的松 0.004參考文獻(xiàn)1. Bindlingmaier F. Nebennieren

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