無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友

無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心葛均友無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第1頁123|42

|Cont

tents培養(yǎng)基灌裝相關(guān)法規(guī)要求怎樣設(shè)計(jì)培養(yǎng)基灌裝方案

培養(yǎng)基灌裝評(píng)價(jià)與調(diào)查常見問題及FDA

483缺點(diǎn)

國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第2頁3

|

無菌藥品基本理念無菌藥品生產(chǎn)須滿足其質(zhì)量和預(yù)定用途要求，應(yīng)最大限度降低微生物、各種微粒和熱原污染。生產(chǎn)人員技能、所接收培訓(xùn)及其工作態(tài)度是到達(dá)上述目標(biāo)關(guān)鍵原因無菌藥品生產(chǎn)必須嚴(yán)格按照精心設(shè)計(jì)并經(jīng)驗(yàn)證方法及規(guī)程進(jìn)行

|處理或成品檢驗(yàn)。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第3頁空調(diào)系統(tǒng)資質(zhì)職責(zé)公用設(shè)施人員操作生產(chǎn)設(shè)備環(huán)境監(jiān)控容器密封質(zhì)量確保|

質(zhì)量控制質(zhì)量受權(quán)人

過程控制4

|無菌特征組成清潔消毒

質(zhì)量確保更衣確認(rèn)

人員衛(wèi)生

文件體系物料質(zhì)量

無菌藥品風(fēng)險(xiǎn)分析為基礎(chǔ)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第4頁5

|

培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)---使用培養(yǎng)基作為藥品替換品（Placebo）進(jìn)行無菌模擬生產(chǎn)，對(duì)無菌工藝進(jìn)行驗(yàn)證。

–

培養(yǎng)基灌裝在某種意義上是一個(gè)挑戰(zhàn)性試驗(yàn)，因?yàn)閹缀踉?/p>

全部情況下，微生物在培養(yǎng)基中繁殖和生長要比在實(shí)際

產(chǎn)品中更輕易全方面反應(yīng)整個(gè)生產(chǎn)過程采取無菌工藝生產(chǎn)無菌產(chǎn)品能力。

|各國藥品法規(guī)要求基本內(nèi)容。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第5頁6

|培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)

相關(guān)法規(guī)要求

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第6頁7

||

ng

US

FDA和EU

GMP要求

FDA

CGMP

無菌工藝藥品指南An

aseptic

processing

operatio

on

should

be

validated

using

a

microbiological

growth

mediu

um

in

place

of

the

product.

This

process

simulati

ion,

also

known

as

a

media

fill.

EU

GMP

Annex1

無菌藥品生產(chǎn)Validation

of

aseptic

processin

should

include

a

process

simulation

test

using

a

nutrient

t

medium

(media

fill).國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第7頁8

| GMP附錄一：無菌制劑第四十七條無菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證應(yīng)包含培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。 應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品劑型以及培養(yǎng)基選擇性、澄清度、濃度和滅菌適用性選擇培養(yǎng)基。應(yīng)盡可能模擬常規(guī)無菌生產(chǎn)工藝，包含全部對(duì)產(chǎn)品無菌特征有影響關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)各種干預(yù)和最差條件。 培養(yǎng)基模擬灌|裝試驗(yàn)首次驗(yàn)證，每班次應(yīng)連續(xù)進(jìn)行3次合格試驗(yàn)?？諝鈨艋到y(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)通常應(yīng)按生產(chǎn)工藝每班次六個(gè)月進(jìn)行1次，每次最少一批。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第8頁9

| GMP附錄一：無菌制劑 培養(yǎng)基灌裝容器數(shù)量應(yīng)足以確保評(píng)價(jià)有效性。批量較小產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量應(yīng)最少等于產(chǎn)品批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)是零污染，應(yīng)遵照以下要求： （1）灌裝數(shù)量少于5000支時(shí)，不得檢出污染品； （2）灌裝數(shù)量在5000至10000支時(shí)： 有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗(yàn)； 有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。 （3)灌裝數(shù)量超出10000支時(shí)： | 有1支污染，需調(diào)查； 有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。 （4）發(fā)生任何微生物污染時(shí)，均應(yīng)進(jìn)行調(diào)查。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第9頁批量（瓶）3000允許染菌數(shù)量（瓶）010

|

注冊(cè)申報(bào)要求SFDA

化學(xué)藥品注射劑基本技術(shù)要求（）

…

培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證是對(duì)設(shè)備、環(huán)境以及人員操作一個(gè)系統(tǒng)驗(yàn)證,是判斷無菌確保水平關(guān)鍵伎倆…工藝驗(yàn)證工作主要為培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證試驗(yàn)。灌裝批數(shù)、批量與合格標(biāo)準(zhǔn)見表1。

|4750

63007760≤1≤2≤3國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第10頁fofo

|11

|

相關(guān)指南文件PDA

關(guān)于培養(yǎng)基模擬灌裝技術(shù)匯報(bào)

–

PDA

Technical

Repo

ort

No.

28,

Process

Simulation

Testing

or

Sterile

Bulk

Pharmaceutical

Chem

micals,

Revised

Supplement

–

PDA

Technical

Repo

ort

No.22

1996,

Process

Simulation

Testing

or

Aseptically

Filled

Products

）國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第11頁12

|培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)

試驗(yàn)設(shè)計(jì)

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第12頁13

|

1、試驗(yàn)涵蓋范圍模擬必須包含產(chǎn)品成為無菌狀態(tài)后全部無菌生產(chǎn)工藝步驟(如轉(zhuǎn)運(yùn),

灌裝,

裝載/卸載,

凍干,

加塞,

軋蓋)

模擬必須包含全部無菌處理(如灌裝線設(shè)置,

無菌連接,人員干擾操作)

培養(yǎng)基灌裝研究不包含非無菌混合操作或產(chǎn)品除菌工藝(如無菌過濾)

培養(yǎng)基制備和滅菌能夠與產(chǎn)品

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第13頁14

|

2、多產(chǎn)品簡(jiǎn)化試驗(yàn)思緒一條灌裝線生產(chǎn)多個(gè)產(chǎn)品時(shí)，

依據(jù)以下原因可被劃分為不同類型組

灌裝工藝

不一樣容器、密封方式由此選出兩個(gè)或更多個(gè)在以下方面能涵蓋全部其它相關(guān)產(chǎn)品產(chǎn)品：

容器大小、開放或密封設(shè)計(jì)

灌裝線速度和干預(yù)

|

凍干,

貯存容器形式、轉(zhuǎn)移方式推薦使用類似于矩陣式試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇產(chǎn)品和工藝國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第14頁15

|

模擬灌裝試驗(yàn)設(shè)計(jì)包裝容器代表性選擇：

–

對(duì)于多規(guī)格、容器形狀不一樣灌裝生產(chǎn)線，應(yīng)對(duì)不一樣大

小、形狀容器進(jìn)行評(píng)定。

–

多數(shù)可能選取最大敞口直徑容器和最低生產(chǎn)線速度；

–

有時(shí)也會(huì)選擇輕易倒落小型容器用來代表最差情況，

因可能需要更多人工干預(yù)；

–

當(dāng)不能兼顧

|

時(shí)，應(yīng)考慮選取有代表性幾個(gè)容器進(jìn)行培

養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第15頁材質(zhì)與安裝質(zhì)量16

|

3、驗(yàn)證與確認(rèn)穩(wěn)定產(chǎn)品質(zhì)量性能確認(rèn)及工藝驗(yàn)證（PQ/PV）可靠設(shè)備性能

運(yùn)行確認(rèn)（OQ）安裝確認(rèn)（IQ）

|用戶需求與設(shè)計(jì)

設(shè)計(jì)確認(rèn)（DQ）國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第16頁17

|

驗(yàn)證開始前準(zhǔn)備工作設(shè)備設(shè)施確認(rèn)

HVAC及壓空系統(tǒng)（或氮?dú)猓┐_實(shí)認(rèn)

設(shè)備在線清洗和滅菌CIP

P,SIP滅菌工藝驗(yàn)證

濕熱、干熱滅菌工藝

除菌過濾驗(yàn)證及空氣過濾器完整性檢測(cè)

容器/膠塞密封完好性測(cè)試人員培訓(xùn)

|

無菌更衣確認(rèn)環(huán)境監(jiān)控符合要求國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第17頁18

|

4、模擬灌裝試驗(yàn)設(shè)計(jì)最差情況：高于或低于正常范圍條件程度，與正常生產(chǎn)條件相比最有可能造成工藝或生產(chǎn)失敗條件。宜盡可能模擬實(shí)際無菌生產(chǎn)過程，并包含產(chǎn)品加工中“最差情況”。其設(shè)計(jì)應(yīng)含有以下幾方面代表性：

–

時(shí)間代表性

|

–

運(yùn)行代表性

–

包裝容器代表性國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第18頁19

|

模擬灌裝試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)間代表性：

–

應(yīng)選擇正常工作階段不一樣時(shí)間間隔，并考慮可能

中止、換班。培養(yǎng)基灌裝應(yīng)連續(xù)足夠長時(shí)間，覆

蓋允許工藝時(shí)間程度，并包含實(shí)際加工中最常發(fā)生

操作。操作代表性：

–

依據(jù)實(shí)際生產(chǎn)中可能發(fā)生動(dòng)作或操作來設(shè)計(jì)培養(yǎng)基

|

中發(fā)生、允許和禁止干預(yù)事件一覽表，并在試

驗(yàn)中進(jìn)行模擬。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第19頁20

|

模擬灌裝試驗(yàn)設(shè)計(jì)運(yùn)行代表性：應(yīng)模擬包含“最差情況”生產(chǎn)條件下進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝。（如：最大干預(yù)次數(shù)、模擬加卸料、可能生產(chǎn)線停機(jī)糾正、灌裝針/管調(diào)整和更換、人工軋蓋、在線過濾器更換以及所用人員數(shù)量等）

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第20頁|21

|

最差條件設(shè)計(jì)（1）儲(chǔ)存時(shí)間驗(yàn)證灌裝設(shè)備、部件、儲(chǔ)罐、無菌物料、藥液在實(shí)際灌封前能夠放置最長時(shí)間

–

1.

灌封設(shè)備、灌封部件、儲(chǔ)罐、無菌物料需要再滅菌（除菌

）時(shí)間間隔

?

用超出單項(xiàng)驗(yàn)證后確定最長保留時(shí)間設(shè)備部件、儲(chǔ)

罐、無菌物料參加培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)

–

2.

產(chǎn)品從無菌過濾到灌封加塞完成所需要時(shí)間

?

無菌過濾后存放在中間儲(chǔ)罐內(nèi)培養(yǎng)基模擬實(shí)際生產(chǎn)時(shí)產(chǎn)

品最大儲(chǔ)存時(shí)間后再灌封產(chǎn)品在灌裝后密封前儲(chǔ)存時(shí)間國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第21頁22

|

最差條件設(shè)計(jì)（2）最長灌裝連續(xù)時(shí)間最保守設(shè)計(jì)：在培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)中，模擬生產(chǎn)用時(shí)最長批量所需要時(shí)間，其中包含正常干擾時(shí)間（換班、設(shè)備維修）。（普通不采?。┢渌O(shè)計(jì)：1

1.在生產(chǎn)完成后接著進(jìn)行培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)2.為了降低灌封瓶數(shù)，在每批試驗(yàn)開始、中間及結(jié)束前均灌裝培養(yǎng)基，

|

–

任何干擾操作都應(yīng)在培養(yǎng)基灌裝時(shí)進(jìn)行

–

在正常生產(chǎn)過程中所需最長時(shí)間，包含可能發(fā)生事件，人員

換班等國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第22頁|擬一次23

|

最差條件設(shè)計(jì)（3）干預(yù)設(shè)計(jì)全部干預(yù)都應(yīng)是預(yù)先設(shè)定和進(jìn)行統(tǒng)計(jì)正?！堪啻味紩?huì)發(fā)生（灌封線裝配，稱量調(diào)整，加膠塞/鋁蓋，處理倒瓶，中控取樣，環(huán)境監(jiān)測(cè)，手工補(bǔ)充軋蓋等）非正?！钦Ｇ闆r才會(huì)發(fā)生（設(shè)備故障，灌封線堵塞，軌道調(diào)整，拆卸/替換破損部件）SOP中應(yīng)列出哪些干預(yù)是允許，非正常干預(yù)最少每年模干預(yù)次數(shù)應(yīng)該等于正常生產(chǎn)時(shí)發(fā)生次數(shù)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第23頁|設(shè)備組裝加入膠塞取出卡住膠塞取走倒下玻瓶手工裝載到凍干機(jī)放置熱電偶環(huán)境監(jiān)測(cè)-放置和取走培養(yǎng)皿操作人員進(jìn)出及更衣24

|干預(yù)舉例—冷凍干燥工藝不一樣區(qū)域玻瓶破碎設(shè)備故障更換灌裝針頭灌裝針頭位置調(diào)整自動(dòng)稱量故障自動(dòng)加塞故障國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第24頁25

|

5、培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)頻率新建或生產(chǎn)工藝、設(shè)備、人員等重大變更后無菌工藝生產(chǎn)線，必須經(jīng)最少連續(xù)三批合格培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)常規(guī)生產(chǎn)條件下再驗(yàn)證頻率，培養(yǎng)基模擬試驗(yàn)通常按生產(chǎn)工藝每班次六個(gè)月進(jìn)行1次，每次最少一批。生產(chǎn)線生產(chǎn)不一樣規(guī)格無菌產(chǎn)品，則應(yīng)考慮不一樣規(guī)格產(chǎn)品原因，培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)最差情況進(jìn)行評(píng)定。

|員，確保每年最少參加一次成功培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第25頁26

|

變更后培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)變更及其評(píng)定

對(duì)產(chǎn)品或生產(chǎn)線每一個(gè)變更，均應(yīng)依據(jù)書面變更控

制系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)定

。

假如經(jīng)過評(píng)定認(rèn)為此項(xiàng)變更會(huì)影響到無菌生產(chǎn)工藝產(chǎn)品

無菌確保水平，則需要進(jìn)行增補(bǔ)性培養(yǎng)基模擬灌裝實(shí)

驗(yàn)。

比如，設(shè)施或設(shè)備改變、生產(chǎn)線配置變動(dòng)、人員重

|

環(huán)境監(jiān)控異常和無菌檢驗(yàn)結(jié)果陽性等。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第26頁|培養(yǎng)溫度27

|

6、試驗(yàn)用培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度選擇培養(yǎng)基選擇

適應(yīng)廣譜微生物生長，包含細(xì)菌和真菌

很好澄明度，較小粘度

液體培養(yǎng)基易于除菌過濾

慣用培養(yǎng)基：3％大豆胰蛋白肉湯（TSB）

厭氧培養(yǎng)基僅在特殊情況下使用（FTM）

干粉工藝：具備與干粉產(chǎn)品流動(dòng)性能相同無菌TSB干粉或

無菌撫慰劑粉末（PEG,乳糖,甘露醇…)20-35℃，目標(biāo)值±2.5℃，不少于14天；如選擇兩個(gè)溫度，

則每一溫度下最少培養(yǎng)7天，從低溫開始。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第27頁28

|

惰性替換粉末選擇惰性替換品選擇要求：

–

無活性、易滅菌

–

易溶解

–

對(duì)培養(yǎng)基促進(jìn)生長作用無副作用

–

易灌裝，流動(dòng)性要好（培養(yǎng)基流動(dòng)性較差）慣用替換品

–

聚乙二醇Polyethylene

glycol

系列(PEG

6000,PEG

8000）,

甘露醇Mannitol，乳糖Lactose等

|

–

事先需要伽馬輻照滅菌（鈷60，用量約15～25kGy）

–

應(yīng)進(jìn)行無菌性、抑菌性和溶解度測(cè)試國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第28頁29

|

培養(yǎng)基適應(yīng)性檢驗(yàn)培養(yǎng)基適應(yīng)性檢驗(yàn)

應(yīng)符合培養(yǎng)基無菌性檢驗(yàn)及靈敏度檢驗(yàn)要求。本檢

查培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)前或同時(shí)進(jìn)行。

必須用藥典要求標(biāo)準(zhǔn)微生物或工廠特定微生物（分離

自環(huán)境人員監(jiān)測(cè)及無菌試驗(yàn)）來進(jìn)行

通常為枯草芽孢桿菌、白色念珠菌，菌液濃度控制約在

100個(gè)菌/ml

加入菌液應(yīng)小于100

CF

FU/單位

|

生長良好，判該培養(yǎng)基適應(yīng)性檢驗(yàn)符合要求國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第29頁30

|

7、灌裝體積與數(shù)量單位灌裝體積

選擇體積要使培養(yǎng)基能適當(dāng)?shù)亟佑|容器內(nèi)表面，而且適當(dāng)翻

轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)，接觸到密封件內(nèi)表面。

每只容器灌裝體積普通不少于總?cè)莘e1/3，但也要考慮保

留25

%

至40

%頂空能確?？夏艽嬖谖⑸锶〉米銐蜓?/p>

氣生長。

對(duì)于厭氧灌裝:

用惰性氣體代替氧氣，

并使之完全充滿容器灌封試驗(yàn)數(shù)量

綜合考慮統(tǒng)計(jì)學(xué)要求和實(shí)際生產(chǎn)批量。

|

5000瓶，則培養(yǎng)基灌封最少應(yīng)為實(shí)際生產(chǎn)線最大批次量。

PIC

(>3000瓶)：假如正常生產(chǎn)批次量低于3000瓶，則培養(yǎng)

基灌封最少應(yīng)為實(shí)際生產(chǎn)線最大批次量。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第30頁|31

|

8、培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)陽性對(duì)照培養(yǎng)基陽性對(duì)照試驗(yàn)：

隨機(jī)選取已經(jīng)完成14天培養(yǎng)灌裝培養(yǎng)基樣品，按照藥典要求

–

慣用枯草芽孢桿菌、白色念珠球菌或工廠特定菌作為陽性菌

–

將每個(gè)菌種準(zhǔn)備含<100cfu

u/0.1ml菌液，每個(gè)菌種接種2支

培養(yǎng)基樣品，同時(shí)并平板計(jì)數(shù)（雙份）

–

對(duì)真菌在20-25°C下培養(yǎng)，對(duì)細(xì)菌在30-35

°C下培養(yǎng)，天天

檢驗(yàn)，5天內(nèi)需有生長跡象國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第31頁I.32

|MP

9、培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)合格標(biāo)準(zhǔn)FDA、EU

GMP

和中國新版GM

無菌附錄：灌封量<5000瓶時(shí)，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查，并重新驗(yàn)

證(3批)。II.

灌封量為5000-10000瓶時(shí)，若有1瓶污染，視調(diào)查結(jié)果決定

是否需要重新進(jìn)行1批培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)；若有兩瓶污染，必

須重新驗(yàn)證（3批），同時(shí)進(jìn)行徹底調(diào)查。III.

灌封量>10000瓶時(shí)，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查；若有兩瓶

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第32頁污染瓶數(shù)01234595%置信限值333

|

培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)合格標(biāo)準(zhǔn)PIC及SFDA研發(fā)注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)：在95

5%置信限時(shí)污染率低于0.1%。

計(jì)算公式：污染率

=

(95%置信限值)/(灌封容器數(shù))

×

100%

污染瓶數(shù)與95%置信限值間關(guān)系678910

|4.74

6.3

7.75

9.15

10.

.51

11.84

13.15

14.43

15.7116.9

6國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第33頁菌空氣破真空（不使用惰性氣體），全壓塞、軋蓋1.2.3.4.

1.

2.

3.34

|

10

0、舉例-凍干工藝方式A：模擬灌裝、裝載/卸載過程，縮短放置時(shí)間容器內(nèi)灌封好培養(yǎng)基，以半壓塞狀態(tài)裝入凍干機(jī)凍干機(jī)內(nèi)部分抽真空，在室溫放置一定時(shí)間，不進(jìn)行冷凍。用無菌空氣破真空（不使用惰性氣體），全壓塞、軋蓋缺點(diǎn):真空度不能過高，不能照成培養(yǎng)基沸騰。方式B：以經(jīng)稀釋培養(yǎng)基模擬凍干過程容器內(nèi)灌封好經(jīng)稀釋培養(yǎng)基，以半壓塞狀態(tài)裝入凍干機(jī)模擬凍干過程，直到容器內(nèi)培養(yǎng)基大致到達(dá)正常濃度。用無

|缺點(diǎn)：耗時(shí)長，需開發(fā)特殊凍干程序，營養(yǎng)支持性不均一，影響微生物存活力。

國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第34頁1.2.35

|

凍干工藝方式C：模擬灌裝、裝載/卸載過程，縮短放置時(shí)間，不抽真空或補(bǔ)充空氣容器內(nèi)灌封好培養(yǎng)基，以半壓塞狀態(tài)裝入凍干機(jī)凍干機(jī)不抽真空或者邊抽真空邊補(bǔ)充無菌空氣。在室溫放

置一定時(shí)間，不進(jìn)行冷凍。注意：用培養(yǎng)基完全模擬凍干工藝非常困難(

如時(shí)間長、真空、低溫等)

應(yīng)該首先識(shí)別有污染風(fēng)險(xiǎn)活動(dòng)，并加以模擬(

如未完全密封小瓶

|

小瓶必須不被冷凍

注意確保培養(yǎng)基需氧狀態(tài)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第35頁|注意事項(xiàng)36

|

舉例-無菌粉末分裝工藝方法A

在灌裝線上手工或增加灌裝設(shè)備，先灌裝液體培養(yǎng)基，再分裝無

菌替換品粉末后壓塞、軋蓋。方法B

在灌裝線上手工或增加灌裝設(shè)備，先分裝無菌替換品粉末，再灌

裝液體培養(yǎng)基后壓塞、軋蓋。方法C

先灌裝干粉培養(yǎng)基，再手工或增加設(shè)備加入注射用水所用惰性劑或干粉培養(yǎng)基需事先經(jīng)過輻射滅菌。慣用替換品粉末有聚乙二醇、甘露醇、乳糖等。應(yīng)對(duì)添加替換品量和對(duì)培養(yǎng)基適應(yīng)性影響進(jìn)行研究和評(píng)定。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第36頁|37

|

舉例-無菌原料藥原料藥生產(chǎn)工藝中常有結(jié)晶步驟，因結(jié)晶過程有相變產(chǎn)生，也使模擬過程存在困難。可用一個(gè)液體介質(zhì)模擬結(jié)晶過程，讓其流經(jīng)除菌過濾器和全部管路加到結(jié)晶罐中。若結(jié)晶過程有加晶種操作，模擬過程中也應(yīng)有這么操作，晶種也可用模擬介質(zhì)代替。為使晶體粒度均勻，有些結(jié)晶過程需要降溫，在模擬過程中一般不應(yīng)降溫，因在低溫下抑制微生物生長。離心、洗滌和干燥步驟普通采取常溫，以免溫度對(duì)微生物影響。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第37頁38

| 11、環(huán)境及人員監(jiān)測(cè)環(huán)境和人員監(jiān)測(cè)－按照對(duì)應(yīng)規(guī)程和方案進(jìn)行，應(yīng)涵蓋無菌工藝各工序，頻次數(shù)與正常生產(chǎn)一致。包括： 空氣粒子數(shù) 沉降菌 浮游菌 表面微生物 人員監(jiān)測(cè) |國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第38頁39

|

12、其它提議關(guān)鍵點(diǎn)模擬灌裝全過程提議應(yīng)進(jìn)行錄像，便于事后調(diào)查分析和原因查找，也有利于員工培訓(xùn)。如有可能，應(yīng)有專員觀察和統(tǒng)計(jì)操作人員有意或無意干預(yù)行為及時(shí)間。在試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，有時(shí)還要考慮人員狀態(tài)，如夜班人員注意力往往不夠集中。培養(yǎng)基灌封后能夠進(jìn)行生產(chǎn)，但要等培養(yǎng)基灌封合格后產(chǎn)品才能放行

|樣品或按照托盤應(yīng)進(jìn)行編號(hào)，方便

于調(diào)查和追溯國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第39頁40

|培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)

結(jié)果分析與調(diào)查

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第40頁41

|

培養(yǎng)后檢驗(yàn)?zāi)繖z培養(yǎng)基是否渾濁，是否有微生物生長要由經(jīng)過培訓(xùn)、而且有資質(zhì)能夠發(fā)覺微生物生長跡象人員進(jìn)行檢驗(yàn)假如在兩個(gè)溫度下培養(yǎng)時(shí)，必須在溫度切換時(shí)進(jìn)行中間判讀可疑單位馬上交給質(zhì)量控制微生物

人員，進(jìn)行進(jìn)

|一步分離培養(yǎng)和判定。依據(jù)染菌單位數(shù)，判斷是否到達(dá)驗(yàn)

證接收標(biāo)準(zhǔn)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第41頁污染

率|42

|灌裝污染曲線圖

1

污染可能起源于液體培養(yǎng)基

(

如與培養(yǎng)基貯罐非無菌連接，

在循環(huán)管路中受到污染，微生

物連續(xù)繁殖)。在灌裝結(jié)束時(shí)，

應(yīng)注意保持培養(yǎng)基貯罐處于無菌密閉狀態(tài)，在儲(chǔ)罐內(nèi)取樣測(cè)

試，能夠核實(shí)這么假設(shè)。灌裝過程(時(shí)間或灌裝數(shù)量)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第42頁污染率|43

|灌裝污染曲線圖

2

表明污染僅發(fā)生在試驗(yàn)初

期，可能污染來自起始

生產(chǎn)設(shè)備中（

膠塞容器/

軌道,

計(jì)量泵

/

針頭)，在灌裝過程中污染被部分或

全部“清洗掉”。灌裝過程(時(shí)間或灌裝數(shù)量)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第43頁染率

污

|灌裝過程(時(shí)間或灌裝數(shù)量)44

|灌裝污染曲線圖

3

出現(xiàn)一個(gè)尖峰（在短時(shí)段一

些產(chǎn)品被污染）可能與在灌裝

過程中不正確操作或干預(yù)造成

污染相關(guān)。

很關(guān)鍵是必須知道被污染產(chǎn)

品灌裝準(zhǔn)確時(shí)間，以及當(dāng)初

實(shí)施干預(yù)辦法（灌裝操作過

程錄像是非常有用），這

樣會(huì)比較輕易調(diào)查到原因。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第44頁率

污染灌裝過程(時(shí)間或灌裝數(shù)量)45

|

灌裝污染曲線圖

4

一樣可能是某個(gè)假如錯(cuò)誤

干預(yù)辦法所造成，不

同是該污染影響到液體

管路/回路時(shí)（如培養(yǎng)

基貯罐改變，泵或針|

替換），造成微生物連續(xù)

繁殖。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第45頁污染率

|灌裝過程(時(shí)間或灌裝數(shù)量)46

|灌裝污染曲線圖

5

非常不幸是，這種現(xiàn)象

是最常出現(xiàn)，也是最難

調(diào)查。假如這種現(xiàn)象在

屢次試驗(yàn)中重復(fù)出現(xiàn)，可

能說明這個(gè)工藝存在不確

定原因，需要采取根本

辦法（如

更衣/著裝、消

毒劑和氣流模式改變)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第46頁47

|

失敗調(diào)查流程|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第47頁

–

人員樣

–

表面樣

–

環(huán)境空氣樣2.

對(duì)培養(yǎng)基污染評(píng)定

–

培養(yǎng)條件

–

對(duì)污染培養(yǎng)基菌種必須進(jìn)行

判定

–

確定培養(yǎng)基污|染可能發(fā)生時(shí)

間3

3.

惰性粉末無菌測(cè)試評(píng)定48

|

培養(yǎng)基灌裝失敗調(diào)查

11.

生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)評(píng)定

4.

對(duì)氣體取樣結(jié)果評(píng)定

–

壓縮空氣

–

氮?dú)獾?.

對(duì)水微生物評(píng)定

–

純水

–

WFI6

6.

對(duì)培養(yǎng)基評(píng)定

–

培養(yǎng)基配制和消毒統(tǒng)計(jì)

–

培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)條件

–

培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)結(jié)果中國家大容量注射劑工程技術(shù)研究

48

心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第48頁1.

粒子監(jiān)控評(píng)定–––––粒子測(cè)試監(jiān)控情況層流風(fēng)速報(bào)警統(tǒng)計(jì)煙霧測(cè)試歷史監(jiān)控情況和趨勢(shì)2.

清潔和消毒評(píng)定

–

設(shè)備清潔

|消毒3.

消毒劑配制檢驗(yàn)

–

起源或配制百分比統(tǒng)計(jì)

–

效期及效力

49

|培養(yǎng)基灌裝失敗調(diào)查

24

4.

人員評(píng)定–––––灌裝間最多人數(shù)操作人員連續(xù)工作時(shí)間其它人員更衣情況手消毒及污染可能中

5

5.

干預(yù)操作評(píng)定

–

頻次，是否有非預(yù)期干預(yù)

–

危險(xiǎn)程度

–

污染樣品與干預(yù)關(guān)聯(lián)國家大容量注射劑工程技術(shù)研究

49

心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第49頁50

|

培養(yǎng)基灌裝失敗調(diào)查

3設(shè)備評(píng)定

–

滅菌柜

?

滅菌裝載情況，滅菌程序和統(tǒng)計(jì)等

?

最近穿透試驗(yàn)，泄漏試驗(yàn)和干燥試驗(yàn)結(jié)果

–

隧道烘箱，洗瓶機(jī)等

?

運(yùn)行狀態(tài)，參數(shù)是否正確

?

隧道烘箱各段層流壓差是否正確

–

灌裝設(shè)備

|狀態(tài)

?

設(shè)備是否存在偏差和非計(jì)劃干預(yù)

–

過濾器完整性測(cè)試評(píng)定

?

產(chǎn)品和空氣過濾器完整性測(cè)試結(jié)果中國家大容量注射劑工程技術(shù)研究

50

心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第50頁51

|

培養(yǎng)基灌裝失敗后續(xù)辦法調(diào)查結(jié)論與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定

培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)結(jié)果有效

暫停生產(chǎn)，直至確定污染起源并采取有效糾偏辦法。

對(duì)培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)后和以前所生產(chǎn)產(chǎn)品，進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定

培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)結(jié)果無效，重新進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝

試驗(yàn)

無菌灌裝區(qū)物理?xiàng)l件不滿足要求

|后續(xù)辦法

依據(jù)調(diào)查情況，采取糾偏辦法后，進(jìn)行一批或多批培養(yǎng)

基模擬灌裝試驗(yàn)。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第51頁52

|關(guān)鍵點(diǎn)提醒：

任何失敗樣品都應(yīng)單獨(dú)進(jìn)行分離培養(yǎng)和判定，因?yàn)榭赡懿恢挥幸粋€(gè)污染源。

人員與環(huán)境等監(jiān)控微生物也應(yīng)進(jìn)行分離判定，并與污染菌相比較。

防止試驗(yàn)室引入新污染，造成誤判

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第52頁53

|培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)

常見問題及缺點(diǎn)

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第53頁|54

|

常見問題怎樣判斷哪些灌裝樣品不需要進(jìn)行培養(yǎng)？

破損，影響到密封性樣品

完整性測(cè)試（泄漏測(cè)試）失敗樣品

文件中明確要求給予丟棄中控測(cè)試樣品

設(shè)備自動(dòng)剔除樣品

文件中明確要求，每次干擾后應(yīng)予手工剔除樣品

（要求應(yīng)詳細(xì)、明確，并需證實(shí)其可操作性和穩(wěn)定可

信性）。

剔除樣品應(yīng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)注明丟棄原因國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第54頁55

|

常見問題是否需要厭氧工藝模擬灌裝試驗(yàn)？

假如工藝中存在沖氮?dú)獾榷栊詺怏w操作時(shí)

假如在環(huán)境監(jiān)測(cè)樣品或無菌試驗(yàn)中檢出厭氧菌

有企業(yè)認(rèn)為，即使常規(guī)無菌工藝，也應(yīng)定時(shí)使用硫乙醇酸

鹽培養(yǎng)基進(jìn)行厭氧工藝模擬試驗(yàn)，或在模擬過程中進(jìn)行培

養(yǎng)基切換。培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)中樣品是否需要在培養(yǎng)過程中進(jìn)行

|

不需要。培養(yǎng)基灌裝樣品應(yīng)在開始培養(yǎng)前進(jìn)行操作，使

培養(yǎng)基充分接觸到內(nèi)部各個(gè)表面，開始培養(yǎng)后不應(yīng)再進(jìn)行

反轉(zhuǎn)等干擾。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第55頁56

|

常見問題怎樣對(duì)培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)中干預(yù)進(jìn)行設(shè)計(jì)？

考慮到最差情況

涵蓋整個(gè)生產(chǎn)周期，包含換班、連續(xù)生產(chǎn)等

全部干預(yù)應(yīng)經(jīng)預(yù)先同意和文件化，干預(yù)描述、發(fā)生時(shí)間、頻

率、連續(xù)時(shí)間、受影響瓶數(shù)等

常規(guī)干預(yù)每次培養(yǎng)基灌裝都要模擬，非常規(guī)干預(yù)可每年一次。培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)是否要模擬全部生產(chǎn)過程？是否可以分段進(jìn)行模擬試驗(yàn)？

|

菌過濾以后。

能夠，比如凍干工藝，能夠把無菌灌裝和凍干模擬分開；粉

針工藝中可把加注培養(yǎng)基與粉劑分裝分開。但都需要有明確

方案和判斷標(biāo)準(zhǔn)。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第56頁|57

|

常見問題什么情況下，能夠認(rèn)為培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)無效？

陽性對(duì)照失敗

工藝過程中在無菌操作區(qū)發(fā)生重大偏差，如停電，高效過

濾器損壞等在培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)中，是否必須進(jìn)行錄像？錄像保存期需要多長？

不是必需，錄像僅是一個(gè)可選輔助調(diào)查和培訓(xùn)伎倆。

假如采取了錄像辦法，也僅作為企業(yè)內(nèi)部資料（如同內(nèi)

部審計(jì)匯報(bào)），無須向檢驗(yàn)員出示。

企業(yè)應(yīng)有文件要求，什么情況下要進(jìn)行錄像，錄像儲(chǔ)存

時(shí)間等國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第57頁58

|

Warning

LetterYour

firm

failed

to

design

and

perform

an

adequateaseptic

process

simulation

(i.e.,

media

fill)

basedupon

the

same

controls

used

for

routineproduction.

We

note

that

t

the

(b)(4)

wasobserved

(b)(4)

during

ac

ctual

production.

However,this

intervention

was

per

rformed

only

once

duringthe

media

fill

in

.

–

企業(yè)培養(yǎng)

|

基灌裝驗(yàn)證未依據(jù)日常生產(chǎn)控制進(jìn)行設(shè)計(jì)

和完成，如在實(shí)際生產(chǎn)中觀察到一些干預(yù)操作國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第58頁th59

|

Warning

LetterThe

written

procedur

res

related

to

theproduction

simulations

–

“media

fills”

-conducted

to

validate

e

your

capability

toaseptically

produce

s

small

volume

parenteral(SVP)

were

found

to

be

inadequate.

The

mediafills

for

this

line

did

not

represent

actualoperations

used

in

he

aseptic

production

ofampoules

and

vials.培養(yǎng)基灌

|裝沒有模擬實(shí)際生產(chǎn)過程。國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第59頁60

|

Warning

Letter-

A

routine

production

of

a

(b)(4)

Injection

vials

lot

would

take

approximately

(b)(4)

hours

to

be

filled.

Your

written

pro

ocedures

for

routine

production

require

tha

at

an

intervention

take

place

every

(b)(4)

minu

utes

for

fill-weight

verification

measurements.

SOP要求每幾分鐘就要對(duì)裝量進(jìn)行測(cè)試，不過模擬

|國家大容量注射劑工程技術(shù)研究中心無菌工藝驗(yàn)證培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)葛均友第60頁61

|

Warning

Letter–

The

process

simulatio

ons

(media

fill)

do

not

represent

actual

production

operations

for

your

sterile

API.

The

proces